大黄素对人膀胱癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其机制

目的探讨大黄素对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用，并探讨其作用机制。方法建立人膀胱癌细胞株BIU87裸鼠移植瘤模型，并随机分为4组：对照组、大黄素组、Z—VAD—FMK组、大黄素＋Z—VAD—FMK组。观察各组裸鼠移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线，4周后处死全部裸鼠，取出肿瘤组织，称瘤质量；HE染色观察肿瘤细胞形态，流式细胞分析仪细胞凋亡，RT-PCR检测各组肿瘤组织中AIF和EndoGmRNA的表达，Western blot检测各组肿瘤组织中AIF和EndoG蛋白的表达。结果大黄素组肿瘤生长速度明显慢于其他3组，大黄素组[（0．41±0．05）g]和大黄素＋Z-VAD—FMK组[（0．69±0．07）g]肿瘤较其他2组[（1．08±0．13、1．04±0．09）g]轻，差异有统计学意义（F=90．56、27．49，P〈0．01），大黄素组与大黄素＋Z—VAD—FMK组相比差异也有统计学意义（t=10．01，P〈0．01）。流式细胞仪检测凋亡显示大黄素组细胞凋亡率[（42．71±2．69）％]明显高于大黄素＋Z-VAD—FMK组[（34．38±1．73）％]（t=6．38，P〈0．01）。RT—PCR和Western blot结果显示，大黄素＋Z—VAD—FMK组中AIF和EndoG的表达水平显著上调，与其他各组比较[（1．65±0．12）vs（1．24±0．08）、（0．51±0．07）、（0．48±0．04）；（2．12±0．16）vs（1．75±0．13）、（0．57±0．06）、（0．59±0．07）；（2．42±0．13）vs（1．73±0．11）、（0．78±0．07）;（0．75±0．08）；（3．13±0．25）vs（2．15±0．18）、（0．85±0．09）、（0．81±0．14）]，差异均有统计学意义（F=303．22，319．32，409．38，258．53，P〈0．01）。结论大黄素能够明显抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长，其机制可能部分与大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和EndoG的表达，通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡有关。

大黄素对膀胱癌细胞BIU87增殖和凋亡的影响

目的探讨大黄素对人膀胱癌细胞BIU87生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法采用甲基噻唑（MTT）比色法测定不同浓度大黄素在不同作用时间内对在体外培养BIU87细胞增殖的影响，同时应用流式细胞仪检测细胞增殖周期的变化，免疫组化SP法检测细胞内bcl-2和caspase-3蛋白的表达水平。结果在一定范围内，大黄素的浓度（10—80μg/ml）越高、作用时间越长，对肿瘤细胞生长的抑制作用越强，凋亡率也越高[分别为（9．84±21．13）％、（18．32±22．14）％、（29．73±1．42）％、（42．13±2．36）％]，与对照组[（2．01±20．92）％]相比，差异均有统计学意义（F=531．85，P〈0．01）；大黄素可在G0／G1期阻滞人膀胱癌细胞BIU87的增殖，使S期细胞比率降低[分别为（33．27±1．26）％、（29．17±1．39）％、（16．94±0．86）％、（10．85±1．47）％]，与对照组[（35．45±0．38）％]相比，差异均有统计学意义（F=524．64，P〈0．01）。大黄素作用48h后，BIU87细胞中bel-2蛋白表达下降（灰度值分别为122．65±2．12、131．37±1．62、134．81±1．36、145．55±2．01），easpase-3蛋白表达上调（灰度值分别为135．26±1．41、130．22±1．74、126．11±1．77、118．36±1．53），呈浓度依赖性，与对照组（灰度值分别为108．42±3．73、149．35±1．82）相比，差异均有统计学意义（F=216．23、224．83，P〈0．01）。结论大黄素在体外能抑制人膀胱癌细胞株BIU87的生长、诱导细胞凋亡，其作用与下调bcl-2蛋白表达、上调easpase一3蛋白表达和阻滞细胞周期于Go／G．期有关。