海绵中腺嘌呤核糖核苷的结构测定

海绵是我国南海蕴藏着的一种非常丰富的生物,其中含较多具有生物活性的核苷类化合物;通过有机溶剂提取、柱层析分离纯化从海绵(Clathria fasciculate)中获得一个核苷化合物,利用现代波谱等技术鉴定其为腺嘌呤核糖核苷。

蒲圻贝母中核苷类化学成分研究

目的对蒲圻贝母（Fritillaria puqiensisG.D.Yu et.G.Y.Chen）进行化学成分研究。方法采用各种色谱技术进行分离纯化,通过化合物理化性质及波谱数据进行结构鉴定。结果从正丁醇部位分离得到3个核苷类化合物和3个碱基,分别鉴定为2′-O-甲基腺嘌呤核糖核苷（Ⅰ）,尿嘧啶核糖核苷（Ⅱ）,腺嘌呤核糖核苷（Ⅲ）,尿嘧啶（Ⅳ）,胸腺嘧啶（Ⅴ）,腺嘌呤（Ⅵ）。结论首次对蒲圻贝母的核苷类成分进行了报道,化合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅳ～Ⅵ系首次从贝母属植物中分离得到;其中化合物Ⅰ为稀有甲基修饰核苷,其13C-NMR数据为首次报道,并首次对其碳氢信号进行了全归属。

一磷酸腺苷的改性及其对棉织物的紫外光接枝阻燃

针对生物阻燃剂存在加工热稳定性差和阻燃耐久性差的问题,本实验提出紫外光接枝的解决方法。因其可室温操作,并使纺织品共价键合生物阻燃剂。在5′-腺嘌呤核糖核苷酸二钠盐(AMP-Na_(2))上引入不饱和双键制备AMP-Na_(2)阻燃单体,利用紫外光接枝法将AMP-Na_(2)阻燃单体接枝到棉织物上。采用傅里叶红外变换光谱仪(FT-IR)、核磁共振氢谱(^(1)H-NMR)、质谱仪对AMP-Na_(2)阻燃单体的化学结构进行表征。FT-IR和1H-NMR结果表明,丙烯酰氯与AMP-Na_(2)发生酯化反应制备出阻燃单体。质谱结果表明进行了二羟基改性。通过扫描电镜对接枝后棉织物及其碳化残渣进行表征,发现接枝后棉织物表面变得粗糙且纤维间出现部分粘连,其燃烧后碳化残渣保持良好的织物形态。

白藜芦醇通过AMPK-P53途径调节糖尿病心肌线粒体自噬的研究

目的观察白藜芦醇(RES)对糖尿病心肌线粒体自噬功能的影响并探讨其分子机制。方法 C57BL/6小鼠分为对照组、糖尿病组、RES组及RES+腺嘌呤核糖核苷酸依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂组。小动物超声检测各组实验动物的左室收缩末内径、左室舒张末内径、左室收缩末期容积及左室舒张末期容积;计算左室射血分数及短轴缩短率。Western blotting检测各组实验动物Parkin、P62、P53及磷酸化的AMPK (pAMPK)的蛋白表达。结果与对照组相比,糖尿病小鼠心肌组织Parkin、p AMPK蛋白表达及左室射血分数、短轴缩短率显著降低,而P62、P53蛋白表达显著升高。给予RES处理后可以逆转上述改变,但RES的作用被AMPK抑制剂所阻断。结论 RES可能通过AMPK-P53途径增加糖尿病心肌线粒体自噬,改善心脏功能。

