糖原合酶激酶3β和腺瘤性结肠息肉病蛋白在气道上皮细胞机械损伤修复过程的时空分布

为了探讨糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)和腺瘤性结肠息肉病(adenomatous polyposis coli, APC)蛋白在气道上皮细胞(airway epithelial cells,AECs)损伤和修复中的作用,我们采用机械划线损伤的方法建立体外气道上皮损伤修复模型,采用Western blot、免疫荧光双标共聚焦成像和免疫沉淀的方法观察损伤修复过程中APC蛋白和GSK3β在AECs中表达及分布的动态变化。结果显示:(1)用Western blot方法观察到划线损伤0．5 h后即有GSK3β磷酸化增强(P< 0．05),6 h达到高峰(P<0．05),持续到12 h(P<0．05),24 h开始下降,而GSK3β总量大致保持一致。(2)在免疫荧光双标共聚焦成像实验中,划线损伤0 h组APC蛋白主要表达于胞浆,而划线损伤6 h后APC蛋白主要聚集于损伤前沿区的迁移活跃细胞。(3)免疫共沉淀的实验结果显示,划线损伤0 h时GSK3B和APC蛋白能共同沉淀,但在划线损伤6 h之后,两者发生了分离。以上结果表明:划线损伤后AECs立即启动修复过程,此时GSK3B的活性被抑制,促使APC蛋白游离出来;游离出来的APC蛋白则与微管正极结合,增加了微管的稳定性,从而调节细胞骨架运动,促进气道上皮的损伤修复。

腺瘤样息肉病蛋白在胃腺瘤和胃癌中的表达及其意义

目的:观察家族性腺瘤样息肉病(APC)蛋白在正常胃黏膜、胃腺瘤和胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌发生、发展中的作用。方法:取得经胃镜活检病理检查证实的78例患者的不同胃组织标本,包括24例正常胃黏膜、24例胃腺瘤性息肉(胃腺瘤)和30例胃腺癌组织,以免疫组化ABC法检测标本中APC蛋白的表达。结果:正常对照组胃黏膜、胃腺瘤、胃癌组织APC阳性表达率呈递减趋势,经两两比较,差异均有显著性统计学意义(P<0.05)。高级别上皮内瘤变APC蛋白阳性表达率虽然低于低级别上皮内瘤变,但差异无统计学意义(P=0.697)。结论:在胃腺瘤组织中APC基因表达已出现异常,该基因的失活在胃癌的发生、发展中及胃腺瘤的发生中起重要作用。

结肠腺瘤性息肉病蛋白通过与SMAP/KAP3相互作用与微管结合

结肠腺瘤性息肉病基因 (adenomatouspolyposiscoli,APC)的突变导致家族性结肠息肉腺瘤病和散发性结肠癌 ,APC基因编码一个具有多个结构域、多种磷酸化状态的大分子蛋白质 .APC蛋白可通过C段直接或间接与微管结合 ,同时还可以通过中段与微管结合 ,但其结合的机制目前还不清楚 .为进一步研究APC与其他蛋白质的相互作用 ,利用酵母双杂交技术运用APC中段 (15 0 0bp～ 4 80 0bp)构建诱饵质粒 ,筛选人胎脑cDNA文库 ,得到一个与APC相互作用的蛋白SMAP/KAP3,SMAP/KAP3是驱动蛋白KIF3A/ 3B的相关蛋白 .通过免疫共沉淀和双色免疫荧光共定位的方法 ,证实了APC与SMAP/KAP3在体内的相互作用 ,提示APC可能通过SMAP/KAP3

腺瘤样结肠息肉易感基因蛋白截短与大肠腺瘤及大肠癌早期诊断关系

目的探讨腺瘤样结肠息肉(APC)易感基因截短表达水平在大肠腺瘤及大肠癌早期诊断中的价值。方法 34例大肠癌病理标本作为大肠癌组、28例大肠腺瘤标本作为大肠腺瘤组及同期正常大肠组织标本15例作为正常组。3组分别采用蛋白截短检测技术,比较APC基因蛋白截短表达差异。结果正常组APC蛋白截短(+)为0%,大肠腺瘤组42.86%,大肠癌组47.06%,大肠腺瘤组和大肠癌组差异不显著(P>0.05);正常组与大肠腺瘤、大肠癌组差异显著(χ2=8.917、P=0.003,χ2=10.481、P=0.001);管状腺瘤组织的APC蛋白截短(+)(75.00%),显著高于绒毛腺瘤组织(20.00%)和混合腺瘤组织(16.67%)(P<0.05)。结论 APC蛋白截短(+)表达在不同大肠组织中表达具有一定的差异性,在大肠肿瘤的早期阶段APC蛋白截短(+)表达就存在差异,对早期诊断大肠肿瘤病变具有一定的意义。

