反复冻融处理同种异体移植兔跟腱组织学及生物力学变化

背景:近年来反复冻融处理技术作为一种同种异体肌腱的保存处理方法,主要原理是反复利用0～-60℃腱细胞最易损伤的冷冻温度,使得肌腱内细胞无活性,从而降低免疫原性。目的:拟观察反复冻融处理对同种异体移植兔跟腱组织学和生物力学的影响。设计、时间及地点:组织形态学及生物力学水平的对照动物实验,于2007-10/2008-02在北京大学运动医学研究所实验室完成。材料:选用17只成年健康新西兰大白兔。方法:无菌条件下取兔跟腱并带0.6cm×0.4cm跟骨骨块,按照组织库程序行60Co照射68min,照射剂量为25kGy。分为3组,-80℃冷冻,室温融解,反复冻融次数分别是1,3和10次,每组又抽取7条肌腱作生物力学测定,4条作组织学观察。主要观察指标:取肌腱行苏木精-伊红染色、胶原VanGieson染色和透射电镜扫描,观察跟腱组织形态学改变,并进行跟腱拉伸实验以观察生物力学变化。结果:组织学观察发现,随着反复冻融次数的增加,腱束和胶原纤维排列变得混乱直至断裂,细胞崩解,并且由于冰晶形成造成明显的腱束间裂隙。生物力学方面,与冻融1次组比较,冻融3,10次组的最大载荷、最大载荷能量及最大应力均显著降低(P<0.05),其他指标如弹性模量、能量密度也有下降但不明显。结论:反复冻融处理肌腱是一种有创的处理方法,正如组织学表现的可以引起细胞崩解、腱纤维紊乱甚至断裂等,最终会导致其生物力学水平的下降。

同种异体肌腱移植的前景及问题

由于自体肌腱移植来源有限,组织工程化肌腱尚难以真正应用于临床,同种异体肌腱移植是目前修复肌腱缺损尤其是多条肌腱缺损较为理想的方法。国内外学者对异体肌腱的获取、保存、处理、免疫学特性、临床应用和预后方面做了大量的研究工作,使异体肌腱移植技术日臻完善。同种异体肌腱移植已越来越多的应用于修复人体腱性组织缺损,但是异体肌腱的处理、免疫学特性以及移植后机械强度、术后粘连等问题还需要进一步解决。

玻璃化法保存异体肌腱移植的实验研究

目的评介玻璃化法保存的异体肌腱移植的可行性与有效性。方法家兔60只,其中24只切取双侧跟腱48条,分为2组,分别采用玻璃化法和程序冷冻法保存2周以上。其余36只平均分为3组:A组行新鲜肌腱自体移植,B组行玻璃化法保存肌腱异体移植,C组行程序冷冻法保存肌腱异体移植。术后3、8、12周后取材,行形态学、组织学观察及生物力学测试,并进行组间比较。结果玻璃化法保存肌腱完整率高于程序冷冻法,差异有显著性。A、B组移植后较C组粘连轻,光泽好。新生血管、腱细胞成熟早,愈合进程快。术前A、B、C组生物力学性能差异无显著性,术后12周差异有显著性。结论玻璃化法保存异体肌腱操作简单,能较好保存肌腱的组织结构,移植效果优于传统的程序冷冻法保存的异体肌腱。

骨形态发生蛋白2对移植肌腱在骨隧道内愈合的影响：界面组织学特点

目的:前交叉韧带重建移植肌腱在骨隧道内多为间接愈合,即在肌腱与骨之间没有纤维软骨带而直接由Sharpey’s纤维固定。观察人重组骨形态发生蛋白2对移植肌腱在骨隧道内愈合的影响。方法:实验于2004-06/09在上海市第六人民医院动物实验室完成,动物实验方法符合动物伦理学要求。①实验材料及分组:选用新西兰大白兔36只,按随机数字表法分为3组,即空白对照组、胶原海绵组及骨形态发生蛋白2组,每组12只。②实验方法:采用兔膝关节自体半腱肌重建前交叉韧带悬吊固定模型,骨形态发生蛋白2组在骨隧道内加入人重组骨形态发生蛋白2和胶原海绵,胶原海绵组仅在骨隧道内加入胶原海绵。③实验评估:术后4,8,12周在移植物周围取材进行苏木精-伊红、天狼猩红和Masson染色,观察骨隧道和肌腱移植物间的界面组织学变化,采用Yamakado分类评价界面形态愈合类型,并对Masson染色切片作肌腱周围新骨形成的形态学定量评估。结果:空白对照组2只白兔于术后第10周脱失。①术后4周空白对照组腱骨间有腱-骨分离,骨形态发生蛋白2组腱-骨间充满结缔组织;术后8周骨形态发生蛋白2组形成Sharpey’s纤维,而空白对照组术后12周时开始出现Sharpey’s纤维。②术后4,8,12周骨形态发生蛋白2组白兔新骨形成面积均显著大于空白对照组、胶原海绵组(P<0.01)。结论:人重组骨形态发生蛋白2可促进移植肌腱在骨隧道内的愈合,促进腱-骨之间形成间接连接。

