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腺病毒介导的白细胞介素-24基因对Karpas299细胞增殖与凋亡影响的实验研究
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作者 姜广斌 刘磊 +2 位作者 孙万邦 杨吉成 郭锦锦 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2015年第3期284-288,共5页
目的探讨体外腺病毒介导的白细胞介素-24基因(Ad-IL-24)对间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)Karpas299细胞增殖及凋亡的影响。方法将Karpas299细胞分为空白对照组、Ad-IL-24组及携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒组(Ad-GFP组)。Ad-IL-24组加入20... 目的探讨体外腺病毒介导的白细胞介素-24基因(Ad-IL-24)对间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)Karpas299细胞增殖及凋亡的影响。方法将Karpas299细胞分为空白对照组、Ad-IL-24组及携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒组(Ad-GFP组)。Ad-IL-24组加入200.0μL Ad-IL-24原液,Ad-GFP组加入200.0μL Ad-GFP原液,空白对照组加入200.0μL PBS溶液。分别于处理12、24及48 h后,采用细胞毒性与增殖检测试剂盒(CCK-8试剂盒)检测3组的细胞增殖抑制率;于处理48 h后,采用流式细胞仪检测3组的细胞凋亡率。结果 Ad-IL-24对Karpas299细胞的生长具有抑制作用,且随时间延长,Ad-IL-24组的细胞增殖抑制率呈上升趋势;同时点与Ad-GFP组相比较,12、24及48 h时Ad-IL-24组的细胞增殖抑制率均较高(P<0.05)。与空白对照组及Ad-GFP组相比较,Ad-IL-24组的细胞凋亡率较高(P<0.05)。结论 Ad-IL-24对Karpas299细胞的生长具有抑制作用,且能引起Karpas299细胞的凋亡。 展开更多
关键词 腺病毒介导的白细胞介素-24基因 间变性大细胞淋巴瘤 基因治疗
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腺病毒介导的IL-24基因对胶质瘤细胞系U251拓扑异构酶Ⅱα及Caspase-3表达的影响 被引量:2
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作者 韩硕 崔慧先 +3 位作者 李文玲 赵俊霞 曹翠丽 闫蕴力 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期48-52,共5页
目的探讨腺病毒介导的IL-24基因(Ad5F35-hIL-24)对胶质瘤细胞系U251拓扑异构酶Ⅱα(topoⅡα)及Caspase-3表达的影响。方法应用腺病毒载体将IL-24基因转染U251细胞后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法观察Ad5F35-hIL-24对U251细胞的抑制作用... 目的探讨腺病毒介导的IL-24基因(Ad5F35-hIL-24)对胶质瘤细胞系U251拓扑异构酶Ⅱα(topoⅡα)及Caspase-3表达的影响。方法应用腺病毒载体将IL-24基因转染U251细胞后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法观察Ad5F35-hIL-24对U251细胞的抑制作用;Hoechst33258荧光染色,以及流式细胞术测定细胞凋亡;应用免疫组织化学方法检测topoⅡα表达;免疫印迹法检测topoⅡα和Caspase-3蛋白质表达变化;Transwell实验观察Ad5F35-hIL-24对U251细胞侵袭力的影响。结果与对照组相比,Ad5F35-hIL-24对胶质瘤细胞有明显抑制作用,能显著诱导细胞凋亡,且呈浓度依赖性;免疫组织化学法显示,Ad5F35-hIL-24能明显抑制topoⅡα表达;免疫印迹检测表明,topoⅡα表达明显降低,而Caspase-3蛋白的表达水平增加;Transwell实验表明,Ad5F35-hIL-24能明显降低U251细胞的侵袭能力。结论外源性IL-24基因能显著抑制胶质瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡;topoⅡα及Caspase-3是其重要的作用靶点。该结果对于IL-24基因用于临床治疗胶质瘤有一定参考意义。 展开更多
关键词 白细胞介素-24基因 拓扑异构酶Ⅱα CASPASE-3 胶质瘤 免疫印迹法 流式细胞 人胶质瘤细胞系U251
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携带小鼠白细胞介素-12 siRNA基因重组腺病毒载体的构建及其在树突状细胞中的表达
