NC膜富集法、实时荧光PCR法、培养法检测志贺菌的比较研究

观察、比较硝酸纤维素膜富集法、实时荧光PCR法及传统培养法对志贺菌阳性检出率的不同.对137例临床样本分别采用硝酸纤维素膜富集法、实时荧光PCR法、传统培养法进行检测.3种方法检测结果阳性率分别为13.14%、20.44%、8.03%.硝酸纤维素膜富集法是在培养法基础上进行了一些改进,采用"先分离再培养"的方法,与传统培养法比较,检测结果阳性率明显提高,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).另一方面,硝酸纤维素膜富集法耗时较短,特异性高,成本低并且无需特殊设备,特别适宜基层检测单位和健康筛查单位使用.实时荧光PCR法检测结果阳性率最高,但同时假阳性率也最高.传统培养法检测结果阳性率最低,但现今在临床工作中仍以传统培养法作为志贺菌检测的标准方法.研究结果显示,硝酸纤维素膜富集法检测志贺菌,明显提高了检测结果的阳性率,且特异性高、耗时较短,具有很好的临床应用前景.

银膜富集法测定大气中的气态汞

探讨了用银膜富集管测定大气中气态汞的方法、影响气态汞吸收率的因素和银膜富集管的再生方法。结果表明 :银膜富集管对大气中的气态汞能有效富集。当银膜长 /管径大于 2 0 0 mm/4.5mm,流速为 0 .4L/min时 ,银膜富集管对气态汞的吸收率达 98%以上。

硝酸纤维素膜富集法检测志贺菌方法的建立及应用

目的利用抗原抗体反应与培养法结合,建立先分离再增菌的增菌方法,提高志贺菌的培养检出率。方法将包被了志贺菌多价诊断血清的硝酸纤维素膜(NC膜)固定于拭子上,将拭子插入待测样本37℃孵育30 min,取出冲洗后,置新的营养肉汤管中再继续37℃增菌3 h,冲洗后将拭子涂在SS培养基平板上37℃培养18 h^24 h,计数阳性菌落数。结果通过对随机PCR法筛查阳性临床标本的检验,与传统方法相比较,用NC膜富集法增菌3 h,其检出志贺菌菌落的数目显著增高(t=2.56,P<0.05)。结论此方法大大提高了传统培养法的检出率以及增菌环节的选择性,减少了杂菌竟争性抑制和干扰。

基于超滤膜辅助的糖蛋白全N-连接糖链的富集和质谱解析(英文)

糖基化作为一种常见的蛋白质翻译后修饰,对蛋白质的空间结构、生物功能等具有重要的影响.解析糖蛋白糖链结构有助于更清楚地认识糖蛋白及其功能.本研究建立了一种基于超滤膜富集血清中糖蛋白全N-连接糖链,并利用质谱技术对糖链结构进行分析的方法.根据糖蛋白及其糖链结构之间的分子质量差异,利用Millipore公司的10 ku超滤膜富集血清糖蛋白上酶解(PNGase F)释放的全N-连接糖链,并使用MALDI-TOF/TOF-MS解析糖链结构.通过该技术可以从血清中富集并鉴定到23种独特的N-连接的糖链结构,并且利用二级质谱进行了结构确认.该方法可以被用于从大量生物样本中富集糖蛋白全N-连接糖链,可以达到快速、高通量地解析糖蛋白N-连接糖链的目的.

生物合成的谷胱甘肽产品中蛋白残留的检测方法

开发发酵法或酶法合成的谷胱甘肽产品中微量蛋白残留的检测方法,即膜富集法。并对膜富集法的显色条件进行了优化,对确认的方法进行了验证。方法的检测波长为416nm,显色剂的用量为1.2ml,显色时间为20min。该方法专属性良好,谷胱甘肽样品本身不影响该方法的检测,其不与显色液溴连苯三酚红结合,能够得到准确的检测结果。该方法蛋白含量在0-150μg范围内线性良好(R2=0.996);该方法的检测限(DL)为4.6×10-6;定量限(QL)为13.9×10-6;方法的精密度、重现性良好,同一样品连续测量6次的结果的相对标准偏差(RSD)<3%;加标回收率均在95%-102%之间,准确度较高。膜富集法是检测生物合成产品中微量蛋白残留的好方法。

