膀胱出口部分梗阻大鼠膀胱超微结构和尿流动力学的关系

目的观察大鼠膀胱出口部分梗阻(PBOO)后尿流动力学及超微结构变化,探讨膀胱出口部分梗阻后超微结构和尿流动力学改变的关系。方法 48只雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(Sham组)24只、PBOO 2周组8只、4周组8只、8周组8只。饲养后,于相应周数解剖膀胱,测定膀胱重量、不稳定收缩发生率、容量、漏尿点压及膀胱顺应性,观察逼尿肌超微结构改变等指标。结果 PBOO 2周、4周、8周膀胱重量分别为(220±24.2)mg、(327.8±27.7)mg、(521.6±24.7)mg,Sham组为(108.5±6.3)mg(P<0.05);不稳定收缩发生率分别为50%(4/8)、87.5%(7/8)、37.5%(3/8),Sham组0%为(0/24)(P<0.05);膀胱最大容积分别为(0.65±0.26)mL、(1.57±0.70)mL、(5.62±1.39)mL,Sham组为(0.30±0.08)mL(P<0.05)。梗阻组漏尿点压为2周组(31.5±4.78)cmH2O、4周组(56.5±7.46)cmH2O、8周组(33.00±9.92)cmH2O,Sham组(22.13±3.18)cmH2O(P<0.05)。膀胱顺应性PBOO 2周组、4周组与Sham组比较,差异无统计学意义(P>0.05),8周组与Sham组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。透射电镜观察结果为大鼠PBOO后线粒体增多、水肿,细胞膜穴样凹陷增多,中间连接减少、缝隙连接及胞突连接增多。结论膀胱出口部分梗阻后由代偿期进入失代偿期,可以通过尿流动力学进行检测,而产生这一系列变化的形态学基础可能是超微结构的改变。

膀胱出口部分梗阻动物模型的研究进展

构建理想的膀胱出口部分梗阻(pBOO)动物模型是研究膀胱梗阻性疾病发病机制和开展药物治疗研究的关键。本文就pBOO动物模型的诱导方式选择(包括经耻骨上膀胱颈结扎法、尿道外口缝扎法、尿道外口皮下注射透明质酸等),及诱导pBOO动物模型的特点及局限性进行综述。

补肾活血法对膀胱出口部分梗阻大鼠膀胱逼尿肌组织氧化应激水平的影响

目的:观察膀胱出口梗阻(partial bladder outlet obstruction,PBOO)大鼠膀胱功能及逼尿肌组织氧化应激水平的变化,以及补肾活血方对这些变化的影响。方法:将3月龄雄性Wistar大鼠68只,随机选出12只大鼠作为正常组。剩余大鼠按后述手术方法复制膀胱出口梗阻(BOO)模型,并随机分为4组,每组14只,分别为模型组、补肾活血组、氯化铯组、补肾活血加氯化铯组。于造模成功并分组后第1天起,分别给予相应药物:生理盐水灌胃、补肾活血方灌胃、生理盐水灌胃+皮下注射氯化铯、补肾活血方灌胃+皮下注射氯化铯,正常组同期等体积生理盐水灌胃。给药30 d后,对各组大鼠进行膀胱测压;然后处死各组大鼠,快速取出膀胱并称取湿重;取逼尿肌组织用于检测MDA、SOD、T-AOC等氧化应激各项指标。结果:(1)与正常组相比,模型组(P<0.01)、氯化铯组(P<0.01)膀胱壁组织中MAD水平明显升高,中药组(P<0.01)及中药加氯化铯组(P<0.01)膀胱壁组织中MAD水平则明显低于模型组。(2)模型组(P<0.01)、氯化铯组(P<0.05)及中药加氯化铯组(P<0.01)膀胱壁组织中SOD水平亦明显高于正常组。中药组(P<0.01)膀胱壁组织中SOD水平则明显低于模型组。(3)模型组T-AOC水平明显低于正常组(P<0.05),其它各组与正常组相比,其膀胱壁组织T-AOC水平虽然均有所下降,但均无统计学意义。结论:PBOO可以引起膀胱组织总抗氧化能力下降,并最终导致氧化应激水平上升。补肾活血方可以明显降低大鼠膀胱组织MAD水平,而其对T-AOC的影响似乎并不显著。氯化铯可以部分阻断补肾活血方降低膀胱组织氧化应激水平的作用。

