三磷酸腺苷生物荧光检测技术在清洗消毒效果评价中的应用及研究进展

三磷酸腺苷(ATP)生物荧光检测技术是一种快速微生物检测方法,具有简便、灵敏度高和实时检测等优点,被广泛应用于多种行业微生物检测。该研究对ATP生物荧光检测技术在各类复用器械清洗及医疗环境消毒效果评价中的应用进行综述,为ATP生物荧光检测技术的使用及推广提供参考。

肝病诊断中腺苷脱氨酶检测的临床价值分析

目的观察和讨论血清腺苷脱氨酶在肝病诊断中的临床价值。方法选取我院于2013年2月至2014年2月期间收治的160例肝病患者,依托于过氧化物酶法对肝病患者和正常对照组患者进行血清腺苷脱氨酶(ADA)、速率法丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活性进行科学测定,并观察两组效果。结果肝病患者的ADA和ALT同正常对照组相比都呈现明显升高现象,其中肝硬化组的ADA比ALT更高;而急性肝炎与慢性活动性肝炎肝硬化患者的血清ADA明显高于正常对照组,P<0.05;肝癌和慢性迁延性肝炎患者的血清ADA和正常对照组比略高,但是无差异性(P>0.05)。结论腺苷脱氨酶检测对于肝病患者的诊断具有较高的敏感性,值得在临床实验中推广及使用[1]。

双发射三磷酸腺苷荧光探针的合成及应用

三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)能在活细胞中产生和存储能量,并参与糖酵解、蛋白质的转运活性、克雷布(Kreb)循环等生命活动.溶酶体ATP浓度异常会导致溶酶体功能紊乱,因此溶酶体ATP水平可视化对探索与溶酶体ATP相关的生物过程具有重要意义.本文通过酰氯化、酰胺化反应构建了ATP荧光探针RP-ATP,探针以罗丹明B和芘甲酸为荧光团,二者由二亚乙基三胺通过酰胺键连接.ATP与探针结合后,促使芘甲酸和罗丹明B解聚集以及罗丹明B螺内酰胺环开环,显著增强荧光.探针对ATP的响应范围为毫摩尔级别,与ATP的生理浓度相匹配,且能在酸性pH范围内识别溶酶体内的ATP.探针RP-ATP是探究与溶酶体ATP相关生理、病理过程中强有力的工具.

RP-HPLC定量检测蛹虫草培养基中活性成分

利用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）（Agilent TC-C18色谱柱（250.0 mm×4.6 mm，5μm）；流动相：乙腈-水（51∶49）；流速：1.0 mL/min；检测波长：227 nm，柱温：25℃），测定了新乡种植红豆杉树皮中三尖杉宁碱的含量.结果表明，三尖杉宁碱的线性范围为：0.04~1.4μg，r=0.999；平均回收率为100.40%，RSD=1.07%.首次测定新乡种植红豆杉树皮中三尖杉宁碱平均含量（质量分数）为0.0360%（n=5）.本法操作简便、准确、重现性好，为新乡种植红豆杉提取三尖杉宁碱的测定及其质量控制的提供了方法依据.

ATP检测法监测气管导管两种清洗方法的效果

[目的]探讨三磷酸腺苷(ATP)荧光检测法监测气管导管两种清洗方法的效果。[方法]将300件气管导管随机分为A组、B组,每组每样气管导管150件,A组采用手工清洗方法清洗,B组采用手工清洗加超声波酶洗3min^5min方法。清洗前、清洗后、干燥后用ATP生物荧光法检测其清洗质量,比较两组清洗前后气管导管ATP含量及合格率。[结果]B组清洗后、完成干燥后气管导管ATP含量低于A组(P<0.05);B组清洗气管导管的合格率高于A组(P<0.05)。[结论]手工清洗加超声波酶洗气管导管的清洗效果优于纯手工清洗方法。

市售牙签的安全性检测

目的评价市售牙签的安全性。方法将市售牙签样品制备浸提液,以不同浓度作用于人脐静脉内皮细胞,在不同时间段采用生物荧光检测试剂盒测定培养细胞的三磷酸腺苷,评价各种牙签的细胞毒性。电子游标卡尺测量牙签直径。按GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》进行微生物检测。扫描电镜下观察样品表面光洁度。结果作用3、7、24h后,半数以上样品浸提液在50.00%、25.00%浓度时对正常细胞具有显著杀伤作用,部分样品12.50%、6.25%浓度仍对细胞有杀伤作用。浸提液pH值越低对细胞杀伤性越大。所检样品未测出致病菌,个别样品存在微生物超标。所检样品均做工粗糙,直径过大,表面光洁度差。结论市售牙签普遍存在生产粗糙、有害物残留过量的问题,其使用的安全性应引起牙科医生、消费者及有关部门的重视。

ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术在治疗非小细胞肺癌胸水中的临床应用

目的:研究三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)在非小细胞肺癌(NSCLC)化疗中的应用,为临床治疗方案的选择提供依据。方法:选择52例伴有胸水的NSCLC患者,根据患者及家属治疗意愿分为经验治疗组和药敏治疗组。经验治疗组20例患者根据经验给予(紫杉醇联合卡铂,PTX+CBP)标准方案全身化疗;药敏治疗组32例患者对胸水标本分别进行顺铂(DDP)、诺维本(NVB)、紫杉醇(PTX)、卡铂(CBP)、健择(GEM)、PTX+CBP、NVB+CBP、GEM+DDP体外药敏检测,根据体外药敏检测结果选用化疗方案,比较2组患者治疗有效率。结果:体外药敏试验,单一用药中NVB和PTX对NSCLC的体外敏感率最高,均为28.1%;GEM的体外敏感率次之,为25%;CBP的体外敏感率为21.9%;DDP的体外敏感率最低,为17.6%。联合用药方案显示较好的治疗效果,其中GEM+DDP的体外敏感率最高,达55.9%;PTX+CBP的体外敏感率次之,达50%;NVB+CBP的体外敏感率最低,为40.6%。药敏治疗组患者有效率为65.6%,经验治疗组有效率为40.0%,两组有效率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同化疗药物对NSCLC的体外敏感率不同;根据药敏试验结果选择化疗方案可取得更好的临床治疗效果。

ATP生物荧光检测法对提高ICU环境清洁质量的应用价值

目的:研究三磷酸腺苷(ATP)荧光检测法在提高ICU环境清洁质量中的应用价值。方法:于2018年1月至2018年3月对深圳市第二人民医院ICU高频接触物体表面进行基线调查并进行评估,第二阶段进行持续检测并进行干预,提出改进措施,评价干预后环境质量。结果:基线调查检测高频接触物体表面共采样409份,合格253份,合格率61.86%。床头桌、电开关、病历夹、工作人员手机、电脑键盘、电脑鼠标、听诊器探头相对光单位(RLU)中位数> 500。干预前中后ICU高频接触物体表面检测比较,干预前、中、后高频接触物体表面清洁消毒合格率分别为61.86%、76.60%、91.20%(P <0.001)。结论:ATP荧光检测法ATP荧光检测法具有操作简单、灵敏度高、反馈及时的优势,可作为ICU日常检测环境物表清洁质量的监测方法,有助于提高ICU的环境清洁质量。

管道镜检查对电子膀胱肾盂内窥镜清洗的效果评价

目的通过对比管道镜检查与三磷酸腺苷(ATP)检测在电子膀胱肾盂内窥镜清洗的效果,探讨管道镜技术对电子膀胱肾盂内窥镜清洗效果现场评价的可行性,为电子膀胱肾盂内窥镜清洗效果检查的方法选择提供新的思路。方法2021年6—12月,采用简单随机法选取我院消毒供应中心处理的41条电子膀胱肾盂内窥镜,对每条内窥镜的吸引孔道入口、活检孔道入口、活检/吸引孔道交汇处、活检孔道内腔以及操作端口内腔等5个部位分别进行管道镜影像学检查以及ATP检测,分析不同部位2种检查效果的差别。结果内窥镜的吸引孔道入口、活检孔道入口、活检/吸引孔道交汇处以及操作端口内腔的管道镜影像学检查的污物残留程度均高于相应的ATP检测结果(P<0.01),活检孔道内腔的管道镜影像学检查的污物残留程度与相应的ATP检测结果没有差别(P>0.05)。结论对于电子膀胱镜的管腔清洁效果,其吸引孔道入口、活检孔道入口、活检/吸引孔道交汇处以及操作端口内腔单独ATP检测不足以证明其清洁,应联合采用管道镜影像学检查证实;而活检孔道内腔可以采用ATP检查或者管道镜影像学检查证实其清洁效果。

