下肢静脉功能不全时下肢腓肠肌细胞病理生理学改变的研究

探讨腓肠肌细胞病理形态学和细胞代谢变化与下肢静脉功能不全相互关系及其临床意义 .依据血管造影和多普勒超声检查结果分为对照组 (A组 )及单纯下肢浅静脉曲张 (B组 )、原发性下肢深静脉瓣膜功能不全(C组 ) 3组 ,每组 1 0例 .分别取大腿长收肌 (对照 )和小腿腓肠肌标本检测肌肉中的SOD、NO、Na+ _K+ _ATP酶、Ca2 + _ATP酶、乳酸等各项指标 ;HE染色、ATP酶染色、SDH/COX双重染色后光镜、电镜观察 .结果显示 :A及B组肌组织结构和生化指标均正常 ,C组腓肠肌可见散在肌纤维萎缩、变性和坏死 ,炎性细胞浸润 ;同型肌纤维群化 ;COX/SDH染色可见单根或多根肌纤维酶活性增高 .肌丝间可见脂肪空泡聚集 ,部分线粒体空泡化或髓鞘样改变 .C组腓肠肌乳酸显著高于其他组别 (P <0 .0 1 ) ,而其Na_K_ATP酶、Ca2 + _ATP酶活性、NO、SOD等与其他组比较有显著下降 (P <0 .0 1 ) .表明下肢深静脉功能不全者患肢腓肠肌在肌纤维类型、超微结构和肌肉组织多项生化指标等均发生明显变化 ,推测小腿腓肠肌超微结构的病变是手术后远期效果不佳的病理基础 .如果从骨骼肌营养和抗氧化处理等角度进行治疗 。

大鼠严重烧伤后大脑皮质神经元和腓肠肌细胞bcl-2、HSP70蛋白的表达及意义

目的 探讨大鼠严重烧伤后大脑皮质神经元和腓肠肌细胞bcl 2、HSP70蛋白的表达及其意义。方法 应用免疫组化SP法检测大鼠体表总面积 (TBSA)为 30 %Ⅲ度烧伤后大脑皮质及腓肠肌组织bcl 2、HSP70蛋白的表达及动态变化。结果 严重烧伤后 1- 3hbcl- 2、HSP70在大脑皮质神经元胞浆呈中度阳性表达 ,此后呈阴性 ;而在腓肠肌呈强阳性表达且持续至伤后 12h ,两种蛋白的表达强度及持续时间与细胞的损伤程度密切相关。结论 严重烧伤后bcl 2。

自噬在电针对大鼠失神经性肌肉萎缩的肌细胞形态计量学影响中的作用

目的:研究自噬在电针治疗神经损伤后肌肉萎缩中的作用。方法:通过手术造成大鼠实验性坐骨神经钳夹伤模型,采用电针治疗、自噬抑制剂三甲基腺嘌呤(3-MA)干预等措施,不同时间点取材进行腓肠肌组织学观察和腓肠肌肌细胞截面积的测算。结果:腓肠肌肌组织的HE染色切片显示,第1、2天时,各组腓肠肌组织形态大小正常;第7天时,除正常组外,其余各组腓肠肌组织形态明显变小萎缩;第28天时,电针组的腓肠肌组织形态完整性较好,而电针联合自噬抑制剂组的腓肠肌组织形态大小和完整性较其他各组要差。腓肠肌肌细胞截面积的组间比较显示,第1、2天时,正常组腓肠肌肌细胞截面积与其他各组比无差异;第7、28天时,正常组腓肠肌肌细胞截面积与其他各组比明显变小,P<0.01,有显著性差异;第7、28天时,电针联合自噬抑制剂组肌细胞截面积与电针组比小,P<0.05,有差异。组内比较显示,模型组、电针组和电针联合自噬抑制剂组在第7、28天时的肌细胞截面积较第1天比明显变小,P<0.01,有显著性差异。结论:坐骨神经损伤后腓肠肌短期不萎缩,但中长期萎缩明显,在此过程中,电针可延缓腓肠肌萎缩,使腓肠肌保持形态相对完整;在相同电针情况下,抑制自噬反应会对维持腓肠肌正常形态造成一定负面影响,说明电针可能通过促进细胞自噬来改善腓肠肌组织形态。

不同日龄大鼠快慢肌卫星细胞体外增殖和分化特征研究

本项目旨在探索比较生后2、6及10周SD大鼠腓肠肌、比目鱼肌卫星细胞原代和传代培养的差异。取生后2、6及10周大鼠后肢腓肠肌、比目鱼肌,采用组织块法原代培养与传2代及差速贴壁,应用MTT法、DAPI荧光、免疫荧光细胞化学、NADH-TR酶组化及SDS-PAGE电泳检测。结果表明:分离纯化的各周龄组腓肠肌快肌卫星细胞和比目鱼肌慢肌卫星细胞纯度达到95%以上,采用Desmin、Fast-myosin、Slow-myosin抗体分别鉴定,细胞生长速度以快肌卫星细胞大于慢肌卫星细胞,周龄以2周>6周>10周。NADH-TR酶组化确定腓肠肌分成IIA、IID(IIX)、IIB及I型纤维,以速度与力量为主;而比目鱼肌仅有IIA、IID及I型纤维,没有IIB型纤维,以耐力见长。肌球蛋白重链异构体电泳IIa、IId(IIx)、IIb及I型和IIa、IId(IIx)及I型也分别佐证该结果。本实验结果提示大鼠快肌卫星细胞和周龄年幼的生长速度快于慢肌卫星细胞和周龄年长的,快肌以速度和力量为著,慢肌以耐力为主。