M_5受体参与激活吗啡奖赏大鼠腹侧背盖区nNOS表达

目的 研究不同毒蕈碱受体亚型 (M4,M5)对吗啡诱发大鼠奖赏效应的影响 ,同时观察腹侧背盖区 (ventraltegmentalarea ,VTA)神经型一氧化氮合酶 (nNOS)表达的变化。方法 实验通过侧脑室置管给药 ,采用反义寡核苷酸技术 ,免疫组织化学技术和条件位置偏爱 (conditionedplacepreference,CPP)程序 ,研究M4,M5反义寡脱氧核苷酸干预下吗啡的奖赏行为 ,以及VTA内nNOS表达情况。结果 吗啡 (5mg·kg-1)皮下注射 ,可以建立起稳定的大鼠对伴吗啡环境的位置偏爱 ,同时VTA内nNOS阳性神经元表达也显著增加。而M5反义寡脱氧核苷酸 (M5 AS) (2nmol)侧脑室预注射则可阻断吗啡诱发CPP的形成 ,同时也显著减少VTA内nNOS表达。在吗啡诱发的CPP形成后 ,侧脑室单次注射M5 AS(2nmol)也可以逆转大鼠对伴吗啡环境的位置偏爱 ,同时也明显减少VTA内nNOS表达。相比之下 ,M4反义寡脱氧核苷酸 (M4 AS)对吗啡诱发的CPP形成以及VTA内nNOS表达的影响均不明显。实验前后所有大鼠的运动活性并未发生显著改变 ,可排除运动活性对实验的影响。结论 M5毒蕈碱受体在大鼠吗啡诱发的条件位置偏爱形成过程中起重要作用 ;M5毒蕈碱受体可能是通过激活大鼠VTA内nNOS的表达 ,参与调控吗啡奖赏效应的。

单次注射人工合成大麻素降低大鼠中脑腹侧背盖区多巴胺能神经元兴奋性

大麻成瘾可能维持一生。中脑腹侧背盖区(ventral tegmental area,VTA)作为投射到意识及情绪相关皮层和边缘系统的多巴胺能神经元的主要来源,是奖赏系统的关键部位之一,与药物成瘾密切相关。目前,对于VTA多巴胺能神经元在药物成瘾过程中的作用研究,主要集中在药物成瘾过程中突触可塑性的变化。已有研究表明,大麻素慢性作用5天后,易化了低频电刺激诱导VTA多巴胺能神经元产生突触传递的长时程减弱(long-term depression,LTD)效应,而此过程中多巴胺能神经元兴奋性的变化情况还未见报道。实验中,作者采用离体脑片膜片钳技术,观察单次注射人工合成大麻素HU210对大鼠VTA区多巴胺能神经元兴奋性的影响。结果显示,HU210作用后,神经元基强度增大,平均放电频率降低,其细胞膜电生理特性也发生了改变,表明单次注射人工合成大麻素HU210,降低了VTA多巴胺能神经元的兴奋性,提示神经元内在兴奋性的可塑性改变可能在药物成瘾中发挥作用。

尼古丁暴露和饮酒行为对大鼠腹侧被盖区烟碱型乙酰胆碱受体表达的影响

目的探讨尼古丁暴露和饮酒行为对大鼠腹侧被盖区（VTA）烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）部分亚单位mRNA表达的影响。方法39只出生35d的雄性Wistar大鼠随机分为实验组（N组，n=20），和对照组（C组，n=19），N组大鼠进行为期10d的尼古丁（1．0mg·kg^-1·d^-1）皮下注射，C组大鼠以生理盐水对照处理10d。其后，在N组和C组大鼠中各随机抽取6只（分别为NE组，n=6，和CE组，n=6）大鼠断头取脑分离VTA区提取mRNA，实时定量检测nACh受体α4、α5、α和α2亚单位表达。N组和C组其余大鼠（分别为NA组n=14，CA组n=13）在出生后60d以Samson糖水递减程序诱导建立双瓶自由选择饮酒行为模型，共计69d，之后以相同程序定量检测VTA区标本相同指标。结果①因素分析显示：两因素（尼古丁暴露、饮酒行为）对VTA区nAChRα4、α5亚单位表达水平均有调节作用（F值分别为6．13，5．407，5．186，7．132，P〈0．05）；饮酒行为因素对β2亚单位表达水平有调节作用（F=5．896，P〈0．05）；两因素对α7亚单位表达有极强的交互作用（F=13．894，P〈0．001），对仅5、p2亚单位表达有交互作用（F值分别为6．149，4．222，P〈0．05）。②NA组α4、α5、α7和β2亚单位mRNA表达不同程度的显著高于CA组（F值分别为7．941，13．517，17．438，9．272，分别P〈0．05、P〈0．05、P〈0．01、P〈0．01），NA组的α4、α5、α7、β2亚单位表达水平显著高于NE组（F值分别为5．293，8．500，6．149，4．837，P〈0．05）；CA组胡亚单位表达水平显著低于CE组（F=12．750，P〈0．01）。结论尼古丁和乙醇共同作用于VTA区包含有α4、α5、α7、β2亚单位的nAChR亚型。

