肺炎支原体肺炎患儿血清腺嘌呤核苷酸离子通道型7、维生素D表达水平与疾病严重程度的关系

目的探讨肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿血清腺嘌呤核苷酸离子通道型7(adenine nucleotideionchanneltype7,P2X7)、维生素D表达水平及其与疾病严重程度的关系。方法选取2015年7月至2017年5月于河北省秦皇岛市妇幼保健院就诊的MPP患儿共136例,按照病情严重程度分为严重组(52例)和非严重组(84例)。选择同期来院体检的健康儿童50例作为对照组。比较三组患儿血清P2X7、25-羟基维生素D3、炎性因子和免疫球蛋白水平,分析其与MPP严重程度的相关性。结果严重组患儿血清P2X7、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1beta,IL-1β)水平显著高于非严重组和对照组(P<0.05),而25-羟基维生素D3、IgA、IgG水平显著低于非严重组和对照组(P<0.05)。MPP患儿P2X7与TNF-α、IL-1β正相关,25-羟基维生素D3与IgA正相关,而与IgG负相关(P<0.05)。P2X7、25-羟基维生素D3、TNF-α、IL-1β、IgA、IgG均为严重MPP的独立影响因素(P<0.05)。结论血清P2X7、维生素D表达水平与MPP存在显著相关性,高P2X7水平以及低25-羟基维生素D3水平预示着更严重的MPP。

氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸抗辐射损伤作用及其机制

目的探讨氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的抗辐射损伤作用及其机制。方法将培养的人正常肝细胞株L02细胞分为3组:对照组、照射组和照射+NAD+组。对照组细胞不予照射,直接加入不含NAD+的RPMI-1640培养基培养;照射组细胞照射后加入不含NAD+的RPMI-1640培养基培养;照射+NAD+组细胞照射后加入含有NAD+(终浓度1 g.L-1)的RPMI-1640培养基培养。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测NAD+对受照射L02细胞生长活性的影响;应用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率以及凋亡相关蛋白p53、bax、bcl-2阳性表达率和各周期细胞含量;采用Caspase-3活性检测试剂盒检测细胞Caspase-3活性。结果细胞受照射后加入NAD+能够对抗X射线照射对L02细胞的生长抑制作用,细胞生长活性较照射组细胞活性显著提高;L02细胞在受照射后p53、bax蛋白表达增加,bcl-2表达下调,Caspase-3活性增加,而且细胞周期表现为G1期阻滞;受照射后加入NAD+,则p53、bax蛋白表达下调,bcl-2表达增加,Caspase-3活性下降,G2/M期细胞比例明显增加。结论 NAD+可对抗L02细胞的X线辐射损伤,其作用机制可能通过下调p53、bax与上调bcl-2表达以及抑制Caspase-3活性,抑制受照射细胞凋亡。

高浓度氧暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸表达的影响

目的探讨高浓度氧(高氧)暴露对早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-脱氢酶亚基4(ND4)表达的影响。方法原代培养早产Sprague-Dawley(SD)大鼠AECⅡ,待其在含50mL/L二氧化碳(CO2)培养箱中生长至接近融合状态时随机分为高氧组和空气组。高氧组持续暴露于常压高浓度氧中,氧体积分数>900mL/L,CO2体积分数为50mL/L;空气组仍置于含50mL/L CO2培养箱中。二组分别于高氧或空气暴露6、12、24h提取细胞RNA,采取半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定ND4 mRNA的表达;采用免疫细胞化学染色法检测细胞爬片ND4蛋白的表达。结果与空气组比较,免疫细胞化学结果显示高氧暴露6、12h ND4的表达无显著性差异(Pa>0.05),高氧暴露24h ND4的表达显著减弱(P<0.05);RT-PCR检测显示高氧暴露6h ND4 mRNA表达无显著性差异(P>0.05),高氧暴露12、24h ND4 mRNA表达显著减弱(Pa<0.05)。结论高氧暴露下调早产SD大鼠AECⅡ ND4 mRNA和蛋白水平的表达,这种改变可能参与高氧肺损伤的发病过程。

