转录因子腺病毒E4启动子结合蛋白4在肿瘤中的研究进展

腺病毒E4启动子结合蛋白4(E4BP4)是一种含有碱性亮氨酸拉链的转录因子,在乳腺癌、肺癌、甲状腺癌、结直肠癌等多种恶性肿瘤中高表达,参与肿瘤的发生发展、转移和侵袭,但关于E4BP4在肿瘤研究中的相关综述较少。本文检索并总结相关文献,概述了E4BP4在不同肿瘤发生发展中的作用,为深入研究E4BP4在肿瘤中的作用机制以及基于E4BP4分子治疗靶点的探究提供理论支撑。

急性药物性肝损伤患者血清核因子E2相关因子2、血红素加氧酶-1、脂肪酸结合蛋白4、缺氧诱导因子1α表达意义及其与肝功能指标相关性研究

目的:探讨急性药物性肝损伤患者血清核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达意义及其与肝功能指标的相关性。方法:回顾性选取62例急性药物性肝损伤患者的临床资料作为病例组,另选80例健康体检者的临床资料作为对照组。比较两组血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α及肝功能指标水平,用Pearson相关性分析急性药物性肝损伤患者血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平与肝功能的相关性,并绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平联合检测对急性药物性肝损伤的诊断价值。结果:病例组血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α及谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)、总胆红素(TBIL)水平高于对照组(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,急性药物性肝损伤患者血清Nrf2水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈负相关(r=-0.763、-0.741、-0.685,均P<0.05);血清HO-1水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈负相关(r=-0.489、-0.524、-0.568,均P<0.05);血清FABP4水平与血清AST、TBIL水平呈正相关(r=0.509、0.512,均P<0.05);血清HIF-1α水平与血清ALT、AST、TBIL水平呈正相关(r=0.527、0.486、0.542,均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平联合检测诊断急性药物性肝损伤的曲线下面积(AUC)值为0.919,高于血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α水平单独检测(0.787、0.822、0.824、0.772,均P<0.05)。结论:血清Nrf2、HO-1、FABP4、HIF-1α在急性药物性肝损伤患者中呈高表达,其表达水平与患者肝功能损伤有关,且四者联合检测对急性药物性肝损伤的诊断价值更高。

C-myb蛋白、4E-BP1蛋白在NK/T细胞淋巴瘤中的表达与预后的关系

目的探讨转录激活因子Myb(C-myb)、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白-1(4E-BP1)蛋白在NK/T细胞淋巴瘤中的表达及与预后的关系。方法回顾性选取2017年12月至2019年12月在秦皇岛市第一医院治疗的NK/T细胞淋巴瘤患者34例作为观察组,同时选取腺样体肥大组织30例作为对照组。采用免疫组织化学法检测C-myb、4E-BP1表达,比较两组患者C-myb、4E-BP1表达情况,分析观察组C-myb、4E-BP1表达与临床病理关系。采用Spearman秩相关分析C-myb和4E-BP1表达相关性。随访患者总体生存时间,分析C-myb、4E-BP1表达与预后的关系。结果观察组C-myb和4E-BP1阳性表达率分别为55.88%和61.76%,明显高于对照组(10.00%、6.67%),差异均有统计学意义(P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅳ患者C-myb阳性表达率为91.67%,明显高于Ⅰ~Ⅱ患者(36.36%),差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、原发部位、B症状、国际预后指数(IPI)指数及淋巴结侵犯患者C-myb阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。IPI指数≤2分患者4E-BP1阳性表达率为76.00%,明显高于IPI指数>2分患者(22.22%),差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、原发部位、B症状、临床分期及淋巴结侵犯患者4E-BP1阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);C-myb和4E-BP1表达呈正相关(r_(s)=0.642,P<0.05);C-myb阳性表达和阴性表达患者中位总生存时间比较,差异无统计学意义(P>0.05);4E-BP1阳性表达患者中位总生存时间为24个月(95%CI:21.15~26.85),明显短于4E-BP1阴性表达患者的33个月(95%CI:32.20~33.80),差异有统计学意义(P<0.05)。结论NK/T细胞淋巴瘤中C-myb和4E-BP1蛋白表达上调,与临床分期、IPI指数有一定关系,其中4E-BP1表达与患者预后可能有一定联系。

