LncRNA FOXP4-AS1调控EZH2/LATS2轴对膀胱尿路上皮癌细胞增殖与迁移的影响

目的分析lncRNA FOXP4-AS1调控EZH2/LATS2轴对膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)细胞增殖与迁移的影响。方法利用TCGA数据库与实时荧光定量PCR分析FOXP4-AS1和LATS2 mRNA在BUC组织中的表达;MTT实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞迁移;Western blot检测LATS2与H3K27me3蛋白表达;RNA免疫沉淀(RIP)和染色质免疫沉淀(ChIP)验证FOXP4-AS1、EZH2与LATS2的关系。结果相较正常膀胱组织,BUC组织中FOXP4-AS1表达升高,而LATS2 mRNA表达降低(P<0.01);相较SV-HUC-1,FOXP4-AS1在BUC细胞系(EJ、T24、BIU-87及5637)中表达升高(P<0.01);沉默FOXP4-AS1可显著抑制BUC细胞增殖、迁移及H3K27me3蛋白表达,而显著促进LATS2 mRNA与蛋白的表达,过表达FOXP4-AS1则产生相反效应(P<0.05);RIP与ChIP实验表明FOXP4-AS1可募集EZH2至LATS2启动子区域,导致H3K27me3在该区域富集;敲低LATS2或EZH2表达可部分逆转FOXP4-AS1沉默或过表达对BUC细胞增殖、迁移及LATS2表达的影响。结论FOXP4-AS1在BUC中高表达,其通过招募EZH2至LATS2基因启动子区域负性调控LATS2的表达,进而调控BUC细胞的增殖与迁移。

PKM2通过调控活性氧依赖的PI3K/Akt信号通路影响膀胱尿路上皮细胞癌细胞的侵袭能力

目的 探讨PKM2通过调控活性氧(ROS)依赖的PI3K/Akt信号通路对膀胱尿路上皮细胞癌细胞侵袭能力的影响。方法 将人膀胱癌T24细胞随机分为Control组、si-NC组、si-PKM2组和si-PKM2+IGF-1组。实时PCR检测细胞中PKM2 mRNA表达;CCK-8检测细胞增殖;Transwell小室法检测细胞侵袭和转移;Hoechst 33342荧光染色和流式细胞术检测细胞凋亡;ROS荧光探针法检测细胞中ROS水平;Western blotting检测细胞中PI3K、Akt、mTOR、caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果 与人正常膀胱上皮SV-HUC-1细胞相比,人膀胱癌T24细胞中PKM2 mRNA相对表达量明显增加(P <0.05)。与Control组相比,si-PKM2组T24细胞中PKM2 mRNA相对表达量、细胞增殖能力、侵袭细胞数以及细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR比值和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P <0.05),细胞凋亡率、细胞中ROS相对水平以及细胞中Bax、caspase-3蛋白表达水平明显升高(P <0.05);与siPKM2组相比,si-PKM2+IGF-1组T24细胞中PKM2 mRNA相对表达量、细胞增殖能力、侵袭细胞数以及细胞中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR比值和Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P <0.05),细胞凋亡率、细胞中ROS相对水平以及细胞中Bax、caspase-3蛋白表达水平明显降低(P <0.05)。结论 敲减PKM2可促进膀胱尿路上皮细胞癌细胞中ROS水平升高,抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路激活,进而发挥抑制细胞侵袭和促进细胞凋亡作用。

