催产素受体在雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的分布

本研究旨在探讨催产素(OT)是否可以影响雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的活动。采用免疫组化SP法观察催产素受体(OTR)在雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的分布特点。结果显示,催产素受体在腹腔肠系膜前神经节分布广泛,节内的神经细胞、支持细胞和过路纤维均有OTR免疫阳性产物分布;OTR主要在神经细胞中表达,相对表达量与其他非神经结构相比差异性极显著(P<0.01);在神经细胞中,OTR免疫阳性产物主要存在于胞膜和胞质,核不着色。雌性山羊腹腔肠系膜前神经节神经元对OT具有反应性,提示OT可能通过影响腹腔肠系膜前神经节神经元的活动,从而经其发出的交感节后神经这一途径调节胃肠的生理活动。

孕激素受体在雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的分布

为了研究孕激素对胃肠道的内分泌调节和自主神经对胃肠道的神经调节两种途经之间的相互关系,作者采用免疫组织化学SP法,观察孕激素受体(PR)在成年雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的分布特点。结果显示,雌山羊腹腔肠系膜前神经节中PR免疫阳性产物广泛存在,且主要分布于神经元中。神经元的细胞膜呈棕褐色,为强阳性,细胞质为强阳性或中等阳性。43.40%的神经元细胞核内核质呈黄褐色,核仁为清亮的空泡;56.60%的神经元核质不着色,核仁的PR为中等阳性。图像分析表明神经元的PR相对表达量与其他非神经结构相比差异性极显著(P<0.01)。结果表明,腹腔肠系膜前神经节的交感节后神经元是孕激素作用的靶细胞,提示腹腔肠系膜前神经节上的PR可能是孕激素对胃肠道内分泌调节和自主神经对胃肠道的神经调节之间达到相互协调作用的网络节点。

IFNGR在山羊腹腔肠系膜前神经节的表达

【目的】为了解山羊腹腔肠系膜前神经节(celiac cranial mesenteric ganglion,CCMG)是否具备接受γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)作用的条件,即是否有IFN-γ受体(interferon-γreceptor,IFNGR)存在。【方法】取健康雌、雄性成年山羊的CCMG,经40 g·L-1多聚甲醛磷酸缓冲固定液固定4 h后,用自来水冲洗10h,经梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋后,制作石蜡切片。石蜡切片分4套:第1套做H.E.染色;第2套经脱蜡复水,抗原热修复后,再进行免疫组化SP法染色;第3套经免疫组化SP法染色后用苏木精复染;第4套用作阴性对照组。染色后在光学显微镜下观察记录切片,使用Motic数码显微镜下拍照后,对图片分析处理,计算CCMG的IFNGR相对表达量。将相对表达量数据用SPSS18.0软件分析处理,并利用单因子方差分析(One-way ANOVA,LSD)进行显著性检验。取健康雌性、雄性成年山羊的CCMG,经充分研磨后,使用总RNA提取试剂盒提取总RNA,再以牛的IFNGR1 c DNA序列为模板设计IFNGR1的引物,克隆山羊IFNGR1 c DNA序列并进行扩增。将扩增产物使用琼脂糖凝胶电泳检测是否有目的条带,并进行DNA双向测序。将测序结果在NCBI上进行比对和确认,并与其他的物种的序列进行了同源性比对。【结果】免疫组化染色显示,在CCMG内IFNGR免疫阳性产物分布广泛,在神经元胞体、卫星细胞及神经纤维中均有不同程度的着色。其中神经元均为IFNGR免疫阳性。几乎所有的神经元胞质为黄褐色,IFNGR呈中等阳性,仅有少数神经元胞质染色弱为淡黄色,IFNGR呈弱阳性;在神经元细胞核中,核质部分明显呈棕褐色,IFNGR为强阳性,而核仁染色相对较弱或无着色,IFNGR为弱阳性或阴性。在非神经元结构中,卫星细胞染色呈棕褐色或棕色,IFNGR为强阳性或中等阳性。神经纤维和血管内皮细胞为黄褐色或淡黄色,IFNGR为中等阳性或弱阳性。图像分析表明与其他非神经元结构成分相比,神经元胞体IFNGR的相对表达量差异性极显著(P<0.01)。PCR检测结果显示,IFNGR1 PCR产物的泳道在300 bp与400 bp处看到一个清晰的白色条带。测序结果显示,在山羊CCMG中克隆出了376 bp的IFNGR1的部分c DNA序列。通过在NCBI上与其他物种的基因序列同源性比对显示,这段序列与绵羊的同源性最高(98%,XM_004011371.1),其次为牛(97%,NM_001035063.1),野猪(84%,NM_001177907.1),家兔(73%,XR_085137.1),与褐家鼠(66%,NM_053783.1)的同源性最低。【结论】在山羊CCMG中有IFNGR的表达与分布,并且IFNGR主要在交感节后神经元表达与分布。所以CCMG具备对IFN-γ刺激做出反应的条件,CCMG的交感节后神经元可能是IFN-γ作用的主要靶细胞,提示山羊CCMG可能作为IFN-γ对胃肠道免疫调节途径和自主神经对胃肠道调节的神经途径之间相互协调的关键点。

