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以S-腺苷同型半胱氨酸水解酶为潜在靶点的新药研究进展 被引量:6
1
作者 付云峰 吴庆莉 +1 位作者 杨以阜 左建平 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期510-514,共5页
S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)是细胞内广泛存在的一种酶,它催化S-腺苷同型半胱氨酸(AdoHcy)水解生成腺苷和同型半胱氨酸。抑制SAHH将导致细胞内甲基化抑制物AdoHcy的堆积,从而对转甲基反应产生反馈性抑制作用。而甲基化对于维持细胞... S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)是细胞内广泛存在的一种酶,它催化S-腺苷同型半胱氨酸(AdoHcy)水解生成腺苷和同型半胱氨酸。抑制SAHH将导致细胞内甲基化抑制物AdoHcy的堆积,从而对转甲基反应产生反馈性抑制作用。而甲基化对于维持细胞的活性是必需的。鉴于SAHH在调节生物体转甲基化反应中的核心地位,它已被选择作为多种新药研发的重要靶点,包括免疫抑制剂、抗病毒药、防治动脉粥样硬化和阿尔茨海默病药物。SAHH抑制剂全新的化学结构、良好的作用效果和独特的作用靶点已引起国内外研究者广泛的兴趣。 展开更多
关键词 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 自身免疫性疾病 病毒 动脉粥样硬化 阿尔茨海默病
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S-腺苷同型半胱氨酸水解酶在同型半胱氨酸致平滑肌细胞增殖中作用机制的研究 被引量:5
2
作者 姜怡邓 马琳娜 +3 位作者 刘学英 王菊 徐支芳 于海娇 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第20期2347-2350,2355,共5页
目的探讨S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosyl hom ocysteine;SAH)水解酶(SAH H)在同型半胱氨酸(H om ocysteine;H cy)致平滑肌细胞增殖中的作用机制。方法原代培养平滑肌细胞(VSM C s),用0、50、100、200、500μM浓度H cy干预VSM C s,高效... 目的探讨S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosyl hom ocysteine;SAH)水解酶(SAH H)在同型半胱氨酸(H om ocysteine;H cy)致平滑肌细胞增殖中的作用机制。方法原代培养平滑肌细胞(VSM C s),用0、50、100、200、500μM浓度H cy干预VSM C s,高效液相色谱法(H PLC)检测S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylm ethionine,SAM)和SAH含量的变化;实时R T-PC R和W estern blot检测SAH H表达的变化;M TT法检测H cy对VSM C s增殖的影响。结果 H PLC结果表明,VSM C s与0、50、100、200、500μM H cy培养72 h后,细胞中SAH的含量明显增加,而细胞中SAM的含量和SAM/SAH的比值下降,与对照组比较,差异均有显著性(P<0.05),实时R T-PC R和W estern blot结果显示,SAH H m R N A和蛋白水平下降,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),M TT显示,在50μM H cy组,VSM C s数量明显增加,而100、200、500μM H cy组VSM C s数量反较对照组减少。结论 SAH H表达下调致使SAM/SAH的比值下降可能是H cy引起VSM C s增殖的重要机制之一。 展开更多
关键词 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 同型 平滑肌细胞
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南极冰藻Chlamydomonas sp.ICE-L S-腺苷同型半胱氨酸水解酶基因的克隆及其生物信息学分析 被引量:2
3
作者 王金慧 丁燏 +1 位作者 简纪常 吴灶和 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1234-1242,共9页