基于基因表达芯片和实验验证葛根素降低膀胱尿路上皮癌T24细胞IL6表达及抑制细胞增殖的作用

目的探讨葛根素抑制膀胱尿路上皮癌T24细胞增殖的作用机制及潜在作用靶点。方法CCK8实验验证葛根素对T24细胞的增殖抑制作用。火山图和热图对芯片数据进行质量控制。对基因表达芯片实验得到的差异表达基因列表进行KEGG、GO通路富集分析、蛋白质相互作用(PPI)和上游转录因子预测,得到关键作用靶点及通路并进行相关验证。结果葛根素抑制T24细胞的增殖活力,这种抑制作用和浓度成正比,半数抑制浓度为218μmol·L^(-1)。KEGG通路富集分析显示差异基因主要富集在细胞生长和增殖相关通路,GO通路富集分析显示差异基因主要富集在蛋白质折叠、DNA复制和肿瘤细胞坏死相关通路。PPI分析得到关键作用靶点IL6。IL6在病理分期Ⅲ、Ⅳ期的表达明显高于Ⅱ期,并且PCR实验证明葛根素可降低T24细胞中IL6的表达。GSEA分析显示IL6与上皮细胞增殖相关。上游转录因子预测得到CENPA,分子对接结果显示葛根素和CENPA之间对接良好。结论葛根素能抑制T24细胞的增殖活力,其作用机制可能是葛根素和CENPA结合,降低IL6的表达进而影响蛋白质折叠、DNA复制、肿瘤细胞坏死和增殖相关通路,最终抑制T24细胞增殖。

FISH技术及细胞学技术检测尿脱落细胞对膀胱尿路上皮肿瘤诊断价值研究

目的比较荧光原位杂交(FISH)技术及细胞学技术检测尿脱落细胞对膀胱尿路上皮肿瘤诊断价值。方法采用CSP3/CSP7组合探针和GLPp16/CSP17组合探针对膀胱尿路上皮肿瘤疑似患者的尿脱落细胞进行FISH检测,同时采用细胞学技术检测尿脱落细胞,比较2种方法的灵敏度和特异度。结果FISH技术筛查膀胱尿路上皮肿瘤的灵敏度和特异度分别为92.5%和85.0%,细胞学技术的灵敏度和特异度分别为27.5%和90.0%。FISH技术的灵敏度显著高于细胞学技术(P<0.05),但2种方法的特异度差异无统计学意义(P>0.05)。结论 FISH技术有望成为筛查膀胱尿路上皮肿瘤的新方法。

尿液细胞学巴黎报告系统在诊断尿路上皮肿瘤中的应用价值

目的探讨尿液细胞学巴黎报告系统对尿路上皮细胞肿瘤的诊断价值。方法回顾性研究尿脱落细胞学标本110例,由细胞病理学医生采用双盲法分别用传统报告模式和巴黎报告系统进行评审和重新分类,以手术病理(活检)诊断结果为“金标准”,比较哪种诊断模式与手术病理(活检)诊断有更强的相关性。结果110例中,患者平均年龄58.8岁。男女比例为4.2:1。尿液细胞学巴黎报告系统对高级别尿路上皮细胞肿瘤诊断的敏感性(96.7%)和诊断符合率(93.6%)均要明显优于传统细胞学的敏感性(78.3%)和诊断符合率率(80.8%),差异有统计学意义。与传统尿液细胞学诊断相比,巴黎报告系统对非典型细胞的报告率从23.6%下降到6.4%。而诊断特异性在两者间差异无统计学意义。结论泌尿细胞学巴黎报告系统通过规范性的诊断标准和术语提高了细胞学在尿路上皮细胞肿瘤的诊断效能,值得推广应用。

尿液基细胞荧光原位杂交检测对膀胱尿路上皮癌的诊断价值

目的探讨尿液基细胞学(LBC)靶向的荧光原位杂交(FISH)对膀胱尿路上皮癌(BUC)的诊断价值。方法回顾性收集2020年10月—2022年10月于首都医科大学附属北京天坛医院泌尿外科行膀胱镜检查的128例患者的临床资料。所有患者在行膀胱镜检查前进行尿核基质蛋白22(NMP22)检测、尿LBC检测与尿LBC靶向的FISH检测,以术后病理结果为标准,分析3种检查方法的灵敏度和特异度。结果NMP22、尿LBC与LBC靶向的FISH的灵敏度分别为61.11%、79.17%、82.46%,特异度分别为57.14%、73.21%、86.67%;NMP22、尿LBC的灵敏度在检测高级别BUC时优于低级别,差异有统计学意义(P=0.01,P=0.03);3种方法对肌层浸润性膀胱癌与非肌层浸润性膀胱癌检测的灵敏度比较,差异无统计学意义(P≥0.05)。结论尿LBC靶向的FISH对BUC诊断的灵敏度和特异度较高,尤其是对于低级别BUC,可以作为BUC早期筛查、诊断的重要方法。

