外周血miR-143、miR-33a表达与膀胱癌患者临床预后的相关性

【目的】探讨外周血miR-143、miR-33a表达与膀胱癌患者临床预后的相关性。【方法】选取2017年5月至2021年4月本院收治的60例膀胱癌患者(观察组),另选取同期体检的60例健康志愿者作为对照组。比较两组研究对象外周血miR-143、miR-33a表达水平及不同病理特征患者外周血miR-143、miR-33a表达水平,评价外周血miR-143、miR-33a对膀胱癌的诊断价值,比较外周血miR-143、miR-33a不同表达膀胱癌患者生存曲线,分析外周血miR-143、miR-33a表达与膀胱癌患者死亡风险的关系。【结果】观察组患者外周血miR-143、miR-33a表达水平低于对照组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。不同临床分期、组织分化程度、初发与复发及有无远处转移患者外周血miR-143、miR-33a表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。外周血miR-143、miR-33a联合诊断膀胱癌的曲线下面积为0.922,显著高于miR-143、miR-33a单一指标(P<0.05)。外周血miR-143、miR-33a低表达患者的术后3年生存率分别低于外周血miR-143、miR-33a高表达患者(P<0.05)。外周血miR-143、miR-33a低表达患者术后3年死亡风险是高表达患者的4.550倍、5.223倍(P<0.05)。【结论】膀胱癌患者miR-143、miR-33a表达下调,与病理特征密切相关,检测其表达水平有助于评估患者预后情况,具有较高临床价值。

膀胱憩室癌的临床、病理及影像学研究进展

膀胱憩室癌是膀胱憩室内少见的恶性上皮肿瘤,好发于老年男性,发病率低,临床表现无明显特异性,确诊依赖于组织病理学。现通过对膀胱憩室癌的临床、病理及影像学研究进展作一综述,拟提高对该病的认识,进而减少漏诊和误诊的发生,指导临床医师选择合理恰当的检查、治疗方法以及制定术后随访策略,改善患者的生存预期。

角蛋白7和p53蛋白与膀胱癌临床病理的相关性及预测复发风险的价值

【目的】探讨角蛋白7(KRT7)和p53蛋白与膀胱癌临床病理的相关性及其在复发风险预测中的价值。【方法】采用免疫组织化学染色法测定72例膀胱癌患者手术后癌组织与癌旁正常组织标本中KRT7、p53蛋白的表达情况,比较癌组织和癌旁组织中KRT7、p53蛋白阳性检出率,对比不同临床病理特征患者癌组织中KRT7、p53蛋白阳性检出率,观察KRT7、p53蛋白不同表达膀胱癌患者的3年复发情况。【结果】癌组织KRT7阳性检出率显著低于癌旁组织,p53蛋白阳性检出率显著高于癌旁组织,且差异有统计学意义(P<0.05);有被膜浸润、中低分化、淋巴结转移患者KRT7阴性检出率较高,p53蛋白阳性检出率较高,且差异有统计学意义(P<0.05);KRT7阴性、p53蛋白阳性膀胱癌患者3年复发率分别为46.15%、50.00%,均高于KRT7阳性、p53蛋白阴性患者的12.12%、15.00%,且差异均有统计学意义(Log-Rank=17.553、12.281,P<0.05)。【结论】膀胱癌患者癌组织中p53蛋白呈高表达,KRT7呈低表达,其表达水平与组织分化程度、淋巴结转移以及被膜浸润密切相关。

肿瘤型 M2丙酮酸激酶在膀胱癌中的表达及临床意义

【目的】探讨肿瘤型M2丙酮酸激酶（TumortypeM2-pyruvatekinase，TUM2-PK）在膀胱癌中的表达及临床意义分析。【方法】采取2009年1月至2012年1月，221例膀胱癌患者和220例健康正常人的血清标本，应用酶联免疫吸附测定法（ELISA）定量检测标本的TUM2-PK水平，研究试验组与对照组，以及病理分型与TUM2-PK关系。【结果】膀胱癌患者血清中TUM2-PK的含量明显高于正常对照组[（39．4±3．5）u/mLvs（7．3±2．1）u/mL（P＜0．05）]；同时根据膀胱癌病理分级TUM2-PK的含量存在一定差异：T1期（32．1±6．1）u/mL，T2期（34．1±4．3）u/mL，T3期（68．2±5．9）u/mL。T1期膀胱癌与T2期膀胱癌TUM2-PK含量无明显差异，但T3期较T1、T2明显增高。【结论】监测血清中TUM2-PK含量有助于膀胱肿瘤的早期诊断，同时根据TUM2-PK的含量亦可作为监测肿瘤及疾病分级的重要手段之一。

