H型高血压患者心肌纤维化与血管紧张素Ⅱ、膜型基质金属蛋白酶1水平变化的相关性

目的探讨H型高血压患者心肌纤维化(MF)与血清血管紧张素(Ang)Ⅱ、膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)水平变化的相关性。方法共纳入研究者187例,根据血压及同型半胱氨酸(Hcy)水平将患者分为H型高血压组72例、高血压对照组55例、正常对照组60例。收集一般临床资料和血生化检查结果,采用磁共振成像技术进行MF检测及图像分析测量T1值;采用酶联免疫法测定血清Hcy,MT1-MMP水平;采用放射免疫法检测血清AngⅡ水平,并且分析比较各组患者的T1值及T1值与血清Hcy、AngⅡ、MT1-MMP水平的相关性。结果 H型高血压组、高血压对照组、正常对照组T1值、血清AngⅡ、MT1-MMP水平比较差异有统计学意义(P<0. 05)。直线相关分析T1值与血清Hcy、AngⅡ、MT1-MMP水平均呈负相关(P<0. 05)。血清Hcy与AngⅡ、MT1-MMP水平呈正相关(P<0. 05)。结论高血压、Hcy是MF的危险因素。高血压、Hcy可能通过AngⅡ、MT1-MMP诱导H型高血压患者MF的发生。

膜型基质金属蛋白酶1及其诱导因子在结直肠癌中表达与预后的相关性

目的探讨基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)及膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)在结直肠癌组织中的表达与肿瘤的侵袭、转移及预后的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测48例结直肠癌组织及其癌旁正常组织中EMMPRIN及MT1-MMP mRNA的表达,并用免疫组化SABC法检测上述组织中EMMPRIN及MT1-MMP蛋白的表达。结果48例肿瘤组织中35例(72.9%)有EMMPRIN mRNA的表达,30例(62.5%)有MT1-MMP mRNA的表达。免疫组化染色分别有31例(64.6%)EMMPRIN和25例(52.1%)MT1-MMP呈阳性反应,但在癌旁正常组织中均未检测到EMMPRIN和MT1-MMP mRNA及蛋白的表达。EMMPRIN与MT1-MMP mRNA的相对表达强度与患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度以及肿瘤类型和分化程度无关(均P>0.05),但与Duke’s分期、区域淋巴结转移和远处转移情况呈显著相关(均P<0.01),且EMMPRIN和MT1-MMP的mRNA表达呈显著正相关(r=0.728,P<0.01)。EMMPRIN mRNA阳性表达的患者平均生存期为(37.8±14.6)月,阴性患者为(54.7±11.3)月,5年生存率前者为41.2%,显著低于阴性患者的70.4%(P<0.01),EMMPRIN和MT1-MMP mRNA的阳性表达同患者的总生存率显著相关(P<0.01,P<0.05)。结论MT1-MMP及其诱导因子EMMPRIN与结直肠癌的侵袭与转移密切相关,有可能作为判断结直肠癌侵袭性的有效指标,高表达EMMPRIN和MT1-MMP可能预示着结直肠癌患者不良的预后。

胶质瘤中膜型基质金属蛋白酶1mRNA水平表达

目的探讨胶质瘤恶性程度和膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)mRNA表达水平的关系,为胶质瘤的诊断、治疗及预后等提供参考。方法分别采用实时荧光定量逆转录PCR法(RT-PCR)和半定量RT-PCR法检测34例胶质瘤和7例正常脑组织中MT1-MMPmRNA的表达水平。结果实时荧光定量RT-PCR法检测正常脑组织和II级(低级别)、III级、IV级、高级别(III、IV级)胶质瘤的△△Ct值分别为0.834±0.517,4.063±2.309,6.376±4.023,7.653±4.196和7.072±4.072。半定量RT-PCR法测定结果显示,正常脑组织和II级、III级、IV级、高级别胶质瘤的相对灰度值分别为0.799±0.156,1.142±0.158,1.538±0.482,1.652±0.376和1.600±0.421。正常脑组织和II、III、IV级胶质瘤之间,II、IV级胶质瘤之间,正常脑组织和低、高级别胶质瘤之间,低、高级别胶质瘤之间MT1-MMP基因mRNA表达水平均有显著性差异。结论胶质瘤中存在MT1-MMP基因mRNA高水平的表达,随着肿瘤恶性程度的增加,MT1-MMP基因mRNA的表达水平增高。

