ADA2基因变异与腺苷脱氨酶2缺乏症的研究进展

腺苷脱氨酶2缺乏症是一种罕见的常染色体隐性遗传的自身炎症性疾病,是由ADA2基因纯合或复合杂合变异导致腺苷脱氨酶2活性低下或缺乏而致病。该缺乏症主要临床表现为儿童期起病的全身性炎症、血管炎、体液免疫缺陷和血液学异常等,早期诊断困难,发病机制尚不完全清楚。全身性炎症表型患者治疗首选肿瘤坏死因子α受体拮抗剂,其次为沙利度胺。造血干细胞移植主要用于严重血液学表型患者或对肿瘤坏死因子α受体拮抗剂治疗无效患者。本文对腺苷脱氨酶2缺乏症的临床特征、人口学特征、基因型以及与临床表型相关性、可能的发病机制和诊疗策略进行阐述。

腺苷脱氨酶2缺乏症临床特征与基因型分析

目的总结3例腺苷脱氨酶2(ADA 2)缺乏症患儿的临床特征及基因型特点,提高对该病的认识。方法回顾性分析3例ADA2缺乏症患儿的临床特点并利用全外显子测序进行遗传学分析。利用试剂盒测定患儿血浆中ADA2酶的活性。总结该病的临床及基因型特征。结果本组3例患儿均存在ADA2基因变异,例1以反复发热、皮疹、惊厥为主要临床表现,合并脑卒中,伴炎症指标明显升高,ADA2基因存在复合杂合变异:c.139G>T和c.484T>C突变。例2以反复发热、皮疹为主要临床表现,病程中合并消化道穿孔、脑卒中,炎症指标明显升高。WES检测发现ADA2基因存在c.916C>T及c.1069G>A复合杂合突变。例3以反复发热、咳嗽为主要临床表现,合并心肌炎,伴免疫功能明显下降;WES检测发现患者ADA2基因存在c.849T>G纯合突变。血浆ADA2酶活性测定发现例1和2酶活性显著降低。结论ADA2缺乏症国内罕见,临床特征多变,掌握其临床特征及基因特点,有助于提高诊断水平。

中国人群腺苷脱氨酶2缺乏症致病基因携带者筛查

目的分析中国人群腺苷脱氨酶2缺乏症(deficiency of adenosine deaminase 2,DADA2)致病基因频率,为有效开展中国人群DADA2的防控和干预工作提供依据。方法回顾性分析2015年1月至2021年1月于北京智因东方转化医学研究中心有限公司进行全外显子组测序的11.1万例原始数据,对ADA2基因致病和可能致病性突变进行携带者筛查,分析ADA2基因杂合突变的类型和等位基因频率。结果发现29种ADA2基因致病和可能致病性杂合突变,其中6种[c.730G>T(p.E244X)、c.1049_c.1061 delAGCTGCCTTACTT(p.K350Tfs*14)、c.940A>T(p.K314X)、c.1239+2(IVS8)T>C、c.1240-1(IVS8)G>A、c.1087C>T(p.Q363X)]既往未见报道,等位基因累计频率为0.58%。人群基因频率最高的为p.F355L(0.5%),其次为p.Y453C(0.014%)和p.P193L(0.013%),其他26种位点均小于0.01%,为罕见突变位点。结论通过筛查丰富了ADA2基因突变谱,明确了中国地区人群的ADA2基因突变的携带率约1/171,推测中国人群的DADA2患病率约1/116964。

结核性胸积液腺苷脱氨酶2活性及免疫组化研究

目的:研究腺苷脱氨酶2(Adenosine deaminase 2,ADA2)在结核性胸积液总ADA活性所占比例,及其在结核性胸积液胸膜组织中的细胞来源。方法:测定确诊的32例x结核性胸积液ADA2的总ADA和ADA2活性,以ADA2抗体为一抗,用免疫组化方法检测ADA2在结核性胸积液胸膜组织中的细胞来源。结果:ADA2活性占总ADA的74.8%。结核性胸积液胸膜组织的ADA2免疫组化,可见朗格汉斯巨细胞、上皮样细胞和巨噬细胞被深染,胞浆和胞膜有大量的棕黄色沉着。结论:结核性胸积液的ADA活性主要由ADA2构成,ADA2源自巨噬细胞、上皮样细胞和朗格汉斯巨细胞。

