健脾温肾方对荷肉瘤小鼠腹水模型免疫细胞相关因子影响研究

目的:探讨健脾温肾方对荷S180肉瘤小鼠腹水模型免疫细胞相关因子水平影响。方法:5~6周龄的C57小鼠60只,随机分为模型组、顺铂组、顺铂+低剂量组以及顺铂+高剂量组,每组15只。制备荷S180肉瘤小鼠腹水模型。顺铂组给予0.2 mg/kg顺铂,每周第1天、第4天、第7天给药,给药4周。顺铂+低剂量组在顺铂组基础上灌胃9.75 g/kg健脾温肾方,1次/d,共4周。顺铂+高剂量组在顺铂组基础上灌胃19.5 g/kg健脾温肾方,1次/d,共4周。模型组给予等剂量生理盐水腹腔注射,每周第1天、第4天、第7天给药,给药4周。比较各组小鼠瘤重和抑瘤率、腹水量、红细胞和肿瘤细胞计数、癌胚抗原(CEA)、免疫细胞相关因子变化;并记录小鼠生存时间。结果:顺铂+低剂量组和顺铂+高剂量组抑瘤率高于顺铂组(P<0.05),且呈剂量依赖性。与模型组比较,顺铂组、顺铂+低剂量组以及顺铂+高剂量组瘤重、腹水量、红细胞计数和肿瘤细胞计数减少,CEA、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-4(IL-4)水平降低而γ干扰素(IFN-γ)水平升高,生存时间延长(P<0.05);顺铂+低剂量组和顺铂+高剂量组瘤重、腹水量、红细胞计数和肿瘤细胞计数低于顺铂组,CEA、VEGF、IL-4水平低于顺铂组而IFN-γ高于顺铂组,生存时间长于顺铂组(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论:健脾温肾方对荷S180肉瘤小鼠腹水模型抑瘤率显著,可减少腹水量,且可下调VEGF和IL-4水平及上调IFN-γ水平。

软肝消水巴布剂对S_(180)腹水模型小鼠的治疗作用

目的研究软肝消水巴布剂对模型动物腹水的消退作用。方法将S180肉瘤细胞腹腔接种入小鼠体内复制腹水模型,并通过观察各组动物体重、腹围、腹水量、脏器及生化指标的差异揭示软肝消水巴布剂对腹水的治疗作用。结果软肝消水巴布剂对模型小鼠有很好的消退腹水/延缓生成的作用(P<0.01),并对肝、脾、肾等脏器有一定的保护作用(P<0.05～0.01),并以低剂量为优。结论软肝消水巴布剂对S180腹水模型小鼠有良好治疗作用,提示其可能的临床应用前景。

VEGF-A、C、D对胃癌腹水瘤模型中恩度不同给药方式的疗效预测价值

目的评价VEGF-A、C、D在胃癌腹水瘤模型中疗效预测价值。方法NUGC-4-luc细胞腹腔接种28只雌性裸鼠,1周后随机分组:Group1:顺铂(1mg/kg)d1~3+恩度(8mg/kg)d4~7;Group2:恩度(8mg/kg)d1~4+顺铂(1mg/kg)d5~7;Group3:恩度(8mg/kg)+顺铂(1mg/kg)d1,4,7;Group40.9%氯化钠溶液50μld1-7,给药2周停药1周后处死。ELISA检测积液上清VEGF-A、C、D蛋白含量;腹膜结节包被蜡块后,IHC方法检测VEGF-A、C、D表达。结果4组腹水量(ml):Group4>Group1>Group2>Group3。4组腹膜结节数量:Group4>Group2>Group3>Group1。腹水上清VEGF-A在Group4>Group1>Group2>Group3。腹膜结节VEGF-A,C,D均在癌细胞胞浆着色,VEGF-A表达Group4>Group2>Group1,差异有统计学意义(P<0.05)。VEGF-A含量与腹水量高度相关(r=0.994,P<0.01)。VEGF-A表达与腹膜结节数量高度相关(r=0.972,P<0.01)。结论联合治疗组对腹水及腹膜结节VEGF-A抑制作用均最强,恩度序贯顺铂组对腹水VEGF-A抑制作用强,顺铂序贯恩度组对腹膜结节VEGF-A抑制作用强。VEGF-A不仅预测腹水量而且预测腹膜结节的变化,提示其可作为整体治疗疗效的潜在指标。