膜型基质金属蛋白酶1在胃癌及癌周组织中的表达及临床意义

目的探讨膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)在胃癌及其周围组织中的表达和临床意义。方法收集胃癌病例110例,利用免疫组化染色、RT-PCR分析MT1-MMP在手术切除肿瘤组织及瘤旁组织中表达的差异,以及与患者临床特点及预后的关系。结果 110例肿瘤标本根据染色结果评定,高表达组(>4分)74例,低表达组(≤4分)36例,而瘤旁组织仅有5例呈低表达,其余均未见明显表达。RT-PCR显示Ⅰ、Ⅱ期胃癌与Ⅲ、Ⅳ期胃癌之间表达也具有统计学差异(P<0.05),不同组织类型的胃癌之间表达无明显差异。患者肿瘤早期转移、2年复发率及生存率与MT1-MMP表达具有一定的相关性。结论 MT1-MMP在胃癌组织中表达明显高于癌旁肿瘤组织,与胃癌的病理类型无关,而与胃癌的分期有关。MT1-MMP高表达的胃癌患者,其预后往往差于低表达患者。MT1-MMP有可能作为胃癌治疗的一个新的靶向基因位点。

膜型基质金属蛋白酶1在胶质瘤及瘤旁组织中的表达及临床意义

目的探讨膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)在胶质瘤及瘤旁组织中的表达及临床意义。方法选择54例胶质瘤标本及瘤旁相对正常脑组织,应用Western印迹实验及RT-PCR检测MT1-MMP的表达情况,并与临床相关特征进行关联分析。结果 Western印迹结果显示MT1-MMP在不同级别胶质瘤中表达具有差异性,胶质瘤级别越高其条带灰度值越高,胶质瘤级别越低表达越弱。RT-PCR结果显示MT1-MMP m RNA的表达呈现出与Western印迹结果一致的趋势,正常脑组织、Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤与Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤之间表达具有统计学差异(P<0.05),而Ⅲ级与Ⅳ级胶质瘤之间无明显差异性,并且MT1-MMP表达与患者生存期呈明显的负相关性。结论 MT1-MMP的表达与胶质瘤级别相关,有可能是一个潜在的胶质瘤基因靶向治疗的位点。

应力对成骨样细胞MG63中膜型基质金属蛋白酶1表达的影响

目的:研究压应力对成骨样细胞MG63中膜型基质金属蛋白酶1(Membrane type-1matrix metalloproteinase,MT1-MMP)表达的影响。方法:应用四点弯曲力学加载仪对成骨样细胞MG63施加不同时间及不同力值的压应力,运用Western Blot及Reverse Transcription PCR(RT-PCR)检测MT1-MMP蛋白及mRNA表达的变化。结果:当应变值为2000μstrain时,力学刺激对成骨样细胞MG63中MT1-MMP表达作用最强。应变值恒定(2000μstrain)时力学刺激呈时间依赖性的上调MT1-MMP的表达。结论:不同时间、不同力值的压应力可以影响成骨样细胞MG63中MT1-MMP的表达,进而影响骨改建。

口腔鳞状细胞癌患者中膜型基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶2的表达水平及临床意义

目的探讨口腔鳞状细胞癌患者中膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)、基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达水平及临床意义。方法选择83例接受根治性手术治疗的口腔鳞状细胞癌患者,采用免疫组织化学染色方法检测口腔鳞状细胞癌组织中MT1-MMP、MMP2的表达情况,分析其与患者临床特征及生存情况的关系,采用Spearman相关分析法分析MT 1-MMP、MMP2表达的相关性。结果TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、中-低分化、有淋巴结转移、复发的口腔鳞状细胞癌患者口腔鳞状细胞癌组织中MT1-MMP和MMP2的强阳性表达率分别高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、高分化、无淋巴结转移、未复发的口腔鳞状细胞癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤部位、浸润情况口腔鳞状细胞癌患者口腔鳞状细胞癌组织中MT1-MMP和MMP2的强阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。口腔鳞状细胞癌患者中MT1-MMP与MMP2的表达呈正相关(P<0.05)。MT1-MMP强阳性表达患者的中位生存时间为24个月,明显短于MT1-MMP弱阳性/阴性表达患者的32个月,差异有统计学意义(P<0.01)。MMP2强阳性表达患者的中位生存时间为24个月,明显短于MMP2弱阳性/阴性表达患者的33个月,差异有统计学意义(P<0.01)。结论口腔鳞状细胞癌患者中MT1-MMP、MMP2的表达情况与TNM分期、分化程度、淋巴结转移、复发及预后有关,强阳性表达患者的预后更差。