结直肠癌组织中S6K1及4EBP1蛋白的表达及其与临床病理特征的关系

目的:探讨结直肠癌组织中S6蛋白激酶1(protein S6 kinase 1,S6K1)和真核翻译起始因子-4E结合蛋白1(eukaryotic translation initiation factor 4E binding protein 1,4EBP1)的表达情况及其与结直肠癌患者临床病理参数之间的关系。方法:收集济南军区总医院肿瘤科2007年1月至2009年12月收治的有完整临床病理资料、经手术切除的100例结直肠癌组织与40例正常癌旁结直肠黏膜组织、30例淋巴结转移灶组织、15例远处转移灶组织,用免疫组化方法检测上述组织中S6K1和4EBP1蛋白的表达,并分析其与患者临床病理参数之间的关系。结果:S6K1和4EBP1蛋白在正常结直肠黏膜组织中的阳性表达率分别为17.50%(7/40)和22.50%(9/40),而在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为74.00%(74/100)和79.00%(79/100),S6K1和4EBP1蛋白在癌和正常结直肠黏膜组织中的阳性表达率间差异均有统计学意义(P<0.01);在结直肠癌组织中,S6K1蛋白的阳性表达与结直肠癌患者的临床分期(r=0.31,P<0.01)及组织分化程度(r=0.25,P<0.05)显著相关。4EBP1蛋白的阳性表达与结直肠癌患者的临床分期(r=0.27,P<0.01)及组织分化程度(r=0.22,P<0.05)显著相关。S6K1和4EBP1蛋白高表达患者无疾病进展时间(progression free survival,PFS)更短(P<0.05),但S6K1和4EBP1蛋白表达水平对患者的总生存期(overall survival,OS)无影响(P>0.05)。S6K1和4EBP1蛋白两者的阳性表达呈正相关(r=0.25,P<0.05)。结论:S6K1及4EBP1蛋白在结直肠癌形成过程中有互相促进作用,与结直肠癌的发生发展及预后相关,可作为较为理想的分子靶点和预后评估指标。

血清PDCD4、ZEB1、G-17联合检测对早期胃癌的诊断价值

目的探究血清程序性细胞死亡因子4(PDCD4)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)、胃泌素-17(G-17)联合检测对早期胃癌(GC)的诊断价值。方法将本院收治的136例GC患者、82例萎缩性胃炎患者分别设为GC组、萎缩性胃炎组,另选取同期136例体检健康者设为对照组。比较各组血清PDCD4 mRNA、ZEB1 mRNA及G-17、糖类抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)水平。根据GC患者病情进展程度将其分为早期GC组(80例)和进展期GC组(56例),比较早期GC组、进展期GC组患者血清PDCD4 mRNA、ZEB1 mRNA及G-17、CA19-9、CEA水平;分析血清PDCD4 mRNA、ZEB1 mRNA、G-17、CA19-9、CEA单独或联合检测对早期GC的诊断价值。结果与对照组相比,萎缩性胃炎组、GC组患者血清PDCD4 mRNA表达水平降低(P<0.05),ZEB1 mRNA、G-17水平升高(P<0.05);与萎缩性胃炎组相比,GC组患者血清PDCD4 mRNA表达水平降低(P<0.05),ZEB1 mRNA、G-17、CA19-9、CEA水平升高(P<0.05)。进展期GC组患者血清PDCD4 mRNA表达水平低于早期GC组(P<0.05),ZEB1 mRNA、G-17、CA19-9、CEA水平高于早期GC组(P<0.05)。血清PDCD4、ZEB1、G-17联合诊断早期GC的曲线下面积(AUC)为0.946,高于三者单独诊断及CA19-9、CEA(P<0.05),联合诊断的灵敏度为86.25%,特异度为94.64%,诊断价值最高。结论GC患者血清PDCD4 mRNA表达水平较低,ZEB1 mRNA、G-17水平较高,血清PDCD4、ZEB1、G-17均可辅助诊断早期GC,且三者联合检测可能更有益于临床筛查早期GC。

