高分子树脂膜培养容器在文心兰原球茎增殖中的应用

以薄叶系文心兰 (Oncidium)品种‘AlohaIwanaga’茎尖诱导形成的原球茎 (protocorm likebody ,PLB)为外植体 ,采用树脂膜培养容器 (CP)和三角瓶 ,分别以MS、1 2MS为基本培养基 ,比较 5种不同培养方式 (三角瓶固体方式、三角瓶液体方式、三角瓶液体振荡方式、CP固体方式、CP液体静置方式 )、CO2 施肥和 4种不同糖浓度 (5、10、2 0、30g L)对文心兰原球茎 (PLB)增殖效果的影响 .通过对PLB增殖后的鲜重、干物重和PLB分化幼苗等主要指标分析后表明 :①以 1 2MS为基本培养基、应用CP作培养容器的液体静置培养方式是该实验研究中文心兰PLB增殖的最佳培养方式 ;②CO2 施肥在一定程度上增加了PLB增殖后的鲜重和干物重 ,表明培养容器内的CO2 浓度提高 ,能够促进文心兰PLB的增殖 ;③培养基中 4种不同糖浓度处理中 ,2 0g L糖浓度下 ,增殖后PLB鲜重和干物重均高于其他处理 .糖浓度在 2 0g L以下时不利于PLB的快速增殖 ,高于 2 0g L时对PLB的增殖有一定的抑制作用 .

CO_2施肥时树脂膜培养容器在文心兰试管苗培养中的应用

采用在培养室内CO2 施肥的方法 ,以C3植物文心兰 (Oncidium)品种‘AlohaIwanaga’试管苗为实验植物材料 ,分别以氟乙烯树脂膜容器 (CP)和三角瓶作为培养容器进行培养 .结果表明 :CO2 施肥时 ,树脂膜培养容器 (CP)内生长的试管苗在株高、叶数、叶长、叶幅、根数、根长、鲜重、干物重、干物率、叶绿素指数 (SPAD值 )等生长指标上高于无CO2施肥处理 .采用SSR法进行比较 (显著水平P≤ 0 0 5 ) ,其中在株高、叶长、叶幅、根数、鲜重、干物重等重要生长指标之间存在显著性差异 .以三角瓶为培养容器时其生长虽优于无CO2 施肥处理 ,但多数指标差异并不显著 .实验证明 ,使用CP作为培养容器 ,培养室内CO2 施肥对促进文心兰试管苗的生长和提高其品质效果明显 .

用于丝状菌固态培养研究的膜培养技术

提出了一种改进的膜转移培养技术 ,并以盾壳霉 (Coniothyriumminitans)的固态培养为例 ,从菌体生长、孢子产量及培养基中 pH变化等方面对该培养技术的应用价值进行了分析与研究 .结果表明 ,这种培养体系可以将菌丝体与培养基完全分开 ,但不影响菌体的正常生长与孢子形成 ;通过膜转移培养技术可将盾壳霉的孢子产量提高 1 8倍以上 ;用浸有液体培养基的脱脂棉支撑体培养体系可达到与琼脂培养体系相同的研究目的 ,但其操作更为简单 ,更利于连续培养研究 .这种培养体系在实验室条件下研究其他丝状菌的固态连续培养方面也具有很大的应用潜力 .

类风湿关节炎患者滑膜培养上清液IgG RF分析

类风湿关节炎患者滑膜培养上清液ＩｇＧ ＲＦ分析于孟学，张春芳，史立，单秀霞（中国医学科学院，中国协和医科大学，协和医院，北京１００７３０）类风湿关节炎（ＲＡ）的免疫紊乱涉及到体液因子和细胞因子两个方面，而二者又密切关联，相辅相成。作者在研究细胞因子的...

膜培养法在医院环境微生物污染监测中的应用

微孔膜渗透法是具有样品分离和培养双重功能新的膜培养技术。我们应用微孔膜渗透法对医院环境微生物污染进行监测，重点是医务人员手、物体表面的微生物监测，消毒液效果观察，经２００件样品试验并与肉汤培养法和倾注法进行对比实验，统计学处理，显示该法具有科学性、可靠性、合理性。

卡提素浮膜培养生产工艺的研究

为探索浮膜培养法生产卡提素新工艺,用液体苏通作培养基培养卡介苗菌,收集菌体,按卡提素提取工艺提取。同时,以传统的固体培养法(苏通马铃薯培养基)作参照,比较两种方法所得卡提素的提取率和卡提素的理化指标。结果显示:浮膜培养法所得卡提素的提取率为1.61%,比固体培养法的提取率3.08%低,理化指标符合精制卡介菌多糖核酸标准规定,其中核酸含量明显高于固体培养法的含量。而且,浮膜培养法手工操作量小,质量更容易控制,是一套适合卡提素工业化生产的新工艺。

内循环三相流化床的生物膜的培养

研究了内循环三相流化床在两种不同进水方式情况下生物膜培养情况. 研究表明：间歇进水时生成的生物膜能达到200～250？m左右,连续进水时生物膜厚度能达到100？m;前者较为圆滑紧密,而后者的活性较高;较低的启动容积负荷有利于启动挂膜;挂膜完成后进水的容积负荷不能过低,否则容易因污泥负荷低而引起丝状菌膨胀. 通过间歇式进水培养的活性污泥达到了生物量9.65g·L^-1（其中附着生物膜占92.7%）,而连续式进水负荷COD可以达到11.45kg·m^-3·d^-1, 此时COD去除率达到80%.

