化疗并中药治疗膀胱癌术后髂内动脉插管20例分析

观察膀胱癌膀胱部分切除术后髂内动脉插管定期化疗加中药治疗对预防膀胱癌复发的作用。方法 :全部病例均采取膀胱部分切除 ;膀胱粘膜下局部浸润注射丝裂霉素 40mg ;分离髂内动脉靠近端给予结扎 ,远端插入外径 3mm药泵 ,药泵端埋植于同侧皮下固定 ,术后 1周开始采用顺铂、阿霉素化疗。间隔 1个月再用药 1次 ,连续 1年 ,同时用生地、枸杞子、龟板、鳖甲、连翘等 14味中药水煎服 ,连服 2个月。结果 :2 0例患者经本法治疗后 ,随访 6个月～ 1.5年 ,所有患者在随访期间每 3～6个月复查B超、膀胱镜及尿液细胞学检查 ,均未见肿瘤复发。结论 :膀胱部分切除加粘膜下局部浸润注射抗癌药物加髂内动脉插管定期化疗加中药的治疗方法对预防膀胱癌的复发有肯定的作用。

连钱草、人参、黄芪等组分的艾克清在小鼠体内抗肿瘤作用

目的:观察由连钱草、人参、黄芪、白术、茯苓、莪术等组成的方剂艾克清在小鼠体内的抗肿瘤作用。方法:实验于2005-06/2005-12在河南中医学院药理毒理学研究室完成。瘤株:小鼠肺癌(Lewis)、小鼠肉瘤(S180)、小鼠肝癌(HepA)、小鼠艾氏癌(Esc),由中国医学科学院实验动物中心引入。艾克清胶囊内容物(由河南中医学院制剂研室提供,批号20041218),配制成含0.5%的羧甲基纤维素纳混悬液0.1g/mL。取C57BL/6雌性小鼠200只,各取50只分别用于小鼠Lewis肺癌、小鼠S180肉瘤、小鼠HepA肝癌、小鼠Esc艾氏癌4种不同癌细胞瘤株的注射。将抽取的小鼠Lewis肺癌、小鼠S180肉瘤、小鼠HepA肝癌、小鼠Esc艾氏癌液体,用生理盐水1∶3稀释成1×107个细胞。在C57BL/6小鼠右腋下分别注入小鼠Lewis肺癌、小鼠S180肉瘤、小鼠HepA肝癌、小鼠Esc艾氏癌细胞悬液0.2mL。均于接种后次日,按随机抽签法分为5组,每组10只。然后给药:①艾克清小剂量组:灌胃艾克清混悬液1.0g/(kg·d)(相当于临床用量8.7倍)。②艾克清中剂量组:灌胃艾克清混悬液2.0g/(kg·d)(相当于临床用量17.4倍)。③艾克清大剂量组:灌胃艾克清混悬液4.0g/(kg·d)(相当于临床用量34.8倍)。④阳性对照组:肌肉注射环磷酰胺20mg/(kg·d)。⑤模型组:灌胃等体积的生理盐水(艾克清给药量均为等体积)。各组连续给药10d,末次给药后1h,每只C57BL/6小鼠腋下肿瘤生长明显,包膜完整,然后处死小鼠,剥离摘取每只小鼠的肿瘤称重,计算抑瘤率。抑瘤率=(对照组-给药组)/对照组×100%。结果:200只小鼠均进入结果分析。艾克清大、中、小剂量组的小鼠Lewis肺癌瘤质量显著低于模型组[(0.74±0.12),(0.89±0.13),(0.94±0.11),(1.32±0.13)g,P<0.01],抑瘤率分别为43.98%、32.32%、29.22%。艾克清大、中剂量组连续用药10d后,小鼠S180肉瘤质量显著低于模型组[(0.87±0.13),(1.06±0.22),(1.55±0.19)g,P<0.05,P<0.01],抑瘤率分别为43.54%、31.52%。艾克清大、中、小剂量组连续用药9d后,小鼠HepA肝癌瘤质量显著低于模型组[(1.05±0.13),(1.35±0.12),(1.43±0.22),(1.78±0.31)g,P<0.05,P<0.01],抑瘤率分别为40.8%、31.13%,19.43%,小鼠Esc艾氏癌瘤质量显著低于模型组[(1.03±0.12),(1.35±0.12),(1.55±0.15),(1.78±0.17)g,P<0.05,P<0.01],抑瘤率分别为42.24%、24.35%,13.1%。结论:口服4.0g/kg艾克清对Lewis、S180、HepA、Esc的抑瘤率均达到40%以上,口服2.0g/kg艾克清对Lewis、S180、HepA的抑瘤率均达到30%以上。