外周血T-SPOT.TB与胸腔积液ADA活性检测对结核性胸腔积液的诊断价值

目的探讨外周血结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)与胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)活性单独或联合检测对结核性胸腔积液的诊断价值。方法选取结核性胸腔积液患者110例作为结核组、非结核性胸腔积液患者60例作为非结核组。两组均于治疗前采集外周静脉血进行T-SPOT.TB,计数斑点形成细胞数;采集胸腔积液进行ADA活性检测。根据外周血T-SPOT.TB检测的斑点形成细胞数及ADA活性绘制ROC曲线,比较二者单独检测或联合检测对结核性胸腔积液的诊断效能。结果结核组外周血T-SPOT.TB阳性率、胸腔积液ADA阳性率高于非结核组(P<0.05);结核组外周血T-SPOT.TB阳性率高于胸腔积液ADA阳性率(P<0.05)。两组外周血T-SPOT.TB的A、B孔斑点形成细胞数及胸腔积液ADA活性比较差异有统计学意义(P<0.05)。结核组外周血T-SPOT.T的ROC曲线下面积大于胸腔积液ADA活性检测(P<0.05),其敏感度高于胸腔积液ADA活性检测(P<0.05)。二者联合检测诊断结核性胸腔积液的敏感度高于单独检测(P均<0.05)。结论外周血T-SPOT.TB与胸腔积液ADA活性联合检测对结核性胸腔积液的诊断效能高于二者单独检测。

三磷酸腺苷荧光检测在医疗器械清洗质量控制中的应用

目的评价三磷酸腺苷(ATP)荧光检测技术在医疗器械清洗中的运用,探讨ATP荧光检测的有效性和优越性。方法对2013年6月-8月消毒供应中心依照国家标准要求肉眼观察合格的700件手工清洗和机械清洗器械,按照器械的表面结构和复杂程度分为简单表面器械、复杂表面器械、管腔器械,使用ATP荧光检测技术进行ATP残留量测定,对测定数据进行记录和分析。结果手工清洗组,简单规则表面器械的ATP平均值为81RLU,复杂表面器械的ATP平均值26 RLU,管腔器械中的ATP平均值为17 RLU;在机械清洗组,简单规则表面器械的ATP平均值为15 RLU,复杂表面器械中的ATP平均值25 RLU,管腔器械中的ATP平均值为17 RLU,均在参考的合格值范围以内。结论执行标准的工作流程,无论是手工清洗还是机械清洗,均能保证清洗质量;机械清洗的严谨性更好,可以避免主观性和依从性问题。ATP荧光检测可以作为日常监测工具并具有科学性。

胸水腺苷脱氨酶检测对结核性胸膜炎的诊断价值

目的：分析胸水腺苷脱氨酶检测（ADA）在结核性胸膜炎诊断中的应用价值.方法：对本院2010年1月-2011年12月间收治的174例胸水患者分别采取腺苷脱氨酶检测和结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）检测,比较两种检测方法的灵敏度及特异度.结果：腺苷脱氨酶检测检测诊断灵敏度为95.83%、特异度为85.90%,结核菌素纯蛋白衍生物检测灵敏度为89.58%、特异度为75.64%,两组比较差异显著P〈0.05.结论：腺苷脱氨酶检测应用于结核性胸膜炎的诊断具有准确率高的优势,具有推广应用价值.

探讨GeneXperTMTB/RIF检查在结核性胸膜炎诊断中的价值

目的:探讨GeneXpertMTB/RIF系统检查在结核性胸膜炎诊断中的应用价值。方法:收集临床中100例高度怀疑结核性胸膜炎患者。利用抗酸染色涂片法、胸水腺苷脱氨酶(adenosine delaminate,ADA)检测法和GeneXpert MTB/RIF系统进行检测,对比三种方法检测胸腔积液标本的检出阳性率、GeneXpert MTB/RIF系统对检出结果的量级情况,并检测出标本对利福平的耐药性。结果:100例受试者中,涂片染色法、ADA方法、GeneXpert MTB/RIF系统检测的阳性检出率分别为39%、61%、71%。GeneXpert MTB/RIF系统检测的阳性检出率分别高于涂片染色、ADA染色,差异具有统计学意义;GeneXpert MTB/RIF检测更加对检测标本更为敏感;GeneXpert MTB/RIF检测标本对利福平耐药性敏感度为83.3%(10/12),特异性为95.74%(45/47)。结论:GeneXpert MTB/RIF技术是一项操作简便、安全、高效的分子生物学检测方法,对结核性胸膜炎的早期诊断和治疗具有较大价值,值得临床推广。

消毒供应中心管腔器械清洗效果监测

目的:提高消毒供应中心管腔器械的清洗效果。方法:使用去生物膜清洗剂和常规酶洗剂对四种管腔器械(吸宫管、吸引器头、腹腔镜和胃镜)进行处理,利用三磷酸腺苷(ATP)荧光技术监测四种管腔器械清洗后的清洁水平并进行比较。结果:吸宫管、吸引器头、腹腔镜和胃镜四种管腔器械使用去生物膜清洗剂处理以后器械表面相对荧光强度(RLU)低于使用普通酶洗剂处理后的读值(P<0.05)。结论:去生物膜清洗剂对于管腔器械清洗有很好的清洁效果,ATP荧光可以为管腔器械清洁度提供一个客观、及时的监测方法。

