小鼠脾脏成纤维网状细胞的分离、培养及鉴定

目的建立小鼠脾脏基质细胞培养的方法 ,分离出成纤维网状细胞并对其进行鉴定。方法取健康C57小鼠脾脏,胶原酶消化后,用磁珠分选出CD45-脾脏基质细胞,接种于α-MEM培养基,传代培养待其稳定生长。流式细胞仪进一步分选出成纤维网状细胞(gp38+CD31-),并用PCR、免疫荧光的方法检测其趋化因子表达。结果利用磁珠分离出脾脏的基质细胞培养后可以稳定传代,成功的分选出小鼠脾脏成纤维网状细胞(gp38+CD31-),并检测到其CCL19和CCL21的表达。结论成功分离培养脾脏基质细胞,并分选出有功能的成纤维网状细胞,为实验研究提供稳定的细胞来源。