甘遂醋制前后萜类成分效应部位抗腹水、泻下作用及组成变化研究

目的探究甘遂醋制前后抗腹水、泻下作用及组成变化。方法将甘遂用二氯甲烷和95%乙醇依次提取,获得二氯甲烷部位及非二氯甲烷部位。采用癌性腹水小鼠模型,以腹水量、粪便含水量、尿量及肠道水通道蛋白(AQP)1、AQP3的蛋白表达水平为指标,筛选甘遂效应部位,考察甘遂醋制前后效应部位二氯甲烷提取部位的抗腹水及泻下作用变化。同时对二氯甲烷部位及非二氯甲烷部位,以及醋制前后二氯甲烷部位各成分的相对含量变化进行质谱分析。结果与模型组相比,生甘遂总提物组、二氯甲烷提取部位高剂量组小鼠腹水量和十二指肠、空肠、回肠及结肠AQP1、AQP3蛋白的表达量均显著降低,粪便含水量显著增加,对尿量无影响;非二氯甲烷部位组无明显降低腹水及增加粪便含水量的作用,表明甘遂二氯甲烷部位是其主要效应部位;与模型组相比,醋品二氯甲烷部位高剂量组仍可显著降低癌性腹水小鼠的腹水量,增加粪便含水量,显著降低十二指肠、空肠、回肠中AQP1、AQP3蛋白表达,但对结肠AQP1和AQP3蛋白表达量无显著影响。与生品二氯甲烷部位组相比,醋制后甘遂二氯甲烷部位组小鼠腹水量显著升高,粪便含水量显著降低。此外,甘遂对腹水中癌细胞存活率没有影响,不能促使其凋亡。质谱分析发现,甘遂中萜类成分主要富集于二氯甲烷部位中,且醋制后二氯甲烷部位16个萜类成分中12个成分相对含量减少,4个成分含量增加。结论甘遂醋制后仍保留“泻水逐饮”功效,但泻下作用缓和,效应的变化可能与所含萜类成分的组成变化有关。

摄食控制对小鼠腹水型移植瘤的抑制作用

目的探讨不同摄食控制方法对荷瘤小鼠生存期的影响。方法摄食控制组分别为每日限食2.0 g(DR)、隔1日断食限食4.0 g(IF)、隔2日断食限食6.0 g(SF)和隔1日断食不限食(IF1)4种方法,正常摄食为空白对照组(AL)。观察各组小鼠的体重变化和平均存活天数。结果DR组和IF组平均存活天数分别为19.52±5.24 d和17.96±4.49 d,比对照AL组15.75±1.83 d明显延长(P<0.001和P<0.01)。结论摄食控制恰当,可明显抑制肿瘤细胞的生长、延长荷瘤小鼠的生存期并提高生存质量。

三肽化合物酪丝亮肽(YSL)对腹水型肝癌H_(22)小鼠免疫调节作用实验研究

目的观察三肽化合物酪丝亮肽(tyroserleutide,YSL)对腹水型肝癌H22小鼠的抗肿瘤作用,观察YSL对荷瘤小鼠T淋巴细胞转化及NK细胞杀伤活性的影响。方法建立腹水型肝癌H22小鼠动物模型,观察YSL对腹水型肝癌H22小鼠生存时间的影响;以MTT法检测YSL对荷瘤小鼠T淋巴细胞转化及NK细胞杀伤活性的影响。结果YSL能够明显延长腹水型肝癌H22小鼠生存时间;YSL在5μg.kg-1和50μg.kg-1时可以促进腹水型肝癌H22小鼠T淋巴细胞的转化;YSL在0.5、5和50μg.kg-1时增强荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性。结论YSL可以延长腹水型肝癌H22小鼠的生存时间;促进荷瘤鼠的T淋巴细胞转化及NK细胞杀伤活性。

