腺苷A1受体激动剂预处理兔延迟相心肌蛋白质组学分析

目的:研究腺苷A1受体激动剂2-氯环戊腺苷(2-chloro-N6-cyclopentyladenosine,CCPA)预处理延迟相缺血再灌注心肌保护的蛋白质表达谱的变化。方法:8只新西兰大白兔随机分为CCPA预处理组(CC-PA组)和生理盐水预处理组(NS组)。CCPA组用100μg/kg CCPA预处理大白兔,NS组用生理盐水预处理。24 h后冠状动脉左前降支行30 min缺血/2 h再灌注,然后取左心室缺血区心肌组织进行蛋白质组学研究。另取12只新西兰大白兔随机分为假手术组(Sham组)、生理盐水预处理组(NS组)和CCPA预处理组(CCPA组),每组4只,用Western印迹验证差异蛋白αB-晶状体蛋白的表达。结果:双向凝胶电泳分析发现2组表达明显差异的蛋白点有55个。其中17个差异蛋白质点用基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱技术以及Mas-cot和Expasy软件分析,初步鉴定出17个蛋白质。这些蛋白质包括应激反应蛋白、代谢相关蛋白、信号调节蛋白、离子通道蛋白、免疫相关蛋白等。Western印迹证实αB-晶状体蛋白在CCPA组中的表达明显上调。结论:CCPA预处理延迟相缺血再灌注心肌组织的蛋白质表达谱发生改变,这些蛋白质可能与腺苷A1受体激动剂预处理延迟相缺血再灌注心肌保护作用有关。

腺苷A1受体激动剂预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后HIF-1α及GPx1的影响

目的探究腺苷A1受体激动剂预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,以及进一步明确其与低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和谷胱甘肽过氧化物酶1(GPx1)之间的相关性。方法选择新乡医学院60只健康雄性SD大鼠(周龄7~9周)为研究对象,将其随机分为3组,分别为假手术组(F组,N=20只)、缺血再灌注组(IR组,N=20只)、环己基腺苷预处理组(AP组,N=20只)。其中F组、IR组方法为注入2 mL的0.9%氯化钠,AP组注入0.9%氯化钠注射液2 mL+环己基腺苷(CHA)注射液160μg/kg。各组对48 h亚组大鼠行头颅MRI检查,并对其脑组织行HE染色法。测定各组大鼠脑内不同时间点的HIF-1α、GPx1蛋白表达。结果(1)经头颅MRI检查,AP组、IR组的缺血灶体积均减小,F组未见缺血病灶。(2)HE染色,可见AP组、IR组的缺血灶处伴有脑损伤,AP组较IR组轻,而F组脑细胞正常,三组对比差异有统计学意义(P<0.05)。(3)与F组大鼠对比,其他组大鼠在6 h、24 h、48 h的HIF-1α蛋白表达水平相对较高,差异有统计学意义(P<0.05);而AP组大鼠在6 h、24 h、48 h的HIF-1α蛋白表达水平均高于IR组大鼠,差异有统计学意义(P<0.05);三组大鼠之间在2 h的HIF-1α蛋白表达水平对比差异无统计学意义(P>0.05)。(4)各时段F组大鼠的GPx1蛋白表达均高于其他两组,AP组大鼠除2 h之外,其他时段均高于IR组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腺苷A1受体激动剂预处理的脑保护作用较高,考虑与上调HIF-1α、GPx1蛋白的表达有关,因此有利于减轻脑缺损再灌注损伤程度,以促进预后恢复。

