自由基损伤红细胞膜分子的机理研究

为探明自由基对红细胞膜脂质及蛋白分子损伤机理，本文通过电子自旋共振波谱仪（ＥＳＲ）、激光拉曼波谱仪、圆二色波谱仪（ＣＤ）、显微付立叶变换红外波谱仪（ＭＦＴ－ＩＲ）和表面电子能谱分析系统（ＥＳＣＡ）分别对体外自由基作用３０分钟后，及作用后３小时红细胞膜整体结构、膜蛋白分子及脂质分子进行了分析。结果发现，自由基作用后①红细胞膜中β－胡萝卜素构象由伸展变为卷曲，提示膜整体结构改变，②膜蛋白分子二级结构变化，表现为α螺旋减少和β折叠增加，③膜蛋白分子二硫键与巯基的比例增加（Ｓ－Ｓ／ＳＨ）、亚氨基（ＮＨ）和羰基含量改变，同时蛋白分子的氢键也被破坏（如ＮＨ、ＣＯＨ等基团的减少和ＮＣ、ＣＯ的增加），④膜脂分子磷氧双键（Ｐ＝Ｏ）成分、羰基成分（Ｃ＝Ｏ）、碳－碳双键（Ｃ＝Ｃ）成分降低；说明自由基导致红细胞膜蛋白及脂质分子化学结构改变是造成膜分子构象及膜整体结构改变的根本原因。３小时后无论是膜蛋白二级结构、二硫键与巯基比或膜脂分子Ｐ＝Ｏ、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｃ不仅没有恢复，反而有加重趋势。

运动性疲劳的线粒体膜分子机理研究.IV.线粒体质子跨膜势能、质子漏与运动性内源活性氧生成的相互关系

目的 :以运动、外源性补充CoQ以及运动合并补充CoQ作为干预手段 ,观察线粒体能量转换速率、质子漏与活性氧产生之间的相互关系 ,进一步探讨运动性内源活性氧生成和代谢途径及可能机制。方法 :雄性SD大鼠 36只 ,随机分为 :1)安静对照组 (R ,n =6 ) ;2 )运动中对照组 (Em ,n =6 ) ;3)力竭对照组 (Ei,n =6 ) ;4)安静补药组 (QR ,n =6 ) ;5 )运动中补药组 (Qm ,n =6 ) ;6 )力竭补药组 (Qi,n =6 )。采用三级递增负荷力竭运动模型 ,测定心肌线粒体ROS产生速率、线粒体膜电子传递与质子泵出比值 (H+/ 2e)以及线粒体态 4呼吸速率。结果 :(1)Em和Qm组心肌线粒体ROS产生、H+/ 2e和态 4呼吸分别比R和QR组显著增高 ,并且 ,Qm组三项指标显著高于Em组。 (2 )相关分析表明 ,ROS产生速率分别与H+/ 2e和态 4呼吸速率呈正相关。结论 :运动所致的心肌线粒体质子跨膜势能升高引发了活性氧的生成增加 ,并进而增加质子漏 ,“活性氧循环”与Q循环和质子循环并存和共同运转可能是运动性内源活性氧生成及代谢的重要机制。

McAb共激活T细胞介导肝癌细胞前后的膜分子与TCRVβ基因的表达

Ｔ淋巴细胞活化是一个涉及多种膜表面分子和受体以及一系列相关多肽的复杂过程，为了使Ｔ细胞发挥更好的识别和杀伤癌细胞的功能，采用抗ＣＤ３、ＣＤ２８、ＣＤ８０（Ｂ７１）、ＣＤ２、ＣＤ５８ＭｃＡｂ分别刺激健康人ＰＢＬｓ后作用肝癌细胞，对作用前后ＰＢＬｓ用ＦＡＣＳ进行表型分析，结果发现：作用后ＣＤ３和ＣＤ８分子表达比作用前明显增高，而ＣＤ４分子无显著变化，同时基因家族采用ＲＴＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析ＴＣＲＶβ基因１～２０亚家族表达水平与特征，健康人ＰＢＬｓ分别加入ＩＬ２、ＰＨＡ、抗ＣＤ３和ＣＤ３＋ＣＤ２８、ＣＤ２８＋ＣＤ８０、ＣＤ２＋ＣＤ５８作用肝癌细胞（ＢＥＬ７４０２）前表达水平平均约为５％，作用ＢＥＬ７４０２后表达水平约为１３％～２５％，其特征为Ｖβ７增高，这提示在癌抗原的参与下ＭｃＡｂ共刺激的Ｔ细胞活化，ＴＣＲ接受ＡＰＣ相应抗原的刺激，具有该ＴＣＲ的淋巴细胞迅速增殖而成为针对抗原的Ｔ细胞克隆，发挥其识别和杀伤癌细胞的作用，这将为肿瘤生物治疗的研究提供分子免疫学依据。