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作者 罗建飞 胡炜焰 《微循环学杂志》 2006年第2期51-52,55,共3页
目的:构建载有白细胞介素-12干扰RNA(IL-12si RNA)基因的,能在树突状细胞(DC)表达的重组腺病毒载体,为免疫耐受提供基础。方法:将IL-12p35si RNA和IL-12p40si RNAcDNA克隆于腺病毒穿梭质粒pShuttle2,得到重组质粒,并与腺病毒骨架质粒BD ... 目的:构建载有白细胞介素-12干扰RNA(IL-12si RNA)基因的,能在树突状细胞(DC)表达的重组腺病毒载体,为免疫耐受提供基础。方法:将IL-12p35si RNA和IL-12p40si RNAcDNA克隆于腺病毒穿梭质粒pShuttle2,得到重组质粒,并与腺病毒骨架质粒BD Adeno-XTM体外连接后代共转化大肠杆菌DH5α菌株,重组腺病毒质粒经过293细胞的包装扩增及氯化铯(CsCl)纯化,生成带有IL-12p35和IL-12p40si RNA基因的重组腺病毒载体,感染DC细胞。结果:经形态学、病毒DNA酶切、聚合酶链反应(PCR)和逆转录(RT)等方法的鉴定,证实了载体构建的正确性;经测定,病毒滴度为2.5×1010efu/ml。结论:成功构建带有IL-12p35si RNA和IL-12p40si RNAcDNA的重组腺病毒载体,其所携带的载体能够转染小鼠DC并干扰其在DC中表达,为进一步的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 基因重组腺病毒载体 小鼠白细胞介素-12 树突状细胞 siRNA TH1/TH2 转录后基因沉默 T细胞分化 细菌产物 异源二聚体 Cells
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RGD修饰的腺病毒介导LIF和IL-24双基因共表达对MEG01白血病细胞的抑制作用 被引量:1
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作者 李帅 郁心 +4 位作者 何峰 朱霞霞 杨吉成 盛伟华 缪竞诚 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2015年第5期385-392,共8页
目的利用RGD修饰改造白血病抑制因子(LIF)和白细胞介素-24(IL-24)双基因共表达腺病毒载体,以提高感染效率,探讨其对人白血病MEG01细胞的抑制作用。方法同源重组法构建RGD修饰的表达LIF、IL-24的腺病毒载体Ad.RGD-LIF、Ad.RGD-IL24和Ad.R... 目的利用RGD修饰改造白血病抑制因子(LIF)和白细胞介素-24(IL-24)双基因共表达腺病毒载体,以提高感染效率,探讨其对人白血病MEG01细胞的抑制作用。方法同源重组法构建RGD修饰的表达LIF、IL-24的腺病毒载体Ad.RGD-LIF、Ad.RGD-IL24和Ad.RGD-LIF-IL24。在QBI-293A细胞中扩增腺病毒,检测病毒滴度。流式细胞仪检测各组腺病毒载体对MEG01细胞的感染效率。应用Western blotting检测目的基因LIF、IL-24在MEG01细胞中的表达。CCK-8法检测各组腺病毒载体Ad.RGD-LIF、Ad.RGD-IL24、Ad.RGD-LIF-IL24感染MEG01细胞后对细胞增殖的影响。PE-Anexin V/7-AAD双染后,经流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达。PI染色后,流式细胞仪检测目的基因表达对MEG01细胞周期的影响。实时定量PCR检测细胞周期调控基因p21和E2F1的表达。结果成功构建了RGD修饰的腺病毒载体Ad.RGD-LIF、Ad.RGD-IL24和Ad.RGD-LIF-IL24。RGD修饰后的腺病毒能够显著增强对MEG01细胞的感染效率。CCK-8检测显示,与PBS组比较,携带单个目的基因的腺病毒载体Ad.RGD-LIF和Ad.RGD-IL24在第5 d对细胞生长的抑制率分别为29.2%和31.5%,均能够显著抑制MEG01细胞的生长;携带Ad.RGD-LIF-IL24双基因组的抑制率达42.5%,优于单基因组,差异均有统计学意义(P<0.05)。凋亡检测显示,与PBS组(4.5%)和空病毒组Ad.RGD(7.4%)比较,Ad.RGD-IL24(20.9%)、Ad.RGD-LIF(17.8%)均能够显著促进细胞凋亡,且Ad.RGD-LIF-IL24双基因组(29.7%)的促凋亡作用更强。Western blotting显示,LIF和IL-24能够提高促凋亡蛋白p53、Bax的表达,同时抑制抗凋亡蛋白Bcl-xl的表达。目的基因LIF、IL-24过表达会影响MEG01细胞周期的进程,使细胞阻滞在G2期。实时定量PCR显示,LIF和IL-24能够上调细胞周期调控基因p21的转录,抑制E2F1的表达。结论 LIF和IL-24过表达的腺病毒载体在体外通过调节p53、Bax、Bcl-xl的表达,影响白血病细胞MEG01的生长,诱导其凋亡,并通过调控p21、E2F1的水平影响细胞周期的进程。 展开更多
关键词 腺病毒 白血病抑制因子(LIF) 白细胞介素-24(IL-24) MEG01细胞 生长抑制 凋亡