CD3^+T淋巴细胞在膀胱癌肿瘤上皮与癌旁尿路上皮中的分布差异研究

目的观察CD3+T淋巴细胞在膀胱癌肿瘤上皮及癌旁正常尿路上皮中的分布差异,并探讨其意义.方法收集膀胱癌手术病例28例,术后取其膀胱癌组织标本及癌旁正常组织标本,采用免疫组织化学方法观察肿瘤上皮及癌旁正常尿路上皮中CD3+T淋巴细胞的数量及分布,计数2种上皮内的T淋巴细胞数量并比较其差异.结果在癌旁正常尿路上皮内可见较多的T淋巴细胞分布;而在肿瘤上皮中则少见T淋巴细胞分布,癌旁正常尿路上皮组每5个典型200倍视野中的上皮内T淋巴细胞平均数为(15±4.5)个,肿瘤上皮组则为(4±2.2)个,差异有统计学意义(P<0.01).结论膀胱癌肿瘤上皮与癌旁正常尿路上皮中CD3+T淋巴的分布存在着差异,这一现象可能与膀胱癌的免疫逃避机制及预后相关,值得进一步的深入研究.

European Urology:治疗前中性粒细胞-淋巴细胞比例与行根治性膀胱全切术的膀胱尿路上皮癌患者的病理学分级和肿瘤特异性死亡率呈正相关

根治性膀胱全切术是高危的非肌层浸润型膀胱尿路上皮癌和肌层浸润型膀胱尿路上皮癌手术治疗的金标准,术后患者生存率的长短多取决于肿瘤的病理学分级.这部分膀胱癌患者预后较差,其5年生存率为26％-64％.因此,有必要进一步研究其危险因素的分层,便于更好地为患者选择最佳的综合治疗手段.

血清CYFRA21-1与浸润性膀胱尿路上皮细胞癌预后的关系

目的探讨细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）与浸润性膀胱尿路上皮细胞癌预后的关系。方法 47例浸润性膀胱尿路上皮细胞癌患者中,初发肿瘤36例、复发肿瘤11例,临床分期：T_2期34例,T_3期9例,T_（4a）期4例。病理分级：G_1级9例,G_2级22例,G_3级16例。采用电化学发光免疫分析技术检测术前血清CYFRA21-1水平,以3.5μg/L为临界值将上述患者分为高表达组与低表达组,绘制Kaplan-Meier生存曲线,并进行比较。采用χ~2检验分析CYFRA21-1表达与浸润性膀胱尿路上皮细胞癌患者临床病理特征的关系。结果血清CYFRA21-1在T_（3~4a）期中高表达的比例明显高于T_2期,CYFRA21-1在复发膀胱癌中高表达的比例明显高于初发膀胱癌（P均〈0.05）。而CYFRA21-1表达的高低与膀胱癌患者的年龄、性别、病理分级等指标无关。CYFRA21-1高表达组膀胱癌患者的平均生存时间、术后3年生存率、术后5年生存率均明显低于CYFRA21-1低表达组（P均〈0.05）。结论检测治疗前血清CYFRA21-1水平有助于浸润性膀胱尿路上皮细胞癌预后的判断。

儿童膀胱尿路上皮肿瘤1例报告并文献复习

目的探讨儿童膀胱尿路上皮肿瘤(BUC)的临床病理特点,分享诊疗经验。方法报告喀什地区第二人民医院泌尿外科收治的1例罕见的9岁男性BUC患儿的临床病历资料和诊疗过程,并进行文献复习。结果患儿主诉血尿。术前经腹部泌尿系超声、计算机断层扫描尿路成像(CTU)发现BUC,予以全身麻醉下行经尿道膀胱尿路上皮肿瘤钬激光剜除术,术后病理提示膀胱低恶性潜能的乳头状尿路上皮肿瘤,术后给予盐酸表柔比星膀胱灌注化疗,随访3个月未发现肿瘤进展或复发。结论儿童BUC在临床上十分罕见,血尿是该病最常见的临床症状,一般无特异性阳性体征。经腹泌尿系超声是首选的影像学检查手段,手术治疗是最佳途径,目前尚无可推荐的膀胱灌注化疗方案,术后需要进行长期严格的随访。