S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase,SAHH)是一种细胞内广泛存在的酶,在调节生物体转甲基化反应中占据重要地位。本研究通过RT-PCR及RACE-PCR技术克隆了南极冰藻(Chlamydomonas sp.ICE-L)S-腺苷同型半胱氨... S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase,SAHH)是一种细胞内广泛存在的酶,在调节生物体转甲基化反应中占据重要地位。本研究通过RT-PCR及RACE-PCR技术克隆了南极冰藻(Chlamydomonas sp.ICE-L)S-腺苷同型半胱氨酸水解酶全序列,命名为ICE-LSAHH。ICE-LSAHH全长1 844 bp,包括5′非编码区36 bp,3′非编码区344 bp,含有一个较长的poly(A)尾。开放阅读框1 461 bp,编码487个氨基酸。根据推导的氨基酸序列预测其分子量为53.0 kD,理论等电点为5.16。SignalP 3.0、TMHMM Server v.2.0、NetNGlyc 1.0和NetPhos 2.0预测结果显示,ICE-LSAHH蛋白不存在信号肽与跨膜区,含有1个N-糖基化位点及23个磷酸化位点。利用ClastalX 2.0及MEGA 5.0软件,以邻位相连法对南极冰藻及其他物种SAHH构建系统进化树,结果显示,ICE-LSAHH与杜氏盐藻(Dunaliella salina)、莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)、小球藻(Chlorella variabilis)等有较近亲缘关系。利用SWISS-MODEL程序和PyMOL Viewer软件成功模拟了ICE-LSAHH蛋白亚基的三维结构,该结构包括20个α-螺旋和12个β-折叠,且存在3个结构域:N端底物结合域、NAD结合域和C端域。可见,SAHH基因存在于南极冰藻并进行了有效的表达,该蛋白定位于细胞质,进一步证实SAHH是一个进化上比较保守的蛋白。 展开更多
关键词 CHLAMYDOMONAS sp. ICE-L S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 克隆 三维结构 生物信息学
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Sirt1对糖尿病心肌病大鼠早期心肌S-腺苷同型半胱氨酸水解酶的调节作用及其机制研究 被引量:3
4
作者 李越凡 徐丹 +1 位作者 李婷 官明德 《国际心血管病杂志》 2017年第6期348-351,共4页
目的:通过建立糖尿病大鼠模型,探讨沉默信息调节因子(Sirt1)对S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)糖尿病心肌病早期的调节作用及其机制。方法:采用高脂饮食联合链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,分为对照组、早期糖尿病模型组(DM组)和白藜... 目的:通过建立糖尿病大鼠模型,探讨沉默信息调节因子(Sirt1)对S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)糖尿病心肌病早期的调节作用及其机制。方法:采用高脂饮食联合链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,分为对照组、早期糖尿病模型组(DM组)和白藜芦醇处理组(RES组),RES组给予白藜芦醇2.5 mg/(kg·d)灌胃2周处理。HE染色法观察心肌组织病理结构变化,超声心动图检测心功能相关指标,高效液相色谱法检测同型半胱氨酸(Hcy)、S-腺苷甲硫氨酸(SAM)及S-腺苷同型半胱氨酸(SAH),Western blot检测各组心肌组织SAHH、Srit1等蛋白表达变化。结果:显微镜下DM组大鼠心肌组织可见不同程度炎细胞浸润、甚至变性,而RES组心肌组织可见少量炎性细胞浸润,少量心肌细胞呈长杆状,坏死灶不明显,嗜酸性变较DM组轻。HPLC检测结果显示对照组、DM组和RES组的Hcy分别为(45.37±7.99)、(101.78±16.77)和(86.33±10.09)μmol/L,DM组和RES组较对照组升高,但RES组低于DM组;SAH分别为(50.33±7.34)、(22.92±4.32)和(33.45±7.88)μmol/L,DM组和RES组较对照组降低,但RES组高于DM组;SAM分别为(66.34±9.99)、(69.56±9.01)和(70.89±11.33)μmol/L,各组间无显著差异;SAHH分别为(44.11±5.17)、(92.33±17.56)和(19.73±4.07)μmol/L,DM组较对照组升高,RES组较对照组降低;Srit1分别为(80.12±10.09)、(29.11±3.91)和(107.32±13.24)μmol/L,DM组较对照组降低,RES组较对照组升高。结论:SAHH及下游Hcy等的表达可能是早期糖尿病心肌病发生发展的重要作用机制,而Sirt1对SAHH的表达调控作用可能起重要作用。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 沉默信息调节因子1 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 同型 S-甲硫 S-苷同
