当归多糖硫酸酯的合成及其对脾细胞增殖的作用

目的 合成不同取代度的当归多糖硫酸酯 ;探讨氯磺酸对当归多糖硫酸酯化过程的影响和当归多糖及其硫酸酯对小鼠脾细胞增殖反应的作用 .方法 采用氯磺酸 -吡啶法进行硫酸化修饰 ;Ba SO4比浊法测定修饰物的硫含量 ;MTT比色法研究当归多糖及其硫酸酯对小鼠脾细胞增殖反应的影响 .结果 得到 8种不同取代度的当归多糖硫酸酯 ,硫含量为 93.7～ 171.4mg· g- 1 ,产率为 0 .737～ 0 .884g· g- 1 .当归多糖及其硫酸酯在剂量为 5 0 0 mg· L- 1 和 15 0 0 mg· L- 1时 ,给药组光密度明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,作用与剂量有良好的正相关性 .结论 提高氯磺酸的比例 ,可以提高产物的硫含量 ,但收率降低 .当归多糖及其硫酸酯对活化的

牛大力多糖对小鼠脾细胞增殖及分泌细胞因子的影响

目的观察牛大力多糖对小鼠脾细胞增殖及分泌细胞因子的影响,探讨其免疫调节的作用机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测牛大力多糖对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠T淋巴细胞增殖的影响;采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E_2(PGE_2)的含量。结果牛大力多糖浓度在50~200μg·mL^(-1)范围内能增强Con A诱导的小鼠T淋巴细胞的增殖作用;并对TNF-α和IL-6的产生有促进作用,对PGE_2有抑制作用。结论牛大力多糖能促进小鼠脾细胞的增殖,通过调节细胞因子发挥免疫增强作用。

梅花鹿茸生物碱类成分及其对小鼠脾细胞增殖的影响

目的：研究梅花鹿茸生物碱类成分及其对小鼠脾细胞体外增殖的影响。方法：综合利用Sephadex LH-20和MCI（CHP20P）等柱色谱方法分离梅花鹿茸中的化学成分,运用多种波谱技术（UV、1H-NMR、13C-NMR和MS）鉴定化合物结构,应用MTT法考察梅花鹿茸总碱和8个生物碱成分对小鼠脾细胞体外增殖的影响。结果：从梅花鹿茸中分离得到11个化合物,分别鉴定为：尿嘧啶（1）、次黄嘌呤（2）、尿苷（3）、肌苷（4）、鸟苷（5）、2＇-脱氧鸟苷（6）、鸟嘌呤（7）、胸苷（8）、胸腺嘧啶（9）、胞苷（10）和腺苷（11）。小鼠脾细胞体外增殖活性研究发现梅花鹿茸总碱、尿嘧啶、腺苷具有明显的促进小鼠脾细胞增殖的活性。结论：其中,化合物4~11为首次从梅花鹿茸中分离得到,梅花鹿茸总碱是鹿茸免疫调节作用的物质基础之一,其中以尿嘧啶和腺苷活性最强。

去氢骆驼蓬碱体外抗消化道肿瘤活性和对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用

目的研究骆驼蓬中代表性的成分去氢骆驼蓬碱体外对抗7个消化道肿瘤株活性和对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用,为临床上的用药提供理论依据和参考佐证。方法采用MTT法测试7个消化消化道肿瘤株活性并对量效关系进行了总结;用对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用与临床常见的抗肿瘤药顺铂与羟基喜树碱的作用进行比较。结果去氢骆驼蓬碱对抗7个消化道肿瘤株活性明显,其IC50值分别为TE1 3.44、TE13 3.31、BGC823 3.52、HCG27 3.27、AsPC1 3.59、H22 3.33、Colon26 3.79(μg.mL-1);对小鼠脾细胞增殖反应的抑制作用较羟基喜树碱与顺铂小。结论去氢骆驼蓬碱可以应用于消化消化道肿瘤治疗而且其结构可为抗肿瘤活性化合物设计的模式之一。