膀胱穿刺活检术在膀胱出口部分梗阻大鼠中应用的可行性

目的本实验创新性地将膀胱穿刺活检技术应用于膀胱出口部分梗阻大鼠以评价其可应用性。方法雌性SpragueDawley大鼠18只行尿道外口结扎法造模后,根据不同梗阻时间分为对照组、梗阻14d组、梗阻28d组,利用穿刺技术提取膀胱组织标本,行HE染色观察膀胱形态学变化,通过免疫组织化学染色观察机械敏感K+通道(TERK-1)的表达趋势,判断穿刺方式获取标本的实际应用价值。结果从膀胱穿刺所取得的标本可清楚观察到膀胱出口梗阻后膀胱的典型变化,HE染色下观察到梗阻14d组、梗阻28d组大鼠的膀胱肌纤维束排列及形态被破坏,肌细胞肥大,平滑肌横截面明显增厚。免疫组化提示,随梗阻时间延长,TERK-1通道表达量呈下降趋势,差异具有统计学意义(P=0.035)。结论膀胱穿刺术以微创的方法成功收集到足够的组织标本,用于形态学及病理学检测,是一种可行的方法。

膀胱出口部分梗阻后对逼尿肌细胞增殖及血管新生的影响

目的观察膀胱梗阻后不同时间点的逼尿肌功能、逼尿肌血管新生和增殖的变化，探讨梗阻后逼尿肌功能发生发展的机制。方法将成年雌性SD大鼠75只随机分为对照组、假手术组、梗阻1周组、梗阻2周组、梗阻6周组，每组各15只。采用尿动力学评估逼尿肌功能，通过免疫组织化学检测膀胱逼尿肌中的血管性假性血友病因子（vWF）和细胞核增殖抗原（Ki-67），分析血管新生及增殖变化。结果对照组、假手术组、梗阻1周组、梗阻2周组、梗阻6周组平均膀胱重量分别为（103．23±4．35）、（110．95±5．51）、（228．02±32．88）、（392．35±39．90）、（616．50±86．41）mg，梗阻组与对照组、假手术组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；膀胱逼尿肌收缩功能分别为（24．28±0．91）、（22．10±2．35）、（23．17±1．10）、（36．98±1．95）、（29．72±1．79）kPa，梗阻2周及6周组与对照组、假手术组、1周组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；逼尿肌层微血管密度分别为10．60±2．10、11．30±1．77、47．90±4．38、28．50±3．95、7．55±1．21，梗阻1周及2周组与对照组、假手术组、6周组比较差异有统计学意义（P〈0．01），Ki-67阳性指数分别为（19．10±8．18）％、（19．84±5．45）％、（53．08±7．25）％、（49．28±5．99）％、（13．66±4．42）％，梗阻组与对照组、假手术组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论膀胱逼尿肌肌层细胞血流量减少引起细胞增殖下降可能是膀胱功能失代偿的重要原因。

兔膀胱出口部分梗阻所致逼尿肌超微结构的改变

目的 观察兔膀胱出口部分梗阻后逼尿肌细胞超微结构的改变。 方法 建立雄性兔膀胱出口部分梗阻动物模型 ,利用透射电镜观察其逼尿肌细胞内超微结构 ,应用ImagineTool图像分析软件检测粗面内质网面积和线粒体密度。 结果 梗阻组逼尿肌细胞内单位面积平均 1 1 5 .2 8μm2 ,胞质中粗面内质网面积 (5 .377± 2 .31 8) μm2 ,较对照组的 (0 .476± 0 .31 9) μm2 明显扩大 ;线粒体相对密度为 1 .0 2 7± 0 .0 64 ,较对照组的 0 .830± 0 .0 58明显下降 ,P均 <0 .0 1。 结论 膀胱出口部分梗阻后逼尿肌细胞内质网扩张 ,提示其合成蛋白质功能增强 ,从而引起膀胱壁增厚 ;而线粒体水肿明显 ,密度下降 ,提示逼尿肌细胞能量代谢障碍 。