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影响农杆菌介导白细胞介素-2基因转化番茄的因素研究 被引量:4
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作者 葛艳辉 崔继哲 +1 位作者 于丽杰 宋文华 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期470-474,共5页
利用农杆菌介导法将白细胞介素-2基因(il-2)导入番茄中,对影响其转化的因素进行了分析。结果表明:农杆菌菌种(EHA105和C58C1)、外植体类型(子叶和下胚轴)、带有不同筛选标记(Kanr、PPTr、Hygr)的载体质粒几个因素对芽诱导分化及转化均... 利用农杆菌介导法将白细胞介素-2基因(il-2)导入番茄中,对影响其转化的因素进行了分析。结果表明:农杆菌菌种(EHA105和C58C1)、外植体类型(子叶和下胚轴)、带有不同筛选标记(Kanr、PPTr、Hygr)的载体质粒几个因素对芽诱导分化及转化均有影响。实验共接种转化2018个子叶和下胚轴外植体,获得了47株抗性再生株,对其进行il-2的PCR扩增检测,有44株呈阳性。PCR-Southern杂交证实PCR结果可靠,显示il-2基因已导入到番茄中。 展开更多
关键词 白细胞介素-2基因(il-2) 农杆菌介导 番茄 遗传转化
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人白细胞介素-24基因的克隆及序列测定 被引量:8
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作者 陈雄艳 李丽娥 +3 位作者 盛伟华 龚爱华 缪竞诚 杨吉成 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 2003年第3期279-281,共3页
目的 克隆人白细胞介素 - 2 4 (hIL - 2 4 )基因 ,以供重组表达。方法 利用自行设计合成的一对引物 ,采用RT -PCR技术从LPS活化的人外周血单个核细胞的总RNA中分离hIL - 2 4cDNA并重组到 pUC19载体上 ,进行酶切鉴定和DNA序列测定。结... 目的 克隆人白细胞介素 - 2 4 (hIL - 2 4 )基因 ,以供重组表达。方法 利用自行设计合成的一对引物 ,采用RT -PCR技术从LPS活化的人外周血单个核细胞的总RNA中分离hIL - 2 4cDNA并重组到 pUC19载体上 ,进行酶切鉴定和DNA序列测定。结果 PCR及酶切产物电泳结果均证明所克隆的基因为 6 2 1bp。经序列测定证实所克隆的hIL - 2 4与GenBank报道的结果完全一致。结论 该基因系国内首次获得并经序列测定证实的hIL - 2 4cDNA基因。这为进一步在真核或大肠杆菌中高效表达有活性的重组hIL - 2 4 ,更深入地研究其作用机制以及临床应用奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 白细胞介素-24 基因克隆 序列测定 RT-PCR
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黑素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24抑制肺癌细胞增殖 被引量:2
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作者 马群风 江红 +2 位作者 刘锟 朱捷 郑晓飞 《医学研究生学报》 CAS 2005年第9期779-783,共5页
目的:探讨黑素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24(mda-7/IL-24)对非小细胞肺癌细胞系H460增殖的影响。方法:将mda-7/IL-24插入真核表达载体pcDNA3中,构建重组表达载体pcDNA 3-mda-7/IL-24。按照DNA和脂质体(L ipofectam ine)的不同比例,... 目的:探讨黑素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24(mda-7/IL-24)对非小细胞肺癌细胞系H460增殖的影响。方法:将mda-7/IL-24插入真核表达载体pcDNA3中,构建重组表达载体pcDNA 3-mda-7/IL-24。按照DNA和脂质体(L ipofectam ine)的不同比例,将重组表达载体瞬时转染H460细胞,用RT-PCR检测mda-7/IL-24在不同转染条件下的表达,用MTT法检测转染重组表达载体后对H460细胞增殖的影响。结果:成功构建了mda-7/IL-24的重组表达载体,用SP6引物和mda-7/IL-24上游引物进行RT-PCR分析,在DNA和L ipofectam ine的比例为1μg∶2μl^1μg∶4μl时有目的基因表达。按照1μg∶2μl的比例瞬时转染重组表达质粒72 h后进行MTT分析,结果表明,与未转染细胞和转染空质粒细胞相比,重组质粒pcDNA3-mda-7/IL-24对肺癌细胞H460的增殖有明显抑制作用,抑制率为18.4%。结论:mda-7/IL-24对非小细胞肺癌细胞系H460增殖具有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-24 黑素瘤分化相关基因-7 细胞增殖 肺癌 基因表达