腺苷A_1受体激动剂诱导心脏缺血预处理延迟效应的实验研究

目的 探讨腺苷 A1 受体激动剂能否诱导心脏缺血预处理的延迟保护及其与锰 -超氧化物歧化酶 (Mn-SOD)表达的关系。 方法 按随机数字表法将 6 0只鼠分为 6组 ,每组 10只。 A组 :用腺苷 A1 受体激动剂 2 -氯环戊腺苷 (CCPA)预处理 ;B组 :为缺血对照 ,静脉注射生理盐水 ;C组 :注射反义全巯代磷酸化寡核苷酸 (ODN)后再注射生理盐水 ;D组、E组和 F组在预处理前分别静脉注射 Mn- SOD反义 ODN、意义 ODN、错配 ODN。观察左心室压力变化最大速率 (±dp/ dtmax)的恢复率 ,肌酸激酶同工酶 (CK- MB)释放活性 ,心肌三磷酸腺苷 (ATP)、丙二醛 (MDA)含量和 Mn- SOD活性。 结果 A组、E组和 F组± dp/ dtmax恢复率、心肌 ATP含量和 Mn- SOD活性均高于 B组、C组和D组 (P<0 .0 5 ,0 .0 1) ,而 CK- MB释放活性和 MDA含量均低于 B组、C组和 D组 (P<0 .0 5 )。 结论 腺苷 A1 受体激动剂可诱导预处理的延迟效应 ,减轻心肌缺血 -再灌注损伤 ,其机制与 Mn- SOD的高表达有关。

核转录因子-kB在腺苷A_1受体激动剂预处理中的作用

目的:了解核转录因子-kB(NF-kB)与腺苷A_1受体激动剂(CCPA)预处理延迟阶段中的作用。方法:健康雄性Wistar大鼠随机分组。A组:以CCPA预处理;K组:在CCPA处理前15min注射NF-kB抑制剂;C组:对照组仅用CCPA溶剂注射。24h后制成离体心脏,作离休灌注心,12～15℃缺血180min,间断灌注4℃改良st.Thomas心麻液,再灌注60min。观察心功能,心肌Mn-SOD、MDA和ATP等指标。结果:A组左心压力上升最大速度的恢复率、心肌Mn-SOD、ATP都明显高于K、C组;MDA为15.78±2.39(nmol/mg蛋白质)低于K、C组,差别均有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:NF-kB在腺苷A_1受体激动剂(CCPA)预处理延迟阶段中起着信号传递的关键作用。

HMGB1-TLR4介导的NF-κB信号通路在腺苷预处理保护脑缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨HMGB1-TLR4-NF-κB信号通路在脑缺血再灌注损伤中的作用及腺苷预处理对此信号通路的影响。方法:从新乡医学院动物中心选取体质量220~270 g的成年雄性SD大鼠80只,随机分为F组(假手术组)、I/R组(缺血再灌注组)、AP组(腺苷预处理组)。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。采用动物行为学评分法对造模成功的大鼠进行神经功能量化分析,HE染色观察各组大鼠的脑细胞形态结构,TTC染色观察脑梗死并计算梗死部位的体积;IHC染色检测大鼠脑组织的HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表达。应用SPSS26.0软件对实验所得数据进行单因素方差分析。结果:I/R组、AP组缺血再灌注后不同时间段大鼠神经功能均呈现不同程度的损伤,且其评分均明显高于F组,差异有统计学意义(P<0.05),且AP组神经功能损伤较I/R组明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05);TTC染色显示AP组、I/R组大鼠的脑梗死体积明显大于F组[(93.670±4.509) mm^(3)、(123.670±7.234) mm^(3) vs (0.000±0.000) mm^(3)],且AP组大鼠脑梗死体积较I/R组明显缩小,差异均有统计学意义(P<0.05)。F组大鼠的HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白均有少量表达,但AP组、I/R组较F组表达显著,且AP组各亚组大鼠的HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表达量明显低于I/R组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:腺苷预处理可以通过减少HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白的表达,进而对脑缺血再灌注损伤的大鼠起保护作用。

腺苷A1受体激动剂预处理对保存心脏效果的影响

目的探讨腺苷A1受体激动剂预处理延迟效应对低温St.Thomas液保存大鼠心脏的影响及其与心肌ATP敏感性钾通道的关系。方法Wistar大鼠随机分6组,A、C、D组在缺血前24h以高选择性A1受体激动剂CCPA预处理,B、E注射生理盐水;而D、F组在缺血前应用ATP敏感性钾通道阻滞剂氯磺环己脲。然后A、B组4℃St.Thomas液保存4h,复灌1h,而另4组低温缺血3h,复灌1h。观测心功能、CKMB、ATP含量等。结果A组左室内压上升与下降最大速率恢复率(±dp/dtmax,%)为62.83±17.27,66.81±18.99,心肌ATP含量(10-3μmol/wet.g)3.67±1.42;而B组分别为40.41±18.29,44.70±25.14,1.46±0.54;A组都明显高于B组,差异都有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。C组±dp/dtmax恢复率、ATP含量都明显高于D、E、F组(P<0.01或P<0.05),而D、E、F组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论以腺苷A1受体激动剂可诱导预处理的延迟效应,改善低温St.Thomas液保存离体大鼠心脏的保存效果,而该效应与心肌ATP敏感性钾通道开放有关。