结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌患者中的突变热点研究

目的探讨结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌中的突变热点及对肿瘤的影响。方法通过公共数据库c Bioportal调取结肠癌突变位点结果,根据其中的一段突变热点区域,构建对应结肠腺瘤样息肉病基因过表达载体及RNAi,采用Western blot检测并证实此区域的功能。结果结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌中的突变率高达73.9%,显著高于其他肿瘤（P〈0.05）;其中3 454~4 662 bp区域突变发生率占总突变次数的56.1%;构建RNAi后在正常肠上皮细胞中发现β-catenin、CD44、Ki67出现显著上调;在结肠癌细胞中过表达野生型APC（wt-APC）,缺失APC（hotdelAPC）的情况下发现,wt-APC可以有效抑制c-myc、β-catenin、CD44、Ki67等致癌基因的表达,但hotdel-APC不能。结论APC基因中3 454~4 662 bp这段区域编码的蛋白可能在结肠癌发生过程中发挥重要作用。

结肠腺瘤病合并回肠良性淋巴样息肉病一例

结肠腺瘤病合并回肠良性淋巴样息肉病一例张群丽周金良患者女，２０岁，间隙性便血２年，鲜红色，不与大便混合，近１月便血次数增多，每次１５０ｍｌ左右，曾做纤维肠镜检查，于３０ｃｍ处受阻，诊断为“多发性肠息肉”，患者９岁时曾摘除４枚直肠息肉，余未见异常。父母...

结肠腺瘤性息肉病蛋白在二甲肼诱导大鼠大肠癌中的表达和意义

目的结肠腺瘤性息肉病蛋白(adenomatous polyposis col,APC)在二甲肼诱导大鼠大肠癌中的表达及意义。方法 60只雄性SD大鼠,随机分为对照组(皮下注射生理盐水,20只)和模型组(皮下注射二甲肼,40只),两组均在注射25周后停药,继续喂养5周,于饲养后第10、16、20、25周末,分别处死2只大鼠,其余大鼠于饲养后第30周末处死。HE染色基础上,光镜下观察病理变化;应用蛋白印迹法(western blot)、免疫组织化学法(IHC),检查大肠癌、大肠腺瘤、正常大肠粘膜组织中APC蛋白表达情况。结果于第16、20、30周,与对照组相比,模型组大鼠体重明显降低[(326.4±18.3)g与(322.1±12.8)g;(330.7±12.1)g与(315.0±12.2)g;(341.7±10.2)g与(310.0±8.4)g)(P均<0.05);模型组大鼠共获取大肠腺瘤组织27个,大肠癌组织39个;对照组除2只大鼠大肠粘膜局部增厚外,未见肿瘤病灶;大肠腺瘤、大肠癌组织与对照组中的APC相比,其阳性表达率明显降低(35%与90%;10%与90%)(P均<0.05);通过western blot检测发现,APC蛋白在正常大肠粘膜组织中表现为分子量约300KD的特异性蛋白条带,而在大肠癌、大肠腺瘤组织中没有该特异性条带的表达。结论 APC在正常大肠粘膜组织中强表达,而在大肠腺瘤、大肠癌组织中低表达或不表达,表明APC与大肠癌的发生、发展存在密切相关性,可能是大肠癌的重要肿瘤标志物。

脑胶质瘤中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-联蛋白,结肠腺瘤性息肉病蛋白的表达及相关性分析

目的探讨脑胶质瘤中Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-联蛋白(β-catenin)、结肠腺瘤性息肉病蛋白(APC)的表达水平与组织学病理分级之间的关系,及其在胶质瘤发生发展过程中的作用。方法采用免疫组化S-P法检测β-catenin、APC蛋白在30例不同级别脑胶质瘤、10例正常脑组织中的表达,计算阳性细胞百分率,用统计学方法分析人脑胶质瘤中β-catenin、APC蛋白表达之间的相关性及其两者与胶质瘤不同分级之间的关系。结果β-catenin在脑胶质瘤组织的阳性表达率是70.0%,而在正常脑组织中不表达,两者间有显著差异(P<0.01);β-catenin蛋白在低级别胶质瘤和高级别胶质瘤中的阳性表达率分别是33.3%、93.3%,两者之间有统计学意义(P<0.05)。胶质瘤组织与正常脑组织中APC蛋白阳性表达率分别是20.0%、100%,两者有统计学意义(P<0.01);APC蛋白在低级别胶质瘤中的阳性表达率为40.0%,而高级别胶质瘤中无表达,两者之间有显著差异(P<0.05)。β-catenin、APC蛋白在脑胶质瘤中的表达呈负相关(P<0.01)。结论 (1)在脑胶质瘤组织中,β-catenin蛋白表达明显增高,β-catenin蛋白阳性表达与胶质瘤恶性程度相关;(2)胶质瘤组织中,APC蛋白的阳性表达率明显低于其在正常脑组织中的表达,与胶质瘤恶性度呈负相关;(3)在脑胶质瘤组织中,β-catenin与APC蛋白表达呈负相关。

