聚酰胺膜层析法对清开灵颗粒剂等8种药品的鉴别

目的:建立清开灵颗粒、芩暴红止咳糖浆、丹参、复方丹参片(滴丸),黄连上清丸、十全大补丸、复方刺五加片、养目茶的定性检测方法。方法:溶媒超声提取有效部位;聚酰胺膜层析展开;紫外灯365nm检视。结果:8种药品的聚酰胺膜层析均呈现较好的分离效果。结论:聚酰胺膜层析法适合作为上述药品的快速定性检测方法。

确定性筛选设计在Purcise Q膜纯化抗体的应用

目的:通过确定性筛选设计(DSD)方法建立单抗的Purcise Q膜阴离子交换工艺,进一步降低残留宿主细胞蛋白(HCP)含量。方法:将亲和层析洗脱过滤液作为样品,进行Purcise Q膜层析,选取上样pH、上样电导、载量、流速、峰收集条件5个因子为输入因子,以回收率、HCP去除率、多聚体含量为输出响应值,使用确定性筛选设计DOE模型进行实验。结果:在实验参数范围内,多聚体含量没有明显的变化,HCP含量显著降低。上样电导和载量显著影响HCP去除率,而载量、流速和峰收集条件则显著影响层析回收率。利用JMP的模拟实验功能获得了稳健工艺参数组合(上样电导3 ms/cm、载量300 g/L、流速25 MV/min、峰收集50 mAU/mm),进一步利用决策树机器学习方法自动获得设计空间(上样电导3.0~3.6 ms/cm、载量300~460 g/L、流速5~25 MV/min、峰收集50~180 mAU/mm)。结论:确定性筛选设计实验方法适用于膜层析的工艺开发,能够一段式快速获得稳健工艺参数组合和设计空间,对于工艺放大、工艺转移和降低生产风险极具指导意义。

纤维素亲和层析膜用于去除医药制剂中的内毒素

以纤维素膜为基质 ,活化后 ,键合壳聚糖配基 ,制备成亲和层析膜介质 .考察了所制备的膜介质在不同离子强度I、pH、流速条件下对内毒素的去除效果 .结果表明 ,在离子强度为0 1～ 0 4 ,pH值 6～ 8,流速 2～ 6mL/min范围内去除效果最佳 .将此亲和层析膜介质用于去除人血白蛋白溶液、氢化可的松注射液、右旋糖苷 4 0葡萄糖注射液中的内毒素 ,去除率在95%左右 ,用于去除溶菌酶溶液、盐酸丁卡因注射液中的内毒素 ,去除率在 80 %以上 .

用膜亲和层析法纯化小鼠腹水中的单克隆抗体

目的用膜亲和层析法（ＭＡＣ）纯化小鼠腹水中单克隆抗体（ｍＡｂ）。方法采用尼龙滤膜ＺＢＭ作为介质吸附抗人血清白蛋白（ＨＳＡ），将含ｍＡｂ的腹水滤过此ＺＢＭ，再将吸附于ＺＢＭ上的ｍＡｂ解离下来，获得纯化的ｍＡｂ。结果直径５０ ｍｍ吸附了 ＨＳＡ的 ＺＢＭ，经 １０ ｍＬ腹水循环滤过两次，即可达到最大ｍＡｂ结合量。从ＺＢＭ上解离ｍＡｂ，仅需解离液滤过１次就可完成。纯化的ｍＡｈ经ＰＡＧＥ检测，只显示１条带。用纯化的ｍＡｂ做金标记斑点免疫渗滤法（ＤＩＧＦＡ）检测ＨＳＡ标准品时，其灵敏度较用未纯化的腹水时提高了２０倍。结论用尼龙滤膜ＺＢＭ改进的膜亲和层析法，可用于纯化腹水中的单克隆抗体，且简便、省时、有效。

固定化金属亲和层析胶与亲和层析膜纯化rhMn-SOD和rhCu,Zn-SOD的比较研究

为比较固定化金属亲和层析膜与亲和层析胶的纯化效果,分别用固定化金属亲和层析胶Cu2+柱、Ni2+柱、固定化金属亲和层析膜Cu2+柱、Ni2+柱分离纯化rhCu,Zn-SOD、rhMn-SOD/24a、rhMn-SOD/28。结果表明,亲和胶与亲和膜分离SOD获得相似的纯化效果,纯化倍数均在3到5之间,亲和膜分离所得SOD比活略高于亲和胶,rhCu,Zn-SOD与Cu2+的亲和能力高于rhMn-SOD。固定化金属亲和层析膜色谱为基因工程产物的快速分离鉴定提供了一个简便的方法。