黄药子抗肿瘤活性组分筛选及作用分析

目的 :分析中药薯蓣科植物黄药子可能的抗肿瘤组分及其作用机制。方法 :将黄药子依次用石油醚、乙醇、水系统地提取 ,采用HepA肿瘤细胞株在小鼠进行体内筛选和研究 ,观察不同组分对肿瘤腹水生长及肿瘤细胞的各种变化 ,分析各组分抗肿瘤作用及特征。结果 :石油醚提取物抑制肿瘤腹水生长作用强于乙醇提取物 ,而水提取物有一定的促生长作用。石油醚提取物能显著延长小鼠存活期 ,低降肿瘤腹水生成量和肿瘤细胞存活率 ,用药后肿瘤细胞再次传代 ,肿瘤腹水的形成时间显著延长。结论 :黄药子石油醚提取物具有显著的抗肿瘤活性 ,且抗肿瘤作用与直接的细胞作用有关。

千金子及不同含油量千金子霜利尿作用研究

目的:观察千金子生品和不同含油量的千金子霜对小鼠炎性腹水病理模型的影响,探讨千金子制霜的目的和千金子霜合理的含油量标准。方法:腹腔注射0.6%的醋酸造成小鼠炎性腹水病理模型,观察各给药组2h、4h、6h和8h不同时段小鼠体重的变化。结果:千金子生品0.26g/kg和1.3g/kg在各时段利尿作用均不明显,与模型组比较无明显的统计学差异。含油量22.3%和25%的千金子霜高剂量组(0.65g/kg)体重减轻程度相对较大,各时段与模型组比较具有较显著地统计学差异(P<0.05)。含油量25%低剂量(0.13g/kg)组在8h时体重减轻与模型组比较也有显著性差异(P<0.05),而28.4%含油量的霜高、低剂量组体重减轻均不明显。结论:千金子制霜后减轻炎性水肿作用比生品明显增强,含油量22.3%～25%的千金子霜作用最为明显。

复方车前凝胶贴膏的制备及初步评价

[目的]研究旨在将复方车前水浸膏制备为易于使用的复方车前凝胶贴膏。[方法]采用Plackett-Burman设计联合Box-Behnken响应面优化法,以初黏力、持黏力、180°剥离强度为评价指标,优选最佳制备处方。采用改良Franz扩散池法,以京尼平苷酸为指标,研究其体外释放行为。以小鼠H22肝癌腹水模型对其药效进行评价。[结果]优化得到复方车前凝胶贴膏的基质配方为NP700,PVPK90,甘油,甘羟铝,酒石酸,蒸馏水(8∶5.38∶32.5∶0.5∶0.5∶44.62)。凝胶膏中京尼平苷酸24 h体外释放(81.23±1.52)%。给药7 d后,与模型组相比,贴膏组与浸膏组小鼠腹水量显著减少(P<0.01),腹水中VEGF的量显著下降(P<0.05),免疫功能破坏得到显著改善(P<0.05),且贴膏组与浸膏组差异无统计学意义。[结论]复方车前凝胶膏的处方合理,制备的凝胶膏黏性良好,指标成分京尼平苷酸体外释放率符合一级动力学方程,复方车前凝胶贴膏能有效减少小鼠腹水量,效果显著。

顺-6-氟-3-氯代亚甲基-硫色满-4-酮的体内抗肿瘤活性研究

目的探讨顺-6-氟-3-氯代亚甲基-硫色满-4-酮(CMFT)的急性毒性及体内抗肿瘤活性。方法考察CMFT的急性毒性,建立移植性肿瘤模型,通过灌胃和腹腔注射给药考察CMFT的体内抗肿瘤活性。结果 CMFT毒性较低,可显著抑制H22肝癌细胞小鼠皮下移植瘤的生长,并明显延长S180腹水瘤小鼠的存活时间。结论该化合物具有较高的体内抗肿瘤活性且毒性较低,值得对其进行深入研究。