GnRH受体在山羊腹腔肠系膜前神经节的分布及其意义

本研究旨在观察促性腺激素释放激素受体(Gonadotropin-releasing hormone receptor,GnRHR)在山羊腹腔肠系膜前神经节的分布特点,以探讨GnRH是否可以影响腹腔肠系膜前神经节(Celiac-superior mesenteric ganglia,CSMG)的活动。取雄性和雌性成年山羊的腹腔肠系膜前神经节各5个,经免疫组织化学SP法染色后,观察GnRHR在肠系膜前神经节的分布特点,并用Image-Pro Plus 6.0(IPP 6.0)软件图像半定量分析技术,分析腹腔肠系膜前神经节中的神经元和非神经元的GnRHR分布差异。结果表明:GnRHR强阳性产物主要分布神经元的胞膜和胞质中;血管内皮细胞、神经纤维和卫星细胞中只有GnRHR弱阳性产物;GnRHR在神经细胞和非神经细胞中的表达量呈极显著性差异(P<0.01)。上述结果表明,腹腔肠系膜前神经节对GnRH具有反应性,且神经元为其作用的靶细胞,提示GnRH可能通过影响腹腔肠系膜前神经节神经元的活动,进而影响其发出的交感节后神经纤维所支配的靶器官功能这一途径来调节胃肠的生理活动。

FSH受体在雌山羊腹腔肠系膜前神经节的分布

为探讨雌山羊腹腔肠系膜前神经节是否具备FSH调控胃肠功能活动的条件,取成年雌山羊的腹腔肠系膜前神经节各5对,经免疫组织化学SP法染色后,观察FSH受体在腹腔肠系膜前神经节的分布特点。结果显示,在腹腔肠系膜前神经节内,FSH受体免疫阳性产物主要存在于神经元的细胞质,为强阳性或中等阳性染色,而细胞核呈空泡状,不着色。另外,在神经节内过路纤维、施万细胞中FSH受体呈弱阳性染色。图像分析表明,该神经节内神经元胞体的FSH受体相对表达量极显著高于其他非神经元胞体结构(P<0.01)。说明雌山羊腹腔肠系膜前神经节神经元是FSH作用的主要靶细胞,提示FSH可能通过影响腹腔肠系膜前神经节的神经元活动,从而影响其发出的交感节后神经,对胃肠器官功能活动进行调控。

白细胞介素-18受体在雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的分布

旨在探讨雌性山羊腹腔肠系膜前神经节是否存在IL-18受体((Interleukin-18receptor,IL-18R)。取雌性山羊腹腔肠系膜前神经节(Celiac Superior Mesenteric Ganglion,CSMG),通过免疫组化SP法检测IL-18R在CSMG的分布情况。结果显示,雌性山羊CSMG的神经元、卫星细胞和神经纤维均有IL-18R免疫阳性产物分布,且主要分布于CSMG的神经元胞体,说明雌性山羊CSMG具备对IL-18刺激做出反应的条件。提示:雌性山羊CSMG可能是IL-18对胃肠道免疫内分泌调节与神经调节协调的关键点。

雌激素α、β受体在雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的分布

为探讨山羊腹腔肠系膜前神经节在雌激素影响胃肠道机能活动中的作用和意义,取雌性山羊腹腔肠系膜前神经节,经免疫组化SP法染色后,在数码显微镜下拍照、测量,用高清晰图像分析系统对雌激素受体(ER)的分布特点进行分析,并计算相对表达量。雌激素受体在腹腔肠系膜前神经节的神经元、支持细胞和过路纤维均有ERα、ERβ受体免疫阳性产物分布,但主要分布于神经元胞体。在神经元胞体中,细胞膜和细胞质为强阳性染色,而细胞核为弱阳性染色。ERα在神经元胞体的相对表达量显著高于非神经元胞体结构(P<0.05),ERβ在神经元胞体的相对表达量极显著高于非神经细胞结构(P<0.01)。雌性山羊腹腔肠系膜前神经节神经元具有对雌激素刺激反应的受体,提示腹腔肠系膜前神经节可能作为雌激素作用于胃肠道的内分泌途径和自主神经对胃肠道调节的神经途径之间相互协调的网络节点。

LH受体在雌性山羊腹腔肠系膜前神经节的分布

为了探讨LH与胃肠道活动中内分泌调节与神经调节之间的关系,试验采用免疫组织化学染色方法,观察雌性山羊腹腔肠系膜前神经节中LH受体的分布特点。结果显示,在腹腔肠系膜前神经节内,LH受体免疫阳性产物在神经元的细胞质和细胞膜上为强阳性或中等阳性表达,而细胞核呈空泡状,不表达。另外,在神经节内的支持细胞、过路纤维、施旺细胞以及血管内皮细胞中LH受体为弱阳性,有少量分布。神经元上的LHR相对表达量显著高于其他非神经结构(P<0.05)。结果表明腹腔肠系膜前神经节中神经元细胞是LH作用的靶细胞,提示腹腔肠系膜前神经节中神经元上的LH受体可能是协调LH对胃肠道活动的内分泌调节与神经调节的关键节点之一,即LH可能通过作用于该神经节的神经元活动,从而影响其发出的交感节后神经纤维这一途径来调节胃肠道的活动。