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南极嗜冷假单胞菌7197S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)基因的克隆与序列分析 被引量:3
5
作者 张金伟 曾润颖 《现代生物医学进展》 CAS 2006年第4期5-7,共3页
从南极普利兹湾深海沉积物中筛选到一株耐冷菌株7197,其16S rDNA序列分析表明该菌株属于假单胞菌属(Pseu-domonas)。作者通过设计引物,从该菌的全基因组DNA中克隆到编码S-腺苷-L-高半胱氨酸(SAHH)的完整ORF,全长为1424bp。使用DNAMAN(5... 从南极普利兹湾深海沉积物中筛选到一株耐冷菌株7197,其16S rDNA序列分析表明该菌株属于假单胞菌属(Pseu-domonas)。作者通过设计引物,从该菌的全基因组DNA中克隆到编码S-腺苷-L-高半胱氨酸(SAHH)的完整ORF,全长为1424bp。使用DNAMAN(5.1)软件对全长ORF为1424bp的SAHH基因进行分析,SAHH基因编码一个由474AA残基组成、分子量预计为52523 Da的SAHH蛋白质,与Psychrobacter sp.273-4的SAHH有96.84%的相似性;与Acinetobacter sp.ADP1的SAHH有79%的相似性;与Pseudomonas fluorescens Pf-5的SAHH有75%的相似性。 展开更多
关键词 嗜冷假单胞菌 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 克隆 序列分析
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腺苷同型半胱氨酸水解酶的表达纯化及活性测定方法建立
6
作者 许秀丽 周建平 +4 位作者 刘培 郝庆钦 温新宇 王玲 田亚平 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第12期1500-1502,共3页
目的获得高纯度的重组S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH),并建立其活性测定方法。方法运用基因工程技术,在大肠杆菌系统中原核表达重组SAHH,经过镍亲和层析和Sephadex G15两步纯化,得到目的蛋白对其进行理化性质鉴定,并通过优化活性测定条... 目的获得高纯度的重组S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH),并建立其活性测定方法。方法运用基因工程技术,在大肠杆菌系统中原核表达重组SAHH,经过镍亲和层析和Sephadex G15两步纯化,得到目的蛋白对其进行理化性质鉴定,并通过优化活性测定条件,确定SAHH活性测定方法。结果终产物SAHH纯度为95%,相对分子质量为49000,比活性为1615U/mg。在37℃、pH7.5的HEPES缓冲液中反应20min为酶活性测定最佳条件,抑制剂可有效抑制酶活性。结论通过基因重组技术可获得高纯度的SAHH,产物理化性质良好,活性测定方法成功建立,为循环酶法测定同型半胱氨酸工艺稳定放大提供可循依据,并且为SAHH抑制剂科学研究提供一种可靠的方法。 展开更多
关键词 腺苷同型半胱氨酸水解酶 亲和层析 生物活性 DTNB显色
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非马沙坦对2型糖尿病大鼠早期心肌S-腺苷同型半胱氨酸水解酶的调节作用
7
作者 韩冬梅 刘方波 万相全 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1420-1426,共7页
目的:探讨非马沙坦(FIM)在糖尿病心肌病(DCM)早期发生发展过程中的干预作用及对S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)的调节作用。方法:健康雄性SD大鼠,高脂饮食5周后,腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,实验将大鼠分为正常对照(contr... 目的:探讨非马沙坦(FIM)在糖尿病心肌病(DCM)早期发生发展过程中的干预作用及对S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)的调节作用。方法:健康雄性SD大鼠,高脂饮食5周后,腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,实验将大鼠分为正常对照(control)组、早期糖尿病模型(DM)组和DM+FIM组,DM+FIM组在造模成功后给予FIM灌胃处理。4周后,对各组动物进行血清学检测,包括空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和空腹胰岛素(FINS)的水平,超声心动图检测心功能相关指标,高效液相色谱法(HPLC)检测同型半胱氨酸(Hcy)、S-腺苷甲硫氨酸(SAM)及S-腺苷半胱氨酸(SAH)的含量,Western blot检测各组大鼠心肌组织中SAHH等蛋白表达变化。