EDIL3、MCP-1蛋白在膀胱癌组织的表达中及其与临床病理特征的相关性分析

【目的】探讨膀胱癌组织中的表皮生长因子样结构域3(EDIL3)蛋白、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达及其与患者病理特征的相关性.【方法】选取2016年1月至2017年12月本院收治的104例膀胱癌手术后病灶组织样本(观察组)及其癌旁组织52例(对照组).采用免疫组化染色检测两组标本中的EDIL3蛋白、MCP-1蛋白表达水平,并分析其阳性表达与患者临床病理特征的相关性.【结果】观察组EDIL3蛋白均有表达,其高表达率和MCP-1蛋白阳性表达率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).膀胱癌组织中EDIL3蛋白与MCP-1蛋白表达呈显著的正相关关系(r=0.387,P<0.05).在不同临床分期、病理学分级的膀胱癌组织中的EDIL3蛋白高表达率、MCP-1蛋白阳性表达率差异均具有统计学意义(P<0.05);在是否发生淋巴结转移、不同病灶大小的膀胱癌组织中的EDIL3蛋白高表达率、MCP-1蛋白阳性表达率差异均不具有统计学意义(P>0.05).【结论】膀胱癌组织中EDIL3、MCP-1蛋白表达上调,二者表达呈正相关,并与其临床分期、病理分级关系密切,在促进膀胱癌的发生、发展中发挥一定作用.

三氧化二砷诱导人膀胱癌T24细胞凋亡的实验研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人移行细胞膀胱癌细胞株T24细胞凋亡的作用。方法用MTT法、TUNEL法、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳等方法观察As2O3诱导T24细胞凋亡的作用。结果As2O3可有效地抑制T24细胞增殖,随着药物浓度增高其抑制作用增强,且细胞出现典型的凋亡变化。DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡特征性梯形条带。TUNEL法呈阳性结果。透射电镜下可见细胞核仁消失,染色质浓缩聚集于核膜下。对照组均未见上述变化。对凋亡相关基因Bcl-2免疫组化染色发现其表达下调,同时凋亡主要效应分子Caspase 3被激活。结论As2O3可有效诱导膀胱癌细胞凋亡,通过下调Bcl-2基因表达是其作用机制之一。

MMP-9及其抑制因子TIMP-1在膀胱癌中的表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其抑制因子(TIMP-1)在膀胱移行细胞癌(TCCB)中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学和RT-PCR方法检测47例TCCB组织和5例正常膀胱组织MMP-9和TIMP-1蛋白的表达情况。结果:在正常膀胱组织中MMP-9、TIMP-1不表达或呈分布均匀的微量表达,而在TCCB中则有不同程度的阳性表达,二者表达量比较差异均有显著性(P<0.05)。随着TCCB临床病理分期、分级的升高,MMP-9的表达呈现增高趋势(P<0.01),但TIMP-1表达情况与肿瘤临床病理分期、分级无明显关联(P>0.05)。MMP-9和TIMP-1在初发TCCB和复发TCCB中的表达差异均无显著性(P>0.05)。结论:MMP-9在TCCB的发生、发展中具有促进作用;MMP-9和TIMP-1之间的平衡失调可能是肿瘤侵袭和转移的分子机制之一。

Bcl-2基因在人膀胱癌细胞中表达对CTL凋亡诱导作用的影响

目的:探讨Bcl-2基因在人膀胱癌细胞中表达对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)凋亡诱导作用的影响。方法:采用基因重组技术构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/Bcl-2;应用脂质体介导的基因转染技术将pcDNA3.1(+)/Bcl-2导入膀胱癌BIU-87细胞,RT-PCR检测Bcl-2基因表达水平;不同浓度抗Fas单克隆抗体(Anti-Fasmab)模拟CTL的Fas-配体(Fas-L)处理转染与未转染Bcl-2基因的膀胱癌细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、吖啶橙(AO)荧光染色法和流式细胞检测仪(FCM)分析细胞存活和凋亡情况。结果:酶切和核酸测序证明真核表达载体pcDNA3.1(+)/Bcl-2构建成功。将重组质粒转染膀胱癌细胞后,RT-PCR分析表明,转染Bcl-2基因的BIU-87/Bcl-2细胞的Bcl-2基因表达水平较BIU-87细胞和转染空载体的BIU-87/neo细胞显著增高,P<0.01。An-ti-Fasmab作用后,BIU87/Bcl-2细胞的存活率显著高于BIU-87和BIU-87/neo细胞,P<0.05或P<0.01。3种细胞虽均发生凋亡的形态学改变,但BIU87和BIU87/neo细胞改变更为明显,两者的凋亡率分别为(25.33±3.00)%和(27.05±1.75)%,而BIU-87/Bcl-2细胞的凋亡率为(18.06±1.41)%,显著低于前两者,P<0.01。结论:Bcl-2基因高表达通过阻断CTL杀伤膀胱癌细胞的Fas/Fas-L途径,使膀胱癌细胞能够抵御免疫系统中CTL的攻击。