结肠腺瘤样息肉蛋白(APC)基因表达与染色体数目异常胚胎关系

目的:探讨结肠腺瘤样息肉蛋白(APC)对染色体分离的影响。方法:采用荧光定量PCR和免疫组化比较APC基因和蛋白在自然流产绒毛核型分析异常胚胎细胞(实验组)中的表达,并以人工流产绒毛核型分析正常胚胎细胞为对照(对照组)。结果:APCmRNA拷贝数/GAPDHmRNA拷贝数均值研究组为0.098±0.035,对照组为0.009±0.005。免疫组织化学结果表明其在实验组中的表达也高于其在对照组中的表达,P<0.01。结论:APC基因的高表达可能导致染色体分离异常。

结肠腺瘤性息肉病蛋白在大脑皮层早期发育中的作用

结肠腺瘤性息肉病(adenomatous polyosis coli,APC)蛋白是一个大型的多功能蛋白,在发育的大脑皮层中,增殖的细胞可以表达APC,且当细胞向皮层板迁移的时候它的表达会增加。其对于Wnt/β-catenin信号,细胞骨架动态以及细胞极性十分重要。本文对APC在大脑皮层早期发育中的作用进行了总结。APC在大脑皮层早期发育过程中是调节细胞数目,核迁移运动,细胞极性以及细胞类型的特化所必须的。

结肠腺瘤性息肉病基因蛋白在二甲肼诱导大鼠大肠癌过程中的表达

目的观察结肠腺瘤性息肉病基因(APC)蛋白在二甲肼诱导大鼠大肠癌形成过程中的表达,为大肠癌的靶向治疗和早期诊断提供新思路。方法将雄性SD大鼠60只随机分为正常对照组和模型组,应用免疫印迹法和免疫组织化学SP法,检测20例大肠癌组、20例大肠腺瘤组及20例正常对照组大鼠大肠黏膜组织中APC蛋白的表达情况。结果免疫组织化学检测结果显示,APC蛋白在正常对照组大鼠大肠黏膜组织中均呈强阳性表达,在大肠腺瘤和大肠癌组大鼠大肠组织中未见表达;免疫蛋白印迹检测结果显示,正常大肠黏膜组织均表现为包含有1条相对分子质量约为300×103的特异性条带,而大肠癌和大肠腺瘤黏膜组织却均不含有该条带。结论APC蛋白在大肠腺瘤和大肠癌组织中呈不表达状态,而在正常大肠黏膜组织中呈强表达状态,提示其与大肠癌的发生、发展过程关系密切,可望成为大肠癌的肿瘤标志物。

β-连环蛋白和腺瘤性结肠息肉病蛋白在小鼠牙胚发育中的表达及相互关系的研究

目的观察β-连环蛋白(β-catenin)和腺瘤性结肠息肉病(APC)蛋白在胎鼠下颌第一磨牙牙胚中的表达,探讨两者的作用及相互关系。方法将昆明小鼠按雌雄比2∶1合笼,发现阴栓视为妊娠,定为E0.5d,制作E13.5d、E14.5d、E15.5d、E16.5d、E17.5d胎鼠下颌第一磨牙石蜡切片,免疫组化SP法检测β-catenin和APC蛋白的表达与分布。结果β-catenin在牙胚蕾状期、帽状期、钟状期上皮内均有表达,且随着发育的成熟,其表达逐渐增强,着色于细胞膜、质及核。APC蛋白在蕾状期牙蕾上皮呈强阳性表达,随着牙胚发育其表达逐渐减弱,着色在细胞膜、质。β-catenin与APC蛋白有显著的负相关性(P<0.01)。结论β-catenin表达于牙胚早期细胞核及细胞质内,提示其参与了牙胚早期的细胞增殖过程。β-catenin与APC蛋白的时空表达有重叠现象,并呈显著负相关,这符合WNT经典信号通路中两者的作用关系。

