血管紧张素Ⅱ对体外培养的牛眼小梁细胞^3H胸腺核苷酸掺入率及胶原合成的影响

目的:观测血管紧张素Ⅱ（Angiotensin Ⅱ,Aug Ⅱ）对体外培养的牛眼小梁细胞（bovine trabecularmeshwork cells,TM cell）3H胸腺核苷酸（3H-hymidine,3H-TdR）掺入率及胶原合成的影响,探讨原发性青光眼的发病机制。方法:（1）牛眼小梁细胞的体外培养:应用免疫组化方法（neuronal specific enolas,NSE,Ⅷ因子相关抗原染色）、细胞鉴定、光学及电子透射显微镜对细胞进行形态学及生长特性的观察;（2）Aug Ⅱ（1×10-7mol·L-1及 1×10-8mol·L-1）以及其Ⅰ型受体（angiotensin receptor type I,AT1）拮抗剂孵育TM细胞,采用检测3H-TdR掺入率的方法了解细胞增殖状态,并用化学方法检测培养液中羟脯氨酸含量,间接推导胶原含量。结果:牛眼小梁细胞培养成功,以上皮型为主。Ang Ⅱ明显地增加了牛眼小梁细胞的3H-TdR摄入 率,同时培养液中的羟脯氨酸含量亦相应增高。结论:体外培养牛眼小梁细胞技术是研究小梁细胞特性的重要实验技术。AngⅡ可以诱导体外培养的牛眼小梁细胞的细胞增殖率升高,同时促使胶原合成增强。AT1受体拮抗剂可以部分阻断此促增殖效应。眼科学报2001;17:209～212。

外源性环腺核苷酸对育肥猪部分血液指标的影响

为了解外源性环腺核苷酸对育肥猪部分血液生化指标的影响,试验选择健康、体重基本一致的育肥猪10头,采集血液,测定血清总胆固醇、葡萄糖浓度、血清生长激素质量浓度、胰岛素含量。结果表明:给育肥猪注射cAMP制剂可影响育肥猪部分血液生化指标,并对育肥猪体内生长激素和胰岛素的分泌、代谢具有一定的促进诱导功能,进而促进蛋白质、脂肪的合成与储存,加快育肥猪生长速度。

尿核苷和腺核苷的2＇位烯丙基化反应

在核苷酸合成中,核糖2＇位羟基的保护是不易的,主要原因是难以区别2＇位和3＇位的两个羟基。Markiewicz曾提出利用试剂1,3-二氯-1,1,3,3-四异丙基二硅氧烷（简写为TIPDSiCl2）作为暂时保护基团的好方法。但是,这种方法不适应醚形式的2＇位羟基的保护。

专一选择性反应策略合成2′-O-甲基腺嘌呤核苷

2′-O-烷基核糖核苷由于其在赋予寡核苷酸高度的目标特异性、代谢稳定性以及优良的药代动力学和药效动力学特征上所展现的重要作用,成为了反义药物研究领域的热点,尤其是2′-O-甲基腺嘌呤核苷,作为第二代反义寡核苷酸的关键原料药,其的高效合成研究具有重要意义。现有合成方法存在的成本高和选择性不足等问题,本文基于专一选择性反应思路设计了一条新的合成路线,即以腺嘌呤核苷为起始物,经过缩醛化实现2′-和3′-位羟基选择性地保护、环状缩醛保护基可控区域选择性还原开环、2′-位羟基选择性甲基化及氢化脱苄反应,成功实现了2′-O-甲基腺嘌呤核苷的高效合成,单程总产率为36.7%。此策略不仅每一步反应表现出高选择性以及温和的反应条件,而且使用的试剂更加廉价易得,合成步骤也相对简短,为核苷类化合物核糖骨架上羟基的区域选择性功能化提供了新的思路。

腺嘌呤核苷酸转位酶:生理功能及在疾病发生中的病理意义

腺嘌呤核苷酸转位酶(adenine nucleotide translocase,ANT)对线粒体完整性和生物能量代谢至关重要。ANT有4种异构体,生理情况下ANT主要参与膜两侧的腺嘌呤核苷二磷酸/腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine diphosphate/adenosine triphosphate,ADP/ATP)交换,可能是构成线粒体渗透性转运孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)的主要成分,并参与细胞凋亡和质子泄漏过程。ANT损伤引起线粒体功能障碍,在代谢性疾病、心肌病及肿瘤发生进展中有着重要的病理意义,文章总结了近几年有关ANT的研究进展和知识,旨在为靶向ANT的疾病治疗提供新思路。