嘌呤能离子通道型受体7及其在周围神经再生中的作用

在周围神经系统的神经节内,神经元胞体被周围的卫星胶质细胞包裹形成神经结构功能单元,而嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)是卫星胶质细胞膜上的一个腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)门控的非选择性离子通道,有研究表明,P2X7R可促进细胞增殖和促进神经轴突生长,也有研究报道,其被激活后可导致环氧化酶2(COX-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)等炎症介质的释放,介导细胞的损伤,因此P2X7R的功能尚存争议。本文就P2X7R的结构、功能以及在周围神经系统中作用的研究方法做一简单综述,为研究P2X7R在神经再生中的具体功能提供方法学支持。

腺嘌呤核苷酸化合物对多型核白细胞内[Ca^(2+)]_i的影响

为了探讨腺嘌呤核苷酸化合物对多型核白细胞内［Ｃａ２＋］ｉ的影响，本文采用ＡＴＰ和ＡＤＰ激活此类白细胞，并用Ｆｕｒａ－２双波长荧光法测定细胞内游离钙浓度的变化。结果表明，ＡＴＰ和ＡＤＰ能激活多型核白细胞，引起细胞内［Ｃａ２＋］ｉ的明显升高。多型核白细胞对ＡＴＰ和ＡＤＰ具有不同的敏感性。在较低的激活剂浓度（１０μｍｏｌ／Ｌ）下，此类白细胞对ＡＤＰ更敏感；而在较高的激活剂浓度（１００μｍｏｌ／Ｌ）下，此类白细胞对ＡＴＰ更敏感。另外，多型核白细胞被ＡＤＰ激活后能再度被ＡＴＰ所激活，而被ＡＴＰ激活后不能再被ＡＤＰ激活，表明ＡＴＰ和ＡＤＰ对此类白细胞的作用机制不同。

三磷酸腺苷-嘌呤受体P2X配体门控离子通道7介导核苷酸结合寡聚化结构域样受体3炎症小体在痛风性关节炎中的机制研究进展

痛风是嘌呤代谢障碍和/或尿酸排泄减少使血尿酸持续升高而导致尿酸盐结晶（monoso-dium urate，MSU）析出并沉积在关节或关节周围组织中引起关节肿痛的炎症性疾病，其主要的临床表现为反复发作的急性痛风性关节炎。一般认为，MSU刺激IL-1β分泌引起关节肿痛是痛风的主要发病机制，但该机制不能解释为何多数高尿酸血症患者不出现痛风发作。

血清Nox2、ATG7水平对新生儿窒息心肌损伤的评估价值

目的探讨自噬相关基因-7(ATG7)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(Nox2)在新生儿窒息病儿血清中的表达及早期诊断价值。方法选取2019年1月至2021年12月在郑州大学第三附属医院产科分娩的75例新生儿窒息病儿为研究组,根据是否合并心肌损伤将病儿分为窒息心肌损伤组31例,窒息非心肌损伤组44例。同期选择50例健康足月新生儿为对照组。收集一般资料,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)测量血清ATG7水平,采用蛋白质印迹法检测Nox2水平,以Nox2/β肌动蛋白的灰度比值为Nox2表达量;采用Pearson法分析ATG7、Nox2表达的相关性及与各指标的相关性;利用受试者操作特征曲线(ROC曲线)评价Nox2、ATG7水平对新生儿窒息心肌损伤的诊断价值。结果与对照组[0.26±0.06、(4.83±0.61)ng/L]比较,新生儿窒息病儿血清Nox2(0.65±0.09)、ATG7[(21.04±3.66)ng/L]表达水平升高,且窒息心肌损伤组[0.85±0.11、(24.23±3.98)ng/L]病儿血清中Nox2、ATG7水平高于窒息非心肌损伤组[0.51±0.08、(18.80±3.43)ng/L](P<0.05);窒息心肌损伤病儿血清中Nox2、ATG7表达呈显著正相关(r=0.57,P<0.05);病儿血清中Nox2和ATG7表达与肌酸激酶同工酶(CK-MB)、缺血修饰白蛋白(IMA)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、氨基末端脑钠肽前体(NT-ProBNP)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌红蛋白表达均呈正相关(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清Nox2、ATG7水平预测新生儿窒息合并心肌损伤的曲线下面积(AUC)及其95%CI分别为0.91(0.82,0.96)、0.89(0.80,0.95),对应的灵敏度分别为83.87%、87.10%,特异度分别为84.09%、75.00%,二者联合预测的AUC及其95%CI为0.92(0.84,0.97),灵敏度为90.32%,特异度为81.82%。结论窒息心肌损伤病儿血清中Nox2、ATG7表达均上调,二者联合检测对窒息心肌损伤有一定的诊断价值。

