从四例丙肝患者系列血清标本分析HCV基因的变异

目的 研究丙型肝炎病人系列血清标本的丙型肝炎病毒 (HCV)基因型变化及HCV膜区基因变异和“准种”现象。方法 对 4例因献血感染HCV病人的系列血标本 ,用特异性引物PCR扩增检测 ,5′ NCR和核心区测序确定HCV基因型 ,并对标本膜区基因进行克隆 ,每个标本随机选择 5～9个克隆进行测序分析。结果 发现随着时间推移 ,存在HCV基因型的转换现象。在 2种HCV基因型转换期存在混合感染。所有测定序列均为 1b或 2a或 1b +2a基因型。对从部分血样中获得的 5～9个克隆测序表明 ,在不同克隆间虽然存在一定的核苷酸差异 ,但在 5 70nt长度的序列中 ,仅有 0 8～4 5 6个核苷酸差异。结论 HCV基因变化是多层次的。同一病人可混合感染不同基因型HCV ,HCV膜区基因有随时间而发生变异现象。但在本研究的标本中 ,通过对同一标本基因多个克隆的序列测定 ,未见明显的“准种”现象。