ATP-TCA、常见耐药蛋白表达与IB3~IIB期宫颈癌新辅助化疗疗效的关系

目的评价联合三磷酸腺苷-肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)和常见耐药蛋白检测两种方法预测宫颈癌化疗敏感性的可行性。方法收集2014年12月至2017年12月接受治疗前IB3~IIB期(根据FIGO 2018标准重新分期)宫颈鳞癌患者的新鲜肿瘤组织标本100例。采用ATP-TCA对宫颈癌细胞进行体外药敏检测。同时采用En Vision免疫组化法检测P-gp、GST-π、TopoⅡ和TS 4种蛋白的表达。标本取材后,患者均接受紫杉醇+卡铂方案新辅助化疗2个周期。评价新辅助化疗的近期疗效以及两种检测方法联合预测临床化疗敏感性的可行性。结果(1)95例患者完成ATP-TCA体外药敏检测,紫杉醇+卡铂方案的体外有效率达80.0%。95例患者中获CR 5例,PR 68例,有效率为76.8%。体外药敏试验结果与近期疗效的符合率为86.3%,其预测临床化疗敏感性的灵敏度和特异度分别为93.2%和63.6%。(2)P-gp、GST-π、TopoⅡ和TS蛋白的阳性表达率分别为42.1%(40/95)、28.4%(27/95)、33.7%(32/95)和55.8%(53/95)。耐药蛋白P-gp、GST-π和TopoⅡ表达与近期疗效有关(P<0.05)。GST-π表达与近期疗效符合率最高,为75.8%;其预测临床化疗敏感性的灵敏度、特异度分别为80.8%和59.1%。(3)仅耐药蛋白GST-π与ATP-TCA检测结果有关(P<0.05),两者符合率达81.0%。(4)耐药蛋白GST-π表达联合体外药敏试验与近期疗效的符合率最高,为87.4%。结论ATP-TCA体外药敏试验联合耐药蛋白GST-π表达能够预测宫颈癌化疗的敏感性,为实现宫颈癌同步放化疗化疗药物的个体化选择提供参考。

超声清洗机在手术器械预清洗中的应用研究

目的:研究超声清洗机在手术器械预清洗中的应用效果,以提高手术器械清洗质量。方法:随机抽取医院消毒供应中心集中处理的5类有代表性的1000件手术器械,按照均衡分布原则将其分为手工清洗组和超声清洗组,每组500件,分别采用手工清洗和超声清洗机超声清洗两种方式对手术器械进行预清洗,使用目测和(或)带光源放大镜目测检测方法和三磷酸腺苷(ATP)生物荧光检测法对两组器械的表面、轴节、齿牙、卡锁及管腔内进行检测,比较两组器械预清洗效果。结果:两组预清洗方式对器械表面的清洗合格率比较差异无统计学意义;目测和(或)带光源放大镜方法检测中,超声清洗组器械的轴节、齿牙、卡锁及管腔内的清洗合格率明显高于手工清洗组,差异有统计学意义(x^2=4.15,x^2=3.98,x^2=3.90,x^2=5.00;P<0.05);ATP方法检测中,超声清洗组器械的轴节、齿牙、卡锁和管腔清洗合格率明显高于手工清洗组,差异有统计学意义(x^2=4.39,x^2=4.50,x^2=7.35,x^2=10.04;P<0.05)。结论:超声清洗作为预清洗方法,能显著提高器械轴节、齿牙、卡锁及管腔内的清洗质量,提升工作效率;可保证灭菌质量,降低医院感染的发生。

管腔器械清洗效果的监测和提高

为了提高管腔器械的清洗效果,使用去生物膜清洗剂和常规酶洗剂对四种管腔器械(宫吸管、吸引器头、腹腔镜和胃镜)进行处理,利用三磷酸腺苷(ATP)荧光技术监测四种管腔器械清洗后的清洁水平。结果发现:宫吸管、吸引器头、腹腔镜和胃镜四种管腔器械使用去生物膜清洗剂处理以后器械表面相对荧光强度(RLU)要明显低于使用普通酶洗剂处理后的读值。以上结果表明:去生物膜清洗剂对于管腔器械清洗有很好的清洁效果,ATP荧光可以为管腔器械清洁度提供一个客观、及时的监测方法。

