不同肝素溶媒在血仿膜吸附法无肝素透析中应用的临床观察

目的探讨不同肝素溶媒行血仿膜吸附法无肝素透析的效果及可行性。方法对29例合并出血或有出血倾向的维持性血透患者,采用同一患者自身前后交叉对照的方法观察生理盐水(NS)和5%葡萄糖(GS)为肝素溶媒的透析效果。结果29例无一例出血加重,NS与5%GS两种肝素溶媒其透析器的BUN和Scr清除率无明显差别(P>0.05),但5%GS为肝素溶媒时透析器凝血情况明显低于NS(P<0.05)。结论在血仿膜吸附法无肝素透析中5%GS作为肝素溶媒的吸附效果优于NS。

膜吸附法结合可视化环介导等温扩增技术检测柑橘黄龙病菌

【背景】柑橘黄龙病(Huanglongbing,HLB)是由候选韧皮部杆菌亚洲种(‘Candidatus Liberibacter asiaticus’,CLas)侵染引起的一种柑橘病害。对于该病害的防治主要采取综合措施,包括实施检疫、种植无病苗木、及时挖除病树和集中大面积联防联控柑橘木虱等。前3种方法都需要依靠准确的柑橘黄龙病诊断技术。【目的】利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP),结合膜吸附法DNA快速提取和Gelgreen荧光染料可视化,建立黄龙病田间核酸快速检测方法。【方法】以黄龙病菌β-操纵子与原噬菌体DNA聚合酶基因为模板设计LAMP特异性引物,包括外引物F3/B3、内引物FIP/BIP、环引物LoopF/LoopB和茎引物StemF/StemB。通过对环引物和茎引物设定不同的用量组合,对LAMP引物体系进行优化,确定合适的引物浓度。用优化后的LAMP引物体系对188份田间柑橘叶片进行检测,并构建受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析实时荧光LAMP(qLAMP)在CLas检测上的准确性。对qLAMP预混反应液进行两步的常温干燥,分别设定不同的存放条件,评估LAMP常温干燥试剂的稳定性。用本研究建立的CLas可视化LAMP快速检测方法,对田间71个柑橘叶片样品和35个柑橘果实样品进行检测,与实时荧光定量PCR(qPCR)比较两者的符合率。【结果】在LAMP体系中加入环引物、茎引物或增加其浓度都能促进反应速率的提升,并且同时加入终浓度均为1.6μmol·L-1的环引物和茎引物能进一步提高LAMP反应速率。LAMP预混液通过两步法干燥在不同温度存放1—4周均能保持反应活性基本不变,表明制备的两步法干燥LAMP试剂检测性能较好,在低温和常温环境下的稳定性尚可,仅35℃高温存放会略微增加LAMP试剂的反应时间。使用孔径0.1μm尼龙膜代替纤维素滤纸作为核酸吸附材料能提升CLas快速诊断技术的灵敏度。结合DNA快速提取和可视化LAMP建立的CLas快速核酸诊断方法最低能检测到浓度为102 copies/μL的重组质粒样品,总体准确率高。经配对卡方检验,该方法的诊断结果与qPCR无显著差异。可视化LAMP快速检测相较常规检测有着更低的成本和耗时,而且可视化LAMP快速检测无需离心机和PCR仪等昂贵的仪器,仅需一台65℃恒温设备即可。【结论】建立的CLas快速核酸检测方法成本低,30 min即可观察到检测结果,操作简便,准确性高,可替代qPCR在田间进行黄龙病的快速鉴定。

GGTⅡ特异免疫膜吸附法对肝细胞肝癌诊断价值的探讨

目的 建立 1种新的γ 谷氨酰转肽酶同功酶Ⅱ (GGTⅡ )特异免疫膜吸附法 ,并探讨其对肝细胞肝癌 (HCC)的临床诊断价值。方法 从患者血清中提取、分离、纯化GGTⅡ ,并制备相应的特异性抗体 ,将纯化的特异性抗体、神经氨酸酶 (NMD )和植物血凝素 (PHA )吸附并固定到硝酸纤维膜上 ,分别对HCC及其相关疾病患者血清中GGTⅡ进行定性检测。结果 GGTⅡ特异免疫膜吸附法对HCC检测敏感性达 85 .2 6% ( 2 66/3 12 ) ,特异性为 95 .81% ( 5 49/5 73 ) ;对于肿瘤直径小于 5cm的HCC检测阳性率可达 5 9.0 9% ( 13 /2 2 ) ,对于AFP阴性或低浓度的HCC患者检测阳性率达 67.3 9% ( 3 1/4 6)。结论 GGTⅡ特异免疫膜吸附法简便、快速、微量、灵敏、价格低廉 ,可用于HCC的辅助诊断、鉴别诊断和早期发现 。