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靶向肿瘤腺病毒介导IL-24抑制人胃癌细胞增殖 被引量:1
8
作者 曹亚玲 黄茂涛 +4 位作者 黄一 季代金 冯早明 李学成 陈陵 《西南国防医药》 CAS 2014年第1期9-12,共4页
目的探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子特异驱动IL-24的重组腺病毒(Ad-phTERT-IL-24)对人胃癌SGC-7901细胞增殖及侵袭能力的影响。方法将Ad-phTERT-IL-24感染人胃癌SGC-7901细胞,采用荧光实时定量PCR及Western blot检测IL-24表达;采用C... 目的探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子特异驱动IL-24的重组腺病毒(Ad-phTERT-IL-24)对人胃癌SGC-7901细胞增殖及侵袭能力的影响。方法将Ad-phTERT-IL-24感染人胃癌SGC-7901细胞,采用荧光实时定量PCR及Western blot检测IL-24表达;采用CCK-8方法检测细胞生长曲线;采用Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果与以PBS代替病毒液处理的SGC-7901细胞相比,感染Ad-phTERT-IL-24的SGC-7901细胞内IL-24表达明显升高(P<0.01),于第5、6 d吸光度明显下降(P<0.05),细胞侵袭能力亦显著降低(P<0.05)。结论 Ad-phTERT-IL-24可有效上调人胃癌SGC-7901细胞IL-24表达,进而抑制细胞增殖及侵袭能力。 展开更多
关键词 端粒酶 逆转录酶 启动子 腺病毒 白细胞介素-24 胃癌
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κ基因结合核因子、白细胞介素-24以及Mimecan基因与临床子宫内膜癌的关联性研究 被引量:1
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作者 栗军香 王晓华 +4 位作者 郑丽娟 宁俊丽 贾丽霞 王文霞 李红梅 《现代中西医结合杂志》 CAS 2016年第20期2177-2179,共3页
目的探讨κ基因结合核因子(NF-κB)、白细胞介素-24(IL-24)以及Mimecan基因与临床子宫内膜癌的关联性。方法将子宫内膜癌患者115例依照子宫内膜癌分期的不同分为子宫内膜癌Ⅰ期组(30例)、子宫内膜癌Ⅱ期组(32例)、子宫内膜癌Ⅲ期组(28例... 目的探讨κ基因结合核因子(NF-κB)、白细胞介素-24(IL-24)以及Mimecan基因与临床子宫内膜癌的关联性。方法将子宫内膜癌患者115例依照子宫内膜癌分期的不同分为子宫内膜癌Ⅰ期组(30例)、子宫内膜癌Ⅱ期组(32例)、子宫内膜癌Ⅲ期组(28例)以及子宫内膜癌Ⅳ期组(25例),另外选取健康女性30例为健康组进行对比研究,5组分别测定血清中NF-κB、IL-24以及Mimecan基因水平并进行相关性分析。结果子宫内膜癌Ⅰ期组、Ⅱ期组、Ⅲ期组以及Ⅳ期组患者血清中NF-κB、IL-24以及Mimecan基因含量较健康组均有明显的升高(P均<0.05);子宫内膜癌4组间两两比较,NF-κB、IL-24以及Mimecan基因均具有明显的差异(P均<0.05);子宫内膜癌患者血清中κ基因结合核因子、IL-24以及Mimecan基因含量与病情严重度存在正相关(r=0.81,r=0.70,r=0.74,P<0.05);子宫内膜癌患者血清中NF-κB水平与Mimecan基因水平存在正相关(r=0.77,P均<0.05),NF-κB水平与IL-24水平也存在正相关(r=0.79,P<0.05)。结论 NF-κB、IL-24以及Mimecan基因三者之间的相互协同作用,共同促进了临床子宫内膜癌的发生以及发展。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 κ基因结合核因子 白细胞介素-24 Mimecan基因
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腺病毒介导重组人单链IL-27融合基因在肝癌细胞的表达及活性鉴定
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作者 程晓刚 张亚清 +5 位作者 叶琬 邹强 陈玮 金虹 徐艳 张绍兰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期518-521,共4页