β-内啡肽在大鼠创伤失血性休克脾细胞增殖功能的作用研究

目的 探讨创伤失血性休克后 ,血浆 β 内啡肽 (β EP)对脾细胞增殖功能的调节作用。 方法 ①以Wistar大鼠制造创伤失血性休克模型 ,于模型完成后 0、1、3、6、12、2 4h分别处死大鼠、收集血浆标本并检测 β 内啡肽水平 ,并设假手术对照组 ;②分离正常大鼠脾细胞 ,分别与休克血浆 (Ⅰ组 )、灭活休克血浆 (Ⅱ组 )及休克血浆 + β 内啡肽抗血清 (Ⅲ组 )体外培养 ,观察conA诱导的脾细胞增殖功能。结果 ①休克后即刻血浆 β 内啡肽水平显著升高 (P <0 .0 1) ,1h达高峰 ,之后呈下降趋势 ,2 4h趋于休克前水平。②与对照组相比 ,创伤休克血浆可显著降低conA诱导的脾细胞增殖功能 (P <0 .0 1) ;休克血浆经灭活后 ,脾细胞增殖功能非常显著回升 (P <0 .0 1) ;休克血浆经 β EP抗血清处理较未经抗血清处理相比 ,脾细胞增殖功能明显升高 (P <0 .0 5 ) ,但仍低于对照组。结论 创伤失血性休克后血浆中显著升高的 β 内啡肽对抑制脾细胞增殖功能有重要的作用。

日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗免疫小鼠脾细胞增殖、亚群及凋亡的动态变化

目的探讨日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗免疫BALB/c小鼠后脾细胞增殖、亚群及凋亡的动态变化。方法 96只雌性BALB/c小鼠随机均分为2组,用rBb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗分别经口服灌胃(PO)及鼻腔黏膜(IN)接种两种途径免疫小鼠,于免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20和22周每组各剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,用日本血吸虫成虫抗原(SjAWA抗原)刺激培养,MTT法检测免疫小鼠脾细胞增殖反应,同时设原液、刀豆蛋白A(ConA)组对照;用流式细胞术(FCM)检测免疫小鼠脾CD4+和CD8+T细胞亚群的百分比;脾细胞经ConA刺激培养,流式细胞仪检测脾细胞的凋亡发生率,并设原液组作为对照。结果 PO组增殖水平于免疫后4周达高峰,而IN组于免疫后12周达高峰;PO组脾CD4+T细胞亚群于免疫后4周达最高水平,IN组CD4+T细胞亚群于免疫后12周达最高水平;PO组脾CD8+T细胞亚群于10周达峰值,IN组CD8+T细胞亚群于免疫后6周达最高水平;PO组小鼠脾细胞凋亡率于免疫后6周达最高,而IN组脾细胞凋亡率于12周达最高水平。结论日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗在免疫早期可引起脾细胞增殖,诱导CD4+和CD8+T细胞参与宿主的免疫保护,抑制小鼠脾细胞的凋亡。

人工模拟外湿环境对正常及脾阳虚大鼠脾细胞增殖能力的影响

目的探讨外湿环境因素对正常及脾阳虚大鼠脾细胞增殖能力的影响,研究复合病因内外合邪发病机制。方法选取SD大鼠40只随机分为对照组、外湿组、脾阳虚组、脾阳虚加湿组,每组10只。造模成功后无菌摘除脾脏,采用Con A诱导脾淋巴细胞增殖,以此表示淋巴细胞的功能水平。结果脾阳虚组、外湿组、脾阳虚加湿组脾淋巴细胞增殖能力均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。脾阳虚加湿组脾淋巴细胞增殖能力较脾阳虚组显著下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论外湿环境因素相对于脾阳虚因素对机体免疫抑制作用更强。说明外湿环境因素对正常大鼠、脾阳虚模型大鼠免疫学的影响较单纯脾阳虚模型大鼠明显,并且外湿环境因素与脾阳虚模型具有协同致免疫机能下降的作用。

中药玉竹甾体皂苷类成分及其对小鼠脾细胞增殖的影响

目的:研究玉竹甾体皂苷类成分及其对小鼠脾细胞增殖的影响。方法:利用各种色谱技术进行分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定,应用MTT法考察玉竹正丁醇层总皂苷和3个皂苷类成分对小鼠脾细胞体外增殖的影响。结果:从玉竹中分离并鉴定了5个化合物,分别为β-谷甾醇(Ⅰ)、胡萝卜苷(Ⅱ)、无刺枣苷Ⅰ(Ⅲ)、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-O-甲基-(25S)-呋甾-5-烯-3β,26-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-[β-D-吡喃木糖基-(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)β-D-吡喃半乳糖苷(Ⅳ)、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25S,25R)-呋甾-5-烯-3β,14α,22α,26-四醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-[β-D-吡喃木糖基-(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)β-D-吡喃半乳糖(Ⅴ)。小鼠脾细胞体外增殖活性研究发现玉竹正丁醇层总皂苷、化合物Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ具有明显的促进小鼠脾细胞增殖的活性。结论:化合物Ⅳ、Ⅴ为首次从该种内分离得到,化合物Ⅲ为首次从该属植物中分离得到,玉竹中皂苷类成分是玉竹免疫调节作用的物质基础之一。