异体肌腱移植重建伸肌腱止点治疗锤状指畸形

目的:观察异体肌腱移植重建伸肌腱止点治疗锤状指畸形的疗效。方法:选择于2003-01/2006-03在东南大学医学院附属徐州医院骨科采用改良伸肌腱止点重建术治疗的锤状指畸形患者15例,均自愿参加观察。开放损伤2例患者于急诊1期予以手术治疗,闭合损伤13例患者在1周内予以手术治疗。①手术方法:臂丛麻醉,于末节指骨基底以远4mm偏背侧的尺桡两边对向钻孔,形成骨隧道,采用修剪合适的异体肌腱穿过骨隧道,在远侧指间关节背侧交叉后分别与伸指肌腱的侧腱束吻合(吻合前选直径1.0mm克氏针将远侧指间关节固定过伸位10°￣15°),石膏托外固定,6周后拔除克氏针及拆除石膏进行末节屈伸功能锻炼。术后定期随访。②功能测评:测量手指最大伸直位掌指关节、近指间关节、远指间关节伸直受限角度的总和及手指屈曲位时指端与掌横纹之间的距离。优:伸指0°,屈指指端过掌横纹;良:伸指受限≤-15°,屈指指端达掌横纹。结果:15例患者全部进入结果分析,无脱落。术后随访2个月￣3年,平均19.5个月。所有患者伤口甲级愈合,无异物排斥反应。按Dargan功能评定标准,优12例(占80%),良2例(占13.3%),优良率达93.3%。1例因远侧指间关节僵硬而屈伸活动功能欠佳。结论:异体肌腱移植伸肌腱止点重建术是治疗锤状指畸形的有效方法。

腘绳肌腱重建前交叉韧带移植肌腱的固定

目的:腘绳肌腱重建前交叉韧带曾出现过多种固定器材,分析近年来关于腘绳肌腱重建前交叉韧带的文献资料,了解肌腱固定方式的发展趋势。资料来源:通过计算机检索Medline1995-01/2006-09有关腘绳肌腱重建前交叉韧带移植肌腱固定方式的文献,检索词为“anteriorcruciate ligament,reconstruction,hamstring”,限定文章语言种类为English;另外检索中文期刊全文数据库2000-01/2006-03有关腘绳肌腱重建前交叉韧带移植肌腱固定方式的文献,检索词为“前交叉韧带,重建术,腘绳肌腱”,限定文章语言种类为中文。资料选择:选取有关腘绳肌腱重建前交叉韧带的文章,纳入标准:①随机或自身前后对照的临床研究。②观点明确。③有关于固定方式的评论。排除标准:①综述。②重复性研究。资料提炼:共检索到60篇关于腘绳肌腱重建前交叉韧带的文章,选择其中符合标准的33篇进行综合分析。资料综合:固定方式经历了一个由皮质骨外固定到骨隧道内固定的演变过程,Transfix是目前较为理想的固定方式,肌腱结嵌压固定是最新出现的一种固定方式,其临床效果尚需进一步验证。在固定位置的选择上,多数学者认为应该遵循等距重建。通过对固定方式的比较发现,隧道内固定能减轻术后骨隧道的扩大程度。结论:腘绳肌腱重建前交叉韧带的固定方法越来越趋于隧道内固定,并朝着利于腱骨愈合、减轻骨隧道扩大的方向发展。在固定位置的选择上,学者们尚无统一的意见,其趋势可能是向解剖固定发展。

碱性成纤维细胞生长因子促进冻干肌腱移植重建前交叉韧带的早期血管生成: 组织学表现(英文)