腺苷A1受体激动剂延迟预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨腺苷A1受体激动剂2-氯环戊腺苷(2-chloro-N6-cyclopentyla denosine,CCPA)延迟预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的保护机制。方法:30只健康新西兰雄性大白兔随机分成3组:假手术组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、CCPA组(组),每组10只。C组仅行左冠脉套线而不阻断160min,I/R组行左冠脉阻断40min,再灌注120min,P组在静注CCPA0.mg/kg24h后处理同I/R组。各组分别于左冠前降支阻断前20min(T1)、左冠前降支阻断20min(T2)、左冠前降支阻断40mi(T3)、心肌再灌注1h(T4)心肌再灌注2h(T5)5个时点抽取颈内动脉血测定血清中IL-10含量。再灌注120min后,测心肌热休克蛋白70(Heat shock protein70,HSP70)蛋白表达和心梗面积,电镜下观察细胞超微结构变化。结果:与I/R组比,P组IL-10含量和HSP70表达增高(P<0.05),心肌梗死面积减少(P<0.05),细胞结构损伤减轻。结论:CCPA延迟预处理通过增高心肌HSP7表达和IL-10水平来减轻缺血再灌注损伤发挥心肌保护作用。

腺苷A_1受体激动剂后处理对兔心肌缺血-再灌注损伤的影响

目的探讨腺苷A1受体激动剂(2-氯环戊腺苷,CCPA)后处理对兔心肌缺血-再灌注损伤的保护作用。方法32只兔随机均分为四组:假手术组(S组,开胸后仅行左冠状动脉套线而不阻断160min)、缺血-再灌注组(IR组,行左冠状动脉前降支阻断40min,再灌注120min)、缺血后处理组(IPC组,结扎左冠状动脉前降支40min,再通30s,结扎30s,重复3次,再灌注120min)和CCPA后处理组(APC组,结扎左冠状动脉前降支40min,开放左冠状动脉1min内予以静推CCPA100μg/kg,再灌注120min)。分别于左冠状动脉前降支阻断前20min(T1)、左冠状动脉前降支阻断20min(T2)、左冠状动脉前降支阻断40min(T3)、心肌再灌注1h(T4)和心肌再灌注2h(T5)抽取颈内动脉血测定血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量。再灌注末抽血离心测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),测定心肌梗死面积。结果和IR组相比,IPC组和APC组再灌注各个时间点cTnI均降低(P<0.05);IPC组和APC组梗死面积均小于IR组(P<0.05);IPC组和APC组血清中SOD的活性高于IR组,MDA的含量低于IR组(P<0.05)。结论腺苷A1受体激动剂后处理具有类似缺血后处理的心肌保护作用。其机制可能是通过减少氧自由基的生成,增强心肌抗氧化能力。

金属硫蛋白介导腺苷A1受体激动剂延迟预处理对兔心肌的保护作用

目的:探讨腺苷A1受体激动剂——2-氯环戊腺苷(2-chloro-N6-cyclopentyladenosine,CCPA)延迟预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的延迟相保护机制。方法:30只健康新西兰雄性大白兔随机均分成3组:假手术组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)和CCPA组(P组)。C组仅行左冠脉套线而不阻断160min;I/R组行左冠脉阻断40min,再灌注120min;P组在静注CCPA0.1mg/kg24h后处理同I/R组。再灌注结束后观察心肌细胞超微结构和心肌梗死面积的变化,测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdhyde,MDA)含量,免疫印记法测心肌金属硫蛋白(metallothionein,MT)表达。结果:与I/R组比,P组血清中SOD的活性增高,MDA的含量降低(P<0.05),MT表达增高(P<0.05),心肌梗死面积减少(P<0.05)。结论:CCPA预处理对缺血再灌注心肌的延迟相保护作用与促进心肌MT表达有关。