活血通窍汤辅助治疗对动脉瘤性蛛网膜下腔出血并发脑血管痉挛临床疗效及对血清基质金属蛋白酶-9同型半胱氨酸和可溶性细胞间黏附分子-1水平的影响

目的分析活血通窍汤辅助治疗对动脉瘤性蛛网膜下腔出血(SAH)并发脑血管痉挛(CVS)挛患者临床疗效及对血清基质金属蛋白酶(MMP)-9、同型半胱氨酸(Hcy)和人可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)的影响。方法选择浙江省义乌市中心医院2021年4月至2022年4月收治的SAH并发CVS患者78例,运用随机数字表法分为对照组(39例)与治疗组(39例)。对照组给予盐酸法舒地尔注射液治疗,治疗组在对照组基础上服用活血通络汤。2组均治疗2周。比较2组治疗疗效,治疗前后中医证候积分、血流动力学、神经功能和认知功能、MMP-9、Hcy和sICAM-1水平变化。结果治疗组总有效率高于对照组(P<0.05)。2组治疗后患者头痛、恶心呕吐和颈项抵抗积分较治疗前降低(P<0.05),治疗组低于对照组(P<0.05)。2组治疗后颈内动脉颅外段平均注速(VICA-Vm)和大脑中动脉平均注速(MCA-Vm)较治疗前降低(P<0.05),治疗组治疗后低于对照组(P<0.05)。2组治疗后mRS评分较治疗前降低,MoCA评分较治疗前升高(P<0.05);治疗组治疗后改良Rankin量表(mRS)评分低于对照组,蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分高于对照组(P<0.05)。2组治疗后MMP-9、Hcy和sICAM-1水平较治疗前降低(P<0.05);治疗组治疗后MMP-9、Hcy和sICAM-1水平低于对照组(P<0.05)。结论活血通窍汤辅助治疗SAH并发CVS患者疗效良好,患者血流动力学改善,神经功能改善,可降低MMP-9、Hcy和sICAM-1水平。

膜型基质金属蛋白酶-1表达水平与胶质母细胞瘤患者放射治疗抵抗的相关性

目的探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达水平与胶质母细胞瘤(GBM)患者放射治疗抵抗的相关性。方法选取2021年1月至2022年1月新疆维吾尔自治区人民医院收治的112例GBM患者为研究对象,根据放射治疗反应性不同将研究对象分为放射治疗敏感组(放射治疗敏感,75例)和放射治疗抵抗组(放射治疗抵抗,37例)。比较分析两组患者的临床特征。分析GBM患者放射治疗抵抗的独立影响因素。结果两组患者的年龄、性别、体重指数、吸烟史比例、发病部位、Karnofsky功能状态评分比较差异均无统计学意义(P>0.05),放射治疗抵抗组患者的肿瘤最大径、非全部切除比例、MT1-MMP表达水平均大于或高于放射治疗敏感组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,肿瘤最大径、MT1-MMP表达水平、非全部切除均为GBM放射治疗抵抗的独立危险因素(P<0.05)。结论MT1-MMP表达水平升高为GBM患者放射治疗抵抗的独立危险因素,可为GBM的诊断与治疗提供新思路。