膀胱浆细胞样尿路上皮癌1例报告

膀胱浆细胞样尿路上皮癌(plasmacytoid urothelialcarcinoma,PUC)是临床罕见的特殊类型膀胱癌,临床及病理学形态均易与多种其他类型恶性肿瘤或炎性疾病相混淆。鉴于该亚型为预后较差的组织学类型,需要行更为积极的治疗策略,现报告1例膀胱PUC患者并结合文献进行分析,以期引起临床医师的重视。

膀胱尿路上皮癌HER2表达及临床病理分析

目的探讨膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)中HER2的表达情况,并分析其临床意义。方法收集膀胱非浸润性低级别BUC 27例、非浸润性高级别BUC 5例、浸润性高级别BUC 60例,采用免疫组化MaxVision法法检测各组织样本中HER2蛋白的表达,并分析HER2表达与临床病理特征的关系。通过GEPIA数据库或直接在肿瘤基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中分析HER2(ERBB2)表达与BUC的关系。结果浸润性高级别BUC中HER22+/3+表达率(26.67%,16/60)显著高于非浸润性低级别BUC(7.41%,2/27)和非浸润性高级别BUC(0,0/5)(P<0.05)。多灶性浸润性高级别BUC中HER22+/3+表达率(75.00%,6/8)显著高于单灶性患者(19.23%,10/52)(P<0.05)。各组织学亚型中HER22+/3+表达率差异有统计学意义(P<0.05),其中普通型为30%(6/20)、腺样分化型为57.14%(4/7)、微乳头型为66.67%(4/6)、浆细胞样型为100.00%(2/2),余亚型均为0/1+。HER2表达与其他临床病理特征均无明显相关性(P>0.05)。GEPIA数据库中,BUC肿瘤组织中HER2(ERBB2)表达高于正常组织(P>0.05),HER2(ERBB2)高表达患者的总生存期(overall survival,OS)低于HER2(ERBB2)低表达(P>0.05);对TCGA数据进行Cox单因素分析显示:年龄、分期、T和N越高的患者OS较短。结论浸润性高级别BUC中HER22+/3+表达率高于非浸润性低级别和高级别BUC,并与肿瘤个数、组织学亚型密切相关,提示结合HER2表达状态、肿瘤个数和组织学亚型或有助于筛选出可能从HER2靶向治疗中获益的浸润性高级别BUC患者。

膀胱尿路上皮肿瘤Survivin蛋白表达与细胞增殖和凋亡

目的探讨Survivin蛋白在膀胱尿路上皮肿瘤中的表达规律及与肿瘤细胞增殖和凋亡之间的关系。方法膀胱尿路上皮肿瘤患者100例,其中低度恶性潜能乳头状尿路上皮肿瘤15例,非浸润性低级别尿路上皮癌22例,非浸润性高级别尿路上皮癌25例,浸润性尿路上皮癌38例;另取10例非膀胱肿瘤患者膀胱黏膜做对照。采用免疫组化方法检测Survivin蛋白和增殖细胞核抗原的表达及末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法进行细胞凋亡率检测。结果 Survivin蛋白在不同级别的膀胱尿路上皮肿瘤表达率有差异,且阳性表达率逐渐增高。结论 Survivin蛋白在膀胱尿路上皮肿瘤的发生与进展过程中可能发挥重要作用,与肿瘤细胞的增殖与凋亡发生有一定关系。