大鼠脑内双核团电活动与多项生理指标的同步记录技术

目的:建立同步检测脑内双核团电活动和多项生理指标,以同时观察脑内相关核团活动与生理反应的心理生理学实验技术。方法:在麻醉的成年大鼠(n=26)进行脑内奖赏系统关键核团腹侧背盖区(VTA)和惩罚系统重要核团基底外侧杏仁核(BLA)电活动的同步记录,同时监测心电、呼吸肌肌电、皮肤电导、体温等多项生理指标,建立成年大鼠脑内双核团细胞外记录与多项生理指标联合记录技术,并对自发深呼吸反应和夹尾刺激反应时同步记录到的6项指标进行初步分析。结果:①麻醉成年大鼠BLA放电频率高于VTA(n=26,配对t检验,P<0.01),且VTA与BLA的放电频率呈正相关(r=0.936,P<0.01);②大鼠自发深呼吸反应期VTA电活动幅值减小(n=9,P<0.05),呼吸肌肌电幅值和皮肤电导幅值均增大(P<0.01);③在夹尾刺激时VTA和BLA的放电频率降低(n=12,P<0.001和P<0.05),心电信号RR间期缩短(P<0.01),但VTA放电频率在夹尾后比夹尾前显著性升高(P<0.05)。结论:脑内双核团电活动和多项生理指标同步记录技术可以稳定记录脑内相关核团电活动和生理活动的变化,可能为药物成瘾脑机制等相关综合性研究提供了一种适宜的实验方法。

神经肽Urocortin2对吗啡成瘾大鼠VTA神经元放电及DA能神经传递的影响

目的明确神经肽urocortin2(UCN2)在吗啡成瘾中抑制丘脑腹侧背盖区(ventral tegmental area,VTA)神经活动的机制。方法建立吗啡成瘾大鼠模型,采用七管微电泳方法,电泳UCN2对吗啡成瘾大鼠VTA神经元自发放电的改变,及UCN2对多巴胺(dopamine,DA)能神经元簇发放电模式的影响,明确UCN2在VTA神经元中与DA存在汇聚作用。另外,给予促皮质激素释放因子(coticortropin-releasing factor,CRF)受体阻断剂及蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)抑制剂,明确UCN抑制吗啡成瘾中发挥关键作用。结果UCN2使82%(31/38)吗啡成瘾大鼠VTA神经元放电频率减慢,平均放电频率由微电泳前的(20.89±2.86)Hz减少到(13.66±3.93)Hz,给药前后放电频率降低具有显著性(P<0.01),UCN2抑制作用可被PKA抑制剂H89及CRF-2R阻断剂AST-2B取消。另外,微电泳UCN2可抑制吗啡成瘾大鼠VTA中DA神经元的爆发放电,AST-2B可增强DA的兴奋效应。结论 UCN2与CRF-2R结合后,通过PKA信号途径,抑制VTA内DA神经元异常放电,在吗啡类药物成瘾中发挥抑制作用,为其用于临床治疗阿片类药物成瘾提供理论依据。

