山羊尿中嘌呤衍生物排出规律的研究

测定瘤胃微生物蛋白质的传统方法为标记法,标记物分内源标记物和外源标记物两类。常用的内源标记物主要有二氨基庚二酸（DAPA）、核糖核酸（RNA）、氨基酸序列（AAP）、三磷酸腺甙（ATP）、磷脂胆碱（P-C）、D-丙氨酸,常用的外源标记物主要有15N、35S和32P等同位素标记[1]。

抗病毒剂研究──Ⅳ．6－氨基－9－（N^4′－芳香基取代乙醛缩氨基硫脲）嘌呤衍生物的合成

合成了６个６－氨基－９－（Ｎ~４′－芳香基取代乙醛缩氨基硫脲）嘌呤衍生物，并进行了抗核型多角体病毒（ＮＰＶ）活性实验。结果显示该类化合物对ＮＰＶ的抑制活性可达６７％。

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸类CD38抑制剂的合成及生物活性评价

分别以1,3,5-三苯甲酰基-α-D-核糖、3,5-二苯甲酰基-2-脱氧-2,2-二氟戊呋喃糖-1-酮和D-木糖为原料,经由烟酰胺核苷及烟酰胺核苷酸中间体,合成了系列糖环经氟原子取代的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)类CD38抑制剂.基于对CD38的水解抑制能力的考察,评价了所合成氟代NAD类似物的活性.结果表明,糖环上氟原子取代的数目和位置对抑制剂活性的影响十分明显,烟酰胺核苷的端基构型对活性的影响较大.2个化合物均显示出非常好的CD38抑制活性,其中化合物2a的抑制活性高出阳性对照物阿糖型氟代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸2个数量级.

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^+)类似物的合成及性质

合成了3种新型结构稳定的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^+)类似物并通过~1H NMR、^(13)C NMR、^(31)P NMR和HRMS进行了表征。NAD^+类似物经80℃加热24 h后,通过~1H NMR确认其结构稳定;通过循环伏安法(CV)测定了其电化学性质,表明其仍然具有良好的氧化还原性能。

侧链键接腺嘌呤的高分子核酸类似物对N-磷酰化氨基酸偶联尿苷反应的模板效应

将高分子核酸类似物聚甲基丙烯酸 -β-( N7-腺嘌呤基 )乙酯加入到尿苷与 N-( O,O -二异丙基 ) -磷酰化丙氨酸的反应体系之中 ,研究其对此反应体系的影响 .结果表明 ,聚甲基丙烯酸 -β-( N7-腺嘌呤基 )乙酯参与了尿苷与磷酰化丙氨酸间的相互作用 ,并促进了具有较高离子密度、较大的流体动力学体积的大分子量产物及 Up U,Up Up U等寡核苷酸片断的生成 ,表现出明显的模板效应 .不含腺嘌呤的对应高分子则无此模板效应 ,聚甲基丙烯酸 -β-( N7-腺嘌呤基 )乙酯对尿苷与 N-( O,O -二异丙基 ) -磷酰化丙氨酸反应的模板效应并不是由于其高分子主链引起的 ,而应归因于其侧链所挂的腺嘌呤碱基的存在 。

拉米夫定联合腺嘌呤核苷类似物治疗慢性乙型肝炎临床对照研究

目的核苷类似物联合干扰素治疗慢性乙型肝炎临床对照研究。方法慢性乙型肝炎患者180例,随机分为A、B、C组,每组60例。A组采用拉米夫定联合腺嘌呤核苷类似物治疗,B组采用拉米夫定治疗,C组采用阿德福韦酯治疗,观察各组患者治疗第12、24、48周时HBV-DNA和HBeAg转阴率、ALT复常率、HBeAg/抗-HBe血清转换率变化情况。结果 HBV-DNA转阴率A组3个时间点优于另外2组,B组第24周优于C组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。ALT复常率A组第12周和第48周优于C组,第48周优于B组,B组第12周优于C组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。HBeAg转阴率第48周A组优于另外2组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论拉米夫定与腺嘌呤核苷类似物阿德福韦酯联合用药疗效优于单独使用拉米夫定或阿德福韦酯。

