慢病毒介导的膜孔相互作用分子1基因敲减对SMMC7721细胞凋亡的影响

目的观察膜孔相互作用分子1（Stiml）基因表达下调对肝细胞癌（HCC）细胞凋亡的作用。方法设计和合成Stiml基因干扰序列，构建慢病毒介导的RNA干扰载体，利用第3代慢病毒包装系统进行病毒制备；干扰慢病毒以2倍感染复数（MOI）感染SMMC7721细胞，定量聚合酶链反应（PCR）和免疫印迹法（WB）检测Stiml基因表达；采用碘化丙锭（PI）和膜联蛋白V（AnnexinV）双染法检测SMMC7721细胞的凋亡变化。结果测序结果表明干扰序列连入干扰载体；定量PCR和Westernblot法检测结果显示干扰慢病毒感染可以抑制Stiml基因75％以上的表达；流式细胞仪检测结果表明在Stiml基因被敲减后，凋亡细胞的比例从8％上升到26％。结论Stiml基因的敲减促进SMMC7721细胞的凋亡。