温针灸对兔膝骨关节炎软骨中ASC、Caspase-1和P2X7蛋白表达的影响

目的 观察温针灸对膝骨关节炎(KOA)模型兔关节软骨组织中凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、嘌呤能离子通道型受体7(P2X7)表达的影响,研究温针灸治疗KOA的作用机制。方法 取40只雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、抑制剂组和温针灸组,每组10只。除空白组外,其余各组采用经典右后肢膝关节伸直位,用石膏管型固定4周制备兔KOA模型。造模成功后,各组给予相应干预措施。应用Lequesne MG评分量表评估兔膝关节状态改变与行为学改变,HE染色观察膝关节软骨病理形态学改变,免疫组织化学法和Western blot法检测软骨组织中ASC、Caspase-1、P2X7蛋白的表达,免疫荧光检测Caspase-1蛋白的表达。结果 造模前,各组实验兔Lequesne MG评分差异无统计学意义(P>0.05);造模后,与空白组相比,其余组Lequesne MG评分均上升(P<0.05);干预治疗后,与模型组比较,温针灸组和抑制剂组评分降低(P<0.05)。HE染色显示,空白组软骨表面结构完整,软骨细胞排列均匀;模型组软骨表面粗糙不平,软骨受损明显,软骨细胞形态大小不一,排列紊乱;抑制剂组和温针灸组软骨表面相对光滑、完整,软骨细胞分布较为均匀,软骨层结构相对清晰。与空白组比较,模型组Mankin’s评分升高(P<0.05);与模型组比较,温针灸组和抑制剂组Mankin’s评分降低(P<0.05)。免疫组织化学法、免疫荧光及Western blot检测结果显示,与空白组比较,模型组ASC、Caspase-1、P2X7的表达均升高(P<0.05);与模型组比较,温针灸组和抑制剂组ASC、Caspase-1、P2X7的表达均降低(P<0.05);温针灸组和抑制剂组相比,ASC、Caspase-1、P2X7表达差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 温针灸可减轻兔KOA软骨损伤,其机制可能与ASC、Caspase-1、P2X7表达降低及细胞焦亡抑制有关。

天香丹抑制P2X7/NLRP3表达改善动脉粥样硬化的作用机制研究

目的:探讨天香丹对动脉粥样硬化小鼠嘌呤能配体门控离子通道7(P2X7)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)的影响。方法:选取8周龄无特定病原体(SPF)级雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠30只,予以高脂饲料喂养12周,造模成功后随机分为模型组、阿托伐他汀组、天香丹组,每组10只;另选取C57BL/6J小鼠10只予普通饲料喂养,设为空白对照组。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-18、IL-1β、腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)的水平;免疫组化检测组织中P2X7、NLRP3的表达。结果:ELISA结果显示:与空白对照组相比,模型组IL-18、IL-1β、ATP水平升高(P<0.05);与模型组相比,阿托伐他汀组、天香丹组IL-18、IL-1β、ATP水平降低(P<0.05)。免疫组化结果显示:与空白对照组相比,模型组P2X7、NLRP3表达均明显升高(P<0.05);与模型组相比,阿托伐他汀组、天香丹组P2X7、NLRP3表达均明显降低(P<0.05)。结论:天香丹改善动脉粥样硬化与调节钾稳态抑制炎症小体的激活有关。

