腐质霉属真菌分类的研究进展

腐质霉属(Humicola)真菌常见而广布,具有重要的经济学及生态学价值。对该类群真菌的分类简史、分子系统学研究进展及目前分类系统存在的弊端进行综述,并依据NCBI中该属现有ITS序列构建系统进化树,同时指出在形态学基础上利用多基因系统发育技术进行该属分类学研究是未来研究的发展趋势。

混凝絮凝法去除腐质酸的研究

进行了混凝絮凝法去除水中腐殖酸的研究 ,结果表明 ,同传统的絮凝剂相比 ,微生物絮凝剂不仅用量少 ,去除效果好(去除率可达 60 % ) ,而且不产生二次污染 ,可应用于废水特别是给水中腐殖酸的去除工艺中。对絮凝剂的絮凝机理进行了初步研究 ,研究表明 ,微生物絮凝剂去除腐殖酸主要是通过架桥完成的 ,不同于 Al2 (SO4 )

特异腐质霉Humicola insolens(YH-8)纤维素酶的催化性质研究

对诱变后的特异腐质霉Humicolainsolens(YH-8)纤维素酶的催化性质进行了研究。结果表明:该酶的最适催化温度和pH值分别为65℃和6.0,在50℃以下酶的稳定性较好,70℃条件下底物对酶有较强的保护作用,该酶的pH稳定性范围为6.0￣9.0,Zn2+、K+、Li+对酶活有促进作用,Mn2+、Ca2+、Mg2+、Co2+、Fe2+、Fe3+对酶活起抑制作用,其中Fe3+对酶的抑制作用非常强,酶对CMC和水杨素有分解作用,而几乎不分解脱脂棉、微晶纤维素和滤纸。

棕黑腐质霉(Humicola fuscoatra)导致真菌性腹膜炎1例

报道1例由棕黑腐质霉属(Humicola fuscoatra)导致的真菌性腹膜炎。此菌分离自1名长期腹膜透析患者的腹水。腐质霉属在自然界广泛存在,棕黑腐质霉导致的人类感染罕见。现对棕黑腐质霉的真菌学特点进行研究,并进行分子测序。体外药物敏感性试验结果对伊曲康唑的MIC为0.008μg/mL,伏立康唑的MIC为0.016μg/mL,两性霉素B的MIC为1.5μg/mL。患者拔除腹透管,改行血液透析。口服伊曲康唑0.1 g/12 h,28 d后病情明显改善,出院。

特异腐质霉纤维素酶的分离纯化与性质

特异腐质霉Humicola insolens（YH-8）能高效合成高稳定性的纤维素酶。由该菌株所产的纤维素酶粗液经过1．5倍酒精沉淀、DEAE-SephadexA-50离子交换层析，SephadexG-100凝胶过滤，得到电泳纯的纤维素酶组分一个。对这个组分的催化性质（以羧甲基纤维素为底物）进行了研究，该酶的最适催化温度60℃，pH值为5．5，在50℃以下酶的稳定性较好，70℃条件下底物对酶有较强的保护作用，该酶的pH稳定性范围为4～8，Zn^2＋，Ca^2＋，Mg^2＋，K^＋，Li^＋对酶活有促进作用，Mn^2＋、Co^2＋、Fe^2＋、Fe^3＋对酶活起抑制作用，酶对CMC-Na和水杨素有分解作用，而不分解脱脂棉和滤纸。

慢速手机与高速涡轮手机去腐质效果比较研究

目的:研究慢速手机及高速涡轮手机治疗年轻恒牙龋齿的效果。方法:选择恒牙患同颌同名牙深龋患者80例,一侧用慢速手机(15 000转/分)去腐质,另一侧牙用传统的高速涡轮手机(30万转/分)去腐。使用NO.2圆钻。两种方法均在喷水的情况下操作。用探针检查去腐质效果,消毒后用氢氧化钙及聚羧酸水门汀垫底,复合树脂光固化充填。结果:慢速手机去腐质治疗龋齿明显优于高速涡轮手机。结论:慢速手机去腐质最大限度地保护了健康牙体组织及牙髓。

产中性纤维素酶特异腐质霉H31-3复合诱变研究

中性纤维素酶在纺织、食品、饲料和制药行业均具有广泛的应用。采用离子束注入技术对中性纤维素酶产生菌特异腐质霉(Humicolainsolens)H31-3进行诱变,经发酵筛选获得较高酶活力且传代稳定的正突变菌株H14,制备其原生质体后进行紫外诱变。筛选后得到正突变菌株H14-2,最终CMC酶、滤纸酶活力分别达82.56IU/mL和5.77IU/mL,较原始菌株提高了78.57%和106.81%。