三种腺苷类似物抑制人高转移卵巢癌细胞侵袭的实验研究

背景与目的:腺苷作用于细胞信号转导系统,可抑制磷脂酰肌醇4-激酶活性、升高腺苷酸环化酶活性和细胞内cAMP水平、抑制血小板肌动蛋白聚合等。腺苷类似物有上述腺苷的生物活性,且不易为腺苷脱氨酶所降解,具有相对较长的生物半衰期。本研究拟观察2-氯腺苷、2-氯脱氧腺苷、2'-脱氧腺苷对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM体外侵袭的抑制作用。方法:以3种腺苷类似物处理HO-8910PM朱峰,等.三种腺苷类似物抑制人细胞、以5-氟尿嘧啶为细胞敏感对照,用台盼蓝拒染法观察药物对细胞的毒性效应;以人工重组基底膜观察细胞的侵袭、粘附和运动能力;以明胶酶显影法观察细胞基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)的分泌及活性;以RT-PCR检测细胞mta1mRNA、nm23H1mRNA表达。结果:2-氯腺苷和2-氯脱氧腺苷处理高转移卵巢癌细胞72h的IC50值分别为5.80μmol/L和2.61μmol/L,2'-脱氧腺苷对该细胞无明显抑制(对细胞的IC50值大于100μmol/L);6.0μmol/L的2-氯腺苷和2-氯脱氧腺苷对细胞侵袭的抑制率分别为(42.5±1.5)%(与对照组比较,P<0.01)和(9.9±0.5)%(P<0.05);对细胞运动的抑制率分别为(36.9±2.1)%(P<0.01)和(17.1±0.4)%(P<0.05);对细胞粘附的抑制率分别为(32.2±2.3)%(P<0.01)和(19.5±3.1)%(P<0.05)。而2'-脱氧腺?

NADPH结构类似物对一氧化氮合成酶电子传递过程的影响

一氧化氮（NO）可作为信使和细胞因子参与血压调节、神经信息传递及抗感染防御等重要功能。生物体内NO主要由一氧化氮合成酶（NOS）以左旋精氨酸为底物，在还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH），黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD），黄素单核苷酸（FMN），四氢生物蝶呤等因子辅助下生成。在NO合成过程中，电子由NADPH，经FAD、FMN功能域，传递到氧化酶域。

手性NAD类似物合成及其辅酶应用

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是生命体中必不可少的氧化还原辅因子。NAD具有β-NAD和α-NAD两种差向异构体,而大多数NAD依赖酶偏好β-NAD。近年来,已合成大量结构简化的NAD类似物,并探索其作为氧化还原辅因子应用于生物催化反应。通常认为酶天然具有立体选择性,而很多结构简化的NAD类似物不含手性中心,暗示有必要合成手性NAD类似物以评估其性能。本研究拟设计合成手性NAD类似物,并初步探讨部分氧化还原酶利用它们作为辅酶的催化性能。以商品化光学纯的氨基-3-苯基丙酸为手性原料,合成了两对NAD类似物对映体,并用来源于巨芽孢杆菌的突变型细胞色素P450单加氧酶(P450 BM3 R966D/W1046S)和来源于硫化叶菌的突变型葡萄糖脱氢酶(SsGDH I192T/V306I),测试这些NAD类似物作为辅酶的催化活性。结果发现,P450 BM3 R966D/W1046S利用还原型S构型NAD类似物的催化效率高于对应的R构型NAD类似物;而SsGDH I192T/V306I则对NAD类似物对映体均没有活性。研究初步表明,氨基酸可作为手性原料制备立体构型明确的NAD类似物,而氧化还原酶表现出偏好特定手性NAD类似物的现象,也提示需要合成更多的手性NAD类似物,并系统测试和匹配氧化还原酶及其突变体,以创建出基于辅酶依赖型氧化还原酶的新催化体系。

三种核苷类似物治疗肝硬化失代偿期患者的疗效比较

目的观察核苷类药物治疗乙型肝炎肝硬化失代偿期的疗效。方法将83例乙型肝炎肝硬化失代偿期患者随机分为四组。所有患者在保肝、对症治疗的基础上,分别给予拉米夫定(A组)100 mg/d、阿德福韦酯(B组)10 mg/d、恩替卡韦(C组)0.5 mg/d口服,对照组(D组)仅给予保肝、对症治疗。观察所有患者临床症状、体征、肝功能、凝血酶原时间活动度(PTA)、乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量、乙型肝炎e抗原(HBeAg)转阴情况等。结果在抗病毒治疗过程中,A组患者死亡2例,另1例在治疗过程中出现YMDD[酪氨酸(Y)、蛋氨酸(M)、2个天冬氨酸(D)]变异及时加用阿德福韦酯退出观察;B组患者死亡1例;C组患者无一例死亡;D组疗效最差,死亡4例。A、B、C组患者临床表现、肝功能及血清病毒学指标均较D组有明显改善,差异有统计学意义(P<0.01)。结论乙型肝炎肝硬化失代偿期患者应给予抗病毒治疗,可首选恩替卡韦,亦可选用阿德福韦酯或拉米夫定。