基于ROCK/NOX4信号通路探究刺芒柄花素对2型糖尿病大鼠内质网应激损伤及肾功能的影响

目的基于RAS同源基因家族成员相关激酶(ROCK)/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)4信号通路探究刺芒柄花素对2型糖尿病大鼠内质网应激损伤及肾功能的影响。方法SPF级健康8周龄雄性C57BL/6大鼠60只,随机分为5组,各12只,健康组、模型组、刺芒柄花素低、中、高组,除健康组外均建立2型糖尿病大鼠模型,刺芒柄花素低组、刺芒柄花素中组、刺芒柄花素高组分别给予20、40、100 mg/kg刺芒柄花素灌胃,其余组别灌胃等体积生理盐水。采用自动生化分析仪测定肾功能指标。苏木素-伊红(HE)染色与Masson染色观察大鼠肾组织病形态。TUNEL检测肾小管上皮细胞凋亡。免疫组化检测RAS同源基因家族成员(Rho)A、NOX4、ROCK阳性表达。Western印迹检测内质网应激相关蛋白表达。结果HE染色结果显示:健康组肾脏组织结构正常;模型组肾小球有一定程度萎缩,组织结构排列不均匀,并且有肿胀、脱落现象、还存在空泡样变性、鲍曼囊腔扩,而经过刺芒柄花素干预后,上述情况有所改善,且呈现出明显的剂量依赖性。Masson染色结果显示:健康组肾组织正常;模型组肾小球、肾小管基底膜增厚,产生空泡样病变,肾间质胶原纤维沉积明显;在经过刺芒柄花素干预后上述状况明显改善,且呈现出明显的剂量依赖性。健康组24 h MAU、SCr、BUN、细胞凋亡率、RhoA、NOX4、ROCL、eIF2α、GRP78水平显著低于模型组(P<0.05)。模型组24 h MAU、SCr、BUN、细胞凋亡率、RhoA、NOX4、ROCL、eIF2α、GRP78水平显著高于刺芒柄花素低组(P<0.05)。刺芒柄花素低组24 h MAU、SCr、BUN、细胞凋亡率、RhoA、NOX4、ROCL、eIF2α、GRP78水平显著高于刺芒柄花素中组(P<0.05)。刺芒柄花素中组24 h MAU、SCr、BUN、细胞凋亡率、RhoA、NOX4、ROCL、eIF2α、GRP78水平显著高于刺芒柄花素高组(P<0.05)。结论刺芒柄花素可能是通过调控Rho/ROCK/NOX4信号通路抑制了2型糖尿病大鼠内质网应激,改善肾功能,对肾脏起保护作用。

P2X7R拮抗剂对小鼠慢性胰腺炎的作用及机制研究

目的探讨嘌呤能P2X7受体(P2X7R)拮抗剂——氧化三磷酸腺苷(OxATP)和亮蓝G(BBG)在抑制下游靶蛋白——核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性体活化和慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化进程中的作用及可能机制。方法 40只C57BL/6小鼠随机均分为正常对照组、CP模型组、Ox ATP组和BBG组。除正常对照组腹腔注射与处理组等体积的生理盐水外,其余组均通过腹腔注射雨蛙素法制作CP小鼠模型(6周)。造模结束后,CP模型组、Ox ATP组和BBG组分别予以腹腔注射生理盐水、Ox ATP(20μL,300μmol/L)和BBG(20μL,10μmol/L)处理,连续注射2周。然后处死各组小鼠并取胰腺组织,行病理学检查,以HE染色对胰腺病理组织学(炎性细胞浸润、腺泡萎缩及纤维化程度)进行评分,天狼星红染色和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组化染色分别对胰腺纤维化程度进行评估;免疫组化法检测胰腺P2X7R、NLRP3和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)中的累积光密度(IOD)值。结果与正常对照组比,CP模型组炎症损伤组织学评分增加,胰腺纤维化程度显著增加,P2X7R、NLRP3和Caspase-1免疫组化IOD值显著升高(P<0.05);与CP模型组相比,Ox ATP和BBG组炎症损伤组织学评分降低,HE染色纤维化评分、天狼星红染色和α-SMA免疫组化染色均显著减轻(P<0.05),胰腺P2X7R、NLRP3和Caspase-1 IOD值均明显降低(P<0.05)。结论 P2X7R拮抗剂Ox ATP和BBG能够显著减轻CP小鼠模型的慢性炎症和纤维化程度,阻断P2X7R-NLRP3炎性体信号通路,这有望成为治疗CP及其纤维化进程的一种潜在新策略。