腺苷A1受体激动剂延迟预处理对缺血再灌注兔心肌炎性细胞因子的影响

目的探讨腺苷A1受体激动剂(2-氯环戊腺苷,CCPA)延迟预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的保护机制及对炎性细胞因子的影响。方法30只健康新西兰雄性大白兔随机分成3组:假手术组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、CCPA组(P组),每组10只。C组仅行左冠脉套线而不阻断160min,I/R组行左冠脉阻断40min,再灌注120min,P组在静注CCPA0.1mg/kg24h后,处理同I/R组。各组分别于左冠前降支阻断前20min(T1)、左冠前降支阻断20min(T2)、左冠前降支阻断40min(T3)、心肌再灌注1h(T4)心肌再灌注2h(T5)5个时点抽取颈内动脉血测定血清中肌钙蛋白(cTnI)、白介素-10(IL-10)和白介素-6(IL-6)含量。再灌注结束后观察心肌细胞超微结构的变化,用伊文思蓝和TTC染色法测心梗面积。结果与C组比,I/R组与P组cTnI、IL-10和IL-6含量均增高(P<0.05),但与I/R组比,P组IL-10增高(P<0.05),心肌梗死面积减少(P<0.05),cTnI和IL-6降低(P<0.05)。结论腺苷A1受体激动剂延迟预处理通过调控炎性细胞因子平衡发挥心肌保护作用。

腺苷A1受体拮抗剂的长期干预对阿尔茨海默病模型小鼠认知功能的影响

目的探讨腺苷A1受体拮抗剂DPCPX的长期干预对阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)模型小鼠认知功能相关电生理指标、行为学表现及病理标志物的影响。方法使用7月龄C57BL/6J及APP/PS1小鼠,随机分为C57-对照组、C57-DPCPX组、APP/PS1-对照组及APP/PS1-DPCPX组,分别采用DPCPX(1mg/kg·d)或对照溶剂连续腹腔注射21d。采用Plexon系统记录小鼠海马CA1区局部场电位,MATLAB软件评估海马认知功能相关电生理指标——尖波涟漪(sharpwaveripples,SWRs)的特征,Morris水迷宫实验评估小鼠的空间记忆能力,免疫荧光染色检测海马内Aβ斑块沉积。结果分析4组小鼠认知功能相关电生理指标(SWRs)、行为学表现(Morris水迷宫)及脑组织Aβ检测结果发现:①在SWRs的平均数量及平均持续时间上,C57-对照组与C57-DPCPX组之间,APP/PS1-对照组与APP/PS1-DPCPX组之间差异均无统计学意义(均P>0.05),仅C57-对照组显著多于APP/PS1-对照组(P=0.0019,P=0.0202)。②Morris水迷宫实验中,在学习阶段的逃避潜伏期上,C57-对照组与C57-DPCPX组之间,APP/PS1-对照组与APP/PS1-DPCPX组之间差异均无统计学意义(均P>0.05),仅C57-对照组与APP/PS1-对照组相比显著缩短(P<0.05)。在探索阶段,在穿越平台次数及目标象限停留时间占比上,C57-对照组与C57-DPCPX组之间,APP/PS1-对照组与APP/PS1-DPCPX组之间差异均无统计学意义(均P>0.05),仅C57-对照组显著多于APP/PS1-对照组(P=0.0024,P=0.0415)。③在Aβ斑块的数量及面积上,APP/PS1-对照组与APP/PS1-DPCPX组相比差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论腺苷A1受体拮抗剂DPCPX的长期干预不能显著改善AD模型小鼠的认知功能,提示对于AD这一具有复杂发病机制的疾病,仅针对单一靶点的干预很难达到显著改善认知功能的作用。