腺苷脱氨酶2与血管炎的相关性研究进展

血管炎性病变临床表现多样,病因复杂。新近研究发现,部分血管炎性病变可能与猫眼综合征染色体候选基因1(cat eye syndrome chromosome region,candidate 1,CECR1)突变导致CECR1基因编码的腺苷脱氨酶2(adenosine deaminase 2,ADA2)功能缺陷相关。多项研究在结节性多动脉炎和不能明确诊断的血管炎性疾病患者中发现了相同的突变位点,并证实了存在ADA2蛋白功能缺陷。作为腺嘌呤核苷代谢过程中的腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)亚型之一的ADA2不论在早期胚胎发育,还是在特异性免疫系统中都发挥了作用,但目前对于ADA2的功能研究较少。推测ADA2缺陷可能通过增加腺苷水平和破坏血管内皮的完整性从而导致血管炎症的发生,机制尚待进一步研究。总之,ADA2缺陷可能揭示了ADA在人类疾病中的作用,为血管炎性疾病提供了诊断和治疗策略,现对其与血管炎的相关性研究做一综述,以期从遗传学角度探讨血管炎的病因。

血管内皮生长因子、白细胞介素-33、腺苷脱氨酶2联合检测诊断胸腔积液性质的价值

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、 白细胞介素-33(IL-33)、 腺苷脱氨酶2(ADA2)联合检测诊断胸腔积液性质的价值.方法 选取2016年6月至2018年6月在医院行胸腔穿刺抽液的21例恶性胸腔积液患者(恶性胸腔积液组)、13例结核性胸腔积液患者(结核性胸腔积液组)以及10例肺炎旁胸腔积液患者(肺炎旁胸腔积液组)作为研究对象,选取医院同期10例Light标准诊断的漏出液患者作为对照组,4组均进行VEGF、IL-33、ADA2水平检测,并进行组间比较,分析3项指标单独诊断以及联合诊断恶性胸腔积液的灵敏度、特异度和准确度.结果 4组VEGF、IL-33、ADA2水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中结核性胸腔积液组VEGF水平和ADA2水平最高,肺炎旁胸腔积液组IL-33水平最高;3项指标联合诊断恶性胸腔积液的灵敏度、特异度和准确度均高于3项指标单独诊断.结论 VEGF、IL-33以及ADA2联合检测诊断恶性胸腔积液的灵敏度、 特异度、 准确度均较高.

ADA2基因变异致腺苷脱氨酶2缺乏症的研究进展

腺苷脱氨酶2缺乏症(deficiency of adenosine deaminase 2,DADA2)是一种新近发现的自身炎症性疾病,由ADA2双等位基因功能缺失变异导致,属于单基因常染色体隐性遗传疾病。DADA2的临床表型主要包括血管炎及血管病变、低丙种球蛋白血症、淋巴细胞减少、纯红细胞再生障碍性贫血等。DADA2主要通过基因检测确诊,抗肿瘤坏死因子药物及造血干细胞移植是该疾病的主要治疗方案,其发病机制目前尚未完全阐明。本文将重点阐述腺苷脱氨酶2缺乏症的发病机制、诊断及治疗的研究进展。

成人腺苷脱氨酶2缺乏症并发神经系统损害的临床特征分析

目的分析成人腺苷脱氨酶2缺乏症(DADA2)并发神经系统损害的临床特征。方法回顾性分析2023年9月18日就诊于福建医科大学附属闽东医院神经内科的1例并发神经系统损害的成人DADA2患者的临床资料。在Pubmed、中国知网及万方数据库中检索与伴神经系统受累的成人DADA2相关的临床研究或病例报道,总结成人DADA2并发神经系统损害的临床特征。同时收集相同研究队列中伴神经系统受累的DADA2患儿的临床资料,对比分析成人DADA2和儿童DADA2临床特征的差异。结果本例患者为男性,30岁,主要表现为皮肤网状青斑、卒中发作和痉挛性截瘫。基因检测示腺苷脱氨酶2(ADA2)基因复合杂合突变,头颅磁共振成像示右丘脑和侧脑室旁腔隙性梗死灶、肥大性下橄榄核变性。文献复习发现迄今共报道22例(含本例)成人DADA2并发神经系统损害患者,发病年龄为25(19,29)岁,卒中是该疾病患者神经系统受累的最主要特征(17/22,77.3%),其次是脑神经(7/22,31.8%)和肢体神经损害(8/22,36.4%)。经予肿瘤坏死因子(TNF)抑制剂等治疗,17/20的患者病情稳定或好转。与并发神经系统损害的儿童DADA2患者相比,成人DADA2患者的发热[12/22(54.5%)比48/59(81.4%)]、关节炎[6/22(27.3%)比34/59(57.6%)]、血液学异常[4/22(18.2%)比28/60(46.7%)]的发生率明显减少(χ^(2)=5.998、5.907、5.489),差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论并发神经系统损害的成人DADA2一般于成年早期起病,主要表现为卒中,也可伴有周围神经损害。成年患者全身症状较儿童少见,及时予TNF抑制剂治疗后结局较好。