脱氧胸腺嘧啶核苷与茶碱对哮喘小鼠免疫调节作用的初步研究

目的探讨胸苷和茶碱在小鼠哮喘模型免疫调节中的作用。方法建立小鼠哮喘模型后,将动物随机分成三组,哮喘组、茶碱组及胸苷组。干预后第一、第二、第三周各处死1/3数量的动物。光镜观察其病理变化及支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞学分类;检测肺、脾组织中细胞凋亡情况;BALF上清液测定细胞因子IFN-γ、IL-4。结果与茶碱组相比,胸苷组早期肺部淋巴细胞(LC)和肺泡巨噬细胞(Am s)浸润明显,后期炎症明显恢复,且IFN-γ水平较其他两组均增高。结论胸苷能部分纠正Th2优势应答,对抗炎症反应。

腺嘌呤核苷酸转运体在压力负荷大鼠心肌组织中的表达

目的 :研究心肌组织中腺嘌呤核苷酸转运体 (ANT)在高血压病心肌肥厚发生、发展中的作用。 方法 :采用腹主动脉缩窄法制作动物模型 ;心肌ANT1、ANT2mRNA的检测采用RT PCR计算机凝胶成像分析。 结果 :①手术组大鼠腹主动脉压、心重指数以及心肌病理切片均证实模型成功。②缩窄后约 4天ANT1mRNA的含量上调 ,而ANT2mRNA的含量下调 ,并于第 7天分别达到峰值和谷值。③术后第 14天手术组大鼠心肌ANT1mRNA和ANT2mRNA的含量均接近假手术组水平 ,并持续至实验结束。 结论 :ANT参与了高血压病心肌肥厚的发生、发展过程 ,且ANT1对这一过程中心肌细胞凋亡的调控占优势 。

聚腺嘌呤核苷酸在金电极上的吸附氧化

采用微电极循环伏安法和吸附转移溶出伏安法研究了单链多聚腺瞟吟核苷酸Poly(A)在金电极上的伏安行为.重点考察了Poly(A)的吸附和氧化过程.发现Poly(A)分子在金电极表面能够形成多种状态的特性吸附.影响吸附态和吸附强度的主要因素是吸附电势,吸附时间和溶液浓度.在负电位区,随着吸附时间(T_s)的变化,Poly(A)分子在金电极表面发生不同状态的以腺嘌呤碱基为吸附位点的强吸附,这种以腺嘌呤碱基吸附的Poly(A)分子能够在零伏附近给出很强的氧化电流峰和对应的还原峰.

脑胶质瘤组织中胸腺嘧啶核苷激酶1的表达和意义及其与细胞增殖抗原Ki67表达的关系

目的研究脑胶质瘤组织中胸腺嘧啶核苷激酶1(TK1)的表达和意义,以及其与细胞增殖抗原Ki67表达的关系。方法 202例脑胶质瘤患者,经病理检查进行脑胶质瘤病理分级及组织类型分型。采用免疫组化染色法检测脑胶质瘤组织中TK1和Ki67的表达。比较不同级别及类型患者脑胶质瘤组织中TK1表达的阳性率;分析TK1与Ki67表达的关系。结果本组患者脑胶质瘤按WHO分级:Ⅰ级12例,Ⅱ级85例,Ⅲ级60例,Ⅳ级45例;组织类型分型:少突胶质细胞瘤28例,星形胶质细胞瘤174例。本组患者TK1阳性119例(58.9%);其中良性组(WHOⅠ级)患者无TK1阳性,低度恶性组(WHOⅡ级)阳性31例(36.5%),高度恶性组(WHOⅢ、Ⅳ级)阳性88例(83.8%);三组间TK1阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05～0.001)。星形胶质细胞瘤及复发患者的TK1阳性率分别显著高于少突胶质细胞瘤和初发的患者(均P<0.05)。TK1与Ki67的表达水平呈正相关(r=0.711,P<0.01)。结论恶性程度高、星形胶质细胞瘤及复发的脑胶质瘤患者瘤组织中TK1的表达增高;提示TK1表达可作为脑胶质瘤病理分级、分型及复发的重要参考指标。TK1与Ki67正相关,提示TK1亦可反映脑胶质瘤细胞的增殖情况。