基于mRNA翻译起始因子eIF4E结构的药物发现

目的探究mRNA翻译起始因子eIF4E的结构和作用机理,为靶向eIF4E的药物设计提供参考信息。方法综合性阐述eIF4E家族的三维结构,运用生物信息学方法分析eIF4E家族氨基酸序列的保守性;运用DoGSiteScorer软件预测eIF4E表面的结合口袋;运用LigPlot和PRODIGY软件,分析eIF4E与药物分子的作用模式、预测两者之间的结合自由能;最后运用Autodock Vina软件,针对eIF4E表面结合口袋,筛选ZINC数据库FDA批准的药物分子。结果eIF4E表面存在5个潜在的药物分子结合口袋,其中结合口袋P0体积最大,且大部分关键氨基酸都高度保守,为靶向eIF4E药物分子的主要结合口袋。结合口袋P2比较刚性,且氨基酸的保守性不高。P2适用于高通量筛选靶向eIF4E的药物分子,实验报道靶向P2的药物分子Z5D具有很强的亲和力。研究结果发现有5个FDA批准的药物分子与eIF4E具有较强的结合能力,可作为设计eIF4E抑制剂的先导化合物。结合口袋P3主要通过疏水作用结合药物分子,且与P0和P2之间存在协同效应。该协同效应表明可设计靶向eIF4E的联合用药方案。结论eIF4E家族高度保守的氨基酸参与稳定eIF4E的三维结构,是结合口袋的重要组成部分,严重影响eIF4E与药物分子之间的相互作用。eIF4E表面存在5个结合口袋,其中P2与药物分子Z5D具有很强的亲和力,可作为筛选药物分子的参考标准。有5个FDA批准的药物分子与eIF4E具有较强结合能力。

艾灸治疗后帕金森病大鼠黑质p-mtor、p-4EBP1及α-syn表达变化

目的观察艾灸治疗对帕金森病大鼠黑质磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mtor)、磷酸化真核细胞起始因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)及α-突触核蛋白(α-syn)表达的影响,探讨艾灸治疗帕金森病的作用机制。方法健康雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、帕金森病组、帕金森病艾灸组,每组15只。帕金森病组、帕金森病艾灸组采用颈背部皮下注射鱼藤酮法制备帕金森病模型,假手术组注射等浓度不含鱼藤酮的葵花油乳液,正常组不做处理。正常组、假手术组、帕金森病组不予艾灸;帕金森病艾灸组造模成功后选取足三里(双侧)、关元、风府穴施予艾灸治疗,1次/d,每次10 min,7 d为1个疗程,连续治疗2个疗程。然后对各组大鼠进行行为学评分;Western blotting检测各组大鼠黑质p-mtor、p-4EBP1,免疫组化法检测各组大鼠黑质α-syn。结果帕金森病组大鼠行为学评分与正常组和假手术组相比明显升高(P均<0.01);帕金森病艾灸组大鼠行为学评分较帕金森病组显著降低(P<0.01)。与正常组、假手术组相比,帕金森病组大鼠黑质p-mtor、p-4EBP1、α-syn表达量明显升高(P均<0.01);与帕金森病组相比,帕金森病艾灸组大鼠黑质p-mtor、p-4EBP1、α-syn表达量明显下降(P均<0.01)。结论艾灸足三里、关元、风府穴治疗帕金森病的作用机制可能是抑制了雷帕霉素靶蛋白/真核细胞起始因子4E结合蛋白通路的过度活化,遏止α-syn的过度表达,从而减轻过度表达的α-syn对多巴胺能神经元的毒性。