M5毒蕈碱乙酰胆碱受体参与药物成瘾的研究进展

M5受体是毒蕈碱乙酰胆碱受体家族的一个新成员，是毒蕈碱乙酰胆碱受体家族（M1-M5亚型）最后一个被克隆出来的，属于G蛋白偶联受体。免疫沉淀和m RNA原位杂交实验表明M5受体在中枢神经系统中特定区域表达，包括海马、丘脑、黑质和中脑腹侧背盖区（VTA）部位）^[1，2，3]。可是和其他M受体比较，M5受体表达水平较低，

急、慢性吗啡依赖大鼠脑内Gi_2蛋白的表达

目的研究吗啡依赖大鼠腹侧背盖区(VTA)、伏隔核(NAc)、前额皮质(PC)、海马及蓝斑(LC)各脑区Ⅱ型抑制性鸟苷酸结合蛋白(Gi2蛋白)的改变,探讨吗啡依赖的可能机制。方法36只SD大鼠随机分为6组,分别为急性吗啡依赖组、急性吗啡戒断组、急性空白对照组、慢性吗啡依赖组、慢性吗啡戒断组和慢性空白对照组。建立吗啡依赖大鼠模型。戒断组腹腔注射纳洛酮5mg/kg,作用30min。断头处死各组大鼠,取出脑组织,进行冰冻切片。用免疫组化技术检测NAc、PC、LC、VTA和海马的相对Gi2蛋白水平。结果急性吗啡依赖组和戒断组与急性空白对照组比较,NAc区Gi2蛋白水平明显降低(P<0·01)。慢性吗啡依赖组和戒断组与慢性空白对照组比较,NAc区Gi2蛋白水平明显降低(P<0·01),LC区Gi2蛋白水平明显升高(P<0·01)。结论吗啡依赖可引起大鼠脑内Gi2蛋白水平发生改变,但各脑区Gi2蛋白水平的变化并不相同。Gi2蛋白水平改变可能是吗啡耐受和依赖潜在的分子机制。

首发精神分裂症患者的中脑多巴胺区静态及动态功能连接异常改变及其与临床症状的相关性分析

目的探讨首发精神分裂症(SCH)患者中脑多巴胺区[腹侧背盖区及双侧黑质致密部(VTA/SNc)]静态功能连接(sFC)及动态功能连接(dFC)的异常改变,及其与阳性与阴性症状量表(PANSS)的相关性。方法前瞻性收集2019年1月至2022年5月郑州大学第一附属医院收治的198例首发未用药SCH患者,以及年龄、性别、受教育年限与之匹配的199名健康对照(HC)组资料。所有被试均行高分辨率结构像MRI及静息态功能MRI(rs-fMRI)扫描。将中脑多巴胺区(VTA/SNc)定义为三个种子点,采用sFC和dFC方法分析SCH组与HC组VTA/SNc功能连接具有统计学差异的脑区,将差异脑区提取的sFC和dFC值与患者的PANSS量表中阳性量表分、阴性量表分、一般精神病理量表分、总分以及各症状分进行相关性分析。结果SCH组男86例,女112例,年龄(23±9)岁,HC组男95例,女104例,年龄(22±5)岁。SCH组的PANSS量表中阳性量表分为(20±7)分,阴性量表分为(21±7)分,一般精神病理量表分为(41±11)分,总分为(82±22)分。与HC组相比,SCH组VTA与小脑蚓部7/9区、左侧壳核、右侧丘脑、左侧中扣带回四个脑区团块sFC值降低(峰值中心,t值分别为-4.35、-4.81、-4.35、-4.65,体素P<0.005,团块P<0.05),右侧SNc与左侧小脑半球4/5/8区、右侧壳核、右侧内侧眶额回、左侧壳核四个脑区团块sFC值降低(峰值中心,t值分别为-4.91、-5.15、-4.77、-5.21,体素P<0.005,团块P<0.05),左侧SNc与右侧壳核、右侧内侧眶额回、左侧中扣带回三个脑区团块sFC值降低(峰值中心,t值分别为-5.82、-4.83、-4.65,体素P<0.005,团块P<0.05);SCH组VTA与右侧顶下回、右侧角回、右侧顶上回dFC变异值降低(t=-4.17)。SCH组以VTA为种子点的脑区团块2(左侧壳核)、以右侧SNc为种子点的脑区团块4(左侧壳核)的sFC值与PANSS量表中的阳性量表分呈正相关(r=0.141、0.169,均P<0.05),差异脑区功能连接值尚与幻觉、妄想、猜疑、敌对、交流障碍、被动/淡漠、交流缺乏、刻板思维、抑郁、不合作、判断和自知力缺乏、冲动控制障碍、主动回避社交这些症状呈现相关性(均P<0.05)。结论首发SCH患者中脑多巴胺区(VTA/SNc)与小脑、丘脑、纹状体、前额叶、扣带回等脑区静态功能连接或动态功能连接(稳定性)降低,并与疾病阳性与阴性症状分数存在相关性。