去除内毒素的研究及临床应用(一种新型亲和层析膜内毒素清除初步应用)

随着生物工程及生命医学及制药工业迅速发展,尤其许多重要的产品被开发,多种生物原物质可通过生物工程获得,但其表达工程菌往往是大肠杆菌.产品易受内毒素污染,迫切需要一种高效能的用于去除内毒素的色谱柱。这是目前生物技术产品中有待解决的问题之一。因此,需要一种能清除内毒素的有效手段,既不破坏原有的有效成份,又能够完全地把内毒素去除。亲和色谱法是利用物质的生物学特性来表达到物质的分离,是去除内毒素的一种期望中较为理想的方法。我们以大孔纤维膜（尼龙66）为介质,以已二胺为间隔臂.以组氨酸或多粘菌素B为配基.制备成亲和层析膜.同时以应用较为灵敏的定量内毒素的检测技术（最低检测限达0.03Eu／ml,最高检测限达0.5Eu／ml）对不同产品制剂内含内毒素去除前后进行定量检测分析。初步进行了自来水含内毒素的清除率,它能达到99.86％,对胸二磷胆碱纳（CytidineDiphosphateCholineCDP-C）内含内毒素的清除率达95.3％,而其药品的有效成分保留车在88％～95.5％。另外,对此膜的一次再生率也能达到99.8％的内毒素清除率。初步结果认为它是在目前方法手段中只为理想的一种清除内毒素的方法。它的最大优点就在于“亲和”对内毒素能较好地予以吸附.对其他有好成份一律不予吸附或吸附量甚微。同时.保留?

膜免疫层析一步法在霍乱弧菌诊断中的应用

目的 :应用膜免疫层析 (免疫沾棒 )快速诊断 0 1群霍乱弧菌。方法 :采用病原学方法和免疫沾棒对 30 9份标本和 2 0株霍乱阳性菌株进行平行检验。结果 :免疫沾棒的灵敏度为 10 u 个 / ml菌液 ,免疫沾棒特异性强。结论 :目前的膜免疫层析试剂不适于临床快速诊断 ,仅仅只能作为一种辅助诊断技术用于外环境的监测和临床标本的诊断。

某些内分泌疾病患者血浆游离氨基酸的改变

本文使用DNS-CI 荧光试剂-聚酰胺薄膜层析法,分析糖尿病、甲状腺机能亢进症、甲状腺机能减退症和肥胖症患者血浆游离氨基酸,并与正常人比较.结果:糖尿病者的支链氨基酸明显升高,甲亢者的酪氨酸和羟脯氨酸明显升高,甲减者此2种氨基酸明显降低,肥胖症者的生酮氨基酸明显升高.说明内分泌功能紊乱能导致氨基酸代谢异常.经多元逐步回归分析。

颇尔推出高效Mustang XT5000囊式膜 层析系统

为满足日益增长的产量需求以及药品开发和生产的下游制备针对性要求，有必要开发新的层析方法。颇尔公司为满足这一日益增长的需求，开发了新型Mustang XT5000囊式膜层析系统，该系统采用囊式封装，可以提供更为出众的生产能力和结合能力，而且制备简单，可广泛应用于各种制备层析领域。

多重PCR技术研究进展

多重PCR(Multiplex polymerase chain reaction,MPCR)是指通过一次PCR反应同时对多个靶标进行扩增,结合一定的检测手段对扩增产物进行检测从而实现对多个靶标进行诊断的技术。MPCR具有高效率、高通量、低成本的特性而被深入研究。目前MPCR技术已被广泛应用于科学研究和疾病诊断等领域,文中从MPCR扩增与检测两方面概述了MPCR技术发展及其应用,讨论了MPCR技术的优点及存在的问题,并且提出将反应体系分隔成小液滴或结合管式对流PCR(CapillaryconvectivePCR,CCPCR)技术的方式有望提高固相载体表面的扩增效率,从而开发出扩增效率高、一致性好、体系稳定、检测重数高的多重PCR技术。

颇尔推出5种有助于提高药品生产效率的新产品

颇尔公司在2005年5月9日开幕的2005 Interphex大会上推出了五种旨在通过可定制和一次性使用提高药品生产效率的革新技术。这些新技术具有能够提高生产能力、规模可扩充、减少耗时环节、缩短制备时间和节省人力等一系列特点，对制药商大有裨益。由于能够成倍地节省药品生产过程中所需的时间和人力，因此这些新产品有助于满足快速增长的全球生物制药行业的需要。