秦皮乙素经p70S6K/4E-BP1信号通路抑制人结肠癌细胞增殖和迁移的作用机制研究

目的:探讨秦皮乙素经核糖体蛋白S6激酶/4E结合蛋白-1(p70S6K/4E-BP1)信号通路抑制人结肠癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法:设HCT116细胞组、氟尿嘧啶组(20μg·ml^-1)、秦皮乙素低(40μg·ml^-1)、高(80μg·ml-1)剂量组,置于CO2培养箱(37℃、5%CO2、2%O2、93%N2)。以上各组每孔设6个平行样,培养72 h。培养结束后,MTT法测定细胞增殖情况,流式细胞仪测定细胞凋亡水平,Transwell Chamber测定迁移水平,RT-PCR法及WEST-BLOT法测定细胞p70S6K、4E-BP1mRNA与蛋白表达水平。结果:氟尿嘧啶组、秦皮乙素低、高剂量组存活率、穿膜数、P70S6K、4E-BP1 mRNA和蛋白水平显著低于HCT116细胞组,细胞凋亡率显著高于HCT116细胞组(P<0.05)。秦皮乙素低、高剂量组存活率、穿膜数、P70S6K、4EBP1 mRNA和蛋白水平显著高于氟尿嘧啶组,细胞凋亡率显著低于氟尿嘧啶组(P<0.05)。秦皮乙素低、高剂量组间各指标差异有统计学意义(P<0.05)。结论:秦皮乙素能抑制结肠癌HCT116细胞增殖、迁移,诱导HCT116细胞凋亡,其机制与秦皮乙素抑制p70S6K、4E-BP1mRNA和蛋白表达有关。

DBP及E4BP4对拓扑异构酶Ⅰ的转录调节作用

目的探讨DBP(D site of albumin promoter(albumin D-box)binding protein)及E4BP4(腺病毒E4启动子结合蛋白-4)是否参与拓扑异构酶Ⅰ(TOPOⅠ)的调节作用。方法运用荧光素酶转录活性测定DBP和E4BP4对mTopoⅠ的转录活性,凝胶阻滞分析检测DBP及E4BP4蛋白和TopoⅠ核酸相互作用。结果荧光素酶转录活性测定实验显示DBP及E4BP4均能促进TopoⅠ基因的转录活性;凝胶阻滞分析实验直接证实DBP及E4BP4与TOPOⅠ启动子区域D-box活性区域结合发挥活性作用。结论 DBP及E4BP4参与调节拓扑异构酶Ⅰ的表达。