培美曲塞和顺铂联合同步放疗治疗局部晚期肺腺癌疗效观察

【目的】探讨培美曲塞联合顺铂（PC）方案同步放疗治疗晚期肺腺癌的·恪床效果。【方法】选取本院肿瘤科收治的98例晚期肺腺癌患者，随机分为研究组和对照组，每组各49例，研究组采用PC方案联合同步放疗治疗，对照组采用紫杉醇＋顺铂结合同步放疗治疗，观察比较两组患者的近期疗效、血清癌胚抗原（CEA）、鳞状细胞抗原（SCCAg）、糖抗原（CA125）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）的变化及并发症发生情况，远期预后。【结果】研究组患者的缓解率为37．50％（18／48）、总有效率为81．25Voo（39／48），均显著高于对照组患者的25．53％（12／47）、65．96％（31／47），但两组相比较差异无显著性（P〉0．05）；治疗后研究组患者的血清CEA、SCCAg、CA125、NSE水平显著低于对照组，且差异有显著性（P〈0．05）；研究组的Ⅲ度、Ⅳ度骨髓抑制、消化道反应、皮疹、肝功能损害发生率显著低于对照组，且差异有显著性（P〈0．05）；研究组患者的中位生存时间为13．5个月显著长于对照组的10．3个月（P〈0．05）。【结论】PC方案联合同步放疗治疗晚期肺腺癌较紫杉醇＋顺铂联合放疗具有更好的效果和安全性。

右旋肌醇甲醚腺嘌呤核苷类似物的合成

以右旋肌醇甲醚为原料,经保护的甲烷磺酸酯与腺嘌呤缩合,合成了腺嘌呤核苷类似物5。此外,化合物3经酸水解,再经环氧化高产率地合成了重要的中间体7,腺嘌呤在强有机碱存在下,对环氧化合物7进行区域性的开环反应,合成了另外两种腺嘌呤核苷类似物8和9。

重组大肠杆菌表达的枯草芽孢杆菌腺苷磷酸化酶的应用研究

利用枯草芽孢杆菌嘌呤核苷磷酸化酶基因deoD在大肠杆菌BL21(DE3)中表达所得到的蛋白为酶液,催化核苷、2′-脱氧核苷与嘌呤及其类似物之间的反应。结果表明,嘌呤类核苷与嘧啶类核苷相比,前者达到反应平衡的时间较短、产物的得率(或底物的转化率)较高;腺苷磷酸化酶对核苷类的催化活性要比对脱氧核苷类的催化活性强;就碱基而言,对嘌呤和嘌呤类似物的催化活性基本相同。

腺苷A1受体激动剂预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的延迟保护作用

【目的】探讨腺苷A1受体激动剂（2-氯环戊腺苷，CCPA）预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的延迟保护作用。【方法】30只健康新西兰雄性大白兔随机分成3组：假手术组（C组）、缺血再灌注组（I／R组）、CC—PA组（P组），每组10只。C组仅行左冠脉套线而不阻断160min，I／R组行左冠脉阻断40min，再灌注120min，P组在静注CCPA 0．1mg／kg 24h后，处理同I／R组。各组分别于左冠前降支阻断前20min（T1）、左冠前降支阻断20min（T2）、左冠前降支阻断40min（T3）、心肌再灌注1h（T4）、心肌再灌注2h（T5）五个时点抽取颈内动脉血测定血清中肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）含量。再灌注120min后，测心肌超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量和心梗面积，电镜下观察细胞超微结构变化。【结果】与I／R组比，P组cTnI和MDA降低（P〈0．05），SOD增高（P〈0．05），心肌梗死面积减少（P〈0．05），细胞结构损伤减轻。【结论】CCPA延迟预处理对兔心肌缺血再灌注损伤有保护作用。

非环状腺嘌呤核苷类似物的合成

在抗病毒剂的合成中,已知某些腺嘌呤核苷,如3-dezadennosine、3-deazanisteromysin、Neplonocin及非环状腺嘌呤核苷类似物,(S)-9-(2,3)-双羟丙基腺嘌呤核苷(s-DHPA)都具有抗DNA及RNA抗病毒的生物活性。 约十年前,我们发现羧酸的N-羟基-5-降冰片烯-2,3-双甲酰亚胺(HONB)活泼脂是一个具有优异的选择性的N-酰基化试剂,它只能与脂肪胺,而不与芳香胺起反应;它只能与羟胺的胺基,而不与羟基起反应。

人类免疫缺陷病毒暴露前预防的应用与挑战

抗病毒治疗不仅将HIV感染从一个致死性疾病转变为一种可以治疗的慢性疾病，同时减少了HIV在人群间的传播，近年来“治疗即是预防”的观念已被人们所认可。随着研究的深入，人们发现HIV暴露前预防（PrEP）能有效减少HIV在高危人群间的传播。临床试验显示PrEP是安全的，可以有效预防HIV感染。目前，欧美国家及WHO指南均推荐对男男性行为者、感染HIV高风险的异性性行为者、HIV单阳伴侣中的HIV阴性者以及静脉吸毒者等高危人群进行PrEP。推荐使用的药物和方法是每日口服替诺福韦和恩曲他滨合剂，部分人群也可使用替诺福韦。PrEP应结合其他预防措施如安全套使用、静脉吸毒的处理以及抗病毒治疗来进一步降低HIV感染的风险。目前，PrEP面临的主要挑战是伦理学、药物可及性、服药依从性以及使用率等问题，应该针对高危人群大力推行PrEP，让更多的人群受益减少HIV感染。