结肠镜对家族性腺瘤性息肉病家系成员筛选的意义

目的：探讨结肠镜对家族性腺瘤性息肉病家系成员筛选的价值。方法：回顾我科1985-2002年通过结肠镜对23个家族性腺瘤性息肉病患者家系共38例亲属进行筛选，观察息肉的量、形态、分布以及病理等特征，分析结肠镜对家系亲属筛选的作用。结果：38例对象中发现有16例大肠内有息肉生长，筛选阳性率达42．1％；1例腺瘤呈重度不典型增生，占6．3％；左半结肠、直肠内息肉分布密集。结论：结肠镜是家族性腺瘤性息肉病家系成员筛选安全、可靠的方法。

赵智强教授辨治结肠腺瘤样息肉学术经验初探

[目的]总结赵智强教授辨治结肠腺瘤样息肉的学术经验。[方法]通过跟随赵智强老师临诊和研习老师治疗结肠腺瘤样息肉的病案,从病因病机、证候诊断及治疗大法、遣方用药等方面总结老师辨治结肠腺瘤样息肉的经验,并附医案说明。[结果]赵老师认为结肠腺瘤样息肉的病因与外邪侵袭、饮食、情志、体质、脾胃虚弱、烟毒、他病影响有关,病机关键是痰瘀毒滞、蕴结肠腑、传导失司,认为本病证候诊断区别于他病,应包括病性证素、病位证素与病态等,病性诊断应借助现代医学的内窥镜、病理学检查资料等,治疗以解毒抗癌防癌变为核心,辅以软坚散结、调理脏腑,并根据患者临床表现随症加减。[结论]赵教授治疗结肠腺瘤样息肉经验丰富,特色突出,值得临床推广。

腺瘤性结肠息肉(APC)蛋白截短突变对MDCK细胞中细胞-基质和细胞-细胞间黏附的影响(英文)

目的探讨腺瘤性结肠息肉(adenomatous polyposis coli,APC)蛋白截短突变对MDCK细胞中细胞-细胞和细胞-基质之间黏附的影响及机制。方法应用细胞黏附测定实验检验MDCK-N2-APC及MDCK-GFP稳定表达株系的黏附率。相对于对照细胞MDCK-GFP,MDCK-N2-APC细胞为稳定突变株,表达APC蛋白N端449-781氨基酸片段。免疫荧光染色、荧光定量PCR及Western blot测定在细胞黏附过程中发挥重要作用的黏附分子(CD29、E-cadherin)的表达情况。结果与对照细胞相比,N2细胞-基质之间黏附率增加,平均升高约180%,而细胞-细胞间黏附率约下降30%。在MDCK-N2-APC细胞中CD29的表达水平增加,E-cadherin的表达水平降低。结论 APC蛋白在细胞-基质及细胞-细胞间黏附中发挥重要作用。其截短突变片段N2可能通过改变CD29和E-cadherin等黏附分子的表达量来影响细胞黏附,进而影响细胞的侵袭和浸润。

腺瘤样结肠息肉易感基因（APC）及结直肠癌缺失基因（DCC）基因甲基化在肺癌早期诊断的意义

目的探讨腺瘤样结肠息肉易感基因（APC）及结直肠癌缺失基因（DCC）基因甲基化在肺癌早期诊断的意义。方法对245例肺癌患者、150例非恶性肺病患者和40例健康志愿者抽取晨起空腹外周血，应用甲基化特异性PCR法检测APC和DCC启动子区甲基化状态。并对其与临床病理特征等进行相关性分析。结果①肺癌组患者外周血中APC及DCC启动子甲基化阳性率分别为26．53％（65／245）和36．33％（89／245）；非肺癌组患者外周血中APC及DCC启动子甲基化阳性率分别为2．67％（4／150）和8．00％（12／150）；健康志愿者外周血中APC及DCC启动子甲基化阳性率为0；肺癌组与非肺癌组、健康志愿者组相比，APC和DCC基因甲基化检测结果比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。②APC及DCC基因甲基化联合检测，诊断肺癌灵敏度为52．65％，特异度为89．33％，联合检测与单独APC检测相比，敏感度与特异度差异均有统计学意义（P〈0.01）；联合检测与单独DCC检测相比，敏感度有统计学差异（P〈0．01），但是特异度差异不明显（P〉0.05）；③甲基化检测结果与患者性别、年龄、病理类型、病理分化程度、临床TNM分期等没有相关性（P〉0．05）。结论APC和DCC基因甲基化与非小细胞肺癌的发生发展密切相关，可以作为肺癌早期诊断标志物之一。