HIF-1α/BNIP3信号通路在IL-4减轻小鼠脑缺血再灌注损伤中的作用及其与自噬的关系

目的:探究低氧诱导因子-1α/Bcl-2/腺病毒E1B-19k Da相互作用蛋白3(HIF-1α/BNIP3)在IL-4减轻小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)中的作用及其与自噬的关系。方法:将SPF级BALB/c小鼠采用随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注组(CIRI组)、IL-4组、HIF-1α抑制剂2ME2组(2ME2组)和IL-4+HIF-1α抑制剂2ME2组(IL-4+2ME2组)。采用线栓法构建CIRI组、IL-4组、2ME2组和IL-4+2ME2组大脑中动脉栓塞(MACO)模型,闭塞缺血60 min后再灌注24 h,假手术组除不阻断小鼠大脑中动脉外,其余操作同上。IL-4组、2ME2组、IL-4+2ME2组建模前30 min分别腹腔注射对应的IL-4C复合体溶液及尾静脉注射2ME2溶液。再灌注24 h后进行神经行为学评分,然后处死小鼠取脑组织。采用TTC染色检测脑梗死体积;干湿重法测定脑组织含水量;TUNEL染色检测细胞凋亡;透射电镜计数自噬小体;比色法测定SOD、MDA和ROS水平;Western blot检测HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ和Beclin-1表达。结果:与假手术组相比,CIRI组小鼠神经行为学评分、脑梗死体积、脑含水量、细胞凋亡率、自噬小体数量、MDA、ROS、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ和Beclin-1水平升高,SOD水平降低(P<0.05);与CIRI组相比,IL-4组神经行为学评分、脑梗死体积、脑含水量、细胞凋亡率、MDA、ROS水平降低,自噬小体数量、SOD、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ和Beclin-1水平升高(P<0.05);与IL-4组相比,2ME2组、IL-4+2ME2组神经行为学评分、脑梗死体积、脑含水量、细胞凋亡率、自噬小体数量、MDA、ROS、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ和Beclin-1水平降低,SOD水平升高(P<0.05)。结论:IL-4可通过激活HIF-1α/BNIP3信号通路,激活细胞自噬,减少细胞凋亡和氧化应激,从而减轻小鼠CIRI。

通络定喘汤干预哮喘儿童IL-4及受体基因多态性临床观察

目的:观察通络定喘汤干预急性期哮喘患儿血清白细胞介素-4 (IL-4)与总免疫球蛋白E (TIgE),及IL-4基因启动子区-589位点和白细胞介素-4受体(IL-4R) rs1801275的变化,探讨血清分子水平的变化与基因多态性之间关联性。方法:将90例患儿随机分为两组各45例,对照组予布地奈德联合复方异丙托溴铵治疗,治疗组在对照组基础上予通络定喘汤口服治疗。治疗前后检测血清IL-4与TIgE。全血基因组提取DNA,电泳、纯化,产物测序。返回结果后进行统计。结果:治疗后治疗组血清IL-4、TIgE水平降低,且高于对照组(P<0.05);IL-4-589 C/T和IL-4R rs1801275基因多态性分析,治疗组、对照组均以TT和AA基因型为主,组间差异无统计学意义(P>0.05);等位基因频率以T和A等位基因为主,且组间分布无统计学差异性(P>0.05)。治疗后IL-4水平在TT、AA基因型组下降幅度更高(P<0.05)。结论:通络定喘汤可以降低哮喘儿童血清IL-4、TIgE水平。在IL-4和IL-4R位点的基因型频率上,治疗组和对照组均以TT和AA高表达;治疗后血清IL-4含量在TT和AA基因型组下降幅度更高,提示中药疗效与某种特定基因型有相关性。

NKCC1、KCC2及mTOR相关蛋白4E-BP1在外伤性癫痫中的表达及意义

目的探讨主要表达于神经元细胞膜上的NA^+-K^+-2CL-转运体(NKCC1)、K^+-CL-转运体(KCC2)及表达于神经元细胞质中m TOR通路信号蛋白4E结合蛋白1(4E-BP1)在外伤性癫痫(PTE)癫痫灶中的表达及临床意义。方法收集2010年1月至2015年12月福建医科大学附属第一医院神经外科外伤性癫痫患者术后脑组织标本14例作为实验组;选取脑外伤患者行减压或清创手术获取的和各种病变患者手术入路不可避免要切除的正常脑组织8例作为对照组。用Western blot和实时定量荧光PCR(RT-PCR)检测14例PTE癫痫脑组织、8例对照组"正常脑组织"NKCC1、KCC2、4E-BP1的表达。结果 Western blot显示PTE病灶脑组织中4E-BP1、NKCC1相对灰度值(0.61±0.12、0.92±0.19)高于正常脑组织(0.27±0.05、0.67±0.66),差异有统计学意义(P<0.05)。PTE病灶脑组织中KCC2相对灰度值(0.58±0.99)低于正常脑组织(0.72±0.06),差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,PTE病灶脑组织中4E-BP1、NKCC1相对灰度值(30.84±1.32、27.81±1.92)高于正常脑组织(26.94±1.24、23.52±0.74),差异有统计学意义(P<0.05)。PTE病灶脑组织中KCC2相对灰度值(21.55±1.01)低于正常脑组织(24.59±1.02),差异有统计学意义(P<0.05)。PTE组中NKCC1/KCC2比值(1.29±0.11)高于对照组(0.96±0.26),差异有统计学意义(P<0.05)。结论NKCC1、KCC2和m TOR通路信号蛋白4E-BP1的异常改变,可能是外伤后脑组织组织学改变及反复癫痫发作的重要分子机制。