腺苷A_1受体激动剂对兔血一氧化氮水平及急性心肌梗塞范围的影响

为了解腺苷Ａ１受体激动剂ＲＰＩＡ对血一氧化氮（ＮＯ）水平及急性心肌梗塞范围的影响，２０只新西兰兔随机分为四组：Ⅰ，前降支缺血６０ｍｉｎ，再灌注９０ｍｉｎ；Ⅱ，缺血前１５ｍｉｎ给予ＲＰＩＡ（０．３ｍｇ／ｋｇ）ｉｖ，余同Ⅰ组；Ⅲ，两次缺血１０ｍｉｎ，间隔１０ｍｉｎ然后缺血６０ｍｉｎ，再灌注９０ｍｉｎ；Ⅳ，缺血前１５ｍｉｎ给予选择性腺苷Ａ１受体拮抗剂ＤＰＣＰＸ（１．０ｍｇ／ｋｇ）ｉｖ余同Ⅲ组。分别测定缺血再灌注期血ＮＯ水平、心率、平均血压及ｄｐ／ｄｔ，实验结束经ＴＴＣ染色测定心肌梗塞范围。结果显示，ＲＰＩＡｉｖ后血ＮＯ水平迅速上升达基础值二倍，并在整个缺血期持续高于对照组，同时伴有心率（２６．３％）和平均血压（１７．３％）的下降，ｄｐ／ｄｔ测值各组无明显差异。心肌梗塞范围，Ⅰ．２３．１±９．４％，Ⅱ．１２．１±２．２％，Ⅲ．１１．４±３．０％，Ⅳ．２１．４±７．８％。结论：缺血预适应（ＩＰＣ）减少急性心肌梗塞范围，腺苷Ａ１受体激动剂可以达到ＩＰＣ效果，而该受体阻滞可以取消ＩＰＣ效果；血ＮＯ水平的升高有可能是ＲＰＩＡ引起ＩＰＣ效应的原因之一。

腺苷预处理对脑缺血再灌注大鼠小胶质细胞极化及神经损伤的影响

目的探讨大鼠脑缺血再灌注(IR)损伤后小胶质细胞表型的变化以及腺苷对脑IR损伤大鼠的神经损伤的作用。方法将36只健康雄性Sprague Dawley大鼠按随机数字表法分为假手术(Sham)组、IR组和腺苷预处理(AP)组,每组12只。AP组大鼠造模前每天腹腔注射2 mL腺苷注射液,连续3 d;Sham组及IR组大鼠每天腹腔注射2 mL生理盐水,连续3 d。IR组和AP组大鼠采用线栓法构建大脑中动脉栓塞模型;Sham组大鼠仅分离颈动脉,不结扎血管。造模2 h后,采用5分制神经行为学评分对各组大鼠进行神经行为学评估。恢复大脑中动脉血流灌注24 h后处死各组大鼠,取出脑组织,采用苏木精-伊红(HE)染色观察缺血半暗带区域脑组织形态学改变,免疫荧光染色法检测M1型小胶质细胞标志物和M2型小胶质细胞标志物的共表达情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测2组大鼠脑组织中M1型小胶质细胞释放的促炎因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和M2型小胶质细胞释放的抗炎因子IL-4、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)的相对表达量。结果IR组及AP组大鼠神经行为学评分显著高于Sham组,IR组大鼠神经行为学评分显著高于AP组(P<0.05)。HE染色结果显示,Sham组大鼠脑组织中细胞结构完整,细胞核清晰可见,细胞排列紧密,无间质水肿;IR组大鼠脑组织中细胞结构明显破坏,细胞排列不整齐,间质疏松,胞体内出现空泡;AP组大鼠脑组织中细胞结构较IR组完整,正常细胞数量较多,排列较整齐,细胞核较完整。免疫荧光染色结果显示,IR组、AP组大鼠脑缺血半暗带区域M1型、M2型小胶质细胞数量显著高于Sham组,IR组大鼠M1型小胶质细胞数量显著高于AP组,M2型小胶质细胞数显著低于AP组(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,IR组、AP组大鼠脑组织中促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、iNOS和抗炎细胞因子IL-4、IL-10、TGF-β相对表达量显著高于Sham组(P<0.05);AP组大鼠中促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、iNOS相对表达量显著低于IR组(P<0.05),抗炎细胞因子IL-4、IL-10、TGF-β相对表达量显著高于IR组(P<0.05)。结论AP可促进大鼠脑IR损伤后小胶质细胞由M1型极化为M2型,抑制促炎因子的释放,增加抗炎因子的释放,对脑IR损伤大鼠具有神经保护作用。

