结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌患者中的突变热点研究

目的探讨结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌中的突变热点及对肿瘤的影响。方法通过公共数据库c Bioportal调取结肠癌突变位点结果,根据其中的一段突变热点区域,构建对应结肠腺瘤样息肉病基因过表达载体及RNAi,采用Western blot检测并证实此区域的功能。结果结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌中的突变率高达73.9%,显著高于其他肿瘤（P〈0.05）;其中3 454~4 662 bp区域突变发生率占总突变次数的56.1%;构建RNAi后在正常肠上皮细胞中发现β-catenin、CD44、Ki67出现显著上调;在结肠癌细胞中过表达野生型APC（wt-APC）,缺失APC（hotdelAPC）的情况下发现,wt-APC可以有效抑制c-myc、β-catenin、CD44、Ki67等致癌基因的表达,但hotdel-APC不能。结论APC基因中3 454~4 662 bp这段区域编码的蛋白可能在结肠癌发生过程中发挥重要作用。

肝细胞核因子-1α基因突变协同腺瘤样结肠息肉病基因突变对家族性腺瘤性息肉病细胞增殖的影响

目的探讨肝细胞核因子-1α(HNF-1α)基因突变协同腺瘤样结肠息肉病基因(APC)突变对家族性腺瘤性息肉病(FAP)细胞增殖的影响。方法利用RNA干扰技术,构建HNF-1α基因突变协同APC突变细胞模型,通过MTT法、克隆形成、划痕试验、细胞迁移、细胞侵袭及致瘤等实验观察HNF-1α基因突变协同APC突变对FAP细胞的增殖能力。结果与单突变组比较,HNF-1α基因突变协同APC突变组FAP细胞具有较强的细胞克隆形成、细胞迁移、细胞侵袭及致瘤性。结论HNF-1α基因协同APC突变促进了FAP细胞增殖。

欣胃颗粒及其拆方对胃癌前病变大鼠Axin、APC基因表达影响的研究

目的观察欣胃颗粒及其拆方对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜中轴蛋白(Axin)、结肠腺瘤样息肉病基因(APC)表达的影响。方法选取360只Wistar健康雄性大鼠,按照随机数字表法将大鼠随机分为空白组、模型组、胃复春组和中药组,其中中药组又分为中药单法组、中药双法组、中药三法组和中药四法组。建立胃癌前病变大鼠模型,造模成功后给予各组大鼠相应处理,观察各组大鼠胃黏膜组织中Axin、APC基因的表达情况。结果与空白组比较,模型组、胃复春组和中药各组大鼠胃黏膜组织中AxinmRNA、APCmRNA的相对表达量均降低(P﹤0.05);与模型组比较,胃复春组和中药各组大鼠胃黏膜组织中AxinmRNA、APCmRNA的相对表达量均增高(P﹤0.05);与胃复春组比较,中药三法组和中药四法组大鼠胃黏膜组织中AxinmRNA的相对表达量均增高,中药双法组、中药三法组和中药四法组大鼠胃黏膜组织中APCmRNA的相对表达量均增高,差异均有统计学意义(P﹤0.05);与中药四法组比较,中药单法组、中药双法组、中药三法组大鼠胃黏膜组织中AxinmRNA、APCmRNA的相对表达量均降低(P﹤0.05)。结论欣胃颗粒可以上调胃癌前病变模型大鼠胃黏膜组织中Axin、APC基因的表达,其中中药四法组作用效果最强。

五个家族性腺瘤性息肉病家系分析

目的分析5个家族性腺瘤性息肉病(FAP)家系,总结常染色体显性遗传规律。方法对5个FAP家系进行调查分析,取外周血、粪便行全外显子组测序(WES)筛查大肠癌基因,行结肠镜检查并取活体组织进行病理分析。结果5个家系中,连续几代发生FAP,当父亲或者母亲患FAP后,其子代发生FAP的概率均等(50%),无性别差异,发病者均存在腺瘤样结肠息肉病基因(APC)突变,未成年人中未见发病,部分患者患有2种以上肿瘤。结论在有FAP病史的家系中,未成年人一般不发病,成年后均需要进行APC基因检测及结肠镜检查,一旦发现腺瘤需要尽早进行内镜下治疗,避免结直肠癌的发生。

莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠Wnt7a和APC表达的影响

目的观察莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠Wnt7a和APC表达的影响。方法用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)。将50只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组,模型组,莫诺苷小、中、大剂量组(30 mg/kg、90mg/kg、270 mg/kg)。利用蛋白免疫印迹法检测Wnt7a和APC表达变化。结果造模7 d,模型组大鼠皮层Wnt7a的表达比假手术组显著升高,APC表达显著下降;与模型组相比,莫诺苷大剂量组Wnt7a表达明显升高;莫诺苷小、中、大剂量组APC的表达显著降低。结论莫诺苷可以促进缺血性脑损伤后Wnt7a表达,抑制APC表达,从而激活Wnt信号通路。

APC蛋白的分子结构及其生物学意义

腺瘤样的结肠息肉病(adenomatous polyposis coli APC),其基因通过连锁分析定位于5号染色体长臂的2区1带(5q21),以显性方式遗传,其cDNA克隆序列[1]分析显示为一个8538个核苷酸组成的开放阅读框架,基因含有15个外显子,全长125Kb,APC基因的mRNA长8.5Kb,编码2844个氨基酸的蛋白质.ACP蛋白在信号转导、细胞分裂、细胞黏着和家族性结肠息肉(familial polyposis coli)的癌变中起重要作用.

β-Catenin、E-cadherin和APC在卵巢上皮肿瘤中的表达

目的分析卵巢恶性上皮性肿瘤、交界性上皮肿瘤、良性上皮性肿瘤中β-连环素(β-catenin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、结肠腺瘤样息肉病(APC)蛋白的表达,研究其在上皮性卵巢肿瘤发生过程中的作用,探讨Wnt信号通路在上皮性卵巢肿瘤中发挥作用的可能性。方法应用免疫组织化学染色SABC法检测49例卵巢恶性上皮性肿瘤、10例卵巢交界性上皮肿瘤及16例卵巢良性上皮肿瘤组织中的β-catenin、E-cadherin和APC蛋白的表达情况,并分析其相关性。结果在卵巢恶性上皮性肿瘤中β-catenin、E-cadherin的异常表达率(79.59%、67.35%)明显高于卵巢交界性上皮肿瘤(30%、20%)和卵巢良性上皮肿瘤(25%、0%)。β-catenin的表达与E-cadherin的表达呈正相关(R=0.525 8,P<0.05)。而卵巢恶性上皮性肿瘤中APC的阴性表达率明显高于卵巢良性上皮肿瘤(P<0.05),而与卵巢交界性上皮肿瘤间差异无统计学意义(P>0.05)。卵巢恶性上皮性肿瘤中β-catenin的表达与APC的表达无显著相关性(R=0.042 9,P>0.05)。结论β-catenin、E-cadherin、APC在卵巢恶性上皮性肿瘤的发生发展中可能发挥重要作用,但传统的Wnt信号通路在上皮性卵巢肿瘤中发挥作用的可能性不大。

Wnt信号通路中APC和Cyclin D1基因与卵巢癌关系的研究进展

卵巢癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病率及死亡率逐年增加,虽然目前的治疗策略相对有效,但存在易复发及化疗耐药。卵巢癌的发生是一个多重因素作用、多步骤进展的过程,伴一系列致癌因素所致的基因突变和某些信号通路的异常激活。Wnt信号通路在哺乳动物胚胎的早期发育、器官形成、组织再生和其他生理过程中,具有至关重要的作用。如果这条信号通路中的关键调控基因发生突变,会导致其信号异常活化,就可能诱导恶变的发生发展。研究已表明,各种因素导致Wnt信号通路中的结肠腺瘤样息肉病蛋白(APC)基因的失活和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)基因的过度表达均与卵巢癌的发生发展有关。因此,探讨Wnt信号通路中的APC、Cyclin D1基因与卵巢癌的关系,有助于进一步揭示卵巢癌的发病机制,为卵巢癌的防治提供新的敏感检测指标和治疗靶点。本文就Wnt信号通路中APC、Cyclin D1基因与卵巢癌关系的研究进展作一综述。