斯钙素-1的表达在膀胱尿路上皮癌的复发和预后中的作用

目的探讨斯钙素-1(STC1)的表达在膀胱尿路上皮癌中的作用。方法选取2011年8月至2018年4月潍坊市益都中心医院泌尿外科及肾脏内科收治的126例膀胱癌肿瘤切除术患者作为研究对象,采用免疫组化检测126个膀胱尿路上皮癌样本中的STC1表达情况,免疫组化评分≥4分的样本归为STC1高表达组(31例),而得分<4分的样本归为STC1低表达组(95例)。分析STC1表达与临床病理因素的相关性。通过Kaplan-Meier方法绘制生存曲线分析膀胱尿路上皮癌组织中STC1表达在患者预后中的作用。通过Cox回归模型分析影响膀胱尿路上皮癌患者不良预后发生的危险因素。结果STC1在T2~T4期膀胱尿路上皮癌患者中的表达高于在Ta~T1期患者中的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示,STC1高表达、低表达在肿瘤复发中差异有统计学意义(P<0.05)。STC1高表达是不良预后因子(P<0.05),多因素分析结果显示,STC1高表达为复发影响因子(P<0.05),STC1高表达为膀胱尿路上皮癌独立预后危险因素(P<0.05)。结论STC1高表达是一个独立的生物标志物,与膀胱尿路上皮癌的复发和预后不良有关。

膀胱尿路上皮癌中KDM6A突变与预后和免疫微环境的分析

目的通过生物信息学分析结合临床样本检测,寻找膀胱尿路上皮癌(BLCA)中关键基因的突变和机制探讨。方法下载TCGA(406例肿瘤组织和19例癌旁组织)和GTEx(21例癌旁组织)数据库中全部BLCA病例数据集的基因突变数据、转录组数据和临床数据。收集BLCA手术临床样本共32例,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测基因表达。结果91.42%的患者存在突变,其中错义突变、单核苷酸变异和C>T突变为主要突变类型,突变排在前5位的基因分别为TP53(47%)、TTN(45%)、KMT2D(29%)、MUC16(28%)、KDM6A(26%)。TCGA和临床样本中,KDM6A突变型表达水平均显著高于野生型(P=0.008、0.007)。KDM6A野生型的总体生存期(OS)和无进展生存期(PFS)均大于突变型(P=0.028、0.035)。进一步研究发现,KDM6A的表达与CD8+T细胞(r=0.22,P=0.039)、巨噬细胞(r=0.31,P=0.032)和内皮细胞(r=0.26,P=0.002)水平均呈显著正相关。结论BLCA中KDM6A的突变与预后和免疫微环境密切相关,KDM6A突变可能是BLCA的潜在治疗靶标。

尿外泌体miR-29c对器官和非器官局限性膀胱尿路上皮癌临床结局的预测价值

目的 探讨尿外泌体微小RNA(miR)-29c对器官和非器官局限性膀胱尿路上皮癌(BUC)临床结局的预测价值。方法 2017年1月~2022年3月,从我院泌尿外科选取152例BUC病人作为验证集。另外,从我院体检中心选择了126例非癌对照。采用实时荧光定量PCR法检测尿外泌体miR-29c表达水平。结果 验证集BUC病人尿外泌体miR-29c水平低于非癌对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而尿外泌体miR-17-5p水平和miR-590-5p水平比较无明显差异(P>0.05)。尿外泌体miR-29c水平诊断BUC的ROC曲线下面积为0.969(95%CI:0.953~0.986),相应的敏感性和特异性分别为92.1%和90.2%。亚型分析中,非器官局限性BUC病人尿外泌体miR-29c水平较器官局限性BUC病人进一步降低(P=0.009)。预后分析中,尿外泌体miR-29c高表达组病人总生存期、无病生存期和疾病特异性生存期均更长(P<0.05)。结论 尿外泌体miR-29c低水平是BUC病人不利的预后因子,有希望作为器官和非器官局限性BUC不良临床结局的预测标志物。