三种不同方式检测志贺杆菌的分析比较

目的:探索三种不同方式检测志贺杆菌的分析比较。方法:收集2019年3月1日到2019年12月31日共202例经询问告知有腹泻症状的体检者粪便样本,分别应用常规细菌培养法、实时荧光定量聚合酶链式反应法和硝酸纤维素膜富集法等三种不同方式鉴定志贺杆菌,比较三组方式阳性率。结果:202例临床样本中,硝酸纤维素膜富集法检测出10例阳性,阳性率为4.95%(10/202);实时荧光定量PCR法检测出14例阳性,阳性率为6.93%(14/202);传统培养法检测出2例,阳性率为0.99%(2/202)。实时荧光定量PCR法阳性检出率最高,而传统培养法阳性检出率最低。硝酸纤维素膜富集法与实时荧光定量PCR法统计分析,x2=0.94,P>0.05,无统计学差异。硝酸纤维素膜富集法与传统培养法比较。x2=2.72,P<0.01。实时荧光定量PCR法与传统培养法比较,x2=4.65,P<0.05,均有统计学上显著差异。结论:实时荧光定量PCR法阳性检出率最高,而传统培养法阳性检出率最低,但临床仍以传统培养法为主,而硝酸纤维素膜富集法在提高阳性检出率的基础上缩短检测周期,具有一定的临床应用前景。

尿液蛋白富集方法的比较

人尿液中蛋白含量低,在进行质谱分析时易被高丰度蛋白掩盖。因此,发展高效和高选择性的富集方法,是实现尿蛋白标记物深度覆盖的必要前提。探究不同实验方法对尿液蛋白富集和尿蛋白质组的影响尤为重要。本研究采用超滤法、硝酸纤维素膜富集法和饱和硫酸铵沉淀法,等体积各处理5例健康志愿者和膀胱癌患者10 mL尿液样本,富集尿液蛋白,SDS-PAGE分离尿蛋白,比较不同方法纯化的效率;通过质谱分析,比较不同纯化方法的肽段鉴定效果,确定针对尿液蛋白质组蛋白的最佳富集方法。相对于超滤和硝酸纤维素膜富集法,饱和硫酸铵沉淀法成功地应用于健康人尿蛋白的富集和质谱检测,在保证回收蛋白质量的前提下,可减少高丰度白蛋白的干扰,富集更多低丰度蛋白,提高了质谱鉴定的灵敏度。综上所述,饱和硫酸铵提取尿蛋白的效果较好,该方法具有大规模处理尿液、提高蛋白质组学筛选临床诊断标记物研究的应用潜力。

Enrichment of Semi-Volatile Organic Acids from Aqueous Solutions by Multiple-Effect Membrane Distillation

Multiple-effect membrane distillation （MEMD） process for enriching semi-volatile organic acids from their individual aqueous solutions was performed by using a hollow fiber-based air gap membrane distillation （AGMD） module with the function of internal heat recovery. Aqueous solutions of glyoxylic acid, glycolic acid, lactic acid, pyrnvic acid, malonic acid and glutaric acid were used as model feed. For a feed of 1% （mass fraction）, each acid could be enriched for 8--20 times, which depended on the surface tension of the concentrate. The operation performance of MEMD process was characterized by permeation flux J, performance ratio PR and acid rejection rate R. The effects of cold feed-in temperature, heated feed-in temperature, feed-in volumetric flow rate and feed-in concen- tration on MEMD performance were experimentally evaluated. Maximum values of J, PR and R were 4.8 L/（h-m2）, 9.84 and 99.93%, respectively. Moreover, MEMD process demonstrated a fairly good stability in a long-term experiment lasting for 30 d when aqueous solution of 4% （mass fraction） lactic acid was used as a feed.