背景:以往实验已证实碱性成纤维细胞生长因子在体内外均有促新生血管形成的作用。冻干法可以减低移植物的抗原性,经冻干处理后的移植物保存时间长并且运输方便,更容易商品化。冻干肌腱补充活性细胞生长因子有望加速新血管的生成。目的:拟验证碱性成纤维细胞生长因子促进冻干肌腱移植重建前交叉韧带后早期血管的生成作用。设计、时间及地点:对照观察动物实验,于2006-06/2007-06 在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成。材料:选用健康成年家犬 14 只。方法:取 2 只犬,无菌手术取其双下肢伸趾长肌腱 16 条,冻干处理后供实验用。将其余12 只犬左、右侧膝关节分别移植单纯冻干肌腱和复合 100 μg/L 碱性成纤维细胞生长因子后冻干肌腱重建前交叉韧带。主要观察指标:分别于移植后 1,2,3,4,5,6 周取材,每次取 2 只。进行苏木精-伊红染色,通过图像分析仪定性观察新生血管的生成情况。结果:复合碱性成纤维细胞生长因子冻干肌腱组移植后两三周出现新生血管,四五周达到高峰;单纯冻干肌腱组移植后四五周出现新生血管。复合碱性成纤维细胞生长因子冻干肌腱组新血管长入肌腱的时间先于对照组,深度深于对照组。结论:复合 100 μg/L 碱性成纤维细胞生长因子的冻干肌腱移植重建前交叉韧带后,在新血管形成的时间及长入肌腱的深度方面均优于单纯冻干肌腱。

脊神经后根切断后肌腱移植治疗脑性瘫痪后足内翻23例

选择甘肃省康复中心1997-04/2007-12收治的脑性瘫痪选择性脊神经后根切断术后遗留足内翻患者23例31足,其中行胫骨后肌移位术9足,胫骨前肌移位术4足,联合肌腱移位术即Bridle手术18足,肌腱移植后行康复训练。随访6个月～5年,平均26.3个月。31足中优11足,良16足,优良率87%。选择性脊神经后根切断术降低肌张力、缓解肌痉挛,肌腱移植矫正畸形和功能康复训练重建功能相结合是治疗伴有足内翻的痉挛性脑性瘫痪较为有效的手段。

自体肌腱重建前交叉韧带后的生物力学转归

目的:建立犬自体屈肌腱重建前交叉韧带模型,比较重建后不同时期移植物总体最大抗拉强度和刚度的变化。方法:实验于2005-01/12在上海市第六人民医院动物实验中心和上海交通大学力学研究中心完成。采用成年比格犬21只,随机数字表法分为重建前交叉韧带组15只,正常对照组6只。①重建前交叉韧带组建立犬自体屈肌腱重建前交叉韧带模型,不锈钢螺钉悬吊固定。15只犬分别于术后0.5,1,1.5,3,6个月各时间点取材,3只/次。取材包括股骨远端和胫骨近端以及连接两者的重建的前交叉韧带,其余连接股骨和胫骨的组织均去除,然后测量移植物最大抗拉强度和刚度的变化。②正常对照组不造模,切取犬双膝包括股骨远端和胫骨近端以及连接两者的前交叉韧带,其余连接股骨和胫骨的关节囊及韧带全部清除,取其标本进行力学测定。③拉力检测方法均是通过Zwick万能材料试验机进行拉力测试,预牵拉2N,牵拉速度10mm/min,测试两组最大抗拉强度和刚度,并记录标本拉断点的位置。结果:实验采用成年比格犬21只,全部进入结果分析。①正常对照组最大抗拉强度和刚度的测试结果:屈肌腱的最大抗拉强度为(564.15±36.18)N,刚度为(59.89±4.28)N/mm;前交叉韧带的最大抗拉强度平均为(684.75±48.10)N,刚度为(74.34±6.99)N/mm,所有前交叉韧带拉断点均在关节内部分;重建后即刻移植物的总体最大抗拉强度为(301.92±15.04)N,刚度为(31.35±1.97)N,所有拉断点均在骨隧道内编织线处。②重建前交叉韧带组术后不同时间点最大抗拉强度和刚度的变化:术后0.5,1,1.5,3,6个月移植物最大抗拉强度分别为(72.59±6.17)N,(34.26±2.12)N,(73.91±6.88)N,(180.97±6.25)N,(393.93±32.46)N;移植物刚度分别为(13.18±1.23)N/mm,(6.56±1.35)N/mm,(13.27±2.10)N/mm,(22.46±2.29)N/mm,(28.74±1.30)N/mm。③术后不同时间点两组最大抗拉强度和刚度的比较:术后0.5,1,1.5,3,6个月,重建前交叉韧带组移植物总体最大抗拉强度分别是正常对照组重建后即刻的24.0%,11.3%,24.5%,60.0%,130.5%;移植物刚度分别是正常对照组重建后即刻的42.0%,20.9%,42.3%,71.7%,91.7%。结论:犬自体屈肌腱重建前交叉韧带后随时间的延长,移植物总体最大抗拉强度和刚度呈由强到弱再缓慢增强的趋势,为临床重建术后康复计划的制定提供实验数据。