结果:2型糖尿病大鼠模型造模成功率为84%,与DM组相比,DM+FIM组动物体重增加显著(P<0.05),心脏指数、左心室指数、FBG和LDL-C明显降低(P<0.05);超声心动图检测显示,与DM组相比,DM+FIM组大鼠射血分数明显升高(P<0.05);HPLC检测结果显示,Hcy水平和SAM/SAH显著降低(P<0.05);Western blot检测结果显示,相对于control组,DM组心肌组织中SAHH的表达显著升高,而DM+FIM处理组则下降。结论:SAHH及下游Hcy等因子的表达可能是早期糖尿病心肌病发生发展的重要作用机制,而非马沙坦可能通过抑制SAHH表达而减轻DCM。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 非马沙坦 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶
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铜离子抑制腺苷同型半胱氨酸水解酶的活性 被引量:6
8
作者 陈劼荩 刘青宇 +1 位作者 杨晓达 王夔 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期421-424,共4页
利用 E.coli JM109菌株高效表达和纯化了重组人的 S-腺苷同型半胱氨酸(AdoHcy)水解酶.初步研究了铜离子对AdoHcy水解酶活性的影响.结果表明,Cu2+可以抑制酶的活性,其抑制能力随着Cu2+浓度增加而增大;Cu2+对 AdoHcy水解酶活性抑制是一... 利用 E.coli JM109菌株高效表达和纯化了重组人的 S-腺苷同型半胱氨酸(AdoHcy)水解酶.初步研究了铜离子对AdoHcy水解酶活性的影响.结果表明,Cu2+可以抑制酶的活性,其抑制能力随着Cu2+浓度增加而增大;Cu2+对 AdoHcy水解酶活性抑制是一个时间依赖的过程,其表观速率常数为(1.08±0.15)min-1.自然底物腺普(AdoHcy)的存在可以明显减弱 Cu2+抑制酶活性的能力。研究结果表明,Cu2+可能与酶的自然底物以某种类似方式竞争结合,从而抑制酶的活性. 展开更多
关键词 铜离子 CU^2+ S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 生物甲基化 酶活性抑制 生化药物
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抑制S-腺苷同型半胱氨酸水解酶活性促进大鼠主动脉血管平滑肌细胞衰老 被引量:1
9
作者 米佳欣 凌文华 《热带医学杂志》 CAS 2022年第6期741-745,894,共6页
目的探究抑制S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)活性,升高S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)水平,对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(RAVSMCs)衰老的影响。方法培养RAVSMCs细胞,随机分为Scrambled组、SAHH siRNA组、Control组、腺苷二醛(ADA)组,Scramble... 目的探究抑制S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)活性,升高S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)水平,对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(RAVSMCs)衰老的影响。方法培养RAVSMCs细胞,随机分为Scrambled组、SAHH siRNA组、Control组、腺苷二醛(ADA)组,Scrambled组转染对照RNA(5 nmol/L),SAHH siRNA组转染SAHH siRNA(5 nmol/L),Control组在平滑肌细胞培养基内加入二甲基亚砜(DMSO),ADA组在平滑肌细胞培养基内加入SAHH抑制剂ADA(30μmol/L),干预时间24 h。采用质谱检测RAVSMCs内SAH水平,之后进行相关衰老指标的检测,使用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色方法检测细胞衰老的情况;通过Western blot检测细胞中p16和p21的蛋白表达水平;采用EdU-488方法检测细胞的增殖能力。结果与Scrambled组比较,SAHH siRNA组SAH水平、SA-β-gal阳性率、p16蛋白、p21蛋白表达水平显著升高,细胞增殖能力显著下降,差异均有统计学意义(t=7.604、16.750、2.906、5.735、4.236,P均<0.05);与Control组比较,ADA组SAH水平、SA-β-gal阳性率、p16蛋白、p21蛋白表达水平显著升高,细胞增殖能力显著下降,差异均有统计学意义(t=27.910、34.080、3.359、4.769、16.670,P均<0.05)。结论抑制SAHH活性,升高SAH水平会诱导RAVSMCs衰老。 展开更多