枸杞多糖对实验性肝癌小鼠肿瘤细胞FasL表达的影响及其抗肿瘤作用机制

【目的】观察枸杞多糖(LBP)对实验性肝癌小鼠肿瘤细胞死亡分子Fas配体(FasL)表达的影响,探讨其抗肿瘤作用机制。【方法】选用昆明种小鼠,随机分为模型组,LBP低、高剂量组(剂量分别为0.625、1.250 g.kg-1.d-1),各组均采用右侧腋下接种H22肝癌腹水型细胞复制荷瘤模型,从第3天开始按设计剂量给药,连续14 d。采用苏木素—伊红(HE)染色观察各组肿瘤细胞密度、细胞核分裂计数及间质淋巴细胞浸润情况,采用免疫组化法观察各组小鼠肿瘤细胞FasL表达情况。【结果】LBP低、高剂量组均可显著降低肿瘤细胞核分裂计数(P<0.05);LBP高剂量组可升高肿瘤间质淋巴细胞浸润程度(P<0.05),HE染色显示在肿瘤边缘组织内见多量淋巴细胞浸润。LBP低、高剂量组均可显著降低小鼠肿瘤细胞FasL阳性表达指数(P<0.05);免疫组化染色显示模型组FasL表达强阳性,LBP低剂量组部分肝癌细胞内FasL表达阳性,FasL仅在LBP高剂量组少量肝癌细胞中有表达。【结论】LBP抗实验性肝癌的效应可能与其能抑制FasL表达,减少免疫活性细胞凋亡有关。

紫杉醇膀胱灌注抑制大鼠膀胱癌生长的机制

目的探讨紫杉醇连续膀胱灌注对大鼠膀胱肿瘤生长的作用和机制。方法将40只雌性Wistar大鼠,随机分为对照组(n=20)和紫杉醇组(n=20),制作N-甲基亚硝基脲诱导大鼠原位膀胱癌模型,于第8周分别行生理盐水和紫杉醇制剂连续膀胱灌注,每周1次,共6次。于第14周进行病理观察、测量膀胱总重量,微血管密度(MVD)和凋亡指数(AI)。结果第14周时,对照组(n=16)和紫杉醇组(n=12)大鼠膀胱均可见明显肿物,光镜下可见癌组织侵入肌层。紫杉醇组大鼠膀胱的重量和肿瘤的MVD小于对照组(P<0.01);紫杉醇组大鼠膀胱肿瘤的AI大于对照组(P<0.01)。结论紫杉醇连续膀胱灌注可抑制大鼠膀胱肿瘤生长,可能与抑制肿瘤血管生长和诱导肿瘤细胞凋亡有关。

酸浆苦素B的体外抗肿瘤活性研究

【目的】研究苦蘵中提取的酸浆苦素B(physalin B,Ph B)的体外抗肿瘤活性。【方法】采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和细胞形态观察法研究Ph B对2种肿瘤细胞株Hep G2和SGC7901增殖的抑制作用及形态的影响,并与抗癌药物羟基喜树碱(hydroxycamptothecine,HCTP)作对照比较;采用4’6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色法观察Ph B诱导Hep G2和SGC7901细胞凋亡。【结果】MTT实验结果显示Ph B对Hep G2和SGC7901的生长均有明显的抑制作用,并具有一定的时间剂量依赖关系,且高浓度时作用优于阳性对照药HCTP,倒置相差显微镜结果也显示其显著改变了细胞形态,并能够证实MTT实验结果的可靠性;DAPI染色结果表明Ph B可促进Hep G2和SGC7901细胞凋亡。【结论】苦蘵提取物Ph B对肿瘤细胞Hep G2和SGC7901具有一定的增殖抑制作用。