mTOR/4EBP1/HIF-1α/VEGF信号通路在哮喘小鼠肺组织中的表达及意义

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)/真核生物始动因子4E结合蛋白1(4EBP1)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路在哮喘小鼠中的表达及意义。方法 40只SPF级6~8周龄雌性Balb/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、布地奈德干预组及m TOR抑制剂(雷帕霉素)干预组,每组10只。卵清蛋白致敏激发建立哮喘小鼠模型,各干预组分别在激发前30 min给予雷帕霉素3 mg/kg腹腔注射或布地奈德混悬液1 mg雾化吸入,对照组和哮喘组以生理盐水代替。于末次激发24 h后处死小鼠,收集肺泡灌洗液(BALF),采用ELISA法测定HIF-1α、VEGF水平;取肺组织行苏木精-伊红(HE)染色观察其病理变化;免疫组化染色和Western blot法测定肺组织磷酸化的m TOR及4EBP1(p-m TOR及p-4EBP1)蛋白表达水平。Pearson法分析p-m TOR、p-4EBP1、HIF-1α、VEGF表达的相关性。结果与对照组相比,哮喘组气管及其周围炎性细胞浸润明显,分泌物增多;BALF中HIF-1α、VEGF水平显著升高(P<0.01);肺组织p-m TOR、p-4EBP1表达显著增加(P<0.01)。与哮喘组相比,各干预组气道炎症浸润明显减轻,分泌物减少;BALF中HIF-1α、VEGF水平明显下降(P<0.01);肺组织p-m TOR、p-4EBP1表达显著降低(P<0.01)。对照组及两干预组间相比上述指标变化差异均无统计学意义(P>0.05)。哮喘组小鼠p-m TOR、p-4EBP1、HIF-1α、VEGF表达水平两两互呈正相关(P<0.05),而对照组及两干预组各指标间无相关性(P>0.05)。结论哮喘发生时p-m TOR、p-4EBP1、HIF-1α、VEGF可能协同参与了哮喘的发病过程。雷帕霉素能阻断这一过程,可能作为治疗哮喘的新靶点。