吸附—膜耦合法从高镁锂比盐湖卤水中提锂

中国的锂资源主要赋存于高镁锂比盐湖卤水中,提锂难度较高,单一分离手段难以高效提锂,多种盐湖提锂技术的耦合是盐湖提锂的未来发展趋势。采用吸附—膜耦合法对盐湖卤水进行处理,在优化条件下实现了高选择性锂吸附,动态脱附后卤水镁锂比从105.2降低至1.49。考察了不同条件对纳滤膜分离纯化锂的影响。纳滤膜在稀释倍数1.0、温度20℃、操作压力0.4 MPa、pH 4.66、产水原料液比0.54的条件下,锂截留率为2.63%、分离因子为27.3、渗透通量为7.125 L/(m^(2)·h),最终产水镁锂比从最初的105.2降低至0.05,实现了对高镁锂比盐湖卤水中锂资源的绿色高效提取。

血仿膜肝素吸附法在高危出血液透析析患者中的应用

血液透析是一个体外循环过程，血液与管路、透析膜的接触，可触发机体的凝血系统，治疗中必须使用抗凝剂以防止血栓的形成。临床上经常遇到各种原因导致的急、慢性肾功能损害并出血患者，普通肝素抗凝治疗显然会加重患者的出血情况，无肝素透析是基层医院（不包括使用无肝素透析器）应用得最多的一种方法，但其操作步骤多，护理工作量大，治疗中频繁的生理盐水冲洗对患者血流动力学影响大近几年来低分子肝素以其抗凝效果确切、对血小板功能影响小而广泛用于临床，但仍不能完全避免对系统凝血功能的影响。江西省九江市中医院血液净化中心自2002年以来运用血仿膜肝素吸附法（HFHD）治疗高危出血的透析患者，现将其治疗方法及疗效作一次回顾性小结，结果如下。

两种浓缩方法在水样脊髓灰质病毒检测中的应用

水样中病毒颗粒的有效浓缩和富集是病毒检测的首要任务.分别应用氯化钠-氯化铝沉淀法和滤膜吸附法,对模拟水样和实际水样的脊髓灰质病毒进行浓缩分离.经过核酸提取后,通过RT-nest-PCR分子生物学技术扩增特异性核酸片段检测病毒,结果发现,两种浓缩方法对水样中的脊髓灰质病毒都能有效地回收富集及检测.通过计算,分别检测到污水处理厂进水口中病毒存在所用水样的有效体积,氯化钠-氯化铝沉淀法为3.5 mL,滤膜吸附法为2.1 mL.应用氯化钠-氯化铝沉淀法对另外3个污水处理厂水样的病毒检测发现,进水口和出水口均有脊髓灰质病毒的存在.另外,制备了包含脊髓灰质病毒特异性核酸片段的阳性质粒标准品,为开展水体环境中有害病毒的检测工作奠定研究基础.

急慢性肾功能衰竭伴出血患者两种无肝素透析方法的疗效比较

血液透析是一个体外循环过程，血液与透析管路及透析膜的接触，易触发并激活机体的凝血系统，导致凝血的发生，因此治疗过程中必须使用抗凝剂预防血栓的形成。肝素作为一种抗凝效果较好的抗凝剂已广泛应用于透析治疗中，但在对各种原因导致的急慢性肾功能衰竭合并出血患者行透析治疗时，普通肝素抗凝治疗往往会加重出血，为此临床上尝试了许多减少出血的透析方法，如无肝素透析、低分子肝素透析、体外肝素化透折以及血仿膜吸附法无肝素透析等。我院对急慢性肾功能衰竭合并出血患者采用血仿膜吸附法无肝素透析和无肝素透析两种方法进行治疗，旨在比较两种方法的疗效，现将结果报道如下。

XW630促进去势大鼠骨组织中雌激素受体表达的研究

我们首次采用现代放免分析技术和免疫组织化学方法 ,对去势大鼠骨组织中 ER的表达进行了定量和定位研究。结果显示 :XW6 30具有促进去势大鼠骨组织中 ER含量及其免疫表达的作用 ,其作用优于雌酚酮 ;OVX大鼠骨组织中 ER表达随时间推移而降低 ,提示 ER的表达依赖于雌激素的存在。

肝癌特异γ-谷氨酰转肽酶同功酶Ⅱ活性检测及其临床价值

目的 探讨患者血清肝癌特异γ 谷氨酰转肽酶同功酶Ⅱ (GGTⅡ )活性与肝癌生物学行为的相关性及其临床价值。方法 用硝酸纤维膜特异免疫吸附法 (NSIA)对患者血清中GGTⅡ进行定性检测。结果 原发性肝癌(PHC)检测敏感性为 83 .77% ,特异性为 98.0 4% ,转移性肝癌 (MLT)诊断阳性率为 7.5 5 % ,对AFP阴性的PHC患者检测阳性率为 65 .91%。结论 NSIA检测GGTⅡ简便、快速、微量、灵敏、经济 ,可用于PHC的辅助诊断、鉴别诊断和早期发现 。

