松弛素对高糖环境下肾小球系膜细胞分泌细胞外基质的影响及其作用机制研究

目的 观察人松弛素（RLX）对高糖培养人肾小球系膜细胞分泌细胞外基质的影响,初步探讨其可能作用机制.方法 将人肾小球系膜细胞株分组：正常糖组：含5.5 mmol/L葡萄糖;高糖组：含30 mmol/L葡萄糖;松弛素干预组：高糖（30 mmol/L葡萄糖）＋松弛素（10 ng/ml）;α-平滑肌动蛋白（α-SMA）的检测增加TGF-β1阳性对照组,即5.5 mmol/L葡萄糖＋TGF-β1（5μg/L）.CCK-8法检测松弛素对系膜细胞增殖的影响,ELISA法检测细胞上清中Ⅳ型胶原（ColⅣ）、纤连蛋白（FN）的表达.qPCR检测系膜细胞TGF-β1 mRNA表达.免疫印迹技术（Western blot）检测α-SMA表达,确定肾小球系膜细胞表型转化情况.结果 松弛素对正常糖组及高糖组系膜细胞活力均未发现有影响;与正常糖组相比,高糖组各时间点肾系膜细胞分泌ColⅣ、FN显著增加,48 h尤为明显（57.28±0.59 vs 41.85 ±0.03、56.52±0.88 vs 33.80±0.24,P＜0.01）,α-SMA表达增加（P＜0.05）.与高糖组比较,松弛素干预组ColⅣ、FN表达在48 h下降最为明显（47.08±0.03 vs 57.28±0.59、36.16±0.52 vs 56.52±0.88,P＜0.01）,α-SMA表达减少（P＜0.01）,TGF-β1 mRNA表达下降（P＜0.01）.结论 松弛素能抑制高糖培养的系膜细胞分泌细胞外基质,部分作用机制是通过抑制细胞表型转分化及抑制TGF-β1基因表达,具有抗纤维化作用.

膝关节注射透明质酸钠对力竭性跑台运动大鼠滑膜组织COMP的影响

目的 观察关节腔注射透明质酸钠（HA）对力竭性跑台运动大鼠滑膜组织中软骨寡聚基质蛋白（COMP）表达的影响,探究滑膜中COMP对HA治疗效果是否具有评价作用.方法 将36只雄性Wistar大鼠随机分为安静对照组、力竭性运动组和力竭性运动加HA注射组,12只/组.力竭性运动加HA注射组1次/周,共5次的膝关节腔HA注射,在6周力竭性跑台运动后,取各组大鼠膝关节滑膜组织,HE染色观察其组织变化,并对其滑膜炎程度行组织学评分,应用免疫组化法检测COMP在各组大鼠滑膜组织中的表达.结果 力竭性运动加HA注射组大鼠滑膜组织滑膜炎症程度显著低于力竭性运动组大鼠（t=7.15,P＜0.01）,滑膜组织COMP的表达也显著低于安静对照组大鼠（t=6.30,P＜0.01）.结论 关节腔注射HA对膝关节滑膜炎具有治疗作用,通过检测滑膜组织中COMP的表达可以评价HA对于滑膜炎的治疗效果.

米非司酮对早孕绒毛和蜕膜组织中诱导型一氧化氮合酶的影响

目的了解米非司酮对早孕绒毛、蜕膜组织中iNOS（iNOS）的影响，进一步探讨米非司酮早孕药物流产机制。方法采用原位杂交及免疫组化方法对40例药物流产的绒毛和蜕膜中iNOS的表达进行检测（实验组），利用计算机CMIAS系统，表达指标以数密度（N／S）及阳性单位（Pu）计算，并与40例正常人工流产的绒毛和蜕膜组织比较（对照组）。结果实验组绒毛组织iNOS原位杂交N／S、Pu分别为（0．12±0．01）、（15．3±2．6），对照组分别为（0．022±0．003）、（3．1±0．5），2组差异有统计学意义（P〈0．01）；免疫组化实验组和对照组N／S、Pu分别为（0．09±0．01）、（10．24±1．55）vs（0．016±0．002）、（1．26±0．33），差异有统计学意义。蜕膜组织中原位杂交及免疫组化iNOS表达较低，2组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论米非司酮早孕药物流产与绒毛组织iNOS活性增加有关，与蜕膜组织iNOS表达无关。

维A酸对糖尿病肾病大鼠足细胞Nephrin表达的影响

目的:探讨维A酸的抗蛋白尿作用。方法:应用链脲佐菌素建立糖尿病肾病模型。维A酸干预。8周后检测24 h尿蛋白定量等,观察足细胞Nephrin表达的变化。结果:干预后大鼠24 h尿蛋白定量减少,Nephrin表达上调。结论:维A酸的抗蛋白尿作用可能与其调节足细胞Nephrin的表达有关。