两种方法冷冻保存异体髌腱重建膝关节交叉韧带比较

目的观察程序冷冻液氮保存和-80℃深低温保存方法处理同种异体髌腱后重建膝关节交叉韧带的愈合过程并比较其差异。方法将兔的1/2骨-髌腱-骨复合体经程序冷冻液氮保存和-80℃深低温保存2周后,观察冻存变化差异并行同种异体移植重建前交叉韧带,分别于术后3周和8周观察细胞毒反应、细胞活性、最大载荷和形态学变化等指标进行比较并与自体移植组对照。结果①经程序冷冻液氮保存方法处理后,髌腱的最大载荷无明显下降,细胞活性得到了较好的保存,组织学观察冷冻损伤较-80℃深低温保存方法轻微。②程序冷冻液氮保存处理的移植物在术后未表现明显的排斥反应,且免疫反应随时间的推移而下降。③移植后3周,各组移植物的最大载荷差异无显著性,移植后8周,程序冷冻液氮保存组移植物的最大载荷优于-80℃深低温保存组,但和自体移植组相近。④和-80℃深低温保存组相比,程序冷冻液氮保存组的移植物在术后的愈合过程和组织学行为更接近于自体移植组。结论①经程序冷冻液氮保存和-80℃深低温保存方法冻存的兔异体髌腱重建膝关节交叉韧带后愈合过程和自体韧带移植重建过程相似。②程序冷冻液氮保存法优于传统的-80℃深低温保存法。

自体肌腱与人工韧带联合应用重建兔前交叉韧带

背景：自体肌腱与人工肌腱是目前治疗前交叉韧带断裂的主要移植物，两者各有优缺点。目的：将自体肌腱与人工韧带联合重建兔前交叉韧带，观察其在不同时间段组织学反应及生物力学改变。设计、时间及地点：同体对照观察，于2007—09／2008—02在郑州大学骨科实验室和郑州大学生物实验室力学中心完成。材料：SPF成年健康新西兰大白兔28只由郑州大学动物实验中心提供，体质量2．4—31kg，平均2．8kg，雌雄不限。MB66编织线为上海施乐辉医用产品国际贸易有限公司产品。方法：①取兔的双下肢伸趾肌腱，一个伸趾肌腱完全包裹人工韧带，另一个伸趾肌腱单纯末端编织备用。②取兔双膝内侧髌旁切口暴露关节，切断并去除正常前交叉韧带，定位上下止点，分别钻股骨和胫骨骨道，一个膝关节穿入自体肌腱与人工韧带联合肌腱（联合肌腱组），另一个关节穿入单纯肌腱（单纯肌腱组），两端钻骨桥缝线固定。分别于术后第2，4，6，8周随机抽出的7只兔，麻醉后处死。主要观察指标：①两组兔重建的前交叉韧带大体观察和组织学观察结果。②两组移植物的最大拉断力。结果：移植后第2，4周，移植物内细胞消失，呈坏死状：联合肌腱之间有炎症细胞浸润，边缘开始有细胞向中心长入。移植后第6周，移植物表面滑膜增生明显；单纯肌腱有少许变形和松弛；联合肌腱部分间隙被滑膜填充，浸润的炎症细胞减少，内部仍有界限。增生的细胞由周围向中心推进明显。移植后第8周，移植物大部分组织被新长入的细胞替代，人工韧带被滑膜完全包裹，浸润的炎症细胞基本消失，部分接触面己融合，但部分面仍有间隙：联合肌腱无变形和松弛，移植物内细胞形态，数量接近正常前交叉韧带，但纤维细胞排列杂乱，纤维有了一定的纵向性。生物力学测试结果联合肌腱最大拉断力大于单纯肌腱（P〈0．05）。结论：联合肌腱与单纯肌腱都经历坏死、再血管化、韧带化的改建过程，与其生物力学经历由强到弱再逐渐增强的过程相一致。联合肌腱硬度或韧性均可弥补单纯肌腱早期易松弛的缺点，晚期自体肌腱成活可弥补人工肌腱被永久性拉长或断裂的缺点。