高尿酸血症与2型糖尿病

糖尿病是一种多因素造成的代谢异常状态，其特征是由于碳水化合物、脂肪及蛋白质代谢紊乱所致的慢性高血糖，原因是胰岛素分泌失调及胰岛素抵抗。高嘌呤含量（每100g含150～1000mg嘌呤）的食物诸如鹅肉、动物内脏（肝、肾、肠、心和脑）、鳗鱼、鲱鱼、鱼卵、鱼皮、虾米、海味、贝类如扇贝、蚝、发酵粉等，对血尿酸水平影响很大。能引起腺嘌呤核苷酸分解增加的糖有果糖和麦芽糖。

槲皮素对兔缺血再灌注心肌还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸、一氧化氮合酶基因和蛋白表达的影响

目的观察槲皮素对兔缺血再灌注心肌还原型炯酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NOX2）、一氧化氮合酶（NOS）基因和蛋白表达的影响。方法建立成年家兔心肌缺血再灌注模型，结扎左缘支30min，再灌注12h。实验分d组：空白对照组（contr01）、缺血再灌注组（I／R）、槲皮素组（Que）、槲皮素＋缺血再灌注组（I／R＋Que）。采用实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）和Westernblot方法检测心肌NOX2、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA和蛋白的表达。结果I／R组NOX2mRNA和蛋白表达分别为1．73±0．41、3．46±0．84，iNOSmRNA和蛋白表达分别为0．29±0．11、0．29±0．11，较对照组明显增高（P〈0．01），eNOS变化不明显（P〈0．01）。给予槲皮素后，Que组NOX2mRNA和蛋白表达分别为0．40±0．08、0．56±0．28，eNOSmRNA和蛋白表达分别为0．22±0．07、0．95±0．23，iNOSmRNA和蛋白表达分别为0．02±0．01、0．874-0．31；I／R＋Que组NOX2mRNA和蛋白表达分别为1．034-0．31、2．054-0．49，eNOSmRNA和蛋白表达分别为0．324-0．09、1．12±0．36，iNOSmRNA和蛋白表达分别为0．164-0．05、3．174-1．29；较对照组水平明显降低（P〈0．01）。结论心肌缺血再灌注后，NOX2、iNOS表达增加；槲皮素明显减少心肌缺血再灌注后NOX2、iNOS和eNOS的表达。

不同糖耐量人群血清吞噬细胞样还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶水平与胰岛β细胞功能的关系