miR-505-5p在膀胱癌细胞中靶向调控PLK1抑制细胞增殖和迁移

目的探究miR-505-5p在膀胱癌细胞中对细胞增殖和迁移能力的影响。方法用qRT-PCR在膀胱癌及癌旁正常组织(n=18)中检测miR-505-5p和Polo样激酶1(Polo-like-kinase 1,PLK1)的表达量。用生物信息学预测miR-505-5p和PLK1的靶向匹配关系,并用双荧光素酶报告基因实验验证。在膀胱癌细胞中用Lipo3000转染miR-505-5p模拟物和抑制剂后,Western blot法检测PLK1蛋白表达;CCK-8法检测细胞增殖;Transwell法检测细胞迁移。结果 miR-505-5p在膀胱癌组织中低表达,PLK1在膀胱癌组织中高表达,与癌旁正常组织比较,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。miR-505-5p能与PLK1 mRNA 3′-非翻译区结合,并抑制其表达。上调miR-505-5p,PLK1蛋白水平降低,细胞增殖能力下降,迁移减弱,与对照组比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论 miR-505-5p通过靶向作用于PLK1 mRNA 3′-UTR负向调控PLK1的表达及负向调控细胞增殖和迁移。

Bcl-2基因对丝裂霉素C诱导的膀胱癌细胞凋亡抑制及其机制的研究

目的:探讨Bcl-2基因对丝裂霉素C(MMC)诱导的膀胱癌细胞凋亡的抑制作用及其分子机制。方法:采用DNA重组技术构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/Bcl-2;利用脂质体将重组载体pcDNA3.1(+)/Bcl-2和空载体pcDNA3.1(+)转入人膀胱癌BIU-87细胞,RT-PCR检测基因转录水平;MMC作用于转染前、后的细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、吖啶橙(AO)荧光染色法、Westernblot技术对细胞生长、凋亡、Caspase-3活性及细胞色素C在细胞内分布的变化进行检测。结果:1)成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/Bcl-2,建立Bcl-2基因高表达的膀胱癌细胞株BIU-87/Bcl-2。2)在MMC作用下,与未转染Bcl-2基因的膀胱癌细胞株BIU-87和BIU-87/neo相比,BIU-87/Bcl-2细胞株存活率上升,P<0.01,其IC50是后者的15倍,q=6.41,P<0.01;BIU-87/Bcl-2的凋亡率显著降低,q值分别为22.62和20.45,P值均<0.01,Caspase-3激活和线粒体细胞色素C的释放受到抑制,BIU-87/Bcl-2的A405显著低于BIU-87和BIU-87/neo,q值分别为28.20和26.70,P值均<0.01,表明BIU-87/Bcl-2的Caspase-3激活受限。结论:Bcl-2基因高表达通过抑制线粒体细胞色素C的释放和Caspase-3的激活,使膀胱癌细胞对MMC诱导的凋亡产生抗性,导致耐药性的产生。

Survivin与VEGF在膀胱癌组织中的表达及Survivin ASODN对膀胱癌细胞系的作用

目的检测膀胱癌组织中Survivin、VEGF表达的相关性;观察Survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人膀胱癌的作用研究。方法采用免疫组化和蛋白印迹技术,检测41例膀胱癌组织及癌旁非癌组织中Sur-vivin和VEGF的表达;应用SurvivinASODN作用后收集各组细胞。观察细胞形态变化及超微结果变化,检测各组Survivin表达情况、AI和PI及ASODN对细胞的生长抑制率。结果41例患者中29例(67.4%)表达Survivin蛋白,其中25例(61.0%)VEGF表达阳性或弱阳性;在癌周非癌组织中未检测到Survivin蛋白的表达。Survivin与膀胱癌的转移有关,P=0.002;Survivin蛋白的表达与VEGF蛋白的表达有相关性,P=0.001。电镜下ASODN组可见典型凋亡样改变;各ASODN转染组细胞Survivin表达减弱,呈时间与剂量依赖性;ASODN转染组AI和PI与对照组相比差异有统计学意义,P=0.012,而AI和PI在各对照组间差异无统计学意义,P>0.05。结论Survivin在膀胱癌组织中的表达能促进膀胱癌的发生与发展,并可能通过上调VEGF的表达而促进膀胱癌发展与转移。Survivin ASODN转染后能下调Survivin蛋白表达,诱导癌细胞凋亡,抑制癌细胞增殖。