特异腐质霉中性内切葡聚糖酶Ⅱ基因的克隆及表达

利用RT-PCR的方法,以特异腐质霉(Humicolainsolens)H31-3总RNA为模板,克隆到中性内切葡聚糖酶Ⅱ基因egl2的cDNA,将其插入到表达载体pGAPZαA中,重组质粒经线性化,电击转化毕赤酵母(Pichiapastoris)菌株GS115,筛选到分泌表达重组EGⅡ的毕赤酵母工程菌株。SDS-PAGE检测结果表明,重组EGⅡ在酵母中得到了特异性表达,表达产物的表观分子量约为55kD,同时对工程菌株的发酵条件和重组EGⅡ的性质进行了初步研究。

一株特异腐质霉纤维素酶高产突变株的鉴定分析

高温真菌特异腐质霉(Humicola insolens)具有强大的纤维素酶分泌和纤维素降解能力,因此在生物质能源、饲料和纺织工业等领域中具有良好的应用前景。在特异腐质霉T-DNA随机插入突变体库中筛选得到一株纤维素酶高产菌株T53。在纤维素诱导培养条件下,突变株T53发酵上清中的滤纸酶活力、内切β-1,4葡聚糖酶活力、纤维二糖水解酶活力、β-葡萄糖苷酶活力以及木聚糖酶活力较野生型菌株分别提高了40%、60%、90%、10%、60%。蛋白电泳结果显示,T53菌株的胞外总蛋白特别是纤维素酶与半纤维素酶的分泌量较野生型菌株有显著提高。TAIL-PCR克隆鉴定了T53菌株中的T-DNA插入位点侧翼序列,结果表明T-DNA插入位点位于一个可能的C2H2型锌指蛋白类转录因子编码基因的上游启动子区域。这为揭示突变株T53中纤维素酶的高产分子机制奠定了重要基础,有助于理解特异腐质霉中纤维素酶的表达调控机制,为特异腐质霉纤维素酶高产工程菌的构建奠定了理论和技术基础。

特异腐质霉角质酶在大肠杆菌中的表达和发酵优化

应用大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21(DE3)表达系统实现特异腐质霉(Humicola insolens,H.insolens)来源角质酶的重组表达。对重组角质酶进行酶学性质研究,发现其最适pH为8.5、最适温度为80℃,并有良好的pH稳定性和温度稳定性。经3L发酵罐中扩大培养并进行发酵条件优化,其最佳发酵条件:发酵前期控制菌体生长pH 7.0、温度37℃,培养时间12~14h;菌体浓度OD600达到50时进入诱导期,调节温度降至30℃,恒速流加0.2g/(L·h)的乳糖溶液进行诱导,总发酵周期为36h,最高酶活2 233U/mL,是摇瓶水平酶活的13倍。

深龋保留部分近髓腐质的疗效分析

目的 :观察深龋治疗时 ,暂时保留部分近髓腐质的疗效。方法 :采用延期充填法 ,对 2 45 6个深龋患牙进行垫底充填 ,随访 6～ 2 4个月。结果 :2 4个月的成功率为 98.44 %,年轻人比年长者的成功率高。结论 :深龋保留部分近髓腐质的充填方法 ,可提高深龋保守治疗的成功率。

禾喜利牌水溶性腐质酸液体肥料在白菜上的应用效果研究

为了明确禾喜利牌水溶性腐质酸液体肥料的增产节支效果,研究其在白菜上的应用效果。结果表明,施用禾喜利牌水溶性腐质酸液体肥料配合适量氮、磷、钾肥料对白菜的增产提质效果明显,可明显增加白菜的单株重,对白菜株高、茎粗、有效株数、成株率等经济性状的影响较小。以施用禾喜利牌水溶性腐质酸液体肥料300 kg/hm^2配合适量氮、磷、钾肥料(与习惯施肥等养分)产量最高,为47 250 kg/hm^2,利润最大,为59 446.5元/hm^2。建议在蔬菜生产上大面积推广应用。

不同腐质酸钾用量对烤烟生长发育及产质的影响

2018—2019年在德江连续2a做了不同腐质酸钾用量对烤烟生长发育及产质影响的田间试验。结果表明:在所有的处理中,每667m2产量均高于对照,增幅为12.1%~21.45%,其中提高最多为处理2>处理3>处理1>处理4;烟叶产值和上中等烟比例为处理2>处理3>处理4>处理1>CK;烟叶钾含量各处理均高于对照,以处理2最高;淀粉含量各处理均高于对照,依次为处理4>处理3>处理2>处理1>CK,说明随腐质酸钾施用量的增加,烟叶中淀粉有增加的趋势;评吸得分处理2>处理3>处理1>CK>处理4,说明施用一定量的腐质酸钾能促进烟株生长发育、增加烟叶产量和改善烟叶品质,但不是越多越好,铜仁烟区施用腐质酸钾6g/株为好。