目的:利用腺病毒表达系统在肝癌细胞表达有生物活性的单链重组人白细胞介素-27(rhscIL-27)并检测其生物学活性。方法:将rhscIL-27基因片段从pcDNA3.1载体克隆到腺病毒载体pAdTrack-CMV,然后在细菌内与pAdEasy同源重组构建AdIL-27腺病毒... 目的:利用腺病毒表达系统在肝癌细胞表达有生物活性的单链重组人白细胞介素-27(rhscIL-27)并检测其生物学活性。方法:将rhscIL-27基因片段从pcDNA3.1载体克隆到腺病毒载体pAdTrack-CMV,然后在细菌内与pAdEasy同源重组构建AdIL-27腺病毒载体并转染293细胞包装、扩增腺病毒颗粒。将重组腺病毒感染肝癌细胞株HepG2,荧光显微镜、RT-PCR及ELISA等方法进行检测蛋白表达情况,IFN-γ诱生实验检测rhscIL-27的生物学活性。结果:成功构建AdIL-27腺病毒载体,经293细胞包装扩增后感染HepG2细胞观察到有GFP表达,RT-PCR及ELISA检测到细胞有rhscIL-27表达,IFN-γ诱生实验证实表达的rhscIL-27具有诱导产生IFN-γ的生物学活性。结论:利用腺病毒表达系统成功在肝癌细胞表达有生物活性的重组人单链IL-27(rhscIL-27),并具有诱导产生IFN-γ的生物学活性,为研究IL-27的生物学功能及其对肝癌的基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 白细胞介素-27 基因表达 腺病毒 转染
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过继回输腺病毒介导的白细胞介素10基因转染CTL对机体抗肿瘤免疫功能的增强效应(英文)
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作者 JunkoAbe YokoYoshida +4 位作者 SatoshiOkabe HiroakiWakimoto Masaruaoyagi KimiyoshiHirakawa HirofumiHamada 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第2期96-103,共8页
本研究探讨了白细胞介素10(IL-10)对小鼠体内抗肿瘤免疫功能的影响。鉴于C26结肠癌细胞转染了IL-10基因后在体内的致瘤性明显下降,本研究构建了一株对C26结肠癌细胞具有杀伤活性的CD8^+CTL并观察了IL-10基因转染的该细胞株对肿瘤的治疗... 本研究探讨了白细胞介素10(IL-10)对小鼠体内抗肿瘤免疫功能的影响。鉴于C26结肠癌细胞转染了IL-10基因后在体内的致瘤性明显下降,本研究构建了一株对C26结肠癌细胞具有杀伤活性的CD8^+CTL并观察了IL-10基因转染的该细胞株对肿瘤的治疗作用。携带IL-10基因的重组腺病毒能有效介导小鼠淋巴细胞的基因转染并使之分泌较高水平的IL-10。IL-10基因转染的CTL过继回输荷瘤小鼠体内能明显增强荷瘤小鼠的体内抗肿瘤免疫功能,使实验性肺转移小鼠肺部转移结节数明显减少,这表明,IL-10对于过继回输的肿瘤特异性CTL的免疫功能具有明显的增强作用。 展开更多
关键词 过继回输腺病毒 介导 白细胞介素10 基因转染 CTL 机体 抗肿瘤免疫功能 增强效应
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白细胞介素-24基因治疗肿瘤机制探讨
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作者 汪小华 杨吉成 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2005年第5期549-551,共3页
关键词 白细胞介素-24 肿瘤 基因治疗 机制
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白细胞介素-24及白细胞介素-12基因治疗小鼠黑色素瘤实验研究 被引量:1
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作者 许灵会 牟斌 +1 位作者 杨善花 崔逢德 《延边大学医学学报》 CAS 2015年第3期157-161,共5页
[目的]研究重组质粒pEGFP-N1-白细胞介素(IL)-24基因及pGEG-IL-12基因单独应用与联合应用对小鼠黑色素瘤移植瘤的抑制作用及其机制.[方法]制备黑色素瘤B16细胞荷瘤小鼠模型,并随机分为5个组,分别向瘤体内注射给予脂质体包裹的基因重组质... [目的]研究重组质粒pEGFP-N1-白细胞介素(IL)-24基因及pGEG-IL-12基因单独应用与联合应用对小鼠黑色素瘤移植瘤的抑制作用及其机制.[方法]制备黑色素瘤B16细胞荷瘤小鼠模型,并随机分为5个组,分别向瘤体内注射给予脂质体包裹的基因重组质粒pEGFP-N1-IL-24(IL-24组),pEGFP-N1-IL-24和pGEG-IL-12(联合应用组),pGEG-IL-12(IL-12组),pEGFP-N1(空质粒组)及PBS(PBS组).每次给药前测量小鼠背部肿瘤的长径和短径,绘制肿瘤生长曲线.采用HE染色法观察各组肿瘤组织形态;RT-PCR法检测移植瘤组织中IL-24,IL-12,Bax,Bcl-2,VEGF,caspase-3及caspase-12mRNA的表达;Western Blot检测移植瘤组织中Bax,Bcl-2,VEGF,caspase-3及caspase-12蛋白的表达.