CD147与VEGF在人膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中CD147与VEGF的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测72例BTCC组织和12例正常膀胱组织CD147与VEGF的表达,分析CD147与VEGF间及其与BTCC部分临床生物学特性的相关性。结果BTCC组织中有CD147、VEGF表达,其阳性率分别为68.1%、70.8%。CD147表达与BTCC的病理分级显著相关,与临床分期未见相关;VEGF表达与病理分级和临床分期显著相关;CD147表达与VEGF表达呈显著正相关(r=0.406,P<0.01)。结论CD147在BTCC的浸润与转移中起重要作用。

膀胱尿路上皮癌中Livin和Smac蛋白表达及意义

目的:探讨膀胱尿路上皮癌中Livin和Smac蛋白表达及意义。方法:采用免疫印迹法(Western-Blot)检测Livin和Smac蛋白在73例膀胱尿路上皮癌及21例正常膀胱黏膜中的表达。结果:膀胱尿路上皮癌中Livin蛋白表达率(37.0%)高于正常膀胱黏膜(0%),Smac蛋白表达率(79.5%)低于正常膀胱黏膜(100%)。Livin蛋白表达率复发肿瘤高于初发肿瘤,Smac蛋白表达率低分期高于高分期。Livin和Smac蛋白表达呈负相关(r=-0.604,P<0.05)。结论:膀胱尿路上皮癌中Livin蛋白与复发相关,Smac蛋白与分期相关,可能成为肿瘤治疗的新靶点。

膀胱移行细胞癌RASSF1A和Cyclin D1与Bcl-2蛋白的表达及意义

目的:探讨RASSF1A、CyclinD1和Bcl-2蛋白在膀胱移行细胞癌发生发展中的作用,以及RASSF1A和CyclinD1与Bcl-2蛋白之间的关系。方法:免疫组化法(SP法)检测45例膀胱移行细胞癌组织、45例癌旁黏膜及18例正常黏膜组织中RASSF1A、CyclinD1和Bcl-2蛋白的表达。结果:膀胱移行细胞癌组织中RASSF1A、CyclinD1和Bcl-2蛋白表达阳性率分别为46.7%(21/45)、88.9%(40/45)和57.8%(26/45);癌旁组织分别为84.4%(38/45)、42.2%(19/45)和24.4%(11/45);正常组织分别为94.4%(17/18)、38.9%(7/18)和16.7%(3/18)。膀胱移行细胞癌组织中RASSF1A蛋白的表达显著低于癌旁及正常膀胱黏膜,P<0.05;而CyclinD1和Bcl-2蛋白的表达则显著升高,P<0.05。RASSF1A和CyclinD1及Bcl-2蛋白的表达呈负相关性,P<0.05。结论:RASSF1A蛋白的表达降低和CyclinD1、Bcl-2蛋白的过表达可能参与膀胱移行细胞癌的发生发展过程,RASSF1A可能通过某种机制促使CyclinD1和Bcl-2在膀胱移行细胞癌中过表达,从而促进膀胱移行细胞癌的发生发展。

Livinα在膀胱移行细胞癌组织中表达的研究

目的:研究膀胱癌相关Livin基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达以及Livin基因表达与膀胱移行癌生物学行为的关系;研究抑癌基因p53在膀胱癌组织中突变以及Livin表达与p53基因突变的关系。方法:100例膀胱移行细胞癌组织,设计Livinα引物,以半定量RT-PCR的方法,检测膀胱癌组织Livinα mRNA,以免疫组化法检测癌组织中p53蛋白。将膀胱肿瘤病理分级、临床分期、是否复发等生物学行为及p53蛋白染色强度分别量化,与组织Livinα mRNART-PCR产物量进行等级相关分析。并以10例正常膀胱黏膜作为对照。结果:100例膀胱移行细胞癌,67例检测到Livinα mRNA表达,10例正常膀胱黏膜组织未检测到Livinα mRNA表达,Livinα mRNA在膀胱移行细胞癌组织中表达率高于正常膀胱黏膜,χ2=14.4,P=0.000。Livinα mRNA在膀胱癌组织中表达与p53蛋白阳性(rs=0.465,P=0.002)及肿瘤病理分级(rs=0.463,P=0.002)有相关性。结论:膀胱移行细胞癌组织中可见Livinα mRNA高表达,Livinα mRNA表达与膀胱癌病理分级及癌组织中p53蛋白呈正相关。