应用GAR-HRP进行甘薯病毒NCM-ELISA检测试验

分别采用辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体 (GAR -HRP)和碱性磷酸酯酶标记的羊抗兔抗体(GAR -AP) ,对甘薯羽状斑驳病毒 (SPFMV)、甘薯潜隐病毒 (SPLV)、甘薯轻斑驳病毒 (SPMMV)及甘薯褪绿病毒(SPCFV)进行NCM -ELISA检测 ,结果表明 ,采用GAR -HRP进行NCM -ELISA检测对于SPFMV、SPLV、SPM MV、SPCFV同样有效 ,且特异性高 ,重现性好 ,在某些方面优于GAR -AP。对于国内危害甘薯的SPFMV、SPLV等主要病毒 ,采用GAR -HRP进行ELISA检测更加经济有效 。

局部枸橼酸抗凝血液透析与改良无肝素透析治疗尿毒症高危出血的临床观察

目前，为了选择一种更安全有效的血液透析方法治疗高危出血或活动性出血的尿毒症患者，我们对局部枸橼酸抗凝（RCA）血液透析和血仿膜肝素吸附法无肝素透析（HCHD）进行了临床应用并将2种方法进行了对比分析，现报道如下。

铁路装车尾气净化回收技术的综合运用

针对某企业铁路装车的尾气产生集中,尾气成分(芳烃类、苯乙烯、汽油等)复杂的特点,分别阐述了四种尾气净化回收工艺的技术原理,并比较四种净化回收工艺的优缺点,认为综合运用二、三种油气回收工艺,可以达到国家规定的最高排放标准。经过综合比较,决定选用吸收法+膜分离法技术。

3种提取全血基因组DNA的方法比较

通过比较提取全血基因组DNA的方法,从而获得一种易于在实验室推广的高效快速的DNA提取方法。本研究收集兰州大学第二医院神经内科90例住院患者抗凝血样,随机分为3组,分别使用硅胶膜吸附法、溶液盐析法及酚氯仿法提取全血基因组DNA。比较分析3种方法实验时间、提取DNA琼脂糖凝胶电泳结果和提取DNA的浓度及纯度,结果表明:3组实验时间比较结果显示,酚氯仿法耗时最长,溶液盐析法耗时最短;3组所提取DNA琼脂糖凝胶电泳结果显示,溶液盐析法DNA条带清晰、光密度高。3组提取DNA的浓度及吸光度比值比较显示,浓度由高到低依次为溶液盐析法、酚氯仿法、硅胶膜吸附法,差异具有统计学意义(浓度分别为43.99±18.89 ng/uL,30.29±16.31 ng/uL,22.62±3.65 ng/uL,p均<0.05),3组吸光度比值无统计学差异。因此,我们认为相比于酚氯仿法与硅胶膜吸附法,溶液盐析法是一种高效、便捷、快速的DNA提取方法。

Characterization of CulnS2 Thin Films with Different Cu/In Ratio

Thin films of CuInS2 were grown on glass reaction method with different [Cu]/[In] substrate by successive ionic layer adsorption and ratios and annealed at 400℃ for 30 rain. The crystal structure and grain sizes of the thin films were characterized by X-ray diffraction method. Atomic force microscopy was used to determine surface morphology of the films. Optical and electrical properties of these films were investigated as a function of [Cu]/[In] ratios. The electrical resistivity of CuInS~ of thin films was determined using a direct current- two probe method in the temperature range of 300-470 K. It is observed that, the electrical resistivity values show a big decreasing with increasing [Cu]/[In] ratio. Hence, the [Cu]/[In] ratio in the solution can drastically affect the structural, electrical, and optical properties of thin films of CuInS2.

CHROMATOGRAPHIC SEPERATION AND PURIFICATION OF HUMAN CHORIONIC GONADOTROPIN

Seperation and purifitation of human chorionic gonadotropion (HCG) in theurine sample of early pregnant women by D3520 resin adsorption chromatographyis repaied. The crude product obtained by DEAE - Cellulose 23 and DEAE Sephadex A50 column chromatography showed a high activity of HCG. Furtherpurifikation of the sample by gel filtration chromatography on a Sephadex G75 column gives a final preparation of 6000～ 6500 IU/mg. The preparation meets therequiTements of the pyrogn test in Chinese Law of Pharmacopoeia.

环境污水脊髓灰质炎病毒浓缩方法的比较

目的比较两相分离法和阴离子滤膜吸附法在浓缩处理外环境污水脊髓灰质炎病毒时的回收效率,选择更高效、便捷的方法以提高外环境污水脊灰病毒监测的敏感性。方法在灭菌的外环境污水中人工添加I型脊灰病毒,使之总病毒量分别达到10~4、10~3、10~2半数组织培养感染剂量(TCID_(50)),再分别用两相分离法和阴离子滤膜吸附法对污水中的脊灰病毒进行浓缩,用实时荧光定量PCR方法和细胞培养方法测定回收病毒的浓度。结果使用实时荧光定量PCR方法测定病毒添加量为10~4TCID_(50)时两相分离法的病毒回收率高于阴离子滤膜吸附法;细胞培养方法测定结果为添加10~4TCID_(50)病毒量时两相分离法和阴离子滤膜吸附法的病毒回收率分别为44.78%和41.06%。结论在对存在脊灰病毒的外环境监测中,两相分离法的浓缩效果整体优于阴离子滤膜吸附法,适合长期应用。