慢性吗啡依赖大鼠脑内G_(i2)蛋白的改变

目的研究慢性吗啡依赖大鼠腹侧背盖区(Ventraltegmentalarea,VTA)、伏隔核(Nucleusaccumbens,NAc)、前额皮质(Prefrontalcortex,PC)、海马(Hippocampus)及去甲肾上腺能神经中枢蓝斑(Locuscoeruleus,LC)五个脑区Gi2蛋白的改变,探讨慢性吗啡依赖的可能机制。方法18只SD大鼠随机分为三组:慢性吗啡依赖组、戒断组和空白对照组。慢性吗啡依赖组和戒断组腹腔注射吗啡,建立吗啡成瘾模型,戒断组腹腔注射纳络酮(5mg/kg)30min后断头处死各组大鼠,取出脑组织,进行冰冻切片。用免疫组化技术检测NAc、PC、LC、VTA和Hippocampus五个脑区相对Gi2蛋白水平。结果慢性吗啡成瘾组和戒断组与空白对照组相比,NAc区Gi2蛋白水平明显降低(P<0.01),LC区Gi2蛋白水平却明显升高(P<0.01),其它脑区未发现明显变化。结论慢性吗啡成瘾可引起大鼠脑内Gi2蛋白水平发生改变,但各脑区Gi2蛋白水平的改变并不相同。Gi2蛋白水平的改变可能是吗啡耐受和依赖潜在的分子机制。

急性吗啡依赖大鼠脑内G_(i2)蛋白的表达

目的研究急性吗啡成瘾后大鼠腹侧背盖区(Ventral tegmental area,VTA)、伏隔核(Nucleus accumbens,NAc)、前额皮质(Prefrontal cortex,PC)、海马(Hippocampus)及去甲肾上腺能神经中枢蓝斑(Locus coeruleus,LC)五个脑区Gi2蛋白的改变,探讨急性吗啡成瘾的可能机制。方法18只SD大鼠随机分为三组,每组6只,分别是急性吗啡成瘾组、急性吗啡戒断组、空白对照组。吗啡成瘾组和戒断组腹腔注射吗啡,直到吗啡成瘾模型建立。戒断组腹腔注射纳络酮5mg/kg,作用30min后断头处死各组大鼠。取出脑组织,进行冰冻切片。用免疫组化技术检测NAc、PC、LC、VTA和Hippocampus五个脑区相对Gi2蛋白水平。结果急性吗啡成瘾组和急性戒断组与空白对照组相比,NAc区Gi2蛋白水平有明显降低(P<0.01),其它脑区则未发现明显的改变。结论急性吗啡成瘾可引起大鼠脑内Gi2蛋白水平发生改变,NAc区Gi2蛋白水平有明显降低,其它脑区则未发现明显的改变。Gi2蛋白水平的改变可能是吗啡耐受和依赖潜在的分子机制。