广西壮族男性膜型基质金属蛋白酶1基因多态性与骨质疏松症的相关性

目的探索膜型基质金属蛋白酶1（membrane-type 1 matrixmetalloproteinase，MT1-MMP，MMP14）基因的多态性与广西百色地区壮族男性骨质疏松症的相关性。方法用超声骨密度仪测量百色地区301名壮族男性左跟骨超声振幅衰减（broadbandultrasonicattenuation，BUA），并根据中国入骨质疏松症建议诊断标准分为正常对照、骨量减少以及骨质疏松组。应用MultiplexSNaPshotSNP分型技术确定MMPl4基因5个单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP）位点（rs1003349、rs3751488、rs2269213、rs2236303和rs743257）的基因型。结果全部位点的多态性分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P〉0．05）。多元线性逐步回归分析提示，上述多态性与BUA变异无相关性（P〉0．05）。rs2236303位点CC基因型（VS．TT，OR=10．604，95％CI：1．899～59．228，P=0．007）、CT基因型（VS．TT，OR=5．602，95％CI：1．351～23．24，P=0．018）以及rs1003349的GT基因型（VS．GG，OR=4．884，95％CI：1．087～21．949，P=0．039）在骨质疏松组的频率显著偏高。连锁不平衡分析显示，rs1003349和rs2236303位点存在一般连锁（D’=0．839，r2=0．458，P〈0．01），两个位点的单倍型pT在骨量正常组与骨质疏松组中的频率差异有统计学意义（P〈0．05），单倍型为GT的个体发生骨质疏松症的风险显著高于C-C或T—C的个体（P〈0．05）。结论MMP14基因的rs1003349和rs2236303多态性位点可能与广西壮族男性骨质疏松症的易感性相关，rs1003349和rs2236303位点的单倍型G-C和T-C可能增加骨质疏松症的发病风险。

老年经皮冠状动脉介入治疗术后支架内再狭窄患者胱抑素C、基质金属蛋白酶抑制剂-1、分泌型卷曲相关蛋白5表达及临床意义

目的探讨老年经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后支架内再狭窄(ISR)患者胱抑素C(CysC)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP-5)表达及对靶血管病变的预测价值。方法选取2020年5月至2022年5月保定市第一中心医院PCI术后1年内发生ISR的65例老年冠心病患者作为观察组,选取同期65例PCI术后1年内未发生ISR的老年冠心病患者作为对照组,比较两组一般资料、术后血清CysC、TIMP-1、SFRP-5水平,分析血清CysC、TIMP-1、SFRP-5水平与ISR发生的相关性,并比较观察组不同Mehran分型患者血清CysC、TIMP-1、SFRP-5水平,分析各指标水平与Mehran分型的相关性,分析血清CysC、TIMP-1、SFRP-5水平预测靶血管发生ISR的价值。结果观察组血清CysC水平高于对照组(t=6.949,P<0.05),TIMP-1、SFRP-5水平低于对照组(t=7.301、8.765,P<0.05);血清CysC水平与ISR的发生呈正相关(r=0.587,P<0.05),TIMP-1、SFRP-5水平与ISR的发生呈负相关(r=-0.609、-0.640,P<0.05)。观察组四种Mehran分型的患者CysC、TIMP-1、SFRP-5水平差异有统计学意义(F=10.759、8.326、19.764,P<0.05)。随着Mehran分型Ⅰ型到Ⅳ型的变化,CysC水平逐渐升高,TIMP-1、SFRP-5水平逐渐下降,差异有统计学意义(P<0.05)。血清CysC水平与ISR患者Mehran分型呈正相关关系(r=0.722,P<0.05),TIMP-1、SFRP-5水平与Mehran分型呈负相关关系(r=-0.799、-0.826,P<0.05)。血清CysC、TIMP-1、SFRP-5水平预测老年冠心病患者PCI术后1年内靶血管发生ISR的曲线下面积(AUC)分别为0.807(95%CI=0.729~0.871)、0.786(95%CI=0.706~0.853)、0.811(95%CI=0.733~0.874),联合预测的AUC最大,为0.943(95%CI=0.887~0.976)。结论老年冠心病PCI术后患者血清CysC水平升高,TIMP-1、SFRP-5水平降低与ISR的发生发展相关,术后早期检测各指标水平有助于预测靶血管发生ISR风险。