宁波地区腺苷脱氨酶2缺乏症致病基因携带者筛查

目的分析宁波地区腺苷脱氨酶2缺乏症(DADA2)致病基因ADA2携带率,为宁波地区DADA2的诊治提供循证医学依据。方法采用回顾性分析方法对宁波市妇女儿童医院2019年01月至2023年01月的4039例进行全外显子组测序受检者的原始数据进行ADA2基因致病和可能致病性变异携带者筛查,分析致病基因携带者变异的类型和携带率。结果共发现46例ADA2基因致病性杂合变异携带者,总携带率为1.15%(46/4039),8种不同的变异类型包括c.1065C>A(p.F355L)、c.1380G>C(p.M460I)、c.916C>T(p.R306X)、c.629T>A(p.I210N)、c.321delA(p.A109Lfs*11)、c.1358A>G(p.Y453C)、c.278T>C(p.I93T)和c.139G>T(p.G47W)。其中p.F355L人群携带率最高为0.79%(32/4039),其次为p.M460I和p.R306X位点,人群携率分别为0.10%和0.07%,其他5种变异位点携带率≤0.05%,为罕见变异位点。结论通过筛查明确了宁波地区人群的ADA2基因变异的携带率约为1/172,推测宁波地区人群DADA2的患病率约为1/118336。

儿童腺苷脱氨酶2缺乏症2例并文献复习

目的总结2例腺苷脱氨酶2(ADA2)缺乏症患儿的临床表型及基因特点,并进行文献复习,提高对该病的认识。方法对2019年3月至12月就诊于青岛大学附属医院的2例ADA2缺乏症患儿的临床资料和基因型进行分析。查阅国内外数据库相关文献,总结该病的临床特征及基因变异特点。结果1.本组2例患儿均存在ADA2基因突变,例1表现为反复发热、网状青斑、结节性多动脉炎及免疫缺陷,为ADA2基因c.571delC(p.Q191Sfs*5)纯合突变,国内外均未见报道,为新发变异;例2表现为反复发热、脂膜炎、下肢血管炎及免疫缺陷,为ADA2基因c.1358A>G(p.Y453C)纯合突变,该位点在国内尚未见报道。2.国外基因确诊患儿共171例,国内仅报道3例,加上本研究2例国内共5例,该5例主要临床表现反复发热(5/5例),皮肤网状青斑(4/5例),脂膜炎(1/5例),皮肤坏疽(1/5例),生长迟缓(1/5例),脑梗死(3/5例),体液免疫缺陷(4/5例),血液系统受累(3/5例),肌痛(2/5例),炎性指标C反应蛋白、红细胞沉降率升高(5/5例)。结论ADA2缺乏症临床表现多样,掌握其临床特点,有助于提高临床诊治水平。c.571delC突变位点国内外均未见报道,为新发现的ADA2基因突变类型,进一步丰富了ADA2基因谱。

腺苷脱氨酶2缺乏症一例

腺苷脱氨酶2(ADA2)缺乏症是近年来发现的第一种血管炎相关的单基因遗传病,呈常染色体隐性遗传[1]。该病是由于ADA2功能缺陷所致,表现为自身炎症反应综合征、卒中反复发作、类似结节性动脉炎的血管炎及免疫缺陷等。研究表明该病与编码ADA2的基因CECR1猫眼综合征候选基因1(CECR1)功能缺失突变有关,目前国内尚无相关报道。现报告1例ADA2缺乏症患儿的临床表现、实验室检查及CECR1基因突变结果,并对其家族成员进行相关基因检测,回顾性分析2014年至今所报道的ADA2缺乏症患者的资料,从性别比例、发病年龄、首发症状、实验室检查、CECR1基因突变类型、治疗方法及随访情况进行综合分析,以期提高广大医师对本病的认识。