果农的良友 果园的希望——介绍“绿仓”果树专用腐质酸生物肥

建立果园多是上山下滩,果园的土壤条件往往先天不足。土壤结构不良,土质瘠薄,的机质含量低且难以在短期内得到改善,这是形成低产园、低质园的重要原因之一。果园大量施用化肥,不但没能如愿已偿地解决树体营养问题,反而使土壤的生态环境更加恶化,果园土肥管理进入恶性循环,这就是为什么有些果园化验土壤养分不缺,却树体发育不良的根本所在。

微生物对土壤腐质化转化的作用分析

微生物对土壤腐质化转化具有重要的意义,对保持自然界土壤肥力具有重要的作用,为农业生产种植提供了必备的条件与土质结构。基于此,将黑钙土作为主要的试验土质,对土壤里的微生物进行细致分析研究,通过对分离微生物进行试验,了解微生物所具有的优势,并同时在不同条件及环境中做实验。

添加秸秆对不同有机含量土壤腐质化特征及酸度的影响

通过向低、中、高及去有机质含量土壤处理中添加玉米秸秆进行室内培养试验,研究秸秆添加量对不同有机质含量土壤腐解能力及土壤酸度的影响。结果表明:在15℃恒温培养150 d后,土壤中秸秆腐解率表现为高有机质含量土壤>中有机质含量土壤>低有机质含量土壤>去有机质含量土壤,高有机质含量土壤均高于其他3种有机质含量处理腐殖化系数,且高有机质含量土壤有机质转化效果最好,有机质增加量最多。对于土壤酸度的影响,随秸秆添加量的增加,土壤pH上升幅度增加,土壤中交换性H^(+)、交换性Al^(3+)、交换性酸的含量降低。不同秸秆添加量条件下,4个有机质含量土壤表现不同,低有机质含量土壤秸秆添加量为10~15 g/kg时,土壤pH增幅最大,土壤交换性H^(+)、交换性Al^(3+)、交换性酸含量减幅最大,土壤酸度降幅最大;中、高有机质含量土壤秸秆添加量为15~20 g/kg时,土壤pH增幅最大,土壤交换性H^(+)、交换性Al^(3+)、交换性酸含量减幅最大,土壤酸度降幅最大。相对3种有机质含量土壤,去有机质含量土壤对降低土壤酸度的效果不明显。不同秸秆添加量和不同有机质含量的土壤中,交换性Al^(3+)含量远高于交换性H^(+),直接影响土壤交换性酸和土壤pH。秸秆还田在增加土壤有机质含量的同时还应有效降低土壤酸度,缓解土壤酸化。

特异腐质霉内切葡聚糖酶Ⅱ基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质

【目的】在毕赤酵母中表达特异腐质霉Humicola insolens的中性内切葡聚糖酶Ⅱ,并对其性质加以研究。【方法】利用RT-PCR的方法,以特异腐质霉(Humicola insolens)NC3总RNA为模板,克隆到中性内切葡聚糖酶Ⅱ基因(egⅡ)的cDNA。将其插入表达载体pPIC9K,重组质粒经线性化后电击转化毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株GS115。【结果】SDS-PAGE和酶活的检测结果均表明:egⅡ基因在毕赤酵母中成功表达。重组酶的部分酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为70°C,且在65°C以下具有较好的热稳定性。最适反应pH为6.5,在pH 6.0?7.0之间有较好的稳定性。【结论】用重组毕赤酵母可高效表达外源中性内切葡聚糖酶,为其今后在工业应用奠定了基础。

特异腐质霉葡糖化酶催化生淀粉一步糖化的酶学特征

从北京西郊森林土壤中分离到产生糖化生淀粉的葡糖化酶的特异腐质霉Humicola insolens HG‐618菌株。优化的产酶培养基如下:6%麦麸、2%玉米粉、0.7%磷酸氢二铵和1%玉米浆,p H 8.0,250m L三角瓶装40m L培养基,在40℃和280r/min培养90h。以生玉米淀粉为底物,发酵液中葡糖化酶活力为180U/m L。酶学性质试验表明,该酶的最适反应p H为6.0,最适反应温度为65℃;在p H 6.0–9.0范围酶活力稳定;酶热稳定性强,在60℃和p H 6.0保温8h,酶活力仍保留83%。一步糖化生玉米粉试验表明,在50m L 30%浓度生玉米粉浆和270U HG‐618葡糖化酶的反应体系中,采用自然p H 6.7,在55℃和100r/min条件下糖化40h。获得的糖化液还原糖浓度为17.1%(由酶产生的还原糖浓度为15.9%),生玉米粉中所含淀粉的糖化率为90%,且产生的糖全部为葡萄糖。因此,该葡糖化酶具有良好的一步糖化生玉米粉前景,它也可以用于生大米粉、生小麦粉和生马铃薯粉的直接糖化。