目的：研究不同血糖水平下，体内总吞噬细胞样烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶（Nox）含量与氧化应激水平，及其与胰岛β细胞功能的关系。方法根据空腹血糖（FBG）和口服糖耐量试验2 h血糖（OGTT 2 hPG），将84名体检市民分为正常糖耐量组（NGT组26例）：FPG〈6.1 mmol/L和OGTT 2 hPG〈7.8 mmol/L；糖调节受损组（IGR组，27例）：FPG在6.1-7.0 mmol/L之间，且OGTT 2 hPG〈7.8 mmol/L或FPG〈6.1 mmol/L，且OGTT 2 h PG在7.8-11.1 mmol/L之间或FPG在6.1-7.0 mmol/L之间，且OGTT 2 h PG 7.8-11.1 mmol/L之间；糖尿病组（DM组，31例）：FPG≥7.0 mmol/L和/或OGTT 2 hPG≥11.1 mmol/L。测定每组Nox含量、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。多组计量资料间比较采用方差分析，组间比较采用独立样本t检验，各因素与校正胰岛素抵抗后的胰岛β细胞功能指数（HBCI）行Pearson法相关分析和多元逐步回归分析。结果 DM组Nox水平较IGR组升高，HBCI较IGR组降低[分别为（143.3±22.1）比（118.0±21.8）U/L，12.4±2.3比31.1±7.7，t=2.156、5.621，均P〈0.05]；DM组Nox水平较NGT组明显升高，HBCI较NGT组明显降低[分别为（143.3±22.1）比（97.2±19.9）U/L，12.4±2.3比105.2±21.3，t=4.460、4.111，均P〈0.05]。Nox是HBCI的独立影响因素（r=-0.572，β=-1.088, R2=0.455，P〈0.001）。结论 Nox是反映机体氧化应激水平的一个较为理想指标，与胰岛β细胞功能之间存在密切联系。

8-异前列腺素F2α及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶p22phox亚基C242T基因多态性与2型糖尿病大血管病变的相关性

目的：探讨8-异前列腺素F2α（8-epi-prostaglandin F2 alpha，8-isoPGF2α）及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADPH）氧化酶P22phox亚基C242T基因多态性与河北省汉族人群2型糖尿病（T2DM）大血管病变的关系。方法选取2012年7月至2013年7月在河北医科大学第三医院内分泌科住院的215例T2DM患者（其中单纯T2DM组110例，T2DM大血管病变组105例）和100名健康对照者为研究对象，采集其体质指数（BMI）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、踝肱指数（ABI）等一般情况，应用全自动生化分析仪测定空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C），在德国拜耳DCA2000仪器上测量糖化血红蛋白（HbA1c）；采用酶联免疫吸附法对8-isoPGF2α水平进行测定，同时用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测受试者p22phox亚基C242T基因多态性。采用方差分析、相关分析和logistic逐步回归法进行统计学分析。结果T2DM大血管病变组8-isoPGF2α水平明显高于单纯T2DM组[（49±24）比（33±13）ng/L，t=－5.856，P〈0.05]和正常对照组[（49±24）比（28±13）ng/L，t=－7.780，P〈0.05]。8-iso-PGF2α与SBP、DBP、BMI、TC、TG、LDL-C、FBG及HbA1c呈显著正相关（r=0.247、0.269、0.201、0.134、0.177、0.233、0.255、0.226，均P〈0.05），与ABI和HDL-C呈显著负相关（r=－0.382、－0.195，均P〈0.05）。T2DM大血管病变组T等位基因及CT＋TT基因型频率均显著高于单纯T2DM组和对照组（χ^2值分别为6.67、4.08、14.01、10.81，均P〈0.05）。CT＋TT型大血管病变发生率高于CC型（χ^2=10.06，P〈0.01）。多元回归分析显示BMI、LDL-C及8-iso-PGF2α是大血管病变的独立危险因素（β=0.913、2.787、0.835）。结论单纯T2DM以及T2DM大血管病变者体内存在氧化应激，但T2DM大血管病变者更加明显；NADPH氧化酶p22phox亚基C242T多态性可能与T2DM大血管病变的易患性无关。

肠道抑制性神经递质影响慢传输型便秘的研究进展

肠道抑制性神经递质主要包括一氧化氮、血管活性肠肽以及嘌呤能神经元分泌的神经递质如β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和三磷酸腺苷。作为肠神经系统与间质细胞信息交流的传递者,肠道抑制性神经递质在慢传输型便秘(STC)发病过程中起到至关重要的作用,是参与调控胃肠动力和分泌功能的一部分。本文就近年来肠道抑制性神经递质及其变化影响STC的相关进展进行综述,以期为开发治疗STC的药物及手段提供新方向。