关键词 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 S-苷同 大鼠主动脉血管平滑肌细胞 衰老
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编码S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶的草菇冷诱导基因Cor3功能验证 被引量:1
10
作者 孙晓红 汪虹 +3 位作者 杨晓达 冯爱萍 陈明杰 潘迎捷 《食用菌学报》 北大核心 2012年第1期13-16,共4页
将草菇(Volvariella volvacea)冷诱导基因Cor3cDNA序列经EcoR I酶切克隆到原核表达载体pPROK-1中,转化大肠杆菌(Escherichia coli)JM109,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达、分离纯化发现该蛋白的分子量约为43kD,等电聚焦... 将草菇(Volvariella volvacea)冷诱导基因Cor3cDNA序列经EcoR I酶切克隆到原核表达载体pPROK-1中,转化大肠杆菌(Escherichia coli)JM109,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达、分离纯化发现该蛋白的分子量约为43kD,等电聚焦电泳结果表明,该蛋白的等电点为6.1,HPLC检测说明合成方向的酶活性为每毫克蛋白每分钟4.5μmol,DNTB与同型半胱氨酸颜色反应测定水解方向的酶活性为每毫克蛋白每分钟0.7μmol,根据上述特性可以确定草菇冷诱导基因Cor3所编码的蛋白是S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)。 展开更多
关键词 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶基因 草菇 冷诱导基因
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METTL3在同型半胱氨酸诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用
11
作者 马凌桔 汪乐新 +7 位作者 迟宏扬 张竞文 彭红建 高春兰 姜怡邓 黄晖 杨力 马胜超 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第26期4221-4225,共5页
背景:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症与胰岛β细胞功能密切相关,但其具体分子机制尚不完全明确。目的:探讨METTL3在Hcy诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用。方法:取第3,4代小鼠胰岛β细胞进行实验。①细胞模型建立和分组:对照组细... 背景:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症与胰岛β细胞功能密切相关,但其具体分子机制尚不完全明确。目的:探讨METTL3在Hcy诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用。方法:取第3,4代小鼠胰岛β细胞进行实验。①细胞模型建立和分组:对照组细胞不加入Hcy,Hcy组细胞加入浓度为100µmol/L Hcy干预48h;②按Lipofectamine^(TM) 2000说明书将过表达质粒Ad-METTL3及si-METTL3转染小鼠胰岛β细胞,设计3种不同干扰片段,PCR验证、筛选出干扰效率最好的干扰片段;③转染后实验分组:对照组、Hcy组、Ad-NC(阴性对照)+Hcy组、Ad-METTL3+Hcy组、si-NC(阴性对照)+Hcy组和si-METTL3+Hcy组;④采用qRT-PCR及Western blot检测细胞中METTL3及细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达;ELISA法测定胰岛素水平来评价胰岛β细胞胰岛素分泌能力;分别过表达和干扰METTL3后检测细胞自噬相关蛋白及胰岛素水平。结果与结论:①与对照组相比,Hcy组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平升高(P<0.05),而p62表达明显降低(P<0.05),胰岛素分泌能力明显下降(P<0.05);②与对照组相比,Hcy组中METTL3蛋白及mRNA水平表达均降低(P<0.05);③胰岛β细胞中沉默METTL3后,Hcy进一步上调了细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ的表达(P<0.05),而p62表达显著下降(P<0.05),细胞中胰岛素水平增加(P<0.05);过表达METTL3后,Hcy则使LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著降低且p62表达则增高(P<0.05);④结论:METTL3参与了Hcy诱导的胰岛β细胞自噬调控,对胰岛素的分泌发挥着调控作用。 展开更多