[结果]肿瘤生长曲线观察结果表明,IL-24组、IL-12组及联合应用组肿瘤体积均明显小于空质粒组和PBS组(P<0.05),联合应用组肿瘤体积最小(P<0.05).HE染色结果显示,空质粒组多数细胞生长差,形态不规则,细胞皱缩,结构稀疏,细胞核溶解、变形,细胞成片坏死.RT-PCR检测结果表明,IL-24组和IL-12组分别有IL-24和IL-12基因mRNA表达,联合应用组同时有IL-24和IL-12基因mRNA表达,而空质粒组和PBS组均未见表达;IL-24组、IL-12组及联合应用组Bax基因mRNA表达水平均明显高于空质粒组和PBS组(P<0.05),联合应用组Bax基因mRNA的表达水平最高,而Bcl-2和VEGF基因mRNA的表达水平则显著降低(P<0.05).Western Blot检测结果表明,IL-24组、IL-12组及联合应用组Bax,caspase-3,caspase-12蛋白的表达水平均明显高于空质粒组和PBS组(P<0.05),联合应用组中Bax,caspase-3,caspase-12蛋白的表达水平最高,而Bcl-2和VEGF蛋白的表达水平则显著降低(P<0.05).[结论]IL-24和IL-12对荷瘤小鼠有治疗作用,二者联合应用治疗效果更强. 展开更多
关键词 黑色素瘤 白细胞介素-24 白细胞介素-12 基因治疗 小鼠
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白细胞介素-24基因对B16细胞小鼠移植瘤的抑制作用
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作者 牟斌 许灵会 +7 位作者 杨善花 魏勇 朴杰 金丹 李红花 李芳芳 金权鑫 崔逢德 《延边大学医学学报》 CAS 2014年第2期79-83,共5页
[目的]探讨重组质粒pEGFP-N1-白细胞介素(IL)-24基因对黑色素瘤B16细胞小鼠移植瘤的抑制作用及其机制.[方法]构建黑色素瘤B16细胞小鼠模型,随机分为3个组,分别向各组小鼠瘤体内注射给予脂质体包裹的基因重组质粒pEGFP-N1-IL-24(实验组),... [目的]探讨重组质粒pEGFP-N1-白细胞介素(IL)-24基因对黑色素瘤B16细胞小鼠移植瘤的抑制作用及其机制.[方法]构建黑色素瘤B16细胞小鼠模型,随机分为3个组,分别向各组小鼠瘤体内注射给予脂质体包裹的基因重组质粒pEGFP-N1-IL-24(实验组),pEGFP-N1(阳性对照组)和PBS缓冲液(阴性对照组).应用HE染色对肿瘤组织形态进行观察,RT-PCR法测定移植瘤中Bax,Bcl-2,VEGF的表达,Western Blot方法研究肿瘤细胞凋亡情况.[结果]HE染色观察结果显示,实验组肿瘤组织细胞变大、胞质疏松、核深染,可见核固缩、核溶解、核碎裂.RT-PCR实验扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测结果示,实验组Bax基因及Bax蛋白的表达均较其他两组明显升高(P<0.05),而实验组Bcl-2和VEGF基因及Bcl-2和VEGF蛋白的表达均较其他两组明显降低(P<0.05).[结论]IL-24对小鼠体内的黑色素瘤B16细胞的生长有抑制作用. 展开更多
关键词 白细胞介素-24 黑色素瘤 质粒 基因治疗 小鼠
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mda-7/IL-24腺病毒对小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的抑制作用研究 被引量:1
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作者 马群风 江红 +2 位作者 刘锟 朱捷 郑晓飞 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期679-682,共4页
目的构建mda-7/IL-24腺病毒,检测其对小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的影响。方法将mda-7/IL-24cDNA亚克隆至腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack-CMV中,在大肠杆菌BJ5183中将重组病毒穿梭质粒和骨架质粒重组。在HEK293细胞中进行病毒包装和扩增,用... 目的构建mda-7/IL-24腺病毒,检测其对小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的影响。方法将mda-7/IL-24cDNA亚克隆至腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack-CMV中,在大肠杆菌BJ5183中将重组病毒穿梭质粒和骨架质粒重组。在HEK293细胞中进行病毒包装和扩增,用PCR方法鉴定后,通过TCID50法测定病毒滴度。用滴度为50pfu/细胞的重组腺病毒Ad·mda-7/IL-24感染NCI-H446细胞72h后,经MTT实验检测其对细胞增殖的影响,并用Westernblot方法检测mda-7/IL-24在NCI-446中的表达。结果核酸序列测定和PCR鉴定表明成功构建Ad·mda-7/IL-24;TCID50法测定扩增的腺病毒滴度为2×1010pfu/ml。Ad·mda-7/IL-24在NCI-H446细胞中表达MDA-7/IL-24,MTT检测表明Ad·mda-7/IL-24明显抑制NCI-H446细胞生长,抑制率为21·37%。结论重组腺病毒Ad·mda-7/IL-24能显著抑制NCI-H446细胞增殖,为研究mda-7/IL-24的作用机制及将其用于小细胞肺癌的基因治疗提供了条件。 展开更多