儿童腺苷脱氨酶2缺乏症1例临床特征和基因分析并文献复习

目的加强国内儿科临床医生对儿童腺苷脱氨酶2(ADA2)缺乏症的认识,促进临床医生对该病的早期识别和诊断。方法分析2014年3月中国医学科学院北京协和医院儿科收治的1例诊断为ADA2缺乏症患儿临床表现、实验室、影像学检查及基因特点,并结合文献进行讨论。结果患儿以反复口腔溃疡、发热起病,逐渐出现网状青斑及神经系统症状,皮肤活检提示微小血栓形成,头颅磁共振成像(MRI)检查提示大脑梗死灶及出血灶,基因检测发现CECR1基因突变,为新发突变。实验室检查外周血ADA明显降低,诊断ADA2缺乏症,予患儿加用钙通道阻滞剂(CCB)及抗凝药物治疗。患儿临床症状好转出院。结论 ADA2缺乏症临床少见,该例为国内首例儿童患者,其基因检测的CECR1突变位点(c.254A>T p.N85I,c.851G>T p.G284V)未有报道,是新发致病突变点。掌握ADA2缺乏症临床特点,有助于提高临床诊治水平。

Sneddon综合征1例并文献复习

Sneddon综合征是一种罕见的神经皮肤综合征,主要累及中小动脉,典型临床表现为广泛的皮肤网状青斑,伴随反复发作的缺血性卒中。本病例是一位青年女性,在近10年多次经历小卒中事件,并伴有脊髓蛛网膜下腔出血和多发颅内动脉瘤。基因检测提示腺苷脱氨酶2(adenosine deaminase 2,ADA2)基因杂合突变(c.1240G>A)。患者曾接受氯吡格雷抗血小板聚集治疗,后停止该治疗。对于卒中反复发作的青年患者,医师应密切观察并详细询问皮肤病变情况,同时建议进行脑血管造影和基因检测,以便更全面地评估和管理这类病例。

基因治疗在免疫出生错误中的研究进展

免疫出生错误(inborn errors of immunity,IEI)是由遗传因素导致免疫结构或功能障碍所致的一类疾病,可累及固有免疫和适应性免疫。2022年IEI新分类包含485种IEI,分为十大类疾病。近年来随着分子生物学的快速发展,许多IEI的具体发病机制得以揭示,使得基因治疗在该类疾病的临床前和临床研究成为可能。该文综述基因治疗在IEI中的研究和应用,以进一步提高临床医生对IEI诊治的认知。

ADAR2通过编辑MAVS基因的3'UTR降低其在细胞中的表达

目的探讨ADAR2在细胞中对线粒体抗病毒信号蛋白MAVS表达的影响及其机制。方法用RT-qRCR检测ADAR家族在细胞中的表达、ADAR2质粒过表达效果以及MAVS的表达;焦磷酸测序验证ADAR2对MAVS的3'UTR区域位点的编辑;双荧光素酶报告质粒检测荧光素酶的相对表达;Western blot检测ADAR2和MAVS蛋白的表达。结果 ADAR家族中ADAR1丰度最高,其次ADAR2也有表达,而ADAR3的表达量很低,几乎检测不到(P<0.05);ADAR2对MAVS的3'UTR区域上的chr20:3869744位点发挥RNA编辑作用(P<0.001);MAVS的3'UTR编辑位点上,编辑型G比正常型A的荧光素酶活性显著降低(P<0.01);在转录和翻译水平,ADAR2都显著降低了MAVS的表达(P<0.05)。结论 ADAR2通过编辑MAVS的3'UTR上的chr20:3869744位点,使其发生A→G的替换,进而抑制了MAVS基因的表达。

胸腔积液ADA,ADA2及ACE水平检测对结核性和恶性胸腔积液的鉴别诊断价值

目的探讨胸腔积液腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)、腺苷脱氨酶同工酶2(adenosine deaminase isozyme 2,ADA2)及血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)水平检测对结核性和恶性胸腔积液的鉴别诊断价值。方法选取安康市汉滨区第三人民医院2018年1月~2019年12月52例胸腔积液确诊患者,采用酶显色测定法测定ADA,ADA2,采用连续监测法测定ACE。使用受试者工作特征(ROC)曲线,并计算曲线下面积(AUC)评估ADA,ADA2和ACE活性水平对结核性与恶性胸腔积液鉴别诊断的意义。结果ADA2,ACE和ADA活性水平,结核性胸腔积液患者分别为47.17±26.22,52.73±30.07和59.90±35.72 U/L,恶性胸腔积液患者分别为17.70±7.82,24.18±8.94和20.48±6.91 U/L,结核性胸腔积液患者胸腔积液中ACE,ADA2和ADA活性水平高于恶性胸腔积液患者,差异均有统计学意义(t=4.85~5.808,均P<0.001);ACE,ADA和ADA2曲线下面积分别为0.865,0.881和0.899,对鉴别结核性与恶性胸腔积液均有意义,ADA2的鉴别诊断效能较高;ADA2联合ADA,ADA2联合ACE,ADA联合ACE的曲线下面积依次为0.875,0.942和0.952,ADA联合ACE的鉴别诊断效能较高。结论ADA,ADA2和ACE对鉴别诊断结核性与恶性胸腔积液均有意义;单指标中ADA2和联合指标中ADA联合ACE的鉴别诊断效能较高。