中药归脾汤加减治疗对膀胱肿瘤局部切除术患者的影响

目的观察中药归脾汤加减对膀胱肿瘤局部切除术后患者生存及复发率的影响。方法选择接受手术治疗的膀胱肿瘤患者136例,患者均行局部切除术,术后对照组给予抗感染及膀胱灌注化疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用归脾汤加减,观察并统计术后2年、3年、5年的患者生存率及复发率。结果治疗组2年、3年、5年生存率均高于对照组,而复发率均低于对照组(均P<0.05),有显著性差异。结论膀胱肿瘤术后应用归脾肠加减,能够使患者的生存率明显提升,降低术后的复发率。

山奈酚对大鼠肝癌细胞CBRH7919的增殖抑制及诱导凋亡作用

【目的】观察山奈酚对大鼠肝癌细胞CBRH7919增殖抑制、诱导凋亡和细胞周期的影响。【方法】选用CBRH7919肝癌细胞株,传代培养24 h后,加入不同浓度山奈酚处理,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率,4,′6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞凋亡形态,彗星电泳技术和流式细胞术检测药物对细胞DNA的作用。【结果】山奈酚体外能抑制大鼠肝癌细胞CBRH7919的增殖,以6.25、12.5、25、50、100μmol/L浓度的山奈酚处理细胞72 h,对CBRH7919细胞的增殖抑制率显著升高,呈明显的剂量效应关系。用50、100μmol/L浓度的山奈酚作用于细胞24、48、72、96 h,对细胞的增殖抑制作用显著增强,呈明显的时间效应关系,即药物作用时间越长,抑制作用越强。DAPI染色显示不同浓度山奈酚组的细胞均有明显的细胞凋亡特征。彗星电泳显示30、60、120μmol/L浓度的山奈酚作用于细胞72 h后,细胞后面均呈现长度不等的拖尾,平均光密度值较空白对照组显著降低(P<0.01),彗星尾距较空白对照组显著增加(P<0.01),且两者改变与药物浓度相关。流式细胞仪检测结果显示30、60、120μmol/L浓度的山奈酚作用于细胞72 h出现亚二倍体凋亡峰,细胞周期被阻滞于S期,不同浓度山奈酚组凋亡率较空白对照组均明显增高。【结论】山奈酚可能通过抑制大鼠肝癌细胞CBRH7919的增殖及诱导其凋亡而产生抗肿瘤作用。

白花蛇舌草对小鼠活体腹水H22肝癌细胞及T细胞的影响

【目的】观察白花蛇舌草对小鼠腹水H22肝癌细胞形态学及腹水CD4+、CD8+T细胞表达的影响。【方法】将SPF级昆明种小鼠随机分成4组,每组10只,分别为模型组、白花蛇舌草组(剂量为25 g/kg)、党参对照组(25 g/kg)、热休克处理组;均采用活体腹水H22肝癌细胞腹腔移植法复制模型;采用涂片、瑞氏—姬姆萨染色及免疫组织化学标记方法观察各组荷瘤小鼠腹水H22肝癌细胞形态学变化及腹水CD4+、CD8+T细胞的表达。【结果】白花蛇舌草组及热休克处理组小鼠活体腹水H22肝癌细胞变形较为严重,胞膜不完整、发泡;部分细胞核见偏移或固缩。白花蛇舌草组腹水CD4+及CD8+T细胞表达均呈增高趋势,党参对照组及热休克处理组分别以CD4+和CD8+T细胞表达为主。【结论】白花蛇舌草能一定程度抑杀小鼠活体腹水H 22肝癌细胞,其机理可能与提高荷瘤小鼠的T细胞免疫功能及具有一定的细胞毒作用有关。