膀胱肿瘤抗原、尿核基质蛋白22、细胞角蛋白-19对膀胱癌的诊断价值分析

目的分析膀胱肿瘤抗原(BTA)、尿核基质蛋白22(NMP22)、细胞角蛋白-19(CK-19)对膀胱癌的诊断价值。方法选取53例膀胱癌患者作为膀胱癌组,49例泌尿系良性疾病患者作为对照组。比较两组患者CK-19、NMP22及BTA水平,分析三者水平与膀胱癌患者临床特征的关系,分析CK-19、NMP22及BTA单独及联合检测对膀胱癌的诊断价值。结果膀胱癌组患者尿液NMP22、BTA及血清CK-19水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。肿瘤分期为Ⅲ~Ⅳ期的膀胱癌患者尿液NMP22、BTA及血清CK-19水平均明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。CK-19、NMP22及BTA联合检测诊断膀胱癌的灵敏度和特异度分别为0.805和0.869,曲线下面积(AUC)为0.854(95%CI:0.774~0.934),均高于CK-19、NMP22及BTA单独检测。结论膀胱癌患者CK-19、NMP22及BTA水平显著升高,三者水平升高与肿瘤分期相关,密切监测三者水平变化可为临床诊断膀胱癌提供依据。

铜绿假单胞菌注射液膀胱灌注治疗在膀胱尿路上皮癌手术患者中的应用效果

目的探讨铜绿假单胞菌注射液膀胱灌注治疗在膀胱尿路上皮癌手术患者中的应用效果。方法将78例行经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBT)的膀胱尿路上皮癌患者采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组39例,观察组患者术后采用铜绿假单胞菌注射液膀胱灌注治疗,对照组患者术后采用吉西他滨膀胱灌注治疗。比较两组患者的血清学指标[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-2(IL-2)]、生活质量[卡氏功能状态(KPS)评分]、不良反应发生情况及肿瘤复发情况。结果治疗后6、12个月,两组患者TNF-α、IFN-γ、IL-2水平均高于本组治疗前,VEGF水平均低于本组治疗前,观察组患者TNF-α、IFN-γ、IL-2水平均高于对照组,VEGF水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。治疗后12、24个月,两组患者KPS评分均高于本组治疗前,观察组患者KPS评分均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。两组患者各不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。治疗后24个月,观察组患者的肿瘤复发率为5.13%,低于对照组患者的20.51%,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论铜绿假单胞菌注射液膀胱灌注治疗应用于膀胱尿路上皮癌手术患者,能降低肿瘤复发率,有效抑制VEGF表达,增强肿瘤细胞清除能力,提高生活质量,且不会增加不良反应。

膀胱尿路上皮癌的MRI诊断——2024年读片窗(2)

1病史摘要患者,女性,80岁,间歇性无痛性肉眼血尿4 d,伴尿频尿急、小便难解、小腹胀痛,无血凝块,无腰痛,无发热等不适;病程中,患者饮食睡眠较差,大便基本正常,近期体质量未见明显变化。体检:体温36.5℃、脉搏74次/分、呼吸18次/分、血压141/79 mmHg(1 mmHg≈0.133 kPa)。神清,精神可,双肺呼吸音清,未闻及明显干湿性啰音,心律不齐,未闻及病理性杂音,腹平软,无压痛及反跳痛,肠鸣音不亢进,移动性浊音(-)。双肾区叩痛(-),双侧输尿管行径区压痛(-),耻骨上膀胱区压痛(-),双下肢不肿,NS(-)。

肿瘤相关中性粒细胞的双向调控作用及其在膀胱尿路上皮癌中的研究进展

膀胱尿路上皮癌(urothelial bladder cancer,UBC)是泌尿外科最常见的恶性肿瘤之一,其发生和进展与肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)密切相关。肿瘤相关中性粒细胞(tumor-associated neutrophils,TAN)作为TME中重要的一类免疫细胞,被证实在多种肿瘤中具有抑癌或促癌的调控作用,这种双向调控的产生与其异质性和可塑性有关,对TAN双向调控的研究有望为肿瘤治疗提供新的靶点。本文概述了TAN双向调控的研究现状,并对其在UBC中的研究进展进行综述。