硒对人心肌缺血/再灌注期间红细胞膜分子流动性的保护机理研究

对象：将３２名患有房间隔或室间隔缺损的病人分为服硒组及对照组各１６名。材料及方法：分别用ＥＳＲ、显微红外等技术对心肌缺血／再灌注期间的冠脉窦血中抗坏血酸自由基（Ａ°）、脂质过氧化代谢产物（ＭＤＡ）、抗氧化酶类活性（血浆超氧化物歧化酶ＳＯＤ、红细胞内谷胱甘肽过氧化物酶ＧＳＨ－Ｐｘ、红细胞膜脂质及蛋白分子相对旋转时间（τｌ、τｐ）、红细胞膜脂质及蛋白分子的构象（蛋白分子的α螺旋和β折叠）及化学结构进行了动态观察和组间比较。结果：１．与对照组相比，服硒并未表现出对再灌注时心脏自由基的产生有抑制作用，但却使再灌注５分钟后的Ａ°自由基水平较对照组大幅度降低，并使服硒组于再灌注期间保持了较低的ＭＤＡ水平和正常ＧＳＨ－Ｐｘ活性以及较好的红细胞膜分子流动性；２．对照组于再灌注后的２０分钟内，其红细胞膜蛋白分子的α螺旋先减少后渐回复和β折叠渐增加并伴有羧基（ＣＯＯＨ）和氨基（ＮＨ３）减少，而其红细胞膜脂质分子的磷氧双键（Ｐ＝Ｏ）、羰基（Ｃ＝Ｏ）和多不饱和键（Ｃ＝Ｃ）则增加，说明再灌注期间自由基造成的上述分子化学结构及构象的改变是对照组红细胞膜分子流动性明显恶化的根本原因；３．服硒组的红细胞膜蛋白分子的α螺旋结构尽管于再灌注开?

刮膜分子蒸馏传质和传热的数学模型

在对刮膜式蒸馏器蒸发表面流体流动和传质传热进行分析的基础上,研究了分子蒸馏过程,并建立了数学模型.该模型揭示了液膜温度和浓度在轴向、圆周方向和径向上的三维变化规律,反映了进料温度、浓度和流量以及刮膜器速度等参数对分子蒸馏过程的影响,适用于恒壁温以及绝热等不同操作情况.分别用龙格 库塔法和平均隐式差分法对头波常微分方程和液膜偏微分方程进行数值求解,该数值方法求解过程稳定.

运动性疲劳的线粒体膜分子机理研究V:线粒体CoQ和质子循环共同参与ROS循环——运动模型中的证据

目的 :以运动、外源性补充辅酶Q (coenzymeQ ,CoQ)以及运动合并补充CoQ作为干预手段 ,观察线粒体CoQ结合含量、质子跨膜势能与活性氧产生之间的相互关系 ,进一步探讨运动性内源活性氧生成和代谢的线粒体膜分子机制。方法 :雄性SD大鼠 36只 ,随机分为 :(1)安静对照组 (R ,n =6 ) ;(2 )运动中对照组 (Em ,n =6 ) ;(3)力竭对照组 (Ei,n =6 ) ;(4 )安静补药组 (QR ,n=6 ) ;(5 )运动中补药组 (Qm ,n =6 ) ;(6 )力竭补药组 (Qi ,n =6 )。采用三级递增负荷力竭运动模型 ,测定心肌线粒体CoQ9及CoQ10 结合含量、ROS产生速率以及线粒体膜质子泵出与电子传递比值(H+/ 2e)。结果 :(1)Em和Qm组心肌线粒体ROS产生、H+/ 2e和CoQ结合含量分别比R和QR组显著增高 ,并且 ,Qm组三项指标显著高于Em组。 (2 )相关分析表明 ,CoQ结合含量分别与H+/ 2e和ROS产生速率呈线性正相关。结论 :以外源性补充CoQ10 和 /或运动应激作为干预手段时 ,心肌线粒体CoQ含量升高导致建立高质子跨膜势能 ,并进而增加活性氧生成 ,进一步支持“活性氧循环”