白花蛇舌草对H22肝癌细胞热休克蛋白70表达的影响

【目的】观察H22肝癌细胞热休克蛋白70(HSP70)表达及清热解毒中药白花蛇舌草对其表达的影响。【方法】以培养的H22肝癌细胞腹腔接种于小鼠使小鼠致瘤,然后将荷瘤小鼠分为模型组、白花蛇舌草组(剂量为25 g/kg)、党参对照组(剂量为25 g/kg)及热休克处理组共4组。采用免疫组化标记法检测各组活体腹水H22肝癌细胞HSP70的表达情况。【结果】白花蛇舌草组及热休克处理组H22肝癌细胞HSP70的表达显著性高于模型组(P<0.05或P<0.01);党参对照组H22肝癌细胞的HSP70表达与模型组比较无显著性差异(P>0.05)。【结论】白花蛇舌草可能通过诱导H22肝癌细胞HSP70表达,增强其免疫原性而发挥抗肿瘤作用。

苦参碱联合5-FU抑制人胃癌裸鼠移植瘤的生长作用及机制

【目的】研究苦参碱(matrine,Ma)与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人胃腺癌SGC-7901裸鼠移植瘤的抑制作用及可能机制。【方法】将人胃腺癌SGC-7901细胞株接种于BALB／cA裸鼠皮下,形成移植瘤后传3代;取生长旺盛期的瘤组织约1．5 mm3,无菌接种于裸鼠右侧腋窝皮下,待肿瘤生长至100-300mm3后将动物随机分为6组,即模型组、5-FU组(50 mg/kg)、Ma低剂量组(50 mg/kg)、Ma高剂量组(100 mg/kg)、Ma低剂量+5-FU组、Ma高剂量+5-FU组;各组分别按设计剂量腹腔给药,35 d后测量各组裸鼠瘤径和肿瘤体积,计算相对肿瘤体积(VR)和相对肿瘤抑制率(pinhibitory);采用免疫组化法检测荷瘤组织中凋亡相关蛋白bcl-2、bax活性和caspase-3的表达情况。【结果】Ma高剂量+5-FU组抑瘤作用与模型组、 Ma高剂量组、5-FU组比较均显著增强(P<0．05或P<0．01),Ma低剂量+5-FU组抑瘤作用也见增强,但与其他组比较无显著性差异;各给药组均可不同程度下调bcl-2表达,上调bax表达,提高活性caspase-3表达,与模型组比较具有显著性差异(P<0．05或P<0．01);Ma高、低剂量分别与5-FU合用后,该调节作用较单独使用显著增强(P<0．05或P<0．01), 并呈现剂量依赖关系。【结论】苦参碱与5-FU联合应用具有一定的协同增效作用,其机制可能与调节凋亡相关蛋白的表达, 诱导胃癌细胞凋亡有关。

天花粉多糖诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其Caspase-3和Caspase-8活化对凋亡的影响

目的:研究天花粉多糖(polysaccharide of snakegourd root)对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用、诱导凋亡的作用以及Caspase-3、Caspase-8活化对凋亡的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)法观察不同浓度天花粉多糖对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用;DAPI染色后荧光显微镜进行细胞凋亡核形态学观察;通过DNA琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段化分析,FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡率,分光光度比色法测定天花粉多糖诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡过程中Caspase-3、Caspase-8活性变化。结果:MTT结果显示,天花粉多糖对人乳腺癌MCF-7细胞有生长抑制作用。10.0μmol/L以上浓度的天花粉多糖作用2 d,DAPI染色可见核浓缩及边缘现象,DNA电泳出现特征性的凋亡条带。1.0、5.0、10.0和20.0μmol/L天花粉多糖处理的MCF-7细胞2 d,细胞凋亡率分别为(5.2±1.3)%、(13.1±4.7)%、(27.6±6.8)%和(43.8±9.8)%;10.0μmol/L天花粉多糖处理MCF-7细胞1、2、3 d,Caspase-3活性在2 d达最高(2.32±0.12)U/μg,而Caspase-8活性则在1d达最高(1.92±0.11)U/μg,两者与对照组相比均有统计学显著性差异(P<0.05)。结论:天花粉多糖对人乳腺癌MCF-7细胞有生长抑制和诱导凋亡作用,其诱导凋亡的机制可能与Caspase-3、Caspase-8活化有关。