关键词 白细胞介素24 黑素瘤分化相关基因-7 重组腺病毒 细胞 细胞增殖
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白细胞介素-18基因修饰的胎肝细胞经脾移植对小鼠免疫功能的影响 被引量:2
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作者 姚航平 张立煌 +1 位作者 孙文佶 冷建杭 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2002年第2期115-120,共6页
目的 :观察表达 m IL- 18的重组腺病毒基因修饰的胎肝细胞 (Adm IL- 18/ BNL.CL2 )经脾移植对正常小鼠免疫功能的影响。方法 :实验组小鼠经脾移植 Adm IL- 18/ BNL.CL2 ,同时设 Lac Z病毒对照组 (Ad- Lac Z/ BNL.CL2 ) ,BNL.CL2 细胞对... 目的 :观察表达 m IL- 18的重组腺病毒基因修饰的胎肝细胞 (Adm IL- 18/ BNL.CL2 )经脾移植对正常小鼠免疫功能的影响。方法 :实验组小鼠经脾移植 Adm IL- 18/ BNL.CL2 ,同时设 Lac Z病毒对照组 (Ad- Lac Z/ BNL.CL2 ) ,BNL.CL2 细胞对照组及空白对照组。2周后处死 ,留取血清 ,制备腹腔巨噬细胞、脾淋巴细胞、肝组织匀浆液 ,提取肝组织总 RNA。采用 ELISA法检测各组小鼠血清、腹腔 Mφ和脾细胞培养上清、肝匀浆中细胞因子的含量 ;采用半定量 RT- PCR法 ,检测肝组织细胞因子 m RNA相对表达量 ;以 LDH释放法测定腹腔 Mφ杀伤活性和脾 NK细胞活性 ,用 MTT还原比色法测定脾淋巴细胞的增殖活性。结果 :实验组小鼠血清、细胞培养上清及肝匀浆中 ,IL- 18、IL - 2、IFN-γ、TNF-α含量均高于其它对照组 ,而 IL - 4、IL - 10水平则低于对照组 ;半定量 RT- PCR结果与EL ISA检测结果一致 ;同时 ,实验组腹腔 Mφ的杀伤活性和脾 NK细胞活性 ,及脾淋巴细胞增殖活性也明显高于对照组。结论 :Adm IL - 18能有效转染至胎肝细胞并稳定表达 m IL- 18;Adm IL - 18基因修饰的胎肝细胞经脾移植后 ,可显著提高肝脏、脾脏免疫细胞活性 ,活化腹腔 Mφ,促进 Th1类细胞因子表达 ,抑制 Th2类细胞因子的分泌。 展开更多
关键词 白细胞介素-18 基因转移 重组腺病毒载体 胎肝细胞 脾内移植 免疫功能 动物实验
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腺病毒载体介导的IL-3基因疗法对放射损伤小鼠造血功能重建的影响
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作者 刘林 张曦 +2 位作者 罗成基 粟永萍 陈幸华 《重庆医学》 CAS CSCD 2005年第9期1290-1292,共3页
目的研究腺病毒载体介导的IL-3基因疗法对放射损伤小鼠造血功能重建的影响.方法将构建的IL-3腺病毒(AdCMVIL-3)经腹腔注射至5Gyγ射线放射损伤小鼠体内,并与注射空载体(AdCMVNull)相对照,检测外周血WBC、Hb及PLT的动态变化.结果空载体... 目的研究腺病毒载体介导的IL-3基因疗法对放射损伤小鼠造血功能重建的影响.方法将构建的IL-3腺病毒(AdCMVIL-3)经腹腔注射至5Gyγ射线放射损伤小鼠体内,并与注射空载体(AdCMVNull)相对照,检测外周血WBC、Hb及PLT的动态变化.结果空载体注射组于照射后产生严重的全血细胞下降:PLT于照后6~12d降至200×109/L以下,WBC于照后6~15d降至1.0×109/L以下,Hb于照后12~15d降至60/L以下.AdCMVIL-3治疗组,WBC下降的程度明显减轻,其最低值高出对照组近2倍,而且WBC的恢复时间较对照组提前约17d.同时显示有一定程度的促进PLT和Hb恢复的作用.结论腺病毒载体介导的IL-3基因疗法可显著促进放射损伤小鼠WBC的恢复,对Hb、PLT的恢复也具有一定的促进作用. 展开更多
关键词 腺病毒栽体 白细胞介素-3 基因治疗 造血功能重建
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白细胞介素-24在相关皮肤病中的研究进展
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作者 袁梦思 路涛 《医学综述》 CAS 2022年第13期2567-2572,共6页
