环境水体中肠道病毒浓缩方法的比较

向水样中接种已知量的脊髓灰质炎病毒,然后利用微孔滤膜吸附—洗脱法、滑石粉—硅藻土吸附层吸附—洗脱法、化学絮凝沉淀法和滑石粉—硅藻土絮凝沉淀法等4种不同的浓缩方法对水样中的病毒进行浓缩,并采用实时定量RT-PCR技术对各方法浓缩后样品中的病毒进行扩增和检测。综合考虑病毒回收率和浓缩方法的可靠性与简便性等因素,确定微孔滤膜吸附—洗脱法为最优的浓缩方案。此外,还比较了三种洗脱液和两种二次浓缩方法的效果,并对各步骤的回收率进行了分析。

水中肠道病毒三种富集方法的效果比较

目的探讨一种效果较好的水中病毒富集方法,为水中病毒的检测提供依据。方法向高压灭菌处理的水样中接种已知滴度的脊髓灰质炎Ⅰ型病毒,采用载阳电荷滤料法、膜吸附-洗脱法Ⅰ、膜吸附-洗脱法Ⅱ对水样分别进行病毒富集后,利用荧光定量RT-PCR技术检测并计算回收率。结果当水中病毒载量为7×102～7×105pfu/L时,载阳电荷滤料法的病毒回收率为92%～94%;2种膜吸附-洗脱法的回收率为72%～77%。结论载阳电荷滤料法富集水中病毒的效果好于2种膜吸附-洗脱法。

多管发酵-菌落PCR法定量检测水中可培养沙门氏菌

采用膜吸附-洗脱法浓缩水样,通过多管发酵法筛选出以可培养沙门氏菌为主的活体细菌.根据沙门氏菌invA基因的保守性,利用沙门氏菌属通用引物进行菌落PCR鉴定,进而确定沙门氏菌阳性平板数量.运用最大可能数法分析数据,计算出水样中可培养沙门氏菌的含量.该方法对沙门氏菌具有良好的特异性和涵盖性.通过对人工污染水样和城市污水厂二级处理出水的检测,证明了多管发酵-菌落PCR方法的检测结果较为准确,可操作性强,能够更真实地反映样品中沙门氏菌的活性.