ADAR2在神经病理性疼痛小鼠中的表达及编辑活性

目的探讨RNA腺苷脱氨酶2(ADAR2)在神经病理性疼痛(NP)小鼠中的表达及编辑活性。方法40只C57BL/6J小鼠随机分为两组,每组20只。模型组小鼠坐骨神经主干均匀间隔结扎4道,构建慢性缩窄性损伤模型小鼠;假手术组仅暴露坐骨神经但不结扎。在术前及术后3、7、14、21、28 d观察小鼠行为学表现,采用逆转录PCR检测小鼠背根神经节中ADAR2 mRNA表达及编辑活性,Western blot和免疫荧光法检测ADAR2蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组小鼠在术后3、7、14、21、28 d机械缩足反射阈值和热缩足反射潜伏期下降(P<0.05)。术后7 d,模型组ADAR2 mRNA和蛋白表达、ADAR2选择性剪接体表达量以及选择性剪接率均高于假手术组(P<0.05)。结论ADAR2在NP小鼠中的表达及编辑活性上调,可能在NP的发生、发展中起到重要作用。

第544例结节红斑—血小板减少—青斑样血管病—免疫缺陷

腺苷脱氨酶2缺乏综合征为一种罕见的常染色体隐性遗传病。本文报道1例成人起病的患者,以皮疹、血小板减少为主要临床表现,伴有免疫缺陷,病情迁延复杂,经临床分析、皮肤病理、血清酶学、基因测序得以明确诊断。

肌萎缩性侧索硬化症和兴奋性氨基酸

以α-氨基-3-羟基-4异恶唑-丙酸(AMPA)受体介导的Ca^(2+)通透性增加,Ca^(2+)流入比例增大而导致神经细胞死亡的理论已经明确。AMPA受体的谷氨酸受体2(GluR2)亚基的Q/R部位编辑率低下是散发性肌萎缩性侧索硬化(ALS)运动神经元死亡的主要原因。变异的铜-锌超氧化物歧化酶(SOD1)相关的家族性ALS(ALS1)是以AMPA受体含GluR2亚基的比例减少为基础;以延髓脊髓性肌萎缩症(SMBA)为代表运动神经元的死亡,不是AMPA受体所介导。ALS GluR2 Q/R部位核糖核酸(RNA)编辑的恢复可以考虑成为ALS治疗的特异方法,而AMPA受体拮抗剂可以防止ALS1运动神经元的变性。

胸水ADA及ADA同工酶在结核性胸膜炎中的诊断价值

目的:探讨胸水ADA及ADA同工酶联合胸水淋巴细胞与中性粒细胞比值(L/N Ratio)在结核性胸膜炎中的诊断价值。方法:纳入2019年1月~2019年6月长沙市中心医院收治的155例疑似结核性胸膜炎患者,检测患者胸水ADA和ADA2活性以及胸水L/N。分别比较不同阈值下ADA、ADA2和胸水L/N对诊断结核性胸膜炎的敏感度和特异性。结果:ADA阀值为48 U/L时,诊断结核性胸膜炎的敏感度为90.6%,特异性为88.6%。ADA2阀值为26 U/L时,诊断结核性胸膜炎的敏感度为90.6%,特异性为94.3%。L/N阀值为0.70时,诊断结核性胸膜炎的敏感度为100%,特异性为48.8%。ADA阀值为48U/L结合L/N阀值0.70时,诊断结核性胸膜炎的敏感度为90.6%,特异性为98.4%。ADA2阀值为26 U/L结合L/N阀值0.70时,诊断结核性胸膜炎的敏感度为90.6%,特异性为97.6%。ADA阈值48U/L,ADA2阀值26 U/L结合L/N阀值0.70时,诊断结核性胸膜炎的敏感度为96.9%,特异性为97.6%。结论:ADA、ADA同工酶联合L/N检测分析可以有效早期筛检结核性胸膜炎。