2型糖尿病患者血清巨噬细胞炎症蛋白1α和基质金属蛋白酶9水平与甲状腺结节的相关性研究

目的探讨2型糖尿病(T_(2)DM)患者血清巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平与甲状腺结节的相关性。方法回顾性选取2021年10月至2023年3月于河北医科大学第三医院就诊的T_(2)DM患者154例,根据患者是否合并甲状腺结节分为甲状腺结节组(83例)和无甲状腺结节组(71例)。比较2组甲状腺功能、血糖、血脂、MIP-1α、MMP-9等指标。采用Logistic回归模型分析影响T_(2)DM患者出现甲状腺结节的因素;采用Pearson相关性检验分析T_(2)DM患者血清MIP-1α、MMP-9水平与其他因素的相关性;绘制受试者工作特征曲线分析血清MIP-1α、MMP-9水平对T_(2)DM患者出现甲状腺结节的预测价值。结果甲状腺结节组促甲状腺激素(TSH)、总三碘甲状腺原氨酸(TT_(3))、总甲状腺素(TT_(4))、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、稳态模型胰岛β细胞功能指数、空腹血糖、空腹胰岛素水平均高于无甲状腺结节组,胰岛素敏感指数(ISI)低于无甲状腺结节组(均P<0.05)。甲状腺结节组血清MIP-1α、MMP-9水平均高于无甲状腺结节组[(29±5)ng/L比(25±5)ng/L、(2.0±0.5)ng/L比(1.4±0.5)ng/L](均P<0.001)。Logistic回归分析结果显示,MIP-1α、MMP-9、TSH、TT_(3)、TT_(4)、空腹胰岛素、HOMA-IR和ISI均为T_(2)DM患者出现甲状腺结节的危险因素(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果表明,T_(2)DM患者血清MIP-1α与MMP-9水平呈正相关(r=0.362,P<0.001)。血清MIP-1α、MMP-9水平与空腹胰岛素、TSH、HOMA-IR、TT_(3)、TT_(4)均呈正相关,与ISI呈负相关(均P<0.001)。MIP-1α、MMP-9水平联合检测预测T_(2)DM患者出现甲状腺结节的曲线下面积大于MIP-1α、MMP-9单独检测(均P<0.05)。结论血清MIP-1α、MMP-9水平与T_(2)DM患者出现甲状腺结节具有密切关系,对预测T_(2)DM患者甲状腺结节具有重要价值。

膜型基质金属蛋白酶-1在骨性关节炎患者滑膜中的表达及意义

目的:探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP/MMP-14)在骨性关节炎(OA)患者膝关节滑膜中的表达和意义。方法:应用免疫组化和Western blot方法检测MT1-MMP蛋白在40例OA与40例非OA患者滑膜中的表达情况。结果:免疫组化结果表明MT1-MMP蛋白在OA与非OA患者滑膜中的表达有显著性差异(χ2=29.46,P<0.01),且阳性表达多定位于滑膜细胞的胞质;Western blot分析结果显示MT1-MMP蛋白在OA患者滑膜(1.042±0.219)中表达显著高于非OA患者滑膜组织(0.256±0.050,F=12.838,P=0.001)。结论:MT1-MMP蛋白与骨性关节炎发生发展相关,可能作为诊断及判断骨性关节炎的一项重要指标。

重组人结缔组织生长因子对人成骨细胞膜型基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶2表达的影响

使用重组人结缔组织生长因子（recombinant human connective tissue growth factor,rCTGF）干预体外培养的人成骨细胞,发现rCTGF可呈时间-剂量依赖性地促进人成骨细胞膜型基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶2的表达,200 ng/ml CTGF作用24～48 h达最大效果.rCTGF可明显增强p38丝裂原活化的蛋白激酶（p38-MAPK）磷酸化,p38-MAPK阻断剂SB 23058可阻断rCTGF上调膜型基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶2的效应.