腐皮镰孢菌对角膜上皮细胞AMPK磷酸化及IL-6表达的影响

目的研究角膜上皮细胞是否存在腺嘌呤核糖核苷酸活化的蛋白激酶(AMPK)磷酸化及真菌对角膜上皮细胞AMPK磷酸化和白细胞介素6(IL-6)表达的影响。方法取人永生化角膜上皮细胞系,采用实时无标记细胞多功能分析仪筛选AMPK激动剂5-氨基-4-甲酰胺咪唑核糖核苷酸(AICAR)(100、300、500和1000μmol/L)和抑制剂化合物C(10.0、12.5、15.0、17.5和20.0μmol/L)对角膜上皮细胞作用的安全浓度范围。以单纯角膜上皮细胞作为正常对照组,角膜上皮细胞与孢子共培养作为孢子对照组,在孢子对照组基础上分别加入AICAR和化合物C作为AICAR组和化合物C组,分别培养4 h。采用Western blot法检测角膜上皮细胞磷酸化AMPK(p-AMPK)和AMPK的表达,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定角膜上皮细胞培养上清液中IL-6质量浓度。结果不同浓度AICAR作用于角膜上皮细胞不同时间后,细胞指数总体比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。10.0μmol/L和12.5μmol/L化合物C作用于角膜上皮细胞后细胞指数较未处理细胞升高。正常对照组、孢子对照组、AICAR组和化合物C组p-AMPK水平分别为0.67±0.15、2.57±0.12、3.67±0.58和1.50±0.50,各组间总体比较差异有统计学意义(F=32.820,P<0.001)。孢子对照组p-AMPK水平较正常对照组升高,差异有统计学意义(P<0.001);AICAR组较孢子对照组p-AMPK水平升高,化合物C组较孢子对照组p-AMPK水平降低,差异均有统计学意义(均P=0.010)。正常对照组、孢子对照组、AICAR组和化合物C组AMPK相对表达量总体比较差异无统计学意义(F=0.120,P=0.950)。正常对照组、孢子对照组、AICAR组和化合物C组IL-6质量浓度分别为(107.81±17.15)、(156.32±9.94)、(167.96±14.16)和(127.42±19.75)pg/ml,各组间总体比较差异有统计学意义(F=15.210,P<0.001),其中孢子对照组IL-6质量浓度较正常对照组升高,差异有统计学意义(P<0.001);AICAR组IL-6质量浓度较孢子对照组略升高,差异无统计学意义(P=0.260),化合物C组IL-6质量浓度较孢子对照组降低,差异有统计学意义(P=0.010)。结论角膜上皮细胞有AMPK磷酸化表达,且真菌孢子刺激角膜上皮细胞后AMPK磷酸化增强,IL-6分泌增多。

金丝桃苷经Nampt/NAD/Sirt1途径对宫颈癌Hela细胞增殖、迁移的影响

目的:探讨金丝桃苷经烟酰胺磷酸核糖基转移酶(Nampt)/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)/沉默信息调节因子1(Sirt1)途径对宫颈癌Hela细胞增殖、迁移的影响。方法:实验设Hela细胞组、氟尿嘧啶组(200μg·ml-1)、金丝桃苷低、高剂量组(200,400μg·ml-1),采用MTT法、结晶紫染色测定细胞增殖、单克隆形成数目,Transwell小室测定细胞侵袭迁移水平,实时荧光逆转录法(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western-blot)测定细胞Nampt、NAD、Sirt1 mRNA和蛋白表达水平。结果:与Hela细胞组比较,氟尿嘧啶组、金丝桃苷低、高剂量组光密度(OD)值、存活率、细胞克隆形成数目、迁移率、穿膜数、Nampt、NAD、Sirt1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与氟尿嘧啶组比较,金丝桃苷低剂量组OD值、存活率、细胞克隆形成数目、迁移率、穿膜数、Nampt、NAD、Sirt1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),金丝桃苷高剂量组OD值、存活率、细胞克隆形成数目、迁移率、穿膜数、Nampt、NAD、Sirt1 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);金丝桃苷高、低剂量组间各指标差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论:金丝桃苷对宫颈癌Hela细胞增殖、迁移具有抑制作用,其机制与金丝桃苷抑制Nampt、NAD、Sirt1 mRNA和蛋白表达,进而抑制Nampt/NAD/Sirt1途径激活有关。

二甲双胍经线粒体自噬途径防治衰老相关疾病的研究进展

衰老是在细胞、组织和器官水平上发生的生理性内稳态的渐进性损害过程。在衰老过程中,自噬水平明显下调,受损细胞器(如线粒体)和蛋白质的累积可导致诸多生理过程发生增龄性改变,最终诱发诸如代谢紊乱、心肌缺血再灌注损伤和癌症等众多疾病。二甲双胍作为治疗2型糖尿病的药物对其他衰老相关疾病亦有积极作用,可通过不同途径诱导线粒体自噬以清除细胞内损伤线粒体,但其能否通过调节线粒体自噬途径而防治衰老相关疾病尚不明确。该文对线粒体自噬在二甲双胍防治衰老相关疾病中的作用进行综述,以期为基于自噬调控角度探寻延缓衰老以及防治衰老相关疾病的临床干预手段提供参考资料。

三七果化学成分的研究

目的研究三七果的化学成分。方法采用硅胶色谱和凝胶色谱以及重结晶等方法,从云南文山三七果的70%乙醇提取物中分离得到14个化合物。通过理化性质和波谱学分析鉴定化学结构。结果分离得到了14个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇（1）、20（S）-人参二醇（2）、20（S）-原人参二醇（3）、20（R）-人参皂苷Rh1（4）、20（R）-人参皂苷Rh2（5）、胡萝卜苷（6）、20（R）-人参皂苷Rg1（7）、20（S）-人参皂苷Rg2（8）、20（R）-人参皂苷Rg3（9）、腺嘌呤核糖核苷（10）、人参皂苷Re（11）、人参皂苷Rd（12）、人参皂苷Rb1（13）、人参皂苷Rb3（14）。结论化合物1~14均为首次从三七果中分得,其中化合物10为首次从人参属中分得。