1,25-二羟基维生素D_3对人肾小球系膜细胞增殖、周期的影响及其机制

目的观察1,25-二羟维生素D_3(1,25-(OH)_2D_3)对人肾小球系膜细胞株增殖及细胞周期的影响,并探讨其可能作用机制。方法对数生长期人肾小球系膜株细胞分为A、B、C、D组,分别加入终浓度为10^(-8)mol/L的1,25(OH)_2D_3+含5%FBS的L-DMEM培养基、5 mg/L雷帕霉素+含5%FBS的L-DMEM培养基、5 mg/L雷帕霉素+终浓度为10^(-8)mol/L 1,25(OH)_2D_3+含5%FBS的L-DMEM培养基。给药48 h时观测各组细胞增殖及细胞周期分布,检测各组细胞真核细胞翻译起始抑制因子4E结合蛋白(4E-BP1)、磷酸化4E-BP1蛋白。结果给药48h时A、B、C组的细胞凋亡率分别为38.02%、55.62%、99.23%,组间比较,P均<0.05。给药48 h时,A、B、C组G_1期细胞所占比例明显高于D组(P均<0.05),S、G_2/M期细胞所占比例明显低于D组(P均<0.05);B、C组G_1期细胞所占比例明显高于A组(P均<0.05),S、G_2/M期细胞所占比例明显低于D组(P均<0.05);C组G_1期细胞所占比例明显高于B组(P均<0.05),S、G_2/M期细胞所占比例明显低于B组(P均<0.05)。A、B、C组细胞4EBP1、磷酸化4E-BP1蛋白相对表达量及磷酸化4E-BP1/4E-BP1均低于D组(P均<0.05);B、C组细胞4E-BP1、磷酸化4E-BP1蛋白相对表达量及磷酸化4E-BP1/4E-BP1均低于A组(P均<0.05);C组细胞4E-BP1、磷酸化4EBP1蛋白相对表达量及磷酸化4E-BP1/4E-BP1均低于B组(P均<0.05)。结论 1,25(OH)_2D_3可抑制人肾小球系膜细胞株的增殖,阻滞细胞周期于G_1期,其机制可能为1,25-(OH)_2D_3下调4E-BP1的表达。

神经元细胞KCC2、NKCC1及4E-BP1在外伤性癫痫致痫灶中的表达及其临床意义

目的探讨神经元细胞KCC2、NKCC1及4E-BP1在外伤性癫痫致痫灶中的表达及其临床意义。方法选择2017年1月-2019年6月本院接诊外伤性癫痫患者37例纳入研究组,经手术切除癫痫致癫灶;同期,另选择于单纯脑外伤患者40例纳入对照组,分别于脑外伤后6 h内手术获取脑组织样本。通过蛋白质印迹法测定外伤性癫痫致癫灶中KCC2、NKCC1、4E-BP1表达,并利用RT-PCR法测定外伤性癫痫致癫灶中KCC2 m RNA、NKCC1 m RNA、4E-BP1m RNA相对表达量。结果蛋白质印迹法检测显示:研究组患者的神经元细胞KCC2相对灰度值低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);研究组患者的神经元细胞NKCC1、4E-BP1相对灰度值均高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);RT-PCR检测显示:研究组患者的致癫灶中KCC2 m RNA相对表达量低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);研究组患者的致癫灶中NKCC1 m RNA、4E-BP1 m RNA相对表达量均高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论神经元细胞KCC2、NKCC1及4E-BP1为脑外伤后患者脑组织的组织学改变、癫痫反复发作主要分子机制;KCC2在外伤性癫痫致癫灶中表达异常降低,而神经元细胞NKCC1、4E-BP1的表达异常增高,可以作为外伤性癫痫致痫灶靶向诊断因子。

佐剂性关节炎大鼠滑膜E2F-1、RB的表达及肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对其影响

目的:研究肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜腺病毒E2启动子结合因子-1(E2F-1)、视网膜母细胞瘤蛋白(RB)表达的影响,从而探讨其对类风湿性关节炎新的治疗机制。方法:Wistar大鼠随机分为4组:N组、AA14组、AA28组和T组。AA14组大鼠于造模14d后处死;AA28组大鼠于造模28d后处死;T组于造模后第14天开始予肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白治疗,治疗14d后处死。免疫组化检测各组大鼠滑膜E2F-1,RB蛋白的表达。HE染色观察各组滑膜组织病理变化。结果:AA14、AA28组滑膜组织在病理学总积分较N组明显提高,AA28组与AA14组、AA28组与T组两组之间也有明显差异;N组滑膜中E2F-1蛋白有少量表达,AA14与AA28组E2F-1蛋白表达均较N组有明显增加(P<0.01),与AA14组比较,AA28组E2F-1蛋白表达增加更明显(P<0.01),与AA28组比较,T组E2F-1蛋白表达明显降低(P<0.01);AA14与AA28组RB蛋白表达均较N组降低(P<0.01),AA28组RB蛋白表达降低更明显,2组间差异有极显著性(P<0.01),与AA28组比较,T组RB蛋白表达增高(P<0.01);AA滑膜上E2F-1的表达和滑膜的病理变化呈正相关,而RB与滑膜的病理变化呈负相关;E2F-1和RB在AA滑膜组织上的表达呈负相关。结论:E2F-1、RB在大鼠佐剂性关节炎病程发生发展中发挥重要作用。肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白能下调E2F-1表达,上调RB表达,这可能是其治疗RA的又一个可能机制。