CIP2A在膀胱尿路上皮癌中的表达及其临床意义

目的:探讨膀胱尿路上皮癌(UCCB)组织中CIP2A的表达及其在膀胱尿路上皮癌发生发展中的意义。方法:应用免疫组化法及逆转录聚合酶链反应法,对48例临床分期为Tis^T1期的膀胱癌组织标本中CIP2A的表达进行检测。病理分级G1级23例,G2级17例,G3级8例;复发性膀胱癌17例;15例非肿瘤膀胱组织作对照应。结果:15例非肿瘤膀胱组织CIP2A表达均为阴性;48例膀胱癌组织中有19例可见CIP2A表达;复发的膀胱癌组织中CIP2A阳性表达率(58.82%,10/17)明显高于初发的膀胱癌组织(29.03%,9/31),两组CIP2A表达阳性率有显著性差异(P<0.05);CIP2A表达率在不同分级的肿瘤组织中无明显差异(P>0.05)。两年随访发现:CIP2A表达阳性的肿瘤病人复发率高(13/19,68.42%),与CIP2A表达阴性者的复发率(11/29,37.93%)相比有显著性差异(P<0.05)。结论:CIP2A与膀胱癌复发有关,检测膀胱癌组织中CIP2A表达有望作为膀胱癌诊断的一种指标,在膀胱肿瘤的预后判断中起重要作用。

紫杉醇膀胱灌注抑制大鼠膀胱癌生长的机制

目的探讨紫杉醇连续膀胱灌注对大鼠膀胱肿瘤生长的作用和机制。方法将40只雌性Wistar大鼠,随机分为对照组(n=20)和紫杉醇组(n=20),制作N-甲基亚硝基脲诱导大鼠原位膀胱癌模型,于第8周分别行生理盐水和紫杉醇制剂连续膀胱灌注,每周1次,共6次。于第14周进行病理观察、测量膀胱总重量,微血管密度(MVD)和凋亡指数(AI)。结果第14周时,对照组(n=16)和紫杉醇组(n=12)大鼠膀胱均可见明显肿物,光镜下可见癌组织侵入肌层。紫杉醇组大鼠膀胱的重量和肿瘤的MVD小于对照组(P<0.01);紫杉醇组大鼠膀胱肿瘤的AI大于对照组(P<0.01)。结论紫杉醇连续膀胱灌注可抑制大鼠膀胱肿瘤生长,可能与抑制肿瘤血管生长和诱导肿瘤细胞凋亡有关。

Livin在膀胱移行细胞癌组织中表达的研究

目的:探讨凋亡抑制基因Livin在膀胱移行细胞癌(TCCB)发生发展中的作用。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测46例TCCB患者癌组织中Livin mRNA的表达,并与13例正常膀胱组织作对照观察。结果:46例TCCB肿瘤组织中35例LivinαmRNA阳性表达,阳性率为76%;对照组13例中无LivinαmRNA阳性表达,二者比较具有显著性差异(P<0.05)。Livin表达在不同临床分期、病理分级、单发与多发等生物学指标上无显著性差异,而复发者组LivinαmRNA表达(91%)要明显高于初发者组(63%),两组有显著性差异(P<0.05)。结论:Livin表达与TCCB的发生、发展有关,可以作为TCCB的分子标志物,可能为TCCB基因治疗提供新的合理靶点。

膀胱移行细胞癌中MIF、MMP9的表达及意义

目的研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、基质金属蛋白酶9(MMP9)在膀胱移行细胞癌(BTCC)、癌旁、正常膀胱中的表达,探讨MIF与膀胱肿瘤侵袭、转移等生物学行为的关系。方法抽取组织总RNA,采用RT-PCR法检测MIF和MMP9 mRNA的表达。结果肿瘤组织中MIF mRNA的表达明显高于正常组织(P<0.05),其MMP9 mRNA的含量也明显升高(P<0.05)。结论MIF在BTCC的侵袭、转移过程中可能具有促进作用,其机制可能与影响MMP9表达上调有关。

膀胱尿路上皮癌分子机制及分子标志应用的研究进展

膀胱癌是泌尿系统最常见的上皮性恶性肿瘤,有鳞状细胞癌、腺癌及其他类型的癌,但以尿路上皮癌为最常见。据统计,全球范围内每年约35.7万例患者新诊断为膀胱癌,其中14.5万例死亡。