台湾泥鳅腐皮病霍乱弧菌的分离与鉴定

为研究台湾泥鳅(Paramisgumus dabryanus ssp.)腐皮病的病原,对其腐皮等病变部位进行细菌分离纯化,获得1株优势菌株,命名为P1,利用革兰氏染色观察其形态特征,利用PCR扩增技术、16S rRNA基因测序,得到病原菌的序列,用MEGA软件构建系统进化树,再结合生理生化分析结果鉴定菌种名称。结果发现:革兰氏染色阴性,弧形,两端钝圆;菌体长1~1.5μm,宽度1~1.2μm,有菌丝和鞭毛,16S rRNA基因1 395 bp。建立系统进化树后发现,P1与霍乱弧菌处于同一分支;生理生化实验结果与霍乱弧菌一致,从而鉴定该菌株为霍乱弧菌(Vibrio cholerae)。药敏实验结果表明,该分离菌株对头孢哌酮、卡那霉菌、万古霉素等10种抗生素高度敏感;对四环素中度敏感;对呋喃唑酮、复方新诺明、克林霉素等17种抗生素耐药。实验结果为台湾泥鳅腐皮病的病原鉴定与药物防治提供参考。

棘胸蛙腐皮病病原菌分离鉴定及五倍子水提液的治疗效果探究

近年来随着棘胸蛙的人工养殖规模逐渐扩大,各种细菌性疾病发生频率也连年增高,其中腐皮病是棘胸蛙常见细菌性疾病之一。患腐皮病的棘胸蛙症状起初是表皮脱落出现白斑,而后白斑逐渐扩大甚至深达肌底,后期因细菌感染引发的炎症而死亡。目前棘胸蛙腐皮病只有报道使用抗生素进行治疗,为探究中草药能否替代抗生素对棘胸蛙腐皮病进行治疗,采用常规的细菌分离纯化及16S rRNA序列扩增确定患腐皮病棘胸蛙的主要病原菌,使用五倍子水提液和其他抗生素开展药敏对比试验,并根据前期养殖场的调研,选用五倍子水提液对棘胸蛙腐皮病进行治疗效果探究。结果表明:患腐皮病棘胸蛙病患处的主要病菌为嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila和维氏气单胞菌Aeromonas veronii;药敏对比试验表明,2种病原菌均对甲砜霉素、氟苯尼考、恩诺沙星、维生素C磷酸酯镁盐酸环丙沙星、硫酸新霉素、强力霉素高度敏感,对五倍子水提液中度敏感。通过治疗试验发现,五倍子水提液治疗组患腐皮病棘胸蛙存活率达100%,且在治疗20 d内患处得到明显缓解。研究发现五倍子水提液虽然对于腐皮病的致病菌只有中度抑菌效果,但是在实际治疗中可以有效控制和治疗棘胸蛙腐皮病,可能五倍子水提液除了抑菌作用之外,还发挥了其他的保健功效。

中国大鲵腐皮病病原菌的分离与鉴定

目的报告中国大鲵(Andrias davidianus)腐皮病的主要病原菌的检测及其生物学特征。方法对发病濒死的大鲵病变组织进行细菌学检查及分离,对分离菌进行形态特征、理化特性16S rDNA序列的分子鉴定,并构建系统发育树;进行人工感染试验及药敏试验。结果分离到1株优势菌,根据此株分离菌的形态特征及理化特性,结合16S rDNA序列测定与系统发育分析结果,判定其为气单胞菌属的维氏气单胞菌。此菌对供试健康大鲵、斑点叉尾鮰和小白鼠有较强的致病作用,对供试27种抗菌药物中的头孢美唑等6种高度敏感,对阿奇霉素和新霉素2种中度敏感,对氟哌酸等19种药物耐药。结论所检出的维氏气单胞菌为导致中国大鲵腐皮病的病原菌。

美国红鱼“腐皮病”病原的初步研究

从有典型'腐皮病'症状的美国红鱼 (Sciaenops ocellatus)中分离到一株优势菌.人工感染菌液浓度为 10 8 CFU/mL时,可致健康美国红鱼出现与自然发病相似的症状,且 100%死亡,确认该分离菌为美国红鱼'腐皮病'的致病菌.该菌的主要生理生化特征为革兰氏染色阴性, 0/129(150 μ g)敏感, TCBS上生长呈黄色,氧化酶阳性,伏-普二试验阴性,葡萄糖产酸不产气,蔗糖发酵阳性,甘露糖发酵阳性,阿拉伯糖发酵阳性,肌醇阴性,赖氨酸阴性,精氨酸阳性,鸟氨酸阴性,硝酸盐还原阳性,七叶灵水解阴性, ONPG阳性,有动力,在盐度 0～ 60生长, 80和 100不生长, 30～ 40 ℃生长, 4 ℃、45 ℃不生长,鉴定该菌为河流弧菌( Vibrio fluvialis).药敏试验表明,该菌对多粘菌素 B、四环素、痢特灵敏感;对卡那霉素、链霉素、复方新诺明、呋喃妥咽、庆大霉素、菌必治不敏感;对氯霉素、青霉素、氨苄青霉素、氟哌酸、环丙沙星、利福平中度敏感.