结血蒿醇提物对小鼠脾细胞增殖和活化的抑制作用

目的:观察藏药结血蒿75%乙醇提取物对体外丝裂原刀豆蛋白A(ConcanavalinA,ConA)刺激的小鼠脾细胞活化和增殖的抑制作用。方法:用ConA刺激小鼠脾细胞,分别用四甲基偶氮唑盐染色法(MTT法),流式细胞术等方法观察结血蒿醇提物对细胞增殖和活化的作用。结果:结血蒿醇提物对体外ConA刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化均有显著的抑制,作用呈剂量依赖性。结论:结血蒿醇提物可抑制ConA刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化,提示其具有免疫抑制活性。

大鼠额叶皮层局灶毁损对脾细胞增殖的影响

为了观察额叶皮层对大鼠细胞免疫功能的调控作用，选用雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，分为左侧额叶皮层毁损组、右侧额叶皮层毁损组、假手术对照组和无创伤对照组，于术后ｄ１９检测其外周血中ＣＤ８＋细胞和脾细胞增殖。结果：假手术组与无创伤对照组间外周血ＣＤ８＋细胞无显著差异；左、右额叶毁损组外周血ＣＤ８＋细胞和脾细胞增殖指数（ＳＩ）均显著高于假手术组（Ｐ＜０．０１）。结论：额叶皮层毁损可增强机体细胞免疫功能，且左右对称。

脂质体干扰素α对小鼠Lewis肺癌转移及脾细胞增殖的影响

Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ小鼠尾静脉注射Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞后，腹腔注射脂质体干扰素α（Ｌ－ＩＦＮ－α）和未包裹干扰素α（ＩＦＮ－α），连续１０ｄ；测小鼠肺湿重、肺转移结节数和ＣｏｎＡ诱导的脾细胞ＤＮＡ掺入量。结果ＩＦＮ－α５、２０万ｕ·ｋｇ（－１）组，小鼠肺湿重较对照组减小１４．１、１９．６％，肿瘤肺转移结数减少３２．７、５０．０％，ＣｏｎＡ刺激的脾细胞ＤＮＡ掺入量增加２４．６、４６．８％。１／１０剂量的Ｌ－ＩＦＮ－α可产生相同的药理活性。小鼠环磷酸胺５０ｍｇ·ｋｇ（－１）ｉｐ３ｄ后，尾静脉注射瘤细胞，实验处理同上。结果Ｌ－ＩＦＮ－α和ＩＦＮ－α对环磷酰胺处理小鼠的Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞肺转移的抑制作用更为明显。本文结果表明，ＩＦＮ－α可抑制小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌转移，促进ＣｏｎＡ刺激的脾细胞增殖，并与剂量明显相关。脂质体包裹ＩＦＮ－α可使其生物活性提高约１０倍。对免疫功能受抑小鼠作用更为显著。

唐古特大黄多糖的理化特性和脾细胞增殖活性研究

目的 研究唐古特大黄多糖的理化性质及其对睥细胞增殖的活性，分析大黄多糖的有效分子量片断。方法 采用水煮醇沉和凝胶层析等方法分离纯化一系列不同分子量的唐古特大黄多糖(Rheum tanguticum Polysacchafide,PTP)，应用硫酸一苯酚法测糖舍量，硫酸一咔唑法测糖醛酸含量，考马斯量兰测蛋白含量，聚丙烯酰胺凝胶电泳和光谱技术测定其纯度，层析技术与气相色谱法测定不同分子量大黄多糖的单糖组戍。MTT法观察大黄多糖对睥细胞增殖的影响。结果 经凝胶柱层析分离得到5个不同分子量组分的RTP(1-5)，其糖含量(糖醛酸含量)分别为97．4％(27.5％)，88．1％(26.3％)，71、8％(23．4％)，77.2％(28.6％)和57.2％(23．8％)；分子量范围分别为：(6-8)×10^5，(5-6)×10^5，(4-5)×10^5，(2-4)×10^5，小于2×l0^5这五个组分均由半乳糖，半乳糖醛酸，阿拉伯糖，葡萄糖，葡萄糖醛酸，山梨糖组成。RTP。均能显著促进小鼠脾细胞增殖，对ConA诱导的T细胞增殖和LPS诱导的B细胞增殖均有明显的协同作用。结论唐古特大黄多糖的5个组分理化性质相似，均能显著促进小鼠脾细胞的增殖，但RT(-1)和RTK(-2)的生物活性较好，其分子量范围为(5-8)×10^5.