参附注射液、高乌甲素注射液诱导白血病细胞株HL-60分化、凋亡的研究

【目的】观察参附注射液及高乌甲素注射液诱导白血病细胞株HL-60分化、凋亡的作用,初步验证温阳法治疗肿瘤的理论。【方法】采用人类急性白血病细胞株HL-60为模型,设参附注射液组(终浓度分别为12.5、25、50、100μL/mL),高乌甲素组(终浓度分别为25、50、100μL/mL),亚砷酸钠对照组(终浓度分别为0.25、2、15μmol/L)及阴性对照组;检测细胞增殖、细胞形态、硝基四氮唑蓝(NBT)还原能力、细胞周期分布、凋亡率等指标。【结果】参附注射液作用后HL-60细胞增殖受抑制,高乌甲素注射液对HL-60的生长无抑制作用;经药物处理60 h后HL-60细胞均出现程度不同以凋亡为主的形态改变;低浓度参附注射液(12.5μL/mL)、高乌甲素注射液(50μL/mL)作用60 h后HL-60细胞NBT还原能力增强,而其他浓度组NBT还原能力反未增强;药物处理60 h后,100μL/mL高乌甲素液及25.50μL/mL参附液流式细胞仪检测直方图上呈现亚二倍体凋亡峰,凋亡率呈不同程度增高。【结论】参附注射液、高乌甲素注射液对人类急性白血病细胞株HL-60具有不同程度的诱导分化和凋亡的双重作用,为温阳法治疗肿瘤提供了一定的理论依据。

姜黄素对人微血管内皮细胞增殖、迁移、成管以及凋亡的影响

【目的】研究姜黄素对人微血管内皮细胞(HMVEC-L)增殖、迁移、成管以及凋亡的影响。【方法】将姜黄素分为0、20、40、80μmol/L 4个实验组,分别用非放射性细胞增殖检测(MTS)法、划痕实验、成管实验以及Hoechst 33258与TUNEL双重荧光法检测姜黄素对HMVEC-L增殖、迁移、成管以及凋亡的影响。【结果】MTS结果显示:从姜黄素与HMVEC-L共同培养的第1天开始,20～80μmol/L浓度组均可抑制HMVEC-L增殖,与对照组(0μmol/L)比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),尤以80μmol/L组抑制HMVEC-L增殖能力最显著(P<0.05或P<0.01)。划痕实验结果显示:20～80μmol/L姜黄素浓度组HMVEC-L迁移率均显著降低,各组HMVEC-L迁移率比较差异有统计学意义(P<0.05),其中尤以80μmol/L组HMVEC-L迁移率最低。成管实验结果显示:20～80μmol/L姜黄素浓度组HMVEC-L成管长度均显著降低,各组HMVEC-L成管长度比较差异有统计学意义(P<0.05),其中尤以80μmol/L组HMVEC-L成管长度最小。Hoechst 33258与TUNEL双重荧光染色结果显示:在姜黄素与HMVEC-L共同培养过程中HMVEC-L发生了凋亡。【结论】姜黄素可通过抑制HMVEC-L增殖、迁移、管样形成并诱导其发生凋亡,从而有效抑制肿瘤血管形成。

Evn-50对人乳腺癌MCF-7耐三苯氧胺细胞株生长和凋亡的影响

目的:通过研究黄荆子的乙酸乙酯提取物Evn-50在体外对人乳腺癌MCF-7和耐三苯氧胺细胞株(MCF-7/TAM-R)的生长和凋亡的影响,探索Evn-50在逆转乳腺癌耐药中的作用及其可能机制。方法:构建MCF-7/TAM-R细胞系,分别用DMSO、5μmol/L TAM、5μmol/L TAM+50μg/ml Evn-50和50μg/ml Evn-50处理细胞。然后,采用MTT法测定细胞存活率,PI单染流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期分布情况,免疫蛋白印记法观察Evn-50和TAM单独或联合作用时的机制。结果:Evn-50单药或与TAM联合均可以降低人乳腺癌MCF-7和三苯氧胺耐药细胞株MCF-7/TAM-R的存活率,两药联合作用更为明显,同单用TAM组相比差异有统计学意义(P<0.01)。Evn-50单药或与TAM联合应用对两株细胞的凋亡均有明显影响,且随着作用时间的延长细胞凋亡逐渐增多,其中以72 h时细胞凋亡率和G2期细胞比例最为明显(P<0.01)。TAM和Evn-50联合处理无论是对MCF-7细胞还是对三苯氧胺耐药细胞MCF-7/TAM-R,均能明显下调p-AKT(Ser473)和p-MAPK44/42(Thr202/Tyr204)蛋白水平。结论:Evn-50能够抑制MCF-7和MCF-7/TAM-R细胞株的生长并诱导细胞凋亡,尤其在Evn-50与TAM联合处理时更为明显。其作用机制可能与AKT和MAPK信号通路的下调相关,但需要进一步研究证实。