栀子苷对部分膀胱出口梗阻模型大鼠膀胱功能障碍的改善作用及机制探讨

目的:探究栀子苷(GE)在部分膀胱出口梗阻(pBOO)模型大鼠中的治疗作用及机制。方法:将大鼠随机分为假手术(Sham)组,pBOO组,GE 20、40、80 mg/kg组,每组6只。pBOO手术后4周,连续灌胃给药GE,1次/d,共2周。实验终点,检测GE对pBOO模型大鼠膀胱肌张力和膀胱尿流动力学的影响,利用HE染色评价GE对pBOO大鼠膀胱组织炎性反应的改善作用,检测GE对pBOO大鼠膀胱组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响,蛋白印迹和实时荧光定量PCR检测GE对Nrf2/NF-κB通路蛋白表达的影响。结果:GE 40、80 mg/kg组可以显著降低pBOO大鼠膀胱重量及膀胱与体重的比值(均P<0.05);显著逆转膀胱组织低顺应性和提高膀胱肌张力(均P<0.05);明显抑制大鼠膀胱组织中炎症细胞浸润;GE还能显著降低MDA含量、增加SOD及GSH-Px活性(均P<0.05);显著逆转pBOO模型大鼠Nrf2/NF-κB通路相关蛋白表达及基因mRNA表达水平(均P<0.05)。结论:GE可以明显改善pBOO模型大鼠的膀胱功能障碍,其可能与调控Nrf2/NF-κB通路有关。

多沙唑嗪对兔膀胱出口部分梗阻致膀胱顺应性减低的影响

目的探讨多沙唑嗪对兔膀胱出口部分梗阻后膀胱顺应性改变的影响。方法成年雄性新西兰兔40只随机分为4组，每组10只，A组为假手术对照组，B组为膀胱出口部分梗阻组，c组为膀胱出口部分梗阻后口服多沙唑嗪组，D组为假手术后给予多沙唑嗪组。各组于14周行尿动力学检测，检测完成后处死并留取膀胱标本，行膀胱称重。结果4组膀胱标本质量分别为（3．2±0．9）、（14．1±2．3）、（5．0±2．0）、（2．9±0．5）g；B、C组均高于A、D组，B组高于c组，差异均有统计学意义（P〈0．01）；A、13组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。4组逼尿肌漏尿点压分别为（10．2±2．5）、（18．8±6．1）、（13．5±4．7）、（11．6±3．6）cmH2O（1cmH2O=0．098kPa），B组高于A、D组，差异有统计学意义（P〈0．01），且高于C组，差异有统计学意义（P〈0．05）；A、C、D组间差异无统计学意义（P〉0．05）。膀胱顺应性分别为（2．86±0．56）、（1．22±0．39）、（4．25±2．19）、（2．90±0．53）ml／cmH2O，B组与A、D组相比明显下降，差异有统计学意义（P〈0．01）；C组高于A、D组，差异有统计学意义（P〈0．05）；A、D组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论膀胱出口部分梗阻后早期应用多沙唑嗪治疗能够延迟梗阻对膀胱顺应性的损害，保护膀胱储尿功能。

大鼠膀胱出口部分梗阻后膀胱壁组织结构和膀胱顺应性改变研究

膀胱出口部分梗阻（bladder outlet partial obstruction，BOO）是泌尿外科临床上常见的问题之一，指的是由膀胱内口到尿道外口之间任何部位形成的梗阻。成人以前列腺增生肥大为主，小儿多见于尿道瓣膜。梗阻发生后膀胱壁组织结构及膀胱功能发生改变，影响储尿排尿过程，并会进一步造成上尿路损害。本研究通过建立BOO动物模型，观察梗阻不同时间后膀胱壁组织结构和膀胱顺应性的变化，探讨其发生机制及其相关性。