五味子油乳剂对胸腺嘧啶核苷掺入淋巴细胞DNA的影响

利用人体外周全血做体外培养,经五味子油乳剂作用后,加入~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR),然后定时测定~3H-TdR掺入外周血淋巴细胞DNA合成的量。结果表明五味子油乳剂对~3H-TdR掺入DNA合成有明显促进作用。

犬单侧膈神经离断后对通气功能及呼吸肌蛋白质、腺嘌呤核苷酸含量的影响

目的 :探讨实验犬单侧膈神经离断后通气功能与呼吸肌蛋白质、腺嘌吟核苷酸含量变化之间的关系。方法 :建立离断单侧膈神经的实验犬模型 ,测量膈神经离断前、后及离断后 1,2个月犬的通气功能及呼吸肌中蛋白质及腺嘌呤核苷酸含量。结果 :通气功能在离断后有明显下降 ,于 1个月后基本恢复 ;犬的膈肌蛋白质、总腺苷酸含量在神经离断后下降 ,肋间肌蛋白质含量呈上升。结论 :犬单侧膈神经离断后通气功能的代偿与呼吸肌中蛋白质、腺苷酸含量变化一致。

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的聚亚甲基蓝／单壁碳纳米管修饰电极差分脉冲伏安法检测

研究了聚亚甲基蓝／单壁碳纳米管修饰电极的制备、电化学性质，采用差分脉冲伏安法成功应用于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的测定。在实验条件下，该修饰电极对NADH氧化具有很好的电催化作用，NADH浓度在2．0～500μmol／L范围内与峰电流呈良好的线性关系，检出限为0．6μmol／L，结果令人满意。

腺嘌呤核苷受体介导肿瘤坏死因子-α开放血肿瘤屏障的作用及其机制

目的明确肿瘤坏死因子-α(TNF-α)开放血肿瘤屏障的作用及其可能机制。方法构建体外血肿瘤屏障模型,给予TNF-α后不同时间点,免疫组织化学法和Western blot法动态检测胶质瘤细胞的热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)和腺嘌呤核苷受体(adenosine A1receptor,A1R)的表达水平;荧光分析法检测体外血肿瘤屏障模型的通透性改变。结果给予TNF-α后,胶质瘤细胞内HSP70表达增加,于30 min时含量最多。C6细胞内A1R的表达水平也在给予TNF-α后明显增加,并于120 min达高峰后逐渐减少。其血肿瘤屏障的通透性亦于给予TNF-α后120 min达最大后减少。结论经TNF-α作用后的胶质瘤细胞HSP70表达增加,增加的HSP70可能是通过某种内在机制提高A1R的表达水平,进而增加了血肿瘤屏障的通透性。

兔急性脑缺氧时脑及脑脊液内腺嘌呤核苷含量的变化

本文报告了由低张性低氧血症所致兔急性脑缺氧时脑组织内腺苷、次黄嘌呤核苷及次黄嘌呤水平分别从正常对照的53.3±2.9、115.6±11.8及186.5±10.3增至816.4±59.0、1049.7±37.5及704.4±55.3μM/g(X±SD),各组间P值均<0.01至0.05。同步测定的脑脊液中三种腺嘌呤核苷水平分别从正常对照的1.6±0.8、5.1±1.0及133.9±50.8增至7.0±1.2、26.6±3.8及430.5±40.4μM/L,各组间P值均<0.01至0.05。说明10分钟左右的脑缺氧即可引起脑脊液中这些核苷有统计学意义的增高;提示上述测定可能成为判断急性脑缺氧状态的一种具有一定特异性的指标。

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶与动脉粥样硬化

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶是一种多亚单位酶复合体,是细胞中一种可诱发的电子传递系统。尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶目前被认为是血管内生成活性氧的主要酶体,它的激活受蛋白激酶C等信号途径介导。研究表明NADPH氧化酶和近年来新发现的gp91phox同工酶即NOX蛋白家族可能通过损伤血管内皮、促进低密度脂蛋白氧化等参与动脉粥样硬化的发生和发展。

犬膈肌起搏后疲劳膈肌腺嘌呤核苷酸、SOD、MDA含量及线粒体改变

目的 探讨膈肌起搏后膈肌疲劳的发生机制。方法 电刺激犬膈神经复制膈肌疲劳模型，测定疲劳前后膈肌ＡＴＰ、 ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＡＸＰ、ＳＯＤ、ＭＤＡ含量，同时观察膈肌线粒体的形态变化。结果 疲劳后ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＸＰ、ＳＯＤ含量低于疲 劳前，ＭＤＡ含量高于疲劳前，ＡＭＰ水平无显著差异。疲劳膈肌线粒体出现肿胀、嵴模糊、少数线粒体空泡变性等可逆性 变化。结论 隔肌细胞ＡＴＰ过度消耗及合成障碍，直接供能物质减少以及氧自由基对亚细胞结构损伤可能是隔肌起搏 后膈肌疲劳发生的原因。