白细胞介素(IL)-24/黑色素瘤分化相关基因7是IL-10家族成员之一,主要表达于脾脏、胸腺及外周血单个核细胞和正常的人类黑色素细胞。IL-24具有多种生物学功能,不仅可通过抑制肿瘤的生长、侵袭、转移及血管形成发挥抗肿瘤作用,还具有强大... 白细胞介素(IL)-24/黑色素瘤分化相关基因7是IL-10家族成员之一,主要表达于脾脏、胸腺及外周血单个核细胞和正常的人类黑色素细胞。IL-24具有多种生物学功能,不仅可通过抑制肿瘤的生长、侵袭、转移及血管形成发挥抗肿瘤作用,还具有强大的免疫调节功能,参与多种炎症性、自身免疫性及变应性皮肤病的发病。因此,深入研究其具体机制有助于临床工作者认识疾病的发生、发展及转归,为疾病的临床诊治提供新的理论依据。 展开更多
关键词 皮肤病 白细胞介素-24 黑素瘤分化相关基因7
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GeXP检测rhIL-24联合DDP对人肺腺癌A549/DDP细胞凋亡相关基因的实验研究 被引量:5
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作者 郭锦锦 王少慧 +2 位作者 孙万邦 宋明英 唐艳丽 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期186-189,共4页
目的:利用多基因遗传表达分析系统(GeX P)探讨重组人白细胞介素-24(rhI L-24)联合顺铂(DDP)诱导人肺腺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞6个凋亡相关基因的变化。方法:用rhI L-24、DDP及rhI L-24+DDP干预A549/DDP细胞,应用多基因遗传表达分析系... 目的:利用多基因遗传表达分析系统(GeX P)探讨重组人白细胞介素-24(rhI L-24)联合顺铂(DDP)诱导人肺腺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞6个凋亡相关基因的变化。方法:用rhI L-24、DDP及rhI L-24+DDP干预A549/DDP细胞,应用多基因遗传表达分析系统(GeX P)同时检测Bax、Bcl-2、Survivin、Caspase3、Rb与P53等6个凋亡相关基因。结果:rhI L-24蛋白可引起A549/DDP细胞Bax基因、Caspase3基因、Rb基因转录上调;Bcl-2基因、Survivin基因转录下调,但抑癌基因P53变化无规律,rhI L-24联合DDP后Bax、Survivin、Rb表达较单独rhI L-24组变化更加显著。结论:rhI L-24蛋白可通过上调Bax,下调Bcl-2、Survivin,激活Caspase3,上调抑癌基因Rb诱导人肺腺癌A549/DDP细胞凋亡。 展开更多
关键词 基因遗传表达分析系统 白细胞介素-24 肺腺癌 凋亡
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共表达口蹄疫病毒VP1-2A基因与猪IL-2重组腺病毒的构建及其免疫效果研究 被引量:3
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作者 苏春霞 段相国 +3 位作者 郑洁 林源 郭琳 陈溥言 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第2期1-5,共5页
构建共表达口蹄疫病毒(FMDV)VP1-2A基因和猪白细胞介素2(IL-2)基因的重组腺病毒,并研究重组病毒对小鼠特异性免疫的影响。将FMDV VP1-2A基因和猪IL-2基因先后克隆到腺病毒的穿梭载体pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP中,在受体菌中与腺病毒骨... 构建共表达口蹄疫病毒(FMDV)VP1-2A基因和猪白细胞介素2(IL-2)基因的重组腺病毒,并研究重组病毒对小鼠特异性免疫的影响。将FMDV VP1-2A基因和猪IL-2基因先后克隆到腺病毒的穿梭载体pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP中,在受体菌中与腺病毒骨架载体pAdenoVatorΔE1/E3同源重组。重组腺病毒质粒转染HEK-293A细胞,得到重组腺病毒rAd5VP1-2A-Po IL-2。MTT法检测重组IL-2的生物活性。用rAd5VP1-2A-poIL-2免疫接种小鼠,同时设免疫单独表达FMDV VP1基因的重组腺病毒rAd5VP1和空腺病毒的对照组。通过检测淋巴细胞增殖功能,特异性抗体分泌,IL-4和IFN-γ的表达水平衡量rAd5VP1-2A-poIL-2对小鼠特异性免疫应答的影响。结果显示,成功获得了rAd5VP1-2A-poIL-2,MTT法检测重组IL-2具有生物学活性。小鼠免疫试验结果显示,与rAd5VP1免疫组相比,rAd5VP1-2ApoIL-2免疫既能增强重组病毒诱导小鼠淋巴细胞增殖的能力,又能提高重组病毒诱导小鼠特异性抗体的水平。细胞因子检测结果显示,串联IL-2能促进重组病毒诱导Th1和Th2的分化。研究结果说明,rAd5VP1-2A-poIL-2可望成为口蹄疫的候选疫苗。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 重组腺病毒 VP1-2A基因 白细胞介素2
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