丹参酮ⅡA磺酸钠抑制膀胱出口部分梗阻大鼠a-SMA的表达及其机制研究

目的:观察丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对膀胱出口部分梗阻(PBOO)大鼠膀胱中a-SMA表达的影响,探究其可能的作用机制。方法:通过膀胱颈部分结扎法建立大鼠PBOO模型,24只SD大鼠随机分为PBOO组、STS治疗组(STS组)以及假手术组(Sham组),每组8只。STS组每天给予STS腹腔注射(10 mg/kg),持续4周。PBOO组及Sham组给予等量生理盐水腹腔注射。应用透射电镜及Masson染色检测膀胱组织中胶原纤维的表达,免疫组化和RT-PCR检测膀胱中a-SMA的蛋白及mRNA的表达,应用Western blot检测膀胱组织中ERK1/2、P-ERK1/2蛋白的表达。结果:PBOO组胶原纤维表达量高于Sham组(P<0.05),STS组胶原纤维表达量低于PBOO组(P<0.05)。PBOO组a-SMA蛋白及mRNA表达高于Sham组(P<0.05),STS组低于PBOO组(P<0.05)。三组ERK1/2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),P-ERK1/2蛋白的表达,PBOO组高于Sham组,STS组低于PBOO组(P<0.05)。结论:STS能够抑制PBOO大鼠a-SMA的表达,其机制可能是通过抑制MAPK通路中ERK1/2蛋白的活化实现的。

前列通窍胶囊对膀胱出口部分梗阻大鼠膀胱组织病理及缺氧诱导因子-1α蛋白表达的影响

目的观察前列通窍胶囊(QTC)对膀胱出口部分梗阻(pBOO)大鼠膀胱组织病理及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达的影响。方法28只雄性SD大鼠中随机选出7只纳入假手术组,对余下21只均施以pBOO造模手术后随机分为pBOO模型组、QTC低剂量组和QTC高剂量组,每组各7只。术后第1天起对各组大鼠相应予以QTC粉末混悬液或蒸馏水灌胃,4周后通过过量麻醉处死所有大鼠,记录体重、膀胱湿重并计算膀胱指数;HE染色法检测膀胱组织病理;免疫组织化学和免疫印迹试验检测膀胱组织中HIF-1α蛋白表达情况。结果与假手术组相比,pBOO模型组大鼠出现明显的膀胱代偿性肥大、平滑肌间隙减小及纤维化,膀胱湿重、膀胱指数及逼尿肌层厚度均显著增加(P均<0.0001),同时,膀胱组织中HIF-1α蛋白表达显著升高(P<0.01);QTC低剂量组大鼠膀胱湿重、膀胱指数、逼尿肌层厚度及膀胱组织中HIF-1α蛋白表达与pBOO组无统计学差异(P均>0.05),亦伴随明显的膀胱病理组织学改变;而QTC高剂量组大鼠膀胱湿重、膀胱指数及逼尿肌层厚度均低于pBOO组(P均<0.05),膀胱组织中HIF-1α蛋白表达明显下调(P<0.01),且膀胱组织病理改变减轻。结论高剂量QTC可抑制pBOO所导致的膀胱湿重和膀胱指数升高,改善代偿性肥大、逼尿肌层厚度增加、平滑肌间隙减小及纤维化等膀胱组织病理改变,并下调膀胱组织中HIF-1α蛋白表达,上述是QTC减轻pBOO所致膀胱损伤的部分作用机理。