膜型基质金属蛋白酶-1在黏着斑激酶相关非激酶调控肝星状细胞胶原代谢中的作用

目的:探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC)膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响并探讨MT1-MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法:应用体外细胞培养技术,脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染;采用Western blotting法测定FRNK蛋白在瞬时转染时相应的表达,鉴定转染效果;分别应用Western blotting和RT-PCR方法测定MT1-MMP在HSC中的相应表达。结果:FRNK质粒成功转染HSC,于转染48h时,FRNK蛋白表达最强,P<0·05;FRNK转染后在基因水平上:MT1-MMP mRNA表达明显增加;翻译蛋白水平上:FRNK质粒转染HSC48h后,MT1-MMP蛋白表达量显著升高。结论:脂质体介导下FRNK质粒转染,可使外源性FRNK在HSC内大量表达,FRNK可能通过上调MT1-MMP值来抑制HSC胶原合成。

川芎嗪注射液对高糖诱导后人腹膜间皮细胞Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶-1和金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的影响

目的:研究川芎嗪注射液对体外培养的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)在高糖刺激下Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表达的影响。方法:胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞进行原代培养并传代,分为5组(每组设3个样本):正常组(完全培养液)、高糖对照组(2.5%葡萄糖)和高糖(2.5%葡萄糖)加低、中、高剂量川芎嗪(10、20和40mg/L)组。采用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-poly merase chain reaction,RT-PCR)法检测细胞内Ⅰ型胶原、MMP-1和TIMP-1mRNA表达;酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原、MMP-1和TIMP-1的蛋白质水平,用二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白检测法测定细胞中蛋白质含量,用以校正ELISA结果。结果:川芎嗪能显著降低高糖所致的HPMCsⅠ型胶原和TIMP-1的表达(P<0.05,P<0.01),两者在蛋白质和基因水平均呈量效关系;且中、高剂量川芎嗪能显著增加MMP-1的表达(P<0.05)。结论:川芎嗪能减少HPMCs高糖刺激下Ⅰ型胶原的合成,并且通过调节MMP-1/TIMP-1的平衡,促进Ⅰ型胶原降解。

骨形成蛋白-2对肺癌A549细胞膜型基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的:探讨骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对人肺癌A549细胞膜型基质金属蛋白酶-1(membrane type 1-matrix metalloproteinase,MT1-MMP)表达的影响。方法:Western杂交检测MT1-MMP蛋白质表达。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)检测细胞培养液中活性基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的浓度。结果:BMP-2可促进A549细胞MT1-MMP蛋白质表达,并呈剂量和时间依赖关系。ELISA进一步显示BMP-2可增加A549细胞培养液中活性型MMP-2的含量。结论:BMP-2可促进A549细胞MT1-MMP的表达及MMP-2的激活。肺癌组织中BMP-2表达的增加可通过促进肺癌细胞MT1-MMP表达及MMP-2激活而促进肺癌细胞的侵袭转移,此可能为肺癌侵袭转移的另一重要机制。

膜型基质金属蛋白酶-1增强乳腺癌细胞系MCF-7的恶性表型

目的:探讨膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)蛋白酶-1表达对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞生物学行为的影响及MT1-MMP催化亚单位在其中的作用。方法:应用脂质体转染法将携带MT1-MMP及其突变体基因MT1-MMP-E240A的pcDNA3.1载体分别稳定导入MCF-7细胞,通过超微结构观察及体外生长、迁移实验检测MCF-7细胞生物学行为的变化。结果:转染后的细胞经RT-PCR证实MT1-MMPmRNA的表达与对照组比较明显增强;免疫荧光细胞化学染色显示MT1-MMP蛋白呈强阳性表达,阳性颗粒分布于肿瘤细胞的胞浆和胞膜。透射电子显微镜观察显示pcDNA3.1组和MCF-7组细胞未见异常,而MT1-MMP组与MT1-MMP-E240A组细胞与对照组相比出现较多处于分裂期的细胞和瘤巨细胞,部分细胞胞浆内出现糖原池和髓样小体样溶酶体。细胞增殖周期、细胞生长曲线测定结果显示,MT1-MMP组与MT1-MMP-E240A组处于G2M期的细胞比率明显高于对照组(P<0.01),提示转染组细胞的增殖能力增强。转染组细胞在Matrigel和FN上的迁移能力较对照组明显增强(P<0.05)。结论:MT1-MMP能够促进肿瘤细胞的增殖、迁移,在一定程度上增加其恶性表型;MT1-MMP催化亚单位在其中不发挥主要作用。