关键词 N6-甲基甲基转移酶3 胰岛Β细胞 同型 细胞自噬 LC3Ⅱ/Ⅰ
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棉花腺苷高半胱氨酸水解酶cDNA的克隆、表达及染色体定位 被引量:10
12
作者 佘义斌 朱一超 +1 位作者 张天真 郭旺珍 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期958-964,共7页
腺苷高半胱氨酸水解酶是调节细胞内甲基反应的一个关键酶。通过对高品质纤维陆地棉品系7235的棉纤维混合cDNA文库随机测序,得到一个棉花腺苷高半胱氨酸水解酶(编号:g073a03a,GhSAHH)的cDNA序列。该cDNA序列长1598bp,利用5′RACE技术得... 腺苷高半胱氨酸水解酶是调节细胞内甲基反应的一个关键酶。通过对高品质纤维陆地棉品系7235的棉纤维混合cDNA文库随机测序,得到一个棉花腺苷高半胱氨酸水解酶(编号:g073a03a,GhSAHH)的cDNA序列。该cDNA序列长1598bp,利用5′RACE技术得到上游318bp的片段,序列拼接获得全长为1916bp的cDNA序列,ORF为1458bp,编码485个氨基酸,其理论上的等电点pI=5.69,分子量MW=53.2kD。该基因在不同组织、器官中均表达,在根、下胚轴和纤维发育早期优势表达。根据Southern杂交结果推测GhSAHH基因在陆地棉基因组中为单拷贝。利用本实验室陆地棉遗传标准系TM-1和海岛棉海7124培育的含140个单株的BC1作图群体,将GhSAHH基因定位在第20号染色体上。 展开更多
关键词 棉花 水解酶 克隆 表达 定位
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S-腺苷高半胱氨酸水解酶在甲基循环中的代谢调节 被引量:5
13
作者 廖素环 施李鸣 +3 位作者 温荣辉 蹇慧 刘芳 黄伟坚 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第6期115-118,共4页
S-腺苷高半胱氨酸水解酶(Adohcyase)广泛存在生物体内,其功能主要是催化细胞S-腺苷高半胱氨酸(Adohcy)可逆水解生成腺苷(Ado)和高半胱氨酸(Hcy)。论文主要阐述了S-腺苷高半胱氨酸水解酶在真核生物细胞中调节S-腺苷高半胱氨酸、S-腺苷甲... S-腺苷高半胱氨酸水解酶(Adohcyase)广泛存在生物体内,其功能主要是催化细胞S-腺苷高半胱氨酸(Adohcy)可逆水解生成腺苷(Ado)和高半胱氨酸(Hcy)。论文主要阐述了S-腺苷高半胱氨酸水解酶在真核生物细胞中调节S-腺苷高半胱氨酸、S-腺苷甲硫氨酸、腺苷、高半胱氨酸的代谢途径和S-腺苷高半胱氨酸、S-腺苷甲硫氨酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺的代谢途径,以及酶在控制细胞中S-腺苷高半胱氨酸水平和调节甲基循环中的代谢作用和其应用研究近况。 展开更多
关键词 S-水解酶 代谢途径 调节 甲基化作用
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杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶基因的克隆及功能分析 被引量:6
14
作者 阎赟梦 李庆华 +2 位作者 李杰 柴丹丹 薛乐勋 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2011年第4期517-520,共4页
目的:探讨杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHase)基因在鞭毛再生中的作用。方法:通过设计简并引物及RACE法克隆了杜氏盐藻SAHase基因全长,使用pH休克法对杜氏盐藻进行鞭毛去除及再生,通过实时荧光定量PCR研究在转录水平上SAHase基因的... 目的:探讨杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHase)基因在鞭毛再生中的作用。方法:通过设计简并引物及RACE法克隆了杜氏盐藻SAHase基因全长,使用pH休克法对杜氏盐藻进行鞭毛去除及再生,通过实时荧光定量PCR研究在转录水平上SAHase基因的变化。结果:所克隆的杜氏盐藻SAHase基因cDNA全长1926bp,包含ORF1458bp、3’UTR61bp和5’UTR407bp。实时荧光定量PCR结果显示,在鞭毛再生的过程中,SAHasemRNA转录量升高,其水平在3h时达到了未处理组的3倍左右。结论:杜氏盐藻的SAHase基因与鞭毛再生有关。 展开更多
关键词 杜氏盐藻 S水解酶 鞭毛
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黄瓜S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶全长cDNA的克隆及表达分析 被引量:3