天麻提取物N^6-羟苄腺嘌呤核苷对小鼠肌张力、运动协调能力及体温的影响

目的观察天麻提取物N6-羟苄腺嘌呤核苷(NHBA)对小鼠肌张力、运动协调能力及体温的影响。方法 ICR小鼠随机分为溶剂对照组、地西泮3 mg/kg组,以及NHBA 5和15 mg/kg组,分别经腹腔注射给药。应用转棒实验观察NHBA对小鼠运动协调能力的影响,应用悬挂实验观察NHBA对小鼠肌张力的影响,测定肛温观察NHBA对小鼠体温的影响,采用高效液相色谱-电化学检测法测定SD大鼠脑组织内单胺类神经递质含量。结果 NHBA 5和15 mg/kg对小鼠的肌张力无明显影响;在5 mg/kg剂量下,NHBA明显降低小鼠体温,给药100 min后体温恢复正常,对小鼠的运动协调能力无明显影响;在15 mg/kg剂量下,NHBA明显影响小鼠的运动协调能力,给药后140 min此作用消失。神经递质测定结果表明,NHBA 5 mg/kg可明显降低大鼠下丘脑、脑干单胺类神经递质去甲肾上腺素(NA)的含量。结论 NHBA具有降低小鼠体温、影响小鼠运动协调能力的作用,其对小鼠肌张力无明显影响。NHBA降低脑内促觉醒神经递质NA水平可能是其发挥中枢抑制作用的机制之一。

原发性肝癌癌旁组织胸腺嘧啶核苷磷酸化酶表达与微血管密度的关系

目的探讨原发性肝癌癌旁组织胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)与微血管密度(MVD)的关系。方法选取海南医学院附属医院普外科切除的肝癌标本40例,采用免疫组织化学方法检测原发性肝癌癌旁组织蜡块中的TP和MVD的表达水平,并在高倍镜下计数微血管数。结果 TP阳性原发性肝癌癌旁组织的MVD明显高于TP阴性原发性肝癌癌旁组织。结论原发性肝癌癌旁组织中TP具有促进组织中血管增生作用,TP阳性原发性肝癌患者术后可选用卡培他滨化疗。

1,2-萘醌修饰的碳纳米管对β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸电化学氧化的催化作用

将具有电活性的1,2-萘醌(1,2-naphthoqu inone,Nq)分子修饰到碳纳米管(CNT)表面形成Nq-CNT纳米复合体,用紫外可见(UV-V is)和红外光谱等方法对Nq-CNT进行了表征,结果表明Nq不仅能快速、有效地修饰到CNT表面,而且还能有效地改善CNT在水溶液中的分散性能。循环伏安结果显示,与GC电极相比,CNT能显著提高Nq的氧化还原峰电流,其伏安曲线上表现出一对几乎对称的氧化还原峰,式量电位E0′几乎不随扫速而变化。进一步的实验结果表明,Nq和CNT对β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的电化学氧化具有协同催化作用,与CNT或Nq相比,Nq-CNT具有较高的电催化活性,能使其氧化过电位降低超过510 mV。本研究对碳纳米管功能化方法具有简单、电极制作容易以及催化效率高等优点。

二氢嘧啶脱氢酶和胸腺嘧啶核苷激酶的研究进展

目的:了解二氢嘧啶脱氢酶（DPD）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）的研究现状和在临床肿瘤治疗中的意义。方法:综述近年来DPD和TK的研究现状及其在临床肿瘤治疗中的应用。结果:DPD存在的个体差异导致氟尿嘧啶治疗中肿瘤细胞对药物的敏感性的不同,从而导致疗效的不同;TK的活性高低一定程度上反映了细胞中DNA的合成速度,可以用于临床诊断肿瘤细胞增殖程度和解释应用嘧啶类化疗药物时的疗效和毒性反应。结论:认识和利用这两种酶的作用机制以及个体差异不仅可以指导临床的个体化治疗,减小药物的不良反应和增加疗效,而且可以辅助肿瘤的诊断和指导嘧啶类新药的开发。