低剂量辐射对脐血T淋巴细胞膜分子表达的影响

目的 探讨低剂量辐射对人脐血 Ｔ淋巴细胞膜分子表达的影响。方法 ６２ｍＧｙ γ射线照射新鲜分离的脐血淋巴细胞，照前及照后４ｈ、１２ｈ、２４ｈ采用单克隆抗体直接免疫荧光标记流式细胞术检测ＴＣＲ、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８分子的表达。结果 低剂量辐射后，脐血淋巴细胞ＣＤ３、ＴＣＲ／ＣＤ３复合物。ＣＤ４、ＣＤ８分子表达显著上调，且均在４ｈ－２４ｈ内随时间推移而逐步增幅；ＣＤ４／ＣＤ８比值无显著性变化。 结论 低剂量辐射可促进脐血Ｔ淋巴细胞的成熟、活化和信号的转导，从而可能在脐血移植中加速免疫功能重建，增强移植物抗白血病反应（ＧＶＬ），降低肿瘤的复发率。

DBP-DBS刮膜分子蒸馏过程数值模拟

利用传质和传热数学模型描述和模拟刮膜分子蒸馏过程,是刮膜分子蒸馏器设计改进与优化操作的有效途径.为此,作者在已有的刮膜分子蒸馏过程数学模型基础上,对DBP DBS混合物分子蒸馏过程进行数值模拟.模拟结果表明,即使进料温度和壁温一致,液膜温度和浓度依然呈三维变化.同时对进料温度、进料组成和进料流量对液膜温度、浓度分布、蒸馏速率、馏出液组成以及分离因数的影响进行了考察,并分析了原因.

人心肌缺血/再灌注期间红细胞膜分子流动性改变的机理研究

对开心手术病人心肌缺血／再灌注过程中冠状静脉窦血中的红细胞流变性变化和红细胞膜分子结构的改变进行了研究。结果表明，再灌注即刻心脏产生大量自由基，并持续到再灌注第２０分钟时才大幅度回落；于再灌注后的２０分钟的自由基产生时相期间，除红细胞膜蛋白分子和脂质分子的τｐ、τｌ均明显延长外，还伴有血浆ＭＤＡ水平的明显增加和ＳＯＤ活性的显著降低，及红细胞内ＧＳＨ－Ｐｘ活性升高；与此同时其红细胞膜蛋白分子的α螺旋先减少后渐回复和β折叠渐增加并伴有羧基（ＣＯＯＨ）和氨基（ＮＨ３）的减少，而其红细胞膜脂质分子的磷氧双键（Ｐ＝Ｏ）、羰基（Ｃ＝Ｏ）和多不饱和键（Ｃ＝Ｃ）则增加；说明（１）再灌注期间氧自由基分别引起了红细胞膜蛋白分子碳端和氮端的改变及膜磷脂分子亲水区和疏水区化学结构的变化，（２）蛋白分子碳、氮端的变化造成了膜蛋白分子构象的改变，（３）蛋白分子和磷脂分子化学结构及构象的改变是红细胞膜这些分子流动性明显恶化的根本原因。

纳米膜分子驱油技术研究及应用——以安塞油田王20—8井组为例

安塞油田属于典型的特低渗透油藏,已进入中后期开发阶段,含水率上升及地层堵塞等开发矛盾日益突出,该油田水驱最终采收率仅为25%,因此,迫切需要采取有效措施,增加油井产量,提高原油采收率。根据安塞油田的实际地质条件和局部区块存在的注水开发矛盾,通过开展纳米膜分子驱油机理及影响因素的研究和室内模拟实验,优选出适合该油田油层特点的纳米膜分子工艺技术并进行了矿场试验,取得了一定的认识及成果。

降膜分子蒸馏过程模型研究

通过对降膜分子蒸馏器蒸发表面上液膜流动和传质传热的分析,建立了液膜的传质和传热方程;并在单组分非线性BGK方程的基础上,建立了描述多组分稀薄气体流动的非线性BGK模型方程。通过适当的边界条件将液膜方程和气体方程耦合在一起,得到了降膜分子蒸馏过程的传质与传热数学模型。该模型揭示了液膜温度和浓度在径向和轴向上的变化规律以及气相空间气体的密度、温度和速度的变化规律,适用于恒壁温和绝热壁等不同操作情况。