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作者 金晓霞 秦智伟 +1 位作者 周秀艳 武涛 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1338-1346,共9页
【目的】克隆黄瓜S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶基因的cDNA,并进行生物信息学和表达分析,为研究该基因的功能奠定基础。【方法】通过对乙烯利诱导黄瓜茎尖SSH文库的筛选,采用RT-PCR和电子克隆技术,获得黄瓜CsSAHH基因的cDNA全长序列(NCBI编... 【目的】克隆黄瓜S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶基因的cDNA,并进行生物信息学和表达分析,为研究该基因的功能奠定基础。【方法】通过对乙烯利诱导黄瓜茎尖SSH文库的筛选,采用RT-PCR和电子克隆技术,获得黄瓜CsSAHH基因的cDNA全长序列(NCBI编号:HQ444960,CsSAHH)。运用半定量RT-PCR,分析CsSAHH基因在乙烯利诱导后的茎尖和雌雄花不同部位的表达。通过生物信息学方法预测CsSAHH基因的蛋白结构。【结果】黄瓜CsSAHH基因的cDNA全长1 545 bp,编码485个氨基酸,其理论上的等电点pI=5.66,分子量MW=53.1 kD。CsSAHH基因在黄瓜茎尖受乙烯利诱导增强表达,在黄瓜雄花中的雄蕊表达较弱。CsSAHH理化性质表明,该蛋白无明显的信号肽;蛋白二级结构主要由loop环和α螺旋构成,含少量的β折叠,预测发现该蛋白分别在85—99氨基酸残基和262—279氨基酸残基处各有1个S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶活性功能区。CsSAHH基因氨基酸序列与苜蓿的同源性为63%,与水稻、玉米、拟南芥等作物同源性较低。【结论】成功克隆黄瓜CsSAHH基因cDNA序列,在85—99氨基酸残基和262—279氨基酸残基处各有1个S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶活性功能区。该基因在茎尖受乙烯利诱导增强表达,在雄蕊中表达较弱。在未处理的雌雄花芽发育不同阶段,雌花芽中表达强于幼果和雄花芽。 展开更多
关键词 黄瓜 S--L-高水解酶 克隆 表达 蛋白结构预测
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草菇S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶基因的克隆和序列分析 被引量:5
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作者 孙晓红 陈明杰 +2 位作者 汪虹 冯爱萍 潘迎捷 《食用菌学报》 北大核心 2010年第1期22-25,共4页
根据草菇(Volvariella volvacea)S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶基因(SAHH)全长cDNA序列设计引物,以草菇基因组DNA为模板,PCR扩增获得草菇SAHH基因的全长序列,序列分析结果表明,草菇SAHH长度为1868bp,编码430个氨基酸残基,基因由12个外显子... 根据草菇(Volvariella volvacea)S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶基因(SAHH)全长cDNA序列设计引物,以草菇基因组DNA为模板,PCR扩增获得草菇SAHH基因的全长序列,序列分析结果表明,草菇SAHH长度为1868bp,编码430个氨基酸残基,基因由12个外显子和11个内含子组成,将草菇SAHH基因推断的氨基酸序列与其它物种的SAHH基因氨基酸序列进行比较发现,SAHH基因保守性较高。 展开更多
关键词 草菇 S--L-高水解酶基因 克隆 序列分析
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草菇S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶同源基因Cor3低温条件下的表达变化 被引量:6
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作者 汪虹 陈明杰 +1 位作者 冯爱萍 乔娜 《食用菌学报》 北大核心 2010年第1期14-21,共8页