细菌纤维素/羟基磷灰石@聚醚砜骨膜支架的制备及其性能研究

骨膜作为骨缺损修复过程中营养物质的来源及膜内成骨过程中的核心位点,其结构和功能的重建对大尺度骨缺损的修复起到极其重要的作用。基于此,为了模拟天然骨膜的结构和功能,将聚醚砜(PES)和羟基磷灰石(HAp)混合,通过静电纺丝制备HAp@PES静电纺纤维膜(HPES),然后通过膜液界面培养法与细菌纤维素(BC)复合,获得了具有微米―纳米结构的BC/HAp@PES(BC/HPES)支架。扫描电镜结果表明,该支架微米―纳米纤维交错分布,且HAp成功复合在微米纤维上。所制备的支架具有良好的力学性能。进一步研究表明,成骨细胞在支架表面表现出良好的增殖和铺展能力,不仅如此,该支架还具有良好的成骨分化诱导能力。因此,这种具有仿生微纳纤维结构且负载HAp的骨膜支架有望用于大尺度骨缺损修复领域。

导电聚吡咯膜技术应用于大鼠肺细胞原代培养的实验研究

目的 :探讨导电聚吡咯膜技术对大鼠肺Ⅱ型细胞体外生长的作用。方法 :采用四甲基偶氮唑盐比色法测定比较导电聚吡咯膜组和常规培养组大鼠肺Ⅱ型细胞的生长和增殖情况。结果 :培养 3～ 5d后两组OD值有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :常规培养条件下的大鼠肺Ⅱ型细胞在体外生长时间约 2～ 3d ,导电聚吡咯膜可以将肺Ⅱ型细胞体外生长时间延长至 5d。

预培养生物膜法在海水循环水养殖系统中的应用效果

为缩短新建海水循环水养殖系统生物过滤器硝化功能构建时间,通过预培养生物膜的方法获得已建立完全硝化功能的2.5 m3过滤材料,将其置于新建系统的生物过滤器中进行硝化细菌接种,系统放养美国红鱼（Sciaenops ocellatusL innaeus）。结果表明：经12 d系统的硝化功能成熟,养殖池氨态氮维持在0.50 mg/L左右,亚硝态氮维持在0.10 mg/L以下,系统运行34 d,硝态氮上升至63.58 mg/L。18~48 d系统稳定运行阶段,养殖池出水口氨态氮平均值0.44 mg/L,进水口氨态氮平均值0.05 mg/L,一次性平均去除率88.64%。系统的日换水量〈1%。养殖1个月,美国红鱼成活率90.91%,养殖密度达28.65 kg/m3水体。预培养生物膜法有效缩短了海水生物过滤器硝化功能构建的时间,具有操作简单、节约时间、系统运行稳定的特点,将使内陆地区开展海水鱼养殖变为可能。

蜕膜细胞条件培养液对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响

目的 探讨蜕膜细胞条件培养液（DCM）对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响。方法 用体外培养早孕、晚孕蜕膜细胞的方法制备DCM,然后将其处理体外培养的早孕滋养细胞。用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析早孕滋养细胞侵袭调节基因表达的变化。结果 正常培养的早孕滋养细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、基质金属蛋白酶抑制物（TIMP-1）、尿激酶型纤溶酶原激活因子（u-PA）mRNA均有表达;而TIMP-2、纤溶酶原激活因子抑制因子（PAI-1）mRNA未见表达。早孕和晚孕DCM均能下调滋养细胞MMP-2、MMP-9、u-PAmRNA的表达,而上调TIMP-1mRNA的表达。早孕、晚孕DCM均能诱导滋养细胞PAI-1mRNA的表达,但对TIMP-2mRNA的表达未见有影响。结论 蜕膜细胞可能通过调节滋养细胞中MMP-2、MMP-9与TIMP-1之间的平衡以及u-PA与PAI-1之间的平衡,而影响滋养细胞的侵袭能力。

血清代用品在绒毛膜细胞培养制备染色体中的应用

本文首次报道自行研制的血清代用品 (SS)替代小牛血清用于绒毛膜细胞培养制备染色体。通过 2 0 0例与常规方法的对比研究 ,结果表明 ,用血清代用品 (SS)替代大部分小牛血清进行绒毛膜细胞培养 ,其培养成功率及可分析的分裂相数与常规法比较均无显著性差异 (P >0 0 5 )。