卵巢肿瘤细胞体外药物敏感试验临床应用价值

目的探讨三磷酸腺苷—肿瘤体外药敏检测在指导晚期卵巢上皮癌患者化疗中的临床应用价值。方法回顾性分析我科住院的晚期卵巢上皮癌20例患者病历,根据药敏实验结果选取敏感化疗方案9例为实验组,采取卵巢上皮癌化疗的一线化疗方案(铂类+紫杉醇)化疗者11例为对照组,比较两组近期临床疗效。结果实验组临床近期疗效好于对照组(Z=-3.636,P<0.001)。结论三磷酸腺苷-肿瘤体外药敏检测结果指导临床化疗与患者的临床近期疗效有很好的相关性,对指导晚期卵巢上皮癌个体化化疗有的临床价值。

多项指标联合检测对结核性胸膜炎的诊断价值研究

目的探讨联合胸腔积液细胞形态学检查、腺苷脱氨酶检测(ADA)、结核感染T细胞检测(TB-IGRA)、结核基因检测(TB-DNA)和结核抗体检测(TB-Ab)对结核性胸膜炎的诊断价值评价。方法选取2019年月6月—2020年6月临床患者230例(包括结核组120例,非结核组110例),进行胸腔积液细胞形态学检查、腺苷脱氨酶检测(ADA)、结核感染T细胞检测(TB-IGRA)、结核基因检测(TB-DNA)和结核抗体检测(TB-Ab),分析其单项检测结果及联合应用诊断效能。结果细胞形态学检查、ADA、TB-IGRA、TB-DNA和TB-Ab 5项指标组成不同组合中,5项指标组合并联检测诊断结核性胸膜炎的敏感度最高(达97.50%);3项指标组合细胞形态学+TB-IGRA+ADA并联检测敏感度较高(94.17%);两项指标组合细胞形态学+TB-IGRA并联检测敏感度较高(91.67%),均高于单一指标检测敏感度,差异有统计学意义(χ^(2)=174.885,P <0.001);串联检测组合中,5项指标组合串联检测对诊断结核性胸膜炎的特异度最高(达99.09%);3项指标组合TB-IGRA+TB-DNA+TB-Ab串联检测特异度较高(92.73%);两项指标组合细胞形态学+TB-DNA检测特异度较高(90.00%),均较单一指标检测时特异度明显提高,差异有统计学意义(χ^(2)=35.242,P <0.001)。各组合之间比较差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为36.073、107.085,P <0.001)。结论细胞形态学检查、ADA、TB-IGRA、TB-DNA和TB-Ab并联检测可提高对结核性胸膜炎诊断敏感性,串联检测可提高其特异度,并可根据实际情况合理选择多项指标的不同检测组合,具有很好的诊断效能及临床实用性。

ATP生物荧光检测在气管镜清洗消毒质量监测中的应用研究

目的探讨三磷酸腺苷(ATP)生物荧光检测对气管镜清洗消毒合格参考值范围和检测方法。方法选取360条患者使用后的气管镜随机分为A、B、C三组,每组120条。A组床旁预处理后分为A1、A2两组(每组60条气管镜),B组气管镜在人工清洗后分为B1、B2两组,C组气管镜在高水平消毒后分为C1、C2两组,A1、B1、C1组采用细菌采样,A2、B2、C2组进行ATP生物荧光采样。两种采样方法对气管镜表面采样为全部长度涂抹采样,管腔的采样方法均为冲刷法。同时选取临床使用后的60条气管镜经过人工清洗后,对管腔运用冲洗法,对冲洗液进行ATP生物荧光检测,比较冲洗法和冲刷法对管腔采样的有效性。结果气管镜在人工清洗后,对管腔采样的冲洗法和冲刷法,两组ATP总量的相对发光值(RLU)差异有统计学意义(P=0.040)。气管镜在A1、B1组的细菌采样中,管腔和表面菌落数差异均有统计学意义(P均<0.001),高水平消毒后表面和管腔菌落数均为0;气管镜在A2、B2、C2三组的ATP生物荧光检测采样中,表面ATP总量RLU值A2与B2组间比较差异有统计学意义(P<0.001),B2与C2组间比较差异有统计学意义(P=0.040);管腔ATP总量RLU值A2与B2组间比较差异有统计学意义(P<0.001),B2、C2两组差异无统计学意义(P=0.450)。结论 ATP生物荧光采样冲刷法对气管镜管腔采样更有效;人工清洗环节非常重要,人工清洗后气管镜表面和管腔ATP总量建议低于10 000和3 400。