膀胱出口梗阻对逼尿肌收缩力的影响及其与神经支配的关系

目的观察膀胱出口部分梗阻(partial bladder outlet obstruction,PBOO)不同阶段逼尿肌收缩力及神经纤维密度的改变,探讨PBOO对逼尿肌收缩力的影响及其与神经支配的关系。方法近端尿道结扎法建立大鼠PBOO模型,实验动物分为4组:假手术6周组及8周组、梗阻6周组及8周组。通过测定膀胱排尿压及顺应性以及离体逼尿肌条收缩幅度评估逼尿肌收缩力;应用神经递质乙酰胆碱M受体阻滞剂阿托品以及激动剂卡巴可观察其对逼尿肌收缩的影响;采用免疫荧光组化法检测逼尿肌神经纤维表达。结果梗阻6周组膀胱排尿压[(25.7±2.3)cmH2O]及顺应性[(0.24±0.03)mL/cmH2O]较假手术组排尿压[(18.7±1.6)cmH2O]及顺应性[(0.15±0.02)mL/cmH2O]显著增高(P<0.01);梗阻8周组膀胱排尿压[(10.8±1.7)cmH2O]及顺应性[(0.11±0.02)mL/cmH2O]较假手术组膀胱排尿压[(19.2±2.1)cmH2O]及顺应性[(0.17±0.02)mL/cmH2O]显著降低(P<0.01)。梗阻6周组逼尿肌条收缩幅度较假手术组显著增高[(0.31±0.03)g vs(0.15±0.02)g,P<0.01],加入阿托品后逼尿肌条收缩幅度明显降低(P<0.05),但仍较假手术组高(P<0.01);梗阻8周组逼尿肌条收缩幅度较假手术组显著降低[(0.09±0.01)g vs(0.16±0.02)g,P<0.01],加入卡巴可后无明显改善(P>0.05)。梗阻组逼尿肌中神经纤维密度随梗阻时间延长明显降低(P<0.05)。结论持续膀胱出口部分梗阻可以导致逼尿肌收缩力呈双向性改变,神经支配在此过程中影响有限,可能主要源于自身肌源性因素改变。

雄性大鼠膀胱出口梗阻两种模型制作方法的比较研究

目的通过采用耻骨后膀胱颈和会阴途径球部尿道部分结扎两种方法,建立雄性大鼠膀胱出口部分梗阻(paritial bladder outlet obstraction,pBOO)模型,并对所建模型进行鉴定和比较,为pBOO后膀胱重构(bladder reconstruction)的深入研究提供一种成活率高,复制性和稳定性较好的动物模型。方法 80只健康雄性Wistar大鼠随机分为三组:I组为假手术组(对照组),20只;II组为耻骨后途径膀胱颈部分结扎组,30只;III组为会阴途径球部尿道部分结扎组,30只。依据梗阻时间分别将I组、II组、III组大鼠随机分为2周组和4周组,于术后2周和4周对大鼠行尿动力学检测后,完整切除膀胱测其重量,将精囊腺组织和部分膀胱用4%甲醛固定,HE染色观察组织学变化。结果 II组和III组成活率分别为73.3%和80.0%,二者无统计学意义;I组、II组、III组建模手术时间分别为(9.75±2.29)、(17.33±3.54)、(10.77±2.44)min,II组与I组和III组比较差异均有统计学意义;I组、II组、III组的2周组和4周组逼尿肌漏尿点压(detrusor leak point pressure,DLPP)分别为(26.31±2.32)、(27.34±3.93)、(24.68±2.39)mmHg和(26..42±2.41)、(34.23±3.01)、(32.63±3.20)mmHg,I组与II组和III组的4周组比较差异有统计学意义,II组和III组的2周组和4周组比较差异均有统计学意义。结论耻骨后途经膀胱颈部分结扎和会阴途径球部尿道部分结扎两种方法都能成功建立雄性大鼠pBOO模型,与耻骨后途径相比,会阴途径成活率高,手术操作时间短,复制性和稳定性好。