日本鳗鲡腐皮病病原菌的分离及鉴定

从患腐皮病的日本鳗鲡（Anguilla japonica）体表溃烂处分离到1株病原菌（322A）,对其进行了人工感染实验和生理生化分析,测定了该菌株的16S rRNA基因序列和促旋酶（gyrase）B亚单位gyrB基因序列,并分别构建系统发育树。结果显示：感染实验证实菌株322A具有致病性;生理生化分析鉴定该菌株属于气单胞菌属（Aero-monassp.）;16S rRNA基因分析显示,该菌株与气单胞菌属细菌的同源性均在99%-100%,构建的系统树显示,菌株322A与嗜水气单胞菌（A.hydrophila（FJ462702））亲缘关系最近;gyrB基因分析表明,该菌株与A.hydrophila种内序列的相似性为96%-98%,种间序列的相似性为94%-95%,构建的系统树结果显示,该菌株与A.hydrophila（FJ608553、FJ608552、AF208259）聚为一个分支。综合上述实验结果,菌株322A可鉴定为嗜水气单胞菌（A.hydrophila）。

罗非鱼腐皮病病原菌分离鉴定及其对中草药敏感性试验

为了研究罗非鱼腐皮病的防治方法,通过形态学观察、生化特性等鉴定方法,从患腐皮病的罗非鱼体内分离到1株温和气单胞菌,并进行致病性试验和中草药药敏试验。致病性试验结果显示,分离细菌对罗非鱼有较强的致病作用。中草药药敏试验结果显示:五倍子、乌梅、沙棘、苏木4种单味中草药对分离细菌有较强的抑菌作用,石榴皮次之,陈皮、石菖蒲、鱼腥草、马齿苋、穿心莲、桉树叶、薄荷等无抑菌作用,且五倍子+乌梅的组方抑菌效果最强。

牛蛙腐皮病致病细菌的初步研究

对牛蛙腐皮病的致病菌进行了分离、鉴定和人工感染。从病蛙上分离到5株细菌，通过对健康牛蛙人工感染试验，得知奇异变形杆菌（Proteusmirabilis）和克氏耶尔森菌（Yeriniakristensenii）具有较强致病力，而其他三株菌无致病力。

养殖日本鳗鲡腐皮病真菌性病原的分离与鉴定

针对近年来人工养殖日本鳗鲡(Anguilla japonica)在越冬过程中广泛发生、传染速度快、死亡率高的腐皮病进行了真菌性病原的分离与鉴定。以麦粒培养法从患病鳗鲡的病灶处分离获得1株真菌菌株Js80122;通过孢子悬液背部肌肉注射、培养物创伤浸泡、孢子创伤涂抹、孢子与细菌混合注射等方法人工感染健康鳗鲡,证实了Js80122为日本鳗鲡腐皮病的病原菌。于不同培养温度条件下,以载玻片培养观察法和盖玻片插片培养观察法对Js80122进行生活史观察与形态学鉴定,结果显示Js80122为丝状真菌,菌丝无横隔,分枝发达,具无性与有性两种生殖方式,动孢子囊呈棍棒形或纺锤形,新生孢子囊以层出或聚伞状方式生长,孢子具两游现象,藏卵器中有1个以上的卵孢子,卵孢子光滑无皱缩。依据其形态学特征,鉴定Js80122为水霉科(Saprolegniaceae)、原绵霉属(Protoachlya Coker)、原绵霉(Protoachlya paradoxa)。

乌鳢腐皮病致病细菌的研究

为了解乌鳢腐皮病发病原因,对具典型乌鳢腐皮病症状的病鱼显症部位的肌肉和肾脏进行了细菌分离和鉴定,并用分离菌株对乌鳢进行了人工感染和体外药物筛选试验.从病鱼显症部位肌肉和肾脏分离出8个菌株,人工感染试验证实2株为腐皮病致病菌.致病菌经鉴定为嗜水气单胞菌.体外药物筛选试验表明,诺氟沙星、庆大霉素和卡那霉素对致病菌抑菌效果最好.

