腹壁-盲肠损伤粘连模型的建立及mXG温敏水凝胶的防粘连机制研究

目的构建腹壁-盲肠损伤粘连模型并探究改性木葡聚糖(mXG)温敏水凝胶对腹壁-盲肠损伤粘连的防治效果。方法选用SD大鼠构建腹壁-盲肠损伤粘连模型,随机分为空白对照组(Control)、商业化壳聚糖膜对照组(Film)和mXG温敏凝胶组(Hydrogel),每组16只。Hydrogel组,将1 mL 4%(m/V)mXG溶液涂抹至腹壁和盲肠的创面,待凝胶形成(3 min)后关腹;Film组,关腹前将2 cm×3 cm大小的壳聚糖防粘连膜覆盖于腹壁创面;Control组,关腹前将1 mL生理盐水注射于腹壁和盲肠的创面。术后7 d和14 d,开腹检查腹壁与盲肠的粘连情况,采用双盲设计进行粘连评分。取同一部位粘连组织或创面组织,进行HE、Masson和Van Gieson染色后,进行防粘连效果组织学评价,免疫组织化学染色检测转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的表达情况。另取12只SD大鼠予以造模和mXG温敏水凝胶干预,术后第1周和6周取心、肝、脾、肺、肾等主要脏器使用HE染色进行组织学检查,进行体内毒性评价。结果动物模型大体观察发现,Hydrogel组的大鼠基本未发生粘连,Film组发生轻度粘连,Control组发生了严重的粘连,差异有统计学意义(P<0.05)。组织学镜下观察发现,7 d时Hydrogel组创面恢复良好,未看到变异的组织,有一定程度的炎性细胞浸润;14 d时创面组织中的炎性细胞明显减少,新生间皮层下仅含有少量胶原纤维的愈合组织;而7 d、14 d,其余两组均出现不同程度粘连的病理表现。免疫组织化学染色发现,Hydrogel组TGF-β1和CTGF的阳性表达一致且较其它两组弱,差异有统计学意义(P<0.05)。体内毒性检测发现,使用mXG凝胶的动物在不同时间点各脏器的结构均没有出现明显变化。结论 mXG温敏水凝胶能够在粘连形成的关键时期起到良好的物理隔离作用,有效预防盲肠-腹壁粘连的发生。

一种高效稳定的大鼠肠粘连模型制备方法

目的:制备稳定大鼠盲肠-腹壁粘连模型,并探讨盲肠在腹腔外暴露时间和盲肠与腹壁的损伤程度对成模率的影响。方法:27只SD大鼠,随机分为A、B、C3组,每组各9只。A组:盲肠暴露15min,重度损伤;B组:盲肠暴露25min,重度损伤;C组:盲肠暴露25min,轻度损伤。行盲肠-腹壁粘连手术后1周打开腹腔,观察大鼠盲肠-腹壁粘连情况,统计各组粘连率,同时取粘连部位腹壁及肠壁组织进行病理切片HE染色,观察组织损伤及炎症反应情况。结果:盲肠暴露25min,重度损伤大鼠盲肠-腹壁粘连率达88.9%,缩短盲肠暴露时间10min及减轻损伤程度会导致粘连率分别降低77.8%和55.6%。组织学检查显示,重度损伤大鼠几乎都伤及盲肠及腹壁肌层,轻度损伤组大鼠有三分之一伤及肌层,但程度较轻;盲肠暴露25min,重度损伤大鼠造模部位炎症反应大于其它两组。结论:在大鼠盲肠-腹壁粘连模型制备过程中盲肠暴露时间与盲肠-腹壁损伤程度对最终粘连率有较大影响,盲肠、腹壁刮伤至片状出血,盲肠空气暴露25min,可得到粘连率达88.9%的高效稳定的大鼠-腹壁粘连模型。