水通道蛋白-1在肝硬化腹水大鼠腹膜上的表达

Objective To investigate the changes of aquaporin （AQP-1） expressions on peritonea in liver cirrhotic rats with ascites,and to study the correlation between AQP-1 expressions and ascites form.Methods32 healthy Sprague-Dawley（SD） rats were divided into two groups randomly, 20 rats were used to produce liver cirrhotic models induced with phenobarbitol sodium and CCl4. The distribution and protein expressions of AQP-1 on the rats′ peritonea were measured with immunohistochemistry assay, and the expressions of APQ-1 mRNA were tested with relative GAPDH quantitative RT-PCR. Results （1）The expressions of AQP-1 were mainly on the endothelial cells of capillary vessels and venules on the rats′ peritonea, and also on mesothelial cells. （2）There was no statistically significant difference between the expressions of AQP-1 protein and mRNA in the two groups on the early stage of liver cirrhosis. （3） Downregulations of the expressions of AQP-1 protein and mRNA were observed in B group on the advanced cirrhotic stage.Conclusion Expressions of AQP-1 were downregulated on the peritonea of rats with decompensated liver cirrhosis, which may play a role in the formation of ascites. The changes of AQP-1 Expressions on peritoneal mesothelial cells which were fewer than those on the endothelial cells may be few relations to ascites form.

甘遂半夏汤中甘遂甘草反药组合加减应用对腹水大鼠利水及免疫方面的影响

目的:从利水及免疫两个方面探讨甘遂半夏汤药效的产生是否与甘遂甘草反药组合相关。方法:将153只Wistar大鼠按体质量随机区组设计分为正常组、模型组、呋塞米组、甘遂半夏汤全方组、甘遂半夏汤去醋甘遂组、甘遂半夏汤去炙甘草组、甘遂半夏汤去炙甘草醋甘遂组,腹腔注射Walker-256细胞复制大鼠腹水模型,正常组和模型组灌胃蒸馏水,其余各组灌胃相应药物。给药9d后,取材前后称量大鼠体质量,测量腹水量,放完腹水后腹主动脉取血,检测PRL1、AⅡ、ALD、ADH。取材前抽取大鼠腹水10 mL,检测腹水中IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ和VEGF含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量在给药第1、4、8天均显著降低(P<0.01),大鼠腹围/体质量比值、ALD、ADH含量均显著升高(P<0.01,P<0.05),净体质量、尿量均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,给药第4天各给药组大鼠体质量均升高(P<0.05,P<0.01),给药第1、4天,甘遂半夏汤组大鼠腹围/体质量比值降低(P<0.05,P<0.01),尿量升高(P<0.05),腹水量降低(P<0.01),血中ADH含量降低(P<0.05),腹水中IL-6和VEGF含量降低(P<0.05),IFN-γ含量升高(P<0.05)。与甘遂半夏汤组比较,甘遂半夏汤去炙甘草组大鼠血中ALD含量升高(P<0.05),甘遂半夏汤去醋甘遂组大鼠血中ADH和腹水中IL-6含量升高(P<0.05),腹水中IFN-γ含量降低(P<0.05),甘遂半夏汤去炙甘草醋甘遂组大鼠腹水量增加(P<0.05),腹水中IL-6、VEGF含量升高(P<0.01,P<0.05)。结论:各给药组在改善腹水模型大鼠利水作用相关指标方面均未表现出明显的毒性,且甘遂半夏汤组在改善利水相关指标方面的作用优于甘遂半夏汤去掉其中一味反药或两味反药组,其发挥利水的机制可能与其抑制肾素-血管紧张素-醛固酮-抗利尿激素系统,促进尿液排泄,同时与甘遂半夏汤具有一定调节IL-6、IFN-γ、VEGF等细胞因子,进而杀伤Walker-256细胞,减少腹水的生成有关。