将草菇(Volvariella volvacea)菌株V23和耐低温诱变菌株VH3的菌丝体在4℃下处理不同时间后,采用荧光定量PCR技术中的双标准曲线法研究了S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶同源基因Cor3的表达变化。结果显示,低温处理后,草菇V23菌株的Cor3基因... 将草菇(Volvariella volvacea)菌株V23和耐低温诱变菌株VH3的菌丝体在4℃下处理不同时间后,采用荧光定量PCR技术中的双标准曲线法研究了S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶同源基因Cor3的表达变化。结果显示,低温处理后,草菇V23菌株的Cor3基因表达量随处理时间的延长呈不断下降趋势,10h时,其表达量仅为对照的7%。而VH3菌株Cor3基因4℃处理2h表达量明显上升,为对照的1.8倍,处理4h和6h表达量降低,分别为对照的80%和90%,处理8h的表达量又上升,为对照的1.4倍,随后下降,处理10h表达量最低,为对照的60%。根据结果初步推测Cor3基因与草菇低温耐受性具有一定相关性。 展开更多
关键词 冷诱导基因表达 低温耐受性 实时定量PCR S--L-高水解酶 草菇
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杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活和毒性检测 被引量:2
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作者 柴丹丹 李庆华 +4 位作者 阎赟梦 毛丽红 李靓 朱立强 薛乐勋 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第1期16-20,共5页
目的:构建杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHH)的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH,并检测其对酵母细胞的毒性和自激活作用。方法:应用RT-PCR扩增杜氏盐藻的SAHHcDNA,测序分析后与酵母双杂交诱饵载体pGBKT7连接,构建诱饵载体pGBKT7-SAHH... 目的:构建杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHH)的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH,并检测其对酵母细胞的毒性和自激活作用。方法:应用RT-PCR扩增杜氏盐藻的SAHHcDNA,测序分析后与酵母双杂交诱饵载体pGBKT7连接,构建诱饵载体pGBKT7-SAHH。用PEG/LiAc法将诱饵载体转入AH109和Y187酵母中,通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母有无毒性和自激活作用。结果:成功构建了诱饵载体pGBKT7-SAHH并成功转化到酵母细胞AH109和Y187中,表达的融合蛋白对宿主酵母细胞无毒性。在AH109和Y187酵母细胞中诱饵载体均未激活报告基因HIS3和ADE2,但是激活了报告基因MEL1。结论:诱饵载体pGBKT7-SAHH可用酵母双杂交方法筛选与SAHH相互作用的蛋白。 展开更多
关键词 S水解酶 酵母双杂交 诱饵载体 自激活 杜氏盐藻
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S-腺苷高半胱氨酸水解酶及其抑制剂的研究近况 被引量:6
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作者 纪宇 李振涛 +1 位作者 朱奇 李爱秀 《药学进展》 CAS 2005年第11期481-486,共6页
综述近年来国内外有关S-腺苷高半胱氨酸水解酶分子水平的催化机制及其抑制剂的作用机制研究和产品开发状况。S-腺苷高半胱氨酸水解酶是大多数病毒复制所依赖的细胞酶,它作为广谱抗病毒药物设计的重要靶点,已引起科学家们的广泛关注,其... 综述近年来国内外有关S-腺苷高半胱氨酸水解酶分子水平的催化机制及其抑制剂的作用机制研究和产品开发状况。S-腺苷高半胱氨酸水解酶是大多数病毒复制所依赖的细胞酶,它作为广谱抗病毒药物设计的重要靶点,已引起科学家们的广泛关注,其抑制剂的开发目前主要围绕对腺苷类似物的结构改造,以获得高活性、低毒性的抗病毒新药。 展开更多
关键词 S-水解酶 抑制剂 广谱抗病毒药物 结构改造
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S-腺苷高半胱氨酸水解酶的晶体结构及其催化机制 被引量:1
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作者 李爱秀 刘兴太 蔡德海 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期521-524,共4页
AdoHcy水解酶是一重要的广谱抗病毒药物靶标,对其结构,特别是三维空间结构的研究,有助于深入了解和阐述其功能,并为实现基于靶标结构的药物设计和筛选奠定基础。该文介绍近年来有关AdoHcy水解酶晶体结构的研究成果。
关键词 S-水解酶 晶体结构 催化机制
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