蜂毒肽对受照射小鼠脾细胞增殖的影响

研究目的:探索蜂毒肽对受照射小鼠的脾细胞转化率的影响。方法:照射前24小时对各实验组小鼠注射不同剂量蜂毒肽,照射后24小时取小鼠的脾细胞进行体外培养48小时,用MTT法测定各实验组小鼠脾细胞转化率。结果:在小鼠受照射前注射不同剂量的蜂毒肽均可提高小鼠脾细胞转化率,其中注射中等剂量蜂毒肽的小鼠脾细胞转化率比空白对照组提高了13.2%,高剂量组比空白对照组提高了17.5%。结论:蜂毒肽可以增强小鼠脾细胞的增殖能力,这可能是蜂毒肽抗辐射的作用机制之一。

脂质血管生长因子粗制品对小鼠脾细胞增殖及ConA诱导IL-2水平的影响

作者建立了脂质血管生长因于（LAF）的乳化方法。用该方法制备的粗制脂质血管生长因子能明显抑制小鼠脾细胞的增殖月降低IL－2的水平，而对照的皮下脂肪抽提物则无此效应。同时发现，乳化过程中加人的Tween－80有一定的细胞毒性。

运脾温阳方及拆方对正常和脾虚小鼠脾细胞增殖的影响

目的:观察运脾温阳方及拆方对正常和大黄致脾虚小鼠脾细胞增殖的影响。方法:采用正常和15%大黄水煎液灌胃造成脾虚模型的小鼠,制作脾细胞悬液经培养后,加入ConA或LPS各50μL后,加入运脾温阳方及拆方50μL,培养72h后用MTT检测。结果:运脾温阳方及拆方对正常小鼠和刀豆蛋白诱导脾细胞增殖具有明显的促进作用,对脂多糖诱导的正常小鼠脾细胞增殖未见有明显的促进作用。运脾温阳方及拆方的各剂量组体外对脾虚小鼠、脂多糖和刀豆蛋白诱导的脾细胞增殖都具有明显的促进作用。拆方中各药作用效果均低于全方组。结论:运脾温阳方及拆方具有促进B细胞和T细胞增殖的作用。

大网膜脂质血管生长因子对体外小鼠脾细胞增殖及白细胞介素-2产生水平的影响

研究了经超声乳化的大网膜脂质血管生长因子对体外小鼠脾细胞增殖及经ConA诱导产生的白细胞介素-2水平的影响。结果显示：此因子能明显抑制体外小鼠脾细胞的增殖且降低白细胞介素-2的产生水平，而对照的皮下脂肪抽援物则无此效应。同时也观察到乳化剂Tween80有轻微的细胞毒性。

氯化镉对小鼠脾细胞增殖与细胞钙稳态关系的影响

以小鼠脾淋巴细胞转化，白介素２（ＩＬ－２）产生，胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ），钙调蛋白量为指标，观察氯化镉（ＣｄＣｌ２，１０－２００μｍｏｌＬ－１）对脾细胞增殖的影响与细胞钙稳态的关系．结果表明，在本实验条件下，ＣｄＣｌ２对小鼠脾淋巴细胞转化，ＩＬ－２的产生有明显抑制作用，且与剂量和时间呈依赖关系．ＣｄＣｌ２对脾细胞钙稳态有干扰，致细胞［Ｃａ２＋］ｉ浓度升高，钙调蛋白量下降，也与剂量和时间呈依赖关系．提示ＣｄＣｌ２对小鼠脾细胞增殖的抑制作用与细胞钙稳态失衡密切相关．

中药复方益气消征方对体外小鼠脾细胞增殖作用的影响

目的观察中药复方益气消征方(YQXZF)对体外小鼠脾细胞增殖作用的影响。方法取不同浓度益气消征方体外作用于小鼠脾细胞,采用MTT比色法测定小鼠脾细胞的光密度值。结果益气消征方对小鼠脾细胞有促进增殖的作用,在益气消征方浓度为3μg/ml时促进增殖作用最明显。结论中药复方益气消征方具有体外促进小鼠脾细胞增殖的作用。

H-2 Ag-TCS连接物制备及抑制异种脾细胞增殖活性的研究

诱导特异性免疫无反应 ,防止器官移植排斥反应。方法供者(NIH小鼠)主要组织相容性抗原(H -2Ag)与天花粉毒素(TCS)经异型双功能试剂SPDP、2 -IT交联 ,制备免疫毒素(Ag-TCS) ;Ag-TCS预处理受者(SD大鼠) ,体外观察其脾细胞对供者抗原再刺激的反应。结果受者脾细胞对供者抗原再刺激呈抑制状态 ,而对非特异性刺激(PHA)呈增生活跃。结论Ag-TCS诱导的免疫无反应性具有供者特异性 ,可用于器官移植免疫耐受的诱导。