腺嘌呤核苷酸及代谢产物在调节糖脂代谢稳态中的作用

糖脂代谢是高等生命体最基本的代谢活动,其过程受到环境和遗传的影响,并在器官、细胞和分子等不同水平上得到精确调控。脂质的过度摄取和积累导致肥胖,诱导糖代谢调节的失控,从而形成胰岛素抵抗和高血糖等代谢综合征。本文综述了游离脂肪酸诱导靶细胞释放腺嘌呤核苷酸的相关研究,回顾了过去数十年关于正常和特殊生理状态下腺嘌呤核苷酸信号发生、转导和作用方式的研究成果,提出了腺嘌呤核苷酸及其代谢产物是脂质代谢和糖代谢相互调节过程中的介导因子,其在2型糖尿病发生、发展中可能承担新角色。

脑内P2X7受体研究进展

三磷酸腺苷（ATP）是细胞供能和储能的物质，在研究中发现它还是中枢神经系统的一种重要神经递质。1970年Burnstock G证实ATP是非胆碱能和非肾上腺素能神经释放的神经递质，正式提出了神经元细胞膜表面存在嘌呤受体。1985年他将ATP结合的受体命名为嘌呤能受体，并将其分为P1（腺苷）、P2（腺嘌呤核苷酸）两大类受体。

肝脏线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸依赖性异柠檬酸脱氢酶参与葡萄糖代谢机制的研究

目的探讨肝细胞中线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸依赖性异柠檬酸脱氢酶(IDH2)对葡萄糖代谢机制的影响。方法分别用高糖或低糖处理小鼠正常肝细胞AML12细胞株,于24、48、72 h后检测IDH2 mRNA及蛋白表达。慢病毒转染法构建IDH2敲低(KD-IDH2组)、IDH2敲低对照(KD-Ctrl组)、IDH2过表达(OE-IDH2组)以及IDH2过表达对照(OE-Ctrl组)细胞株,分别用正常糖、高糖、低糖处理细胞,每组设置3个复孔。流式细胞学检测细胞内活性氧簇(ROS)生成及细胞凋亡。实时定量聚合酶链反应和Western blot法检测糖异生、糖摄取、糖酵解相关基因[己糖激酶1(HK1)、丙酮酸激酶(PKLR)]以及胰岛素、胰高糖素通路相关蛋白[磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、蛋白激酶A(PKA)、磷酸化PKA(p-PKA)]的表达。在胰岛素、胰高糖素刺激下,检测低糖条件下肝细胞葡萄糖输出能力。通过多功能酶标仪检测2-NBDG摄取用于评估肝细胞糖摄取能力。两组间比较采用t检验。结果AML12细胞在高糖处理48 h后,IDH2 mRNA表达明显下降(P<0.01)。KD-IDH2组细胞IDH2 mRNA表达量为KD-Ctrl组的(35.67±10.60)%(P<0.01),OE-IDH2组IDH2 mRNA表达上调为OE-Ctrl的(4.59±0.77)倍(P<0.01)。KD-IDH2细胞在低糖条件下,葡萄糖输出能力明显减弱(P<0.01),糖摄取能力为KD-Ctrl组的(1.23±0.06)倍(P<0.01),AKT、PI3K蛋白活化程度(p-AKT/AKT、p-PI3K/PI3K)显著增加,PKA活化程度(p-PKA/PKA)降低(P<0.01),OE-IDH2组细胞则有相反表现。高糖处理使KD-IDH2细胞中糖酵解途径相关基因HK1、PKLR表达上调(P<0.05),细胞内ROS水平较高(P<0.05),同时细胞凋亡增加(P<0.01)。结论肝脏IDH2表达调控影响肝细胞内葡萄糖代谢,IDH2表达降低使细胞内胰岛素信号通路活化增加,且低糖条件下糖异生途径下调;而过表达IDH2通过增加肝细胞对胰高糖素的响应并降低对胰岛素的敏感性上调肝糖生成。