VTA Nesfatin-1信号通路参与调节糖尿病大鼠摄食及葡萄糖敏感神经元活动

目的:探究大鼠腹侧背盖区(VTA)微量注射nesfatin-1对正常大鼠及糖尿病大鼠摄食及葡萄糖敏感神经元活动的影响.方法:通过向VTA微量注射nesfdatin-1及黑皮质素3/4受体拮抗剂SHU9119观察对正常大鼠及糖尿病大鼠葡萄糖敏感(GS)神经元放电活动的影响;通过综合实验室动物监测系统(CLAMS,Columbus Instruments,Ohio)观察向VTA微量注射nesfdatin-1及黑皮质素3/4受体拮抗剂SHU9119对正常大鼠及糖尿病大鼠摄食的影响.结果:VTA微量注射nesfatin-1后,正常大鼠和糖尿病大鼠GS-E神经元放电活动显著升高(P<0.05),且GS-I神经元放电活动显著下降(P<0.05),但糖尿病大鼠VTA注射nesfatin-1对GS反应性神经元的兴奋/抑制作用更加显著(P<0.05);VTA微量注射nesfatin-1后,正常大鼠和糖尿病大鼠摄食量均显著下降(P<0.05),但糖尿病大鼠摄食量下降更为显著(P<0.05).结论:大鼠VTA nsfatin-1信号通路参与正常大鼠及糖尿病大鼠葡萄糖敏感神经元放电活动及摄食量的调控.

多巴胺神经元在抑郁症动物模型中的适应性改变研究现状与展望

抑郁症作为目前最常见的精神疾病,对人们的生活造成严重的影响。中脑腹侧被盖区(VTA)DA神经元在应激诱发情绪改变、动机抉择、奖励刺激、错误预估、趋利避害等行为中起到主要调节作用,尤其是参与应激诱发抑郁情绪中起到主导作用。因此,本文主要讨论最接近人类诱因诱发抑郁症的动物模型(习得性无助、慢性温和不可预测应激及慢性社会挫败)VTA中DA能神经元适应性改变,阐述DA能神经元活动水平的改变在不同应激诱发抑郁行为中作用机制,探讨针对目前难治且易复发的抑郁症从DA系统角度提供新的治疗思路。

运动奖赏效应及其神经生物学机制的研究进展

身体活动不足已经成为当今社会的公共卫生问题。深入理解运动的奖赏效应及其可能的神经生物学机制,将为改善身体活动不足提供科学有效的干预靶点。本文指出运动是一种典型的自然奖赏行为。大脑奖赏相关的腹侧背盖区-伏隔核的多巴胺能神经环路、前额叶皮质-伏隔核的谷氨酸能神经投射、红核-腹侧背盖区的谷氨酸能神经投射是调控运动奖赏效应的关键神经环路机制。此外,多巴胺、内源性大麻素系统和内源性阿片肽等多种神经分子参与了运动奖赏效应的调控。然而,大脑奖赏系统的过度激活将会导致运动成瘾。

胞体高频刺激诱导VTA多巴胺能神经元兴奋性增强

中脑腹侧背盖区(ventral tegmental area,VTA)多巴胺能神经元的可塑性变化直接影响着奖赏系统等相关脑区的功能。目前对于VTA多巴胺能神经元可塑性的研究主要集中在突触的可塑性,而对多巴胺能神经元胞体兴奋性可塑性的研究还未见报道。本实验旨在研究高频刺激对多巴胺能神经元胞体兴奋性可塑性的影响。采用GABAA受体阻断剂印防己毒素(picro-toxin,PTX)、谷氨酸AMPA受体阻断剂6-氰基-7-硝基喹喔啉-2,3-二酮(6-Cyano-7-nitroquinoxaline-2,3-dione,CNQX)、谷氨酸NMDA受体阻断剂DL-2-氨基-5-膦酰基戊酸(DL-2-amino-5-phosphonopentanoic acid,AP-5)灌流大鼠VTA多巴胺能神经元,阻断神经元突触联系,用离体脑片膜片钳技术观察高频刺激胞体后多巴胺能神经元胞体兴奋性是否发生改变。结果显示,高频刺激后,大鼠VTA多巴胺能神经元的输入阻抗增加,基强度降低,放电频率增加,细胞的兴奋性长时程增强。同时,高频刺激诱导后全细胞电流显著减小,超极化激活的混合阳离子流(Ih)也减小。以上结果提示,高频刺激使VTA多巴胺能神经元兴奋性发生长时程的增强,其机制涉及神经元膜电流的变化。

中央杏仁核毁损对应激诱导复吸的影响

为了研究应激诱导吗啡复吸，我们采用条件性位置偏爱（CPP）重现模型，通过毁损中央杏仁核（CeA）观察其对终纹床核（BNST）和腹侧背盖区（VTA）Fos蛋白表达及CPP重现的影响。