刮膜分子蒸馏数学模型

针对刮膜分子蒸馏器的工作过程,对流体的传质传热进行分析,建立的数学模型包括蒸馏温度、进料速度、刮膜器转速、进料温度等影响蒸馏过程的重要因素。通过模型研究了液膜温度及浓度的变化关系以及进料温度、浓度和刮膜分子蒸馏器等参数对蒸馏过程的影响。

T细胞活化相关膜分子在非小细胞肺癌外周血中的表达及其临床意义

目的 :研究非小细胞肺癌患者外周血T淋巴细胞活化相关膜分子的表达 ,进一步探讨肺癌的免疫功能。方法 :应用流式细胞双色免疫荧光标记技术对 50例肺癌患者外周血T淋巴细胞活化相关膜分子CD3 PE和CD2 5 HLA DR CD69 FITC表达进行荧光免疫检测 ,并与正常对照组 (n =2 5)进行对比研究。结果 :50例肺癌患者外周血T淋巴细胞中CD3+ CD2 5+ 、CD3+ HLA DR+ 和CD3+ CD69+ 表达显著低于正常对照组 (P <0 .0 1 )。手术后外周血CD3+ CD2 5+ 、CD3+ HLA DR+ 和CD3+ CD69+ 表达高于手术前 (P <0 .0 1或P <0 .0 5) ,化疗前后差异无显著性 ;肺癌伴淋巴结转移CD3+ CD2 5+ 、CD3+ HLA DR+ 和CD3+ CD69+ 低于不伴淋巴结转移者 (P <0 .0 1 ) ;Ⅲ期、Ⅳ期和Ⅰ期、Ⅱ期之间CD2 5、HLA DR和CD69表达比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1 ) ;CD3+ CD2 5+ 、CD3+ HLA DR+ 和CD3+ CD69+ 表达与肺癌组织学分级及年龄有明显相关性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1 ) ;与鳞癌和腺癌及患者的性别没有相关性。结论 :应用流式细胞仪检测外周血CD3+ CD2 5+ 、CD3+ HLA DR+ 和CD3+ CD69+ 的表达水平对了解患者的免疫状态、病情判断。

T细胞免疫调节膜分子表达与抗肝癌作用的研究

目的 :研究McAb共刺激PBLs前后的表型变化及与肝癌细胞凋亡的相关性。方法 :采用流式细胞仪分析PBLs被刺激前后的表型 ,用电镜超微结构和DNA梯子电泳观察肝癌细胞凋亡。结果 :CD3、CD4分子表达高于刺激前约 10 % ,肝癌细胞出现凋亡 ,细胞核固缩、边聚、裂解。同时也出现典型的DNA梯子。而肝癌患者用共刺激PBLs后 ,CD3和CD8增高 (P <0 .0 5 )。结论 :共刺激使共刺激信号分子增加 ,抗原呈递能力增强 ,也使细胞因子分泌增加 ,这些因素促使肝癌细胞凋亡 ,而肿瘤患者T细胞增加时向CD8+ 分化 。

新生儿感染时外周血中性粒细胞功能异常膜分子机制研究

目的 探讨新生儿感染时外周血中性粒细胞 (PMN)功能异常的膜分子机制。方法 应用DPH荧光探针标记PMN膜 ,荧光偏振法测定 5 1例感染新生儿 (其中败血症 2 8例、肺炎 2 3例 )、19例健康新生儿PMN膜流动性。结果 感染新生儿PMN流动性较对照组比较显著降低 (P <0 0 1) ,尤以败血症更为明显 ;相关分析结果表明 ,PMN膜微粘度 (η)与吞噬、杀菌率呈负相关 ,相关系数 (γ)分别为 - 0 30 1(P <0 0 5 )、- 0 2 5 6 (P <0 0 5 )。结论 PMN膜流动性降低是造成感染新生儿PMN吞噬、杀菌功能降低的重要原因。

WHO方法研究云南省少数民族红细胞G6PD变异型及膜分子结构氧化损伤的探讨

红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏是一种在蚕豆、药物、感染等多种因素作用下引起溶血的常见遗传性酶缺陷病,估计,目前世界罹患者约4亿人,呈世界性分布,地中海沿岸国家、非洲、美洲、东南亚及中国南部发病较多。我国主要集中在西南及中南地区。