亚低温治疗通过上调IL-10表达水平降低脑出血后MODS发生率

目的探讨亚低温治疗对脑出血患者多器官功能障碍综合征（MODS）发生的作用及其作用机制。方法选择自2014年3月至2015年12月上海市东方医院神经外科重症监护病房住院的48例脑出血患者，依据术后体温分为亚低温治疗组（n=27）和常规治疗组（n=21），统计2组MODS的发生率，并在术后1、2、5、7、14、21 d时，使用ELISA法检测患者血清中IL-10的表达水平，使用Simple Western检测患者外周血淋巴细胞中转录因子腺病毒E4启动子结合蛋白-4（E4BP4）的表达水平。结果亚低温治疗组MODS的发生率为11.11%，而常规治疗组为28.57%，差异有统计学意义（P〈0.05）。术后1、2、5、7、14、21 d时亚低温治疗组IL-10、E4BP4表达水平均明显高于常规治疗组，差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论亚低温治疗可以有效降低脑出血患者MODS的发生率；IL-10在亚低温治疗降低MODS发生中可能有一定的作用，机制与转录因子E4BP4上调IL-10的表达有关。

miR-200c的分子生物学研究进展

微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是在真核生物中发现的一类内源性的、具有调控功能的非编码RNA,其中miR-200家族成员被发现广泛参与了生物体的多种生理病理过程,特别是miR-200c被证实与肿瘤的上皮间质转化过程密切相关,而且对多种肿瘤的研究表明,miR-200c的分子生物学地位突出,参与了包括TGF-β信号通路、Notch信号通路、MAPK信号通路、TLR4/NF-κB信号通路、PI3K-AKT信号通路等多个经典的细胞内信号转导机制,同时还参与构成了miR-200c/锌指E盒结分蛋白(ZEB)双向负反馈回路,对肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡、侵袭等过程有着非常大的影响。细胞间的增殖、凋亡等机制存在一定的共性,本文对miR-200c的分子生物学研究进展作一综述,希望通过对miR-200c分子生物学的综合认识,能为miR-200c向其他学科的拓展研究提供一定的启发。

苓桂术甘汤治疗变应性鼻炎临床研究

目的:观察苓桂术甘汤治疗变应性鼻炎的临床疗效及对血清炎症因子的影响。方法:将86例变应性鼻炎患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组43例。对照组43例给予西替利嗪治疗,观察组43例给予苓桂术甘汤治疗。观察两组患者治疗前后症状体征评分、血清炎症因子〔包括血清免疫球蛋白E(serum immunoglobulin E,lg E)、C反应蛋白(Creactionprotein,CRP)以及白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)〕水平、不良反应情况和两组患者临床疗效。结果:治疗后两组患者的症状体征得分明显降低,且观察组的改变程度明显超过对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后血清炎症细胞因子Ig E、CRP以及IL-4水平较治疗前均明显降低,且观察组降低幅度明显大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);经治疗后观察组有效率为90.7%,对照组有效率为60.5%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组在治疗过程中出现不良反应3例,主要表现为腹痛、头晕;对照组出现不良反应11例,主要表现为局部红斑、瘙痒、恶心呕吐、腹痛腹泻、乏力等,两组不良反应比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:苓桂术甘汤治疗变应性鼻炎临床疗效显著,能有效降低患者血清炎症因子水平,且不良反应较少。