PI3K/AKT/GSK3β信号通路参与腺苷A1R介导异丙酚对缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用

目的:探讨PI3K/AKT/GSK-3β信号通路参与异丙酚对缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及机制。方法:健康雄性SD大鼠72只,所有大鼠参照Zea Longa法建立局灶性脑缺血再灌注损伤的模型。随机分成6组(n=12),A-假手术组,B-模型组(MCAO),C-异丙酚组,D-异丙酚+腺苷A1R拮抗剂组(DPCPX),E-异丙酚组+PI3K特异性抑制剂(LY294002),F-异丙酚+GSK-3β抑制剂组(SB216763),观察大鼠术后24 h神经功能评分情况;LDF监测插栓前后脑血流变化;采用TTC染色法检测各组大鼠的脑梗死体积;用HE染色方法观察大鼠脑组织形态学改变;免疫组织化学法检测Bcl-2阳性细胞表达;采用TUNEL检测各组大脑脑皮质缺血周围神经元凋亡细胞的百分率。结果:与A组比较,B、C、D、E及F组大鼠行为学、脑梗死体积、细胞凋亡率、Bcl-2蛋白表达量均增加(P<0.05);与C组比较,B、D、E组大鼠行为学评分,脑梗死体积及细胞凋亡率均明显增加,Bcl-2蛋白表达量均明显减少(P<0.01),F组Bcl-2蛋白表达量却增加,细胞凋亡率降低(P<0.05),行为学评分减少、梗死体积减少(P<0.05)。结论:腺苷A1R介导的异丙酚对缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用可能与PI3K/AKT/GSK-3β信号转导通路有关。

腺苷A_1受体激动剂抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大

目的探讨选择性腺苷A1受体(A1R)激动剂[R(-)-N6-(2-phenylisopropy1)adenosine(R-PIA)]在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大反应中的作用及其机制,特别是与钙调神经磷酸酶(CaN)表达的关系。方法以体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞为模型,应用AngⅡ(0.1μmol/L)诱导心肌细胞肥大,通过[3H]亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白的生成速率;消化分离法及计算机图像分析系统检测心肌细胞体积。Western-blot蛋白印迹法测定心房钠肽(ANP)、CaN表达含量,观察选择性腺苷A1R激动剂R-PIA(1μmol/L)对心肌细胞肥大的抑制作用及机制。结果R-PIA(1μmol/L)可以明显抑制AngⅡ(0.1μmol/L)诱导的蛋白合成增加[R-PIA(976.2±89.0)vs AngⅡ(1130.7±102.7)计数/(min.孔),P<0.05],抑制细胞体积的增加[R-PIA(1448±145)vs AngⅡ(2306±163)μm3,P<0.05]和心肌细胞内ANP、CaN的表达含量增加。该抑制作用可以被A1R拮抗剂8-cyclopentyl-1,3-dipropylx-anthine(CPDPX)(0.1μmol/L)所拮抗。结论腺苷A1R激动剂R-PIA能抑制AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞肥大,其作用主要是通过A1R介导。其机制可能与减少心肌细胞内CaN的表达有关。

腺苷类似物WS090501的镇静、催眠和抗惊厥作用

腺苷是一种内源性的嘌呤核苷,具有广泛的生理性调节作用。腺苷类似物具有显著的镇静[1]、催眠和抗惊厥作用[2],可以抑制啮齿类动物的自主活动、诱导NREM睡眠（non rapid-eye-movement sleep,非快动眼睡眠）[3]。