A3腺苷受体激动剂预处理对兔体外循环中肺组织损伤的影响

目的研究A3腺苷受体(A3AR)激动剂IB-MECA预处理对兔体外循环(CPB)中肺组织损伤的影响。方法24只新西兰大白兔随机分为对照组(仅行体外循环)、激动剂组(阻断主动脉前15min静脉注射IB-MECA)和拮抗剂+激动剂组(IB-MECA干预前15min静脉注射选择性A3AR拮抗剂MRS-1191),每组8只。CPB结束后采集样本,分别检测和比较各组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-8(IL-8)水平、肺组织丙二醛(MDA)含量和髓过氧化物酶(MPO)活性、肺组织湿/干重比(W/D)、氧合指数(PaO2/FiO2)、肺血管阻力(PVR)和气道压(AWP)等指标,观察各组动物肺组织病理学改变。结果CPB后,激动剂组血清TNF-α和IL-8水平显著低于对照组和拮抗剂+激动剂组(P<0.05);与对照组和拮抗剂+激动剂组比较,激动剂组CPB后肺组织W/D较小,MDA含量较少,MPO活性较低,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);CPB后,激动剂组PaO2/FiO2显著高于对照组和拮抗剂+激动剂组(P<0.05),而AWP和PVR显著低于对照组和拮抗剂+激动剂组(P<0.05);组织学观察发现,激动剂组肺组织的组织病理学改变较对照组和拮抗剂+激动剂轻微。结论A3AR激动剂IB-MECA预处理可显著减轻CPB过程中的肺组织损伤程度。

腺苷A_1受体激动剂CHA对缺血后脑组织β－EP含量的影响

用放射免疫法测定沙土鼠半球缺血模型脑组织中β－ＥＰ（β－ｅｎｄｏｒｐｈｉｎ）含量，观察缺血后β－ＥＰ含量的变化及腺苷Ａ１受体激动剂ＣＨＡ（ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌａｄｅｎｏｓｉｎｅ）对缺血后β－ＥＰ含量变化的影响。结果显示：沙土鼠缺血８ｈ后β－ＥＰ含量明显增加，且与卒中症状呈正相关，与脑比重呈负相关。ＣＨＡ可以改善卒中症状，减轻脑水肿，抑制缺血后β－ＥＰ的升高。提示缺血后中枢β－ＦＰ增加会加重缺血性损伤，腺苷对内源性阿片肽系统具有抑制作用，腺苷抑制β－ＥＰ的升高可能是其抗缺血性脑损伤的又一机理。

腺苷 A_1 受体激动剂 CHA 对缺血性脑水肿的影响

在沙土鼠脑半球缺血模型上，观察了腺苷Ａ１受体激动剂ＣＨＡ（Ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌａｄｅｎｏｓｉｎｅ）对缺血８ｈ内的卒中发生率、卒中症状、以及脑水肿的影响。分析了脑水肿程度与卒中症状的关系。结果显示：ＣＨＡ可以延迟沙土鼠缺血后卒中发生时间，降低卒中发生率，改善卒中症状，减轻缺血性脑水肿。卒中指数与脑组织比重呈明显的负相关。提示腺苷减轻脑水肿，可能是其抗缺血性脑损伤的保护作用之一。

腺苷A_1受体激动剂对异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大的抑制作用

目的 利用体外培养的乳鼠心肌细胞 ,观测腺苷A1受体激动剂 ,R(-) N6 (2 phenylisopropyl)adenosine (R PIA )对异丙肾上腺素 (Isoproterenol,ISO)诱导的心肌细胞肥大的抑制作用 ,并且探讨其作用机制。方法 在二十四孔培养板上进行新生大鼠心肌细胞培养 ,待细胞长成单层后 ,换成低血清培养基 ,分组给药 ,48h后用Lowry’s法测心肌细胞的蛋白质含量 ;用计算机CIAS大恒细胞图象分析系统测量心肌细胞体积 ;用 [3H] leucine标记法测定心肌细胞蛋白合成。结果 在低血清 (0 4% )环境下 ,ISO明显诱导了心肌细胞蛋白含量增加 ,体积增大和蛋白合成增加。R PIA可以明显抑制ISO诱导的心肌细胞蛋白含量增加、体积增大、蛋白合成增加的作用 ,该种作用可以被A1受体拮抗剂 8 cy clopentyl 1,3 dipropylxanthine(CPDPX)所拮抗。结论 在低血清环境下 ,ISO明显诱导心肌细胞肥大 ,ISO诱导心肌细胞肥大通过激动 β -肾上腺受体途径。腺苷明显抑制ISO诱导的心肌肥大 。