秦苓液对尿酸性肾病大鼠肾组织AMPK/iNOS信号途径的影响

目的观察秦苓液对尿酸性肾病大鼠肾组织AMPK/iNOS信号途径的影响,探讨其对尿酸性肾病肾脏损伤的保护机制。方法采用腺嘌呤灌胃配合酵母饲料喂养的方法制备高尿酸肾病大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,别嘌呤醇组[23.33 mg/(kg·d)],秦苓液大、中、小剂量组[剂量分别为:36.4、18.2、9.1 g/(kg·d)],每组12只,予对应药物干预。6周和8周时处死各组1/2大鼠,取肾脏组织。RTPCR检测AMPKα1、iNOS mRNA表达水平,Western Blot检测AMPKα1、p-AMPKα1、iNOS蛋白表达水平。结果与正常组比较,6周及8周模型组AMPKα1 mRNA和蛋白表达、p-AMPKα1蛋白表达降低,iNOS mRNA及蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,6周时秦苓液各组AMPKα1mRNA表达升高,p-AMPK蛋白表达升高,iNOS蛋白表达降低,秦苓液大、小剂量组AMPKα1蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05);8周时秦苓液小剂量组AMPKα1 mRNA表达升高,中、小剂量组AMPKα1、p-AMPKα1蛋白表达升高,iNOS mRNA及蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05)。结论秦苓液可能通过调节AMPK/iNOS信号途径改善代谢,抑制炎性损伤,减轻尿酸性肾病大鼠的肾脏损伤。

激活AMPK/SIRT1通路在改善认知功能障碍中的作用

认知功能障碍与神经细胞凋亡、自噬、氧化应激及神经炎症等多方面有着密切的联系。在许多临床疾病或刺激因素的作用下,患者会出现认知功能的改变,包括记忆、语言、执行和计算等方面能力下降,这给患者生活和家庭都带来很多不便,因此研究各种方法改善患者认知功能障碍十分重要。文章回顾了腺嘌呤核糖核苷酸(adenosine monophosphate,AMP)活化蛋白激酶(AMP⁃activated protein kinase,AMPK)和沉默信息调节因子1(sirtuin 1,SIRT1)这两种细胞代谢关键分子,并概括总结了AMPK/SIRT1信号转导通路主要通过拮抗氧化应激、激活细胞自噬和抑制神经炎症三个方面来降低认知功能损害。AMPK/SIRT1信号通路的神经保护作用将为更多认知功能障碍相关疾病的治疗提供可能。

Roux-en-Y胃转流术后长期维持减重效应和血糖稳态的机制研究

目的探究Roux-en-Y胃转流术(RYGB)后长期维持减重效应和血糖稳态的机制。方法选用12周龄雄性Sprague Dawley(SD)大鼠作为动物模型,采用完全随机法分为假手术组(n=22)、RYGB组(n=12)和胰腺大部切除术组(n=10),以普通饲料和45%高脂饲料干预8周,检测各组大鼠胰岛素分泌水平、葡萄糖输注率、体重和血糖水平,并通过基因芯片和免疫印迹试验检测各组大鼠脂肪组织代谢通路等的变化。组间比较采用t检验及方差分析。结果与假手术相比,RYGB组大鼠术后空腹及葡萄糖刺激后血浆胰岛素水平均显著降低[(1.3±0.2)比(0.6±0.1)ng/ml,t=3.6,P<0.01;(4.1±0.4)比(2.1±0.3)ng/ml,t=4.3,P<0.01],且在45%高脂饲料喂养的情况下可长期维持空腹胰岛素及体重在较低水平[(3.1±0.3)比(0.7±0.1)ng/ml,t=8.1,P<0.01;(453±11)比(349±6)g,t=8.5,P<0.01]。机制研究发现,大鼠RYGB术后脂肪组织胰岛素信号通路受到抑制(1.0±0.1比0.5±0.1,t=6.4,P<0.01),脂肪酸合成减少,脂肪酸分解增加,腺嘌呤核糖核苷酸依赖的蛋白激酶表达增强(1.0±0.1比1.4±0.1,t=4.0,P<0.01)。与假手术组比较,胰腺大部切除术组空腹血浆胰岛素和胰高血糖素水平分别降低71.7%和68.0%[(1.10±0.10)比(0.30±0.04)ng/ml,t=7.5,P<0.01;(16.2±0.8)比(5.2±0.9)pmol/L,t=9.1,P<0.01],但空腹血糖无明显升高,在普通饲料和45%高脂饲料喂养时体重均显著低于假手术组[(434±13)比(389±5)g,t=3.1,P<0.05;(548±16)比(433±11)g,t=6.0,P<0.01]。结论RYGB术后通过减少能量摄入及避免高胰岛素血症可长期维持低体重和血糖稳态,其机制与脂肪合成代谢抑制,而分解代谢增强密切相关。