兔膀胱出口不同梗阻时间对逼尿肌功能和超微结构的影响

目的 观察兔膀胱出口部分梗阻不同时间后逼尿肌功能改变及其超微结构变化。方法 新西兰雄性白兔 2 4只 ,分为A组 (对照组 ) ,B组 (梗阻 5周组 )和C组 (梗阻 2周组 ) ,各 8只。梗阻组手术建成膀胱出口部分梗阻兔模型 ,分别饲养 5周和 2周后解剖膀胱。①测定膀胱重量、容量 ;②检测逼尿肌功能 ;③观察膀胱逼尿肌细胞超微结构。对照组仅行下腹部切口而不建成梗阻模型。结果 (1 )A、B、C组膀胱重量分别为 (3.83±0 .71 )、(1 2 .6 5± 4 .0 1 )、(1 5 .6 3± 4 .0 0 ) g。A、B、C组膀胱容量分别为 (98.1 3± 1 8.1 1 )、(6 9.5 0± 1 0 .2 1 )、(48.1 3± 1 7.1 5 )mL ;(2 )A组单位重量逼尿肌最大张力及最大收缩速度均明显大于B组及C组 (P <0 .0 5或 0 .0 1 ) ;C组单位重量逼尿肌最大张力及最大收缩速度 (除高K+ 液外 )均大于B组 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;(3)B组和C组兔逼尿肌细胞中粗面内质网明显扩张 ,线粒体水肿。结论 膀胱出口部分梗阻可引起逼尿肌功能障碍并在短时间内进入失代偿期 ,这一变化有其超微结构形态学基础。

大鼠膀胱出口梗阻致膀胱重构的形态结构研究

目的观察大鼠膀胱出口部分梗阻不同时期的膀胱逼尿肌细胞增生、凋亡及间质中胶原纤维的变化情况。方法 Wistar大鼠40只,采用经会阴途径球部尿道部分结扎的方法建立膀胱出口部分梗阻模型,随机分为假手术组10只,梗阻2周组15只,梗阻4周组15只。采用免疫组化方法分析增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况;通过末端转移酶标记(TUNEL)法测逼尿肌细胞凋亡指数;运用VG染色分析胶原纤维占膀胱逼尿肌面积比例变化情况。结果假手术组、梗阻2周组和梗阻4周组PCNA阳性表达率分别为(17.19±1.37)%、(50.74±3.15)%、(33.58±2.80)%,梗阻组之间差异有统计学意义(P<0.05),梗阻组与假手术组之间差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组、梗阻2周组和梗阻4周组逼尿肌细胞凋亡指数分别为(20.22±1.70)%、(33.90±1.86)%、(51.18±3.30)%,梗阻组之间差异有统计学意义(P<0.05),梗阻组与假手术组之间差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组、梗阻2周组和梗阻4周组胶原纤维占膀胱逼尿肌面积比例分别为(7.07±0.67)%、(13.19±1.50)%、(22.98±2.89)%,梗阻组之间差异有统计学意义(P<0.01),梗阻组与假手术组之间差异有统计学意义(P<0.01)。结论不同时期大鼠膀胱出口梗阻的膀胱逼尿肌形态结构的变化,可能是膀胱逼尿肌细胞增生、凋亡以及间质中胶原纤维占膀胱逼尿肌比例变化的综合作用结果。