霉菌培养新方法—膜液界面培养法及其应用

本文综述了日本学者 Ｏｇａｗ ａ 等人所建立的一种培养霉菌的新方法－ － 膜液界面培养法。该方法是在一简便的培养装置中， 利用一层多孔膜作为分隔， 让霉菌生长在膜表面上， 与空气充分接触，而膜的另一面则与液体培养基接触， 目的产物透过膜孔积累于培养液中。应用该方法培养米曲霉产生中性蛋白酶和曲酸， 实验结果表明， 其目的产物形成量明显高于常规的摇瓶培养法， 并且， 通过定时更换培养基而无须重新接种即可进行长期培养， 分批积累与收获目的产物。

高糖培养人肾小球系膜细胞对TGF-β1、FN、Smad7表达的影响

目的:通过观察高糖对人肾小球系膜细胞(HMCs)转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)、Smad7表达的影响,探讨糖尿病肾病(DN)的发病机制。方法:将HMCs于高糖(30mmol/L)环境培养不同时间后,采用RT-PCR方法检测TGF-β1、FN、Smad7 mRNA表达,Western blotting检测Smad7蛋白的表达,采用ELISA检测TGF-β1、FN蛋白水平,同时以低糖培养作为对照组。结果:高糖培养24h、48h、72h后,TGF-β1 mRNA及蛋白的表达均较低糖培养对照组增加,在48h时达到高峰;FN mRNA及蛋白的表达亦较对照组增加,且呈时间依赖性;而Smad7 mRNA及蛋白表达下降。结论:TGF-β1/Smad信号转导途径负反馈调节Smad7蛋白的表达减少,可能是DN发病过程中的重要环节之一。

基于培养基压力控制的组织工程化生物膜动态培养系统的研究

目的研究压力大小可控的培养系统,以实现组织工程化生物膜的动态培养。方法根据帕斯卡定律的基本原理,设计培养基压力的控制方法,建立由培养皿、蠕动泵、压力控制模块、主控器与检测模块等组成的组织工程化生物膜动态培养系统。结果该系统可实现培养基于0.12～19.76 mmHg压力范围内的控制。结论该系统为适宜压力范围内的生物膜培养提供所需的压力环境,为组织工程化生物膜动态培养技术提供新思路。

蜕膜细胞条件培养液对卵巢癌细胞株COCl侵袭相关基因表达的影响

目的 研究蜕膜细胞条件培养液(DCM)对卵巢癌相关侵袭基因表达的影响。方法 原代培养早孕蜕膜细胞及晚孕蜕膜细胞并提取DCM,用DCM处理卵巢癌细胞株COCl,利用RT-PCR法对卵巢癌侵袭相关基因的表达进行分析。结果卵巢癌细胞株COC1表达基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-2)及纤溶酶原抑制剂(PAI-1),而不表达MMP-9、TIMP-1及尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)。早孕及晚孕DCM能显著下调卵巢癌细胞株COC1 MMP-2的表达(P<0.01);早孕及晚孕DCM处理的卵巢癌细胞株COC1也表达TIMP-2、PAI-1 mRNA,且有显著差异(P<0.01)。结论DCM可以通过改变卵巢癌细胞株COCl侵袭基因MMP-2/TIMP-2以及B-PA/PAI-1之间的平衡,从而降低卵巢癌细胞株COCl的侵袭能力。

浸铀菌群挂膜连续培养工艺研究

为了研究生物膜形成过程中各级氧化槽Fe2+氧化速率、合格菌液日产量以及各级氧化槽的pH、Eh、温度和溶解氧含量的变化情况,进行了三级串联接触氧化槽试验,测试堆浸用菌生物挂膜连续培养工艺的挂膜时间、pH值及最大流速等工艺参数。结果表明,在pH、温度和充气量稳定的情况下,经11d后,由于生物膜的成熟,Fe2+氧化速率可达0.21g/L,日最大出液量2.88m3,日出液率为0.48。

蜕膜细胞条件培养液中TNF-α及EGF对卵巢癌细胞株COC1侵袭基因MMPs/TIMPs表达的影响

目的研究蜕膜细胞条件培养液(decidual conditioned media,DCM)中TNF-α及EGF对卵巢癌细胞株COC1侵袭基因基质金属蛋白酶(MMPs)/基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)表达的影响。方法原代培养早孕蜕膜细胞并提取DCM,用DCM及分别加入TNF-α及EGF抗体的DCM处理COC1,利用RT-PCR法对COC1侵袭基因MMPs/TTMPs的表达进行分析。结果COC1表达MMP-2,TIMP-2,而不表达MMP-9,TIMP-1。早孕EGF-Ab组与对照组(DCM组)比较,前者可以使COC1的MMP-2 mRNA表达降低,且差异有显著性(P<0.01)。而TNF-α抗体组可以降低MMP-2 mRNA的表达,但与对照组比较差异无显著性(P=0.280)。与DCM组比较,EGF-Ab组可以使COC1的TIMP-2 mRNA表达增加,两者差异有显著性(P<0.01)。而TNF-α抗体组有增加TIMP-2 mRNA表达,但差异无显著性(P>0.05)。结论早孕DCM中TNF-α可能抑制COC1侵袭力。早孕DCM中EGF可能促进COC1侵袭力。