Fenton体系、H_2O_2损伤红细胞膜分子流变性的比较研究

Ｆｅｎｔｏｎ反应体系是由Ｈ２Ｏ２和二价阳离子配制成的反应体系。为区分Ｆｅｎｔｏｎ反应体系和单纯Ｈ２Ｏ２作用分别对红细胞膜脂质及蛋白分子流动性影响的不同，本文通过微吸管法、电子自旋共振波谱仪（ＥＳＲ）、激光拉曼波谱仪等分别对体外Ｆｅｎｔｏｎ反应体系和单纯Ｈ２Ｏ２作用３０分钟后，及恢复３小时后的红细胞膜剪切弹性模量μ、细胞表面指数Ｓｉ、膜整体结构、膜蛋白分子τｐ及脂质分子τｌ相对旋转时间进行了比较分析。结果发现，①Ｆｅｎｔｏｎ反应体系导致了红细胞膜的μ值明显增加，但Ｓｉ无明显改变；②Ｆｅｎｔｏｎ反应体系使红细胞膜中的β胡罗卜素构象的卷曲形式增加，提示膜整体结构改变；③Ｆｅｎｔｏｎ反应体系致使红细胞膜蛋白分子τｐ及脂质分子τｌ明显延长；④恢复３小时后除红细胞膜脂分子τｌ值外，上述改变的可逆性较差；⑤Ｈ２Ｏ２作用只引起红细胞膜τｐ值增加，但并未影响膜脂质分子流动性和红细胞变形性；

Fenton体系、H_2O_2损伤红细胞膜分子流动性的机理的比较研究

在系统中Ｈ２Ｏ２与所含有的亚铁离子通过Ｆｅｎｔｏｎ反应主要生成·ＯＨ自由基损伤细胞，但Ｈ２Ｏ２也可损伤细胞膜或细胞。为区分Ｆｅｎｔｏｎ自由基体系与Ｈ２Ｏ２分别对红细胞膜脂质及蛋白分子相对旋转时间影响机理的不同，分别对体外不同浓度Ｆｅｎｔｏｎ体系和不同浓度Ｈ２Ｏ２作用３０分钟后，红细胞膜剪切弹性模量μ、细胞表面指数Ｓｉ、膜蛋白分子τｐ及脂质分子τｌ相对旋转时间和它们的化学结构进行了比较分析。结果发现，（１）Ｆｅｎｔｏｎ体系导致了红细胞膜的μ值明显增加，但Ｓｉ无明显改变，Ｈ２Ｏ２作用未引起μ值和Ｓｉ的明显改变；（２）Ｆｅｎｔｏｎ体系作用后致红细胞膜蛋白分子τｐ及脂质分子τｌ明显延长，１％Ｈ２Ｏ２作用引起红细胞膜τｐ值延长，但并未影响膜的τｌ；（３）Ｆｅｎｔｏｎ体系作用造成红细胞膜蛋白分子ＳＨ氧化成Ｓ－Ｓ键，ＮＨ１、Ｒ－ＣＯＨ和ＣＯ改变，这是其α螺旋和β折叠等二级结构改变的根本原因，而１％Ｈ２Ｏ２主要是通过使Ｓ电负性改变而影响膜蛋白的二级结构；（４）Ｆｅｎｔｏｎ体系作用造成红细胞膜脂分子亲水区Ｐ＝Ｏ、亲－疏水界面区Ｃ＝Ｏ和疏水区Ｃ＝Ｃ同时减少，而Ｈ２Ｏ２只引起红细胞膜脂分子疏水区Ｃ＝Ｃ的减少；以上Ｆｅｎｔｏｎ体系?

癌基因表达与膜分子侧向运动和cAMP转运的相关性(环核苷酸对癌细胞作用)

Ehrlich癌细胞在cAMP诱导下,于接种后5-7天癌基因c-myc、c-fos、c-H-ras、c-sis的表达强烈被抑制.与此同时癌细胞膜对cAMP转运增强.膜蛋白分子扩散系数[D]值下降,均以接种后7天最为显著P<0.01.可动分子百分比提高.这反映出癌细胞的分化变异.但至接种后9天,上述癌基因重新表达,膜蛋白分子扩散系数上升,cAMP转运下降,这可能是导致接种后11天癌细胞增殖急剧上升,细胞内cAMP水平下降的原因.说明Ehrlich细胞在去恶化及恶化过程中,癌基因表达变异.膜蛋白分子运动和癌细胞多种表型之间密切相关.