不同扶正药物及其配伍对SMMC-7721人肝癌细胞的诱导分化作用

目的 :探讨不同扶正药物及其配伍对SMMC - 772 1人肝癌细胞的诱导分化作用及其作用机制。方法 :选取临床肝癌治疗常用的益气、温阳、补肾、养阴等扶正治法的代表药物 ,并根据阴阳治则理论将其分别配伍为益气养阴、温阳养阴及补肾 (阳 )养阴等复合方治法 ,分别煎成汤液 ,采取大鼠灌胃给药后分离药物血清的方法制备药物血清 ,作用于体外培养的SMMC - 772 1人肝癌细胞 ,以正常大鼠血清和维甲酸作对照。HE染色观察细胞形态 ;RIA法测甲胎蛋白 (AFP)、环核苷酸 (cAMP) ;ELISA法测白蛋白 (Alb)。结果 :养阴、益气养阴、温阳养阴、补肾养阴组细胞Alb分泌量、cAMP含量增加 ,AFP分泌量降低 ,细胞核浆比例缩小。结论 :养阴药北沙参、麦门冬及其与益气、温阳、补肾配伍后的药物血清具有诱导SMMC - 772 1人肝癌细胞分化的作用 ;提高细胞内cAMP水平 。

含砷复方制剂治疗宫颈上皮内瘤变164例疗效观察

目的观察含砷复方制剂治疗宫颈上皮内瘤变(CIN)的疗效和安全性。方法将365例CIN患者分为2组,治疗组164例于月经间期予含砷复方制剂局部用药,3d1次,6次1个疗程,最多限用4个疗程;对照组201例予宫颈环形电刀切除术(LEEP),观察2组治疗期间和治疗3个月后疗效及不良反应、并发症。结果对于CINⅠ级患者,2组疗效相当;治疗组CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级人乳头瘤病毒(HPV)转阴率高于对照组(P<0.05)。治疗组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论含砷复方制剂可应用于CINⅠ级人乳头瘤病毒和(或)合并HPV感染者的治疗。

虫草素钌(Ⅱ)配合物的合成及其对大鼠肝癌细胞杀伤作用的初步研究

【目的】探讨虫草素钌(Ⅱ)配合物的合成及其对大鼠肝癌细胞株CBRH7919的杀伤作用。【方法】以虫草素(Cordycepin)为主要配体,联吡啶(2′,2′-bipyridine)为辅助配体合成钌配合物,将产品初步分离提纯后,以空白组、虫草素组、钌前体组、虫草素与钌前体等摩尔浓度混合的混合物组作为对照组,各组均设0.2、1.0、5.0、25.0、125.0 mg/L共5个浓度,分别作用于大鼠肝癌细胞CBRH7919,72h后进行光镜下形态学观察,并采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定癌细胞存活率。【结果】经初步分离的粗产品(浓度为0.2～25.0 mg/L)作用后的癌细胞存活率均低于相对应浓度的各对照组,72h半数抑制浓度(ρ_I_(50))为48.9 mg/L,并在25.0 mg/L以上浓度使癌细胞发生了明显的形态学改变。虫草素组72h的ρ_I_(50)为51.4mg/L。【结论】虫草素与钌形成配合物后对癌细胞生长抑制作用有所增强,并出现了特殊的形态改变。