中华鳖腐皮病的病理组织学初步观察

取病鳖的肝、肠、脾、肾和溃烂处皮肤等组织数块 ,Zenker's液固定 ,石蜡包埋 ,HE染色 .观察结果显示 ,病鳖肝细胞发生不同程度的变性以至坏死 ,肝血窦淤血 .肠粘膜溃烂 ,肠壁结构被破坏 .脾脏的红髓、白髓分界不清 .肾脏的小管上皮细胞变性 ,毛细血管扩张 .溃烂处皮肤表皮细胞坏死 。

美国青蛙腐皮病病原的研究

Three bacteria strains were isolated from the skin tissue of Rana grylio with "necrotic skin disease".After artificial infection by the bacteria strain skin 1-3 was determined to be the pathogen of the "necrotic skin disease".It was identified to be Acinetobacter lwoffii by VITEK-AMS-60 automatic identification system.The bacteria were rod shaped with a size of (0 75～0 93 ) μm×(1 5～2) μm, Gram-negative, and non-mobile. It was sensitive to 17 species of drugs and resistant to 5 drugs.

中华鳖腐皮病的病原鉴定与药敏试验

为了确定中华鳖(Trionyx sinensis)腐皮病的主要致病菌,从湖南省湘阴县中华鳖养殖场采取已呈明显发病症状且频死的中华鳖10只,从背甲和腹甲病灶处分离到6株菌株,通过分离纯化培养,挑选出2株优势菌株,经形态特征、生理生化特性和人工感染试验,鉴定为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和产碱杆菌(Bacillus al-caligenes)。药敏试验结果表明,这2种致病菌均对青霉素、红霉素、卡那霉素、庆大霉素、丙氟哌酸等抗生素高度敏感,可作为治疗该病的推荐药物。

乌鳢腐皮病病理形态学研究

乌鳢腐皮病的 主要眼观病 变是病鱼体 表鳞片脱落，皮 肤溃烂，有出 血和炎 性渗出 物。主要组织学所见是局部皮肤和骨骼肌急性炎症反 应和坏死。肝 脂肪变性，肾间质充血，肾小管上皮细胞空泡变性。肝脏和肾脏细胞肿胀，线粒体结构模糊、空泡化。

泥鳅腐皮病病原与防治的研究

从湖南长沙市郊患腐皮病的泥鳅上分离到3株细菌,人工感染可复制本病.病原菌都为革兰氏阴性杆菌,以单极生鞭毛运动.氧化酶和过氧化氢酶阳性.溶血,对弧菌抑制剂0/129不敏感,L-组氨酸、L-阿拉伯糖、L-精氨酸和水杨苷不能作为唯一碳源.被鉴定为运动型气单胞菌的温和气单胞苗(Aeromonas Sobria).用呋喃唑酮治疗人工感染泥鳅,效果显著.

牛蛙腐皮病的组织病理学研究

牛蛙腐皮病的组织病理学观察结果，除患部皮肤出现炎症、充血和坏死溶解外，伴有急性化脓性肌炎，肺炎，轻度卡他性胃肠炎，肝坏死，化脓住肾炎，急性脾炎。病理变化表明疾病过程为皮肤感染发展为败血症。

鲫腐皮病病原菌的初步研究

作者对鲫腐皮病的病因及病原菌进行了初步研究。结果表明：在水温为１８．１～３１．０℃时，病程为４８～１２０ｈ；随着水温的升高感染力加强，二者呈显著正相关，ｒ＝０．９５８（ｎ＝５）；经对病原菌进行分离培养，生理生化反应测定，初步认为是点状产气单胞菌点状亚种（ＡｅｒｏｍｏｎａｓｐｕｎｃｔａｔａＳｕｂ．ｐｕｎｃｔａｔａ）。

大鲵腐皮病病原的分离鉴定与药敏试验

大鲵（giant salamander），拉丁学名Andrias davideanus，也称娃娃鱼（呜叫如婴儿啼哭），为现存最大的两栖动物。2008年4月份，四川省某大鲵养殖场发生腐皮病，发病症状主要表现为患病大鲵体表黏液部分脱落，体表有绿豆大小的白色小点和白斑，特别在四肢分布最多。随着病情的发展，白色斑点进一步腐烂成溃疡状直至暴露红色的肌肉。患病大鲵食欲减退甚至废绝。现将大鲵腐皮病病原的分离鉴定与药物敏感试验结果介绍如下。

鳖鳃腺炎与腐皮病并发症的组织病理学研究

对鳃腺炎与腐皮病并发症的鳖的肝、脾、肾、肺、肠和精巢等 6种器官进行病理组织学切片 ,并与健康鳖的相应器官组织进行比较 .结果显示 :病鳖的器官组织出血 ,组织细胞出现肿胀、坏死、崩解 ,最终造成全身性组织损伤 ;血管腔扩大 ,血管壁严重受损 ,内皮细胞坏死脱落 ;血管内及血液中的大量红细胞变形、破裂、溶解 .此外 ,还对病鳖的

中华鳖“腐皮病”病原的研究

对江苏省吴县、吴江等地区养殖的患“腐皮病”的中华鳖的病原进行了分离 ,从病鳖的肝脏分离得菌株 B- 1,用菌株B- 1进行人工感染 ,10 0 %的鳖患病 ,出现与自然病鳖相同的症状。对 B- 1株进行菌体形态特征、培养特性、生理生化反应及致病因子检测 。