膀胱出口梗阻后大鼠逼尿肌细胞内质网形态及GRP78表达的研究

目的观察膀胱出口部分梗阻后膀胱重构中,逼尿肌平滑肌细胞内质网形态及内质网应激标志性蛋白——葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达情况,探讨内质网应激在膀胱重构机制中可能的作用。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为假手术组10只,梗阻2周组15只,梗阻4周组15只,采用经会阴途径球部尿道部分结扎的方法建立膀胱出口部分梗阻模型。采用透射电子显微镜观察逼尿肌平滑肌细胞的超微结构,通过免疫组化和Real-time PCR分别检测逼尿肌中GRP78蛋白及mRNA表达变化。结果假手术组、梗阻2周组和梗阻4周组大鼠膀胱逼尿肌细胞GRP78蛋白阳性表达率分别为(3.37±0.38)%、(51.22±0.27)%、(27.02±1.85)%,梗阻2周组大鼠膀胱逼尿肌中GRP78阳性表达明显增多,与假手术组相比有明显差异(P<0.01),梗阻4周组大鼠逼尿肌中GRP78阳性表达增多,与假手术组相比有明显差异(P<0.01),但比梗阻2周组表达量减少(P<0.01)。各组GRP78mRNA表达量分别为(22.21±1.58)、(30.62±2.49)、(24.52±2.24),梗阻2周组大鼠膀胱逼尿肌细胞GRP78mRNA表达较假手术组明显增加(P<0.01);与梗阻2周组相比,梗阻4周组大鼠膀胱逼尿肌细胞GRP78mRNA表达量下降,有显著性统计学意义(P<0.01),梗阻4周组与假手术组相比无统计学意义。结论在梗阻后膀胱重构过程中,逼尿肌平滑肌细胞内质网形态有明显损伤性变化,GRP78蛋白及mRNA表达水平明显增加,提示内质网应激参与膀胱重构的进展。

电针通过调节膀胱及尿道平滑肌中的血清素受体表达改善骶上脊髓损伤大鼠的排尿功能

目的观察电针治疗后骶上脊髓损伤(suprasacral cord injury,SSCI)大鼠的膀胱最大容量(maximum cystometric capacity,MCC)、漏尿点压力(leakage point pressure,LPP),结合分析逼尿肌、内尿道括约肌(internal urethral sphincter,IUS)中血清素(5-hydroxytryptamine,5-HT)不同亚型受体的表达,探讨电针治疗通过突触后5-HT受体调节逼尿肌-尿道括约肌协同失调(detrusor sphincter dyssynergia,DSD)大鼠排尿功能的效应机制。方法36只SD雌性大鼠,随机抽取12只作为空白组,剩余24只采用改良Hassan Shaker脊髓横断法在T10脊髓节段全横断制作SSCI大鼠模型,成模后随机分为模型组和电针组,每组12只。电针组取次髎、中极、三阴交穴予持续电针刺激40 min,1次/d,连续治疗7 d;空白组与模型组只捆绑不治疗。采用膀胱造瘘法进行尿流动力学检测;处死大鼠后取逼尿肌和近端尿道组织,采用Western blot法检测5-HT受体含量。结果模型组大鼠MCC、LPP显著高于空白组(P<0.01);电针组MCC显著低于模型组且高于空白组(P<0.01),LPP显著低于模型组(P<0.01)。与空白组比较,5-HT1A受体在模型组大鼠逼尿肌中表达显著降低(P<0.01),IUS中显著增高(P<0.01);电针组大鼠逼尿肌中5-HT1A受体显著高于模型组(P<0.01),IUS中5-HT1A受体低于模型组(P<0.05),但仍显著高于空白组(P<0.01)。模型组大鼠逼尿肌中5-HT2B受体表达高于空白组(P<0.05);电针组大鼠逼尿肌中5-HT2B受体表达低于模型组和空白组(P<0.05)。与空白组比较,5-HT7受体在模型组大鼠逼尿肌中表达显著降低(P<0.01),IUS中表达显著增高(P<0.01);电针组大鼠逼尿肌和IUS中5-HT7受体的表达均低于模型组(P<0.05)。结论电针刺激SSCI后DSD大鼠次髎、三阴交、中极穴引起膀胱及尿道平滑肌中5-HT受体表达变化,5-HT1A和5-HT2B受体可能通过Ca^(2+)流入使平滑肌产生相性和/或强直性收缩,5-HT7受体可能通过环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)途径影响大电导Ca^(2+)激活K^(+)(big-conductance Ca^(2+)-activated K^(+),BK)通道活性介导平滑肌松弛,电针治疗由此抑制逼尿肌过度活动、增加其收缩能力并协调尿道阻力以改善SSCI后DSD大鼠下尿路功能。