代谢综合征相关因素与结肠瘤样息肉发病的回归分析

目的探讨代谢综合征因素如腰围、空腹血糖、三酰甘油、血压及高密度脂蛋白等与结肠瘤样息肉发病的关系。方法回顾2005年3月—2009年11月接受结肠镜检查的278例患者临床资料,统计分析与发生结肠瘤样息肉相关的代谢综合征因素。结果 278例患者中符合代谢综合征诊断的有117例(研究组),其余为对照组。研究组平均年龄明显大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而代谢综合征相关因素中除舒张压外,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。经Logistic回归分析,发现腹型肥胖、高血压病和高三酰甘油血症是结肠瘤样息肉发病的危险因素。结论代谢综合征因素中腰围、三酰甘油和高血压病是结肠瘤样息肉发病的可能危险因素,该类患者需进行结肠瘤样息肉筛查。

粘蛋白在胆囊腺瘤样息肉中的表达及意义

目的 研究 4种粘蛋白在胆囊腺瘤样息肉中的表达规律并探讨其意义。方法 采用粘蛋白 1(Mucin1,MUC1)、粘蛋白 2(MUC2 )、粘蛋白 3 (MUC3 )及粘蛋白 5AC(MUC5AC)的单克隆抗体 ,应用免疫组化和Westernblot检测对照组胆囊 2 4例 ,胆囊腺瘤样息肉19例。结果 MUC1、MUC2及MUC5AC免疫组化及Westernblot表达在胆囊腺瘤样息肉组较对照组显著增高 (P <0 .0 1) ,而MUC3在腺瘤样息肉组较对照组显著降低 (P <0 .0 1)。结论 粘蛋白在胆囊腺瘤样息肉中呈现非同步表达 ,可能与其属癌前病变有关。

结肠腺瘤性息肉蛋白、β-连接素和E-钙黏素在大肠癌中的表达

目的:探讨结肠腺瘤性息肉蛋白(APC)、β-连接素(β-catenin)和E-钙黏素(E-cadherin)在大肠癌发生、发展中的作用。方法:采用免疫组化方法检测30例正常大肠黏膜、30例大肠腺瘤、10例大肠腺瘤恶变及50例大肠癌组织中APC、β-catenin和E-cadherin蛋白的表达情况。结果:大肠癌和大肠腺瘤恶变APC阳性率分别为44.0%,40.0%,显著低于大肠腺瘤(86.7%)和正常大肠黏膜(100%)。大肠癌、大肠腺瘤恶变和大肠腺瘤β-catenin胞浆(胞核)异位表达率分别为62.0%,50.0%,30.0%,显著高于正常大肠黏膜(0%),大肠癌β-catenin异位表达率显著高于大肠腺瘤。大肠癌中β-catenin、E-cadherin膜表达缺失率为46.0%,34.0%,显著高于大肠腺瘤(10.0%,6.67%)和正常大肠黏膜(0%,0%),且与大肠癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期有关。APC蛋白表达与大肠癌组织分化程度有关。大肠癌中β-catenin异位表达与APC阳性表达呈负相关关系;β-catenin与E-cadherin胞膜阳性表达呈正相关关系。结论:APC失表达和(或)β-catenin异位表达与大肠癌的发生密切相关,可能是大肠癌发生的早期事件;β-catenin、E-cadherin膜表达缺失与大肠癌的侵袭、转移有关。

食管鳞癌组织中结肠腺瘤息肉蛋白的表达及其临床意义

目的:本研究探讨食管鳞状细胞癌组织及正常食管黏膜组织中结肠腺瘤息肉蛋白(APC)表达情况,并分析其与食管鳞状细胞癌临床病理及5年生存率的关系。方法:236例食管癌患者来自河南林州市。利用组织微阵列技术制作组织芯片,采用免疫组化ABC法,分析236例食管鳞癌组织和相应正常食管黏膜组织中APC蛋白的表达情况,探讨其与食管鳞癌患者年龄、性别、肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移、TMN分期、大体分型和5年生存率的关系。结果:APC蛋白表达主要表现在胞浆中出现黄棕色颗粒,食管鳞癌组织中APC蛋白阳性表达率明显低于正常食管黏膜组织中的阳性表达率(32.2%vs 92.9%,P<0.05);APC蛋白低表达与TMN分期相关(P=0.002),与年龄、性别、肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移、和大体分型无关(P>0.05);APC蛋白低表达食管鳞癌患者的5年生存率明显低于APC蛋白正常表达的食管鳞癌患者(P<0.001)。结论:APC基因表达缺失可能与食管鳞癌的发生、发展相关,导致5年生存率下降,因此上调APC可能是治疗食管鳞状细胞癌(ESCC)患者的新方向,检测APC可能为食管癌预后判断提供依据。