腺苷A_1受体触发延迟预处理对兔心保存的实验研究

目的探讨腺苷A1 受体激动剂延迟预处理对供心的保护效果。方法大白兔以A1 受体激动剂PIA预处理24h后制成离体心脏,以4℃改良St.Thomas液诱导心脏停搏 ,再放入该液中低温保存4h ,再灌注1h。观察心功能恢复率、心肌ATP、CK -MB释放量。另设单纯改良St.Thomas液保存对照组。结果PIA预处理心功能恢复率 (+dp/dtmax % )为59.75±18.41 ,明显高于对照组 (38.18±13.92),差别有显著性 (P<0.05)。心肌ATP含量 (10-3μmol/wetg)PIA预处理组为4.08±1.34 ,明显高于对照组 (2.02±0.88) ,差异亦有显著性(P<0.01)。结论腺苷A1 受体激动剂延迟预处理能改善供心保存效果。

腺苷A2a受体激动剂对脓毒症急性肾损伤中内质网应激的调节作用

目的:探究腺苷A2a受体激动剂对脓毒症诱导急性肾损伤(AKI)模型大鼠内质网应激(ERS)途径及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响。方法:实验分为4组,包括对照组、腺苷A2a受体激动剂(CGS21680)组、模型(AKI)组、腺苷A2a受体激动剂干预(CGS21680+AKI)组,每组10只SD大鼠,CGS21680组和CGS21680+AKI组腹腔注射CGS21680,接着将除对照组外的其余3组大鼠均制备AKI模型。1周后,全自动生化仪检测血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清肾损伤分子-1(KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平,苏木精-伊红(HE)染色和过碘酸雪夫(PAS)染色观察肾组织病理形态学变化情况,TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色观察肾组织内细胞凋亡情况,免疫组化染色检测肾组织内CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78),蛋白质免疫印迹(Western blot)法测定肾组织X-盒-结合蛋白-1(XBP1)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核起始转录因子2α亚基(eIF2α)及磷酸化真核细胞起始因子2α(p-eIF2α)表达水平,免疫组化染色检测肾组织内MCP-1阳性表达情况,Western blot法测定肾组织中MCP-1蛋白表达水平。结果:与对照组比较,AKI组大鼠SCr、BUN、KIM-1、NGAL水平升高(P<0.05),肾组织内可见肾小管扩张、变性及肾小球水肿等病理损伤现象,TUNEL阳性率增加(P<0.05),GRP78、CHOP阳性表达比例升高(P<0.05),肾组织内XBP1、PERK蛋白相对表达量及eIF2α/p-eIF2α比值均上调(P<0.05),MCP-1阳性表达比例与蛋白相对表达量也升高、上调(P<0.05)。与AKI组比较,CGS21680+AKI组大鼠SCr、BUN、KIM-1、NGAL水平降低(P<0.05),肾组织病理损伤情况明显改善,TUNEL阳性率减少(P<0.05),GRP78、CHOP阳性表达比例降低(P<0.05),肾组织内XBP1、PERK蛋白相对表达量及eIF2α/p-eIF2α比值均下调(P<0.05),同时,MCP-1阳性表达比例与蛋白相对表达量也降低、下调(P<0.05)。结论:腺苷A2a受体激动剂能够减轻AKI大鼠急性肾损伤,这可能与其缓解内质网应激,抑制MCP-1水平有关。

腺苷1型受体在肾脏疾病中的研究进展

腺苷在细胞内、外具有多种信号转导功能,通过激活不同类型的腺苷受体发挥生物学作用。腺苷1型受体作为高亲和力受体,在肾脏组织中广泛表达,参与炎症、免疫、血流动力学调节。目前,糖尿病肾病、高血压肾病、急性肾损伤等常见肾脏疾病的发病机制尚未完全明确。腺苷1型受体参与了糖尿病肾病、肾脏缺血再灌注损伤、造影剂肾病的等多种肾脏疾病的病理过程。本文针对腺苷1型受体在肾脏疾病中的研究进展进行综述。