关节镜下自体腘绳肌腱重建前交叉韧带术后骨道增宽研究进展

膝关节镜下进行前交叉韧带（ACL）重建术已成为临床上治疗ACL断裂的常规方法，常用的移植物有自体肌腱、异体肌腱、人工韧带和生物组织工程韧带等。而自体肌腱由于取材方便、成本低、术后组织愈合快、不存在免疫排斥反应和疾病传播危险等优点，现已成为目前ACL重建移植物的主流。目前最常用的自体肌腱移植物有腘绳肌腱（H T ）和骨‐髌腱‐骨（BPTB ）。 Pinczew ski 等［1，2］经10年随访发现，选用BPTB作为ACL重建的移植物，59％的患者术后出现持续且加重的膝关节疼痛，甚至出现持续恶化的膝前疼痛。而使用 H T 重建ACL后不影响膝关节伸张功能，无膝前痛，四股HT在结构上更接近原解剖结构等优点，鉴于上述原因，现临床使用上越来越广泛。

桡侧腕屈肌替代掌长肌行腱片移植治疗腱性锤状指体会

目的 总结在掌长肌缺如时应用桡侧腕屈肌替代掌长肌行腱片移植治疗腱性锤状指的疗效.方法 本组11例腱性锤状指患者,切取桡侧腕屈肌腱片,用双套圈经隧道交叉加压缝合法或其改良术式结合腱片移植修复.结果 本组11例锤状指患者均获得随访,患者切口均Ⅰ期愈合,功能恢复良好,无术后并发症发生.根据1975年美国手外科学会推荐的TAM （total active move-ment,TAM）系统评定方法：优4例,良7例,可、差0例,优良率100％.桡侧腕屈肌功能无影响.结论 在掌长肌缺如时应用桡侧腕屈肌替代掌长肌行腱片移植治疗腱性锤状指操作简单、治疗有效,不影响桡侧腕屈肌功能,临床可以推广应用.

股前外侧皮瓣同肌腱一期移植修复创面11例分析

目的探讨股前外侧皮瓣同肌腱联合移植一期修复创面的临床应用方法。方法对郑州市第一人民医院整形外科2007-07-2010-08应用股前外侧皮瓣同肌腱联合移植一期修复创面11例进行分析。结果术后皮瓣均完全成活,创面一期愈合。1例皮瓣远端部分坏死,经换药,再次植皮后愈合。10例移位皮瓣外观良好,质地柔软;7例皮瓣略显臃肿,经二次手术修薄外观改善。随访6个月～1a,受区皮瓣颜色、质地与周围组织相近,供区局部凹陷不明显。结论股前外侧皮瓣同肌腱联合移植一期修复创面保持受区形态及功能,降低供区损伤,可使复杂创面一期修复完成,是一种理性的治疗方法。

关节镜下前交叉韧带重建研究进展

前交叉韧带对维持膝关节的稳定具有重要作用,而前交叉韧带损伤在临床上较为常见,在运动员和运动量大的年轻人中更高。前交叉韧带损伤主要发生在非接触性运动中,一般伴副韧带及半月板的损伤。有报道指出,美国前交叉韧带损伤患者每年达20万例,其中约10万例需要行前交叉韧带重建术,而我国尚缺乏一般人群统计结果报道。严重的前交叉韧带损伤后保守治疗效果一般都很差,而重建手术能更好地恢复膝关节的稳定及功能．提高患者的生活质量。本文对关节镜下前交叉韧带重建术的研究进展作一综述，以期为临床治疗前交叉韧带损伤提供指导和帮助。

关节镜联合同种异体肌腱解剖重建治疗慢性踝关节前外侧不稳的疗效分析

目的探讨关节镜联合同种异体肌腱解剖重建治疗慢性踝关节前外侧不稳的手术方法及疗效。方法分析2012年1月至2015年12月收治的27例慢性踝关节前外侧不稳的患者资料。27例均行踝关节镜下诊治术和同种异体肌腱解剖重建术。踝关节功能根据AOFAS评分和Mazur评分评定。结果27例术后随访12～18（中位数13．7）个月。随访期间无一例出现切口感染、固定装置松动、移植物失效及断裂等并发症。25例运动功能恢复至伤前水平，2例出现踝关节僵硬，经康复治疗后接近正常。末次随访患侧与健侧的前抽屉位移之差均〈3mm，距骨内翻角之差均〈3°。术后X线片显示踝关节对合关系良好，无撞击征象。末次随访时，AOFAS评分及Mazur评分分别为（88．6±1.1）分、（89．6±1．2）分，与术前比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论关节镜联合同种异体肌腱解剖重建治疗慢性踝关节前外侧不稳可获得满意的临床疗效，且并发症少，值得推广。