大鼠皮层神经元膜片钳单通道记录模型

目的：介绍我室建立的大鼠大脑皮层神经元膜片钳单通道记录模型。方法：大鼠大脑皮层神经元急性分离和膜片钳单通道记录技术。结果：急性分离的皮层神经元经鉴定成活良好，记录的Ｌ－，Ｎ－和Ｔ－型钙通道的单通道电活动与文献报道基本一致。结论：我室建立的膜片钳实验方法是可靠的。

大鼠背根神经节分离细胞离子单通道记录技术

本文探讨了在大鼠背根神经节(DRG)细胞上记录离子单通道电流的方法,研究了膜片钳实验的各个环节,研究了提高封接电阻的方法。研究结果表明,单通道记录的背景噪声取决于电极与细胞的封接水平。文中还讨论了实验系统的组装,电极制备和细胞分离等技术。

单通道和全细胞记录技术

离子通道的活动是可兴奋细胞传递信息的基础 ,膜片钳技术的发明导致了生命科学的一场革命。对膜片钳的工作模式、记录模式。

建立大白鼠视皮层脑片膜片钳全细胞记录技术

目的 建立大白鼠视皮层脑片膜片钳全细胞记录技术。方法 利用盲法获得膜片记录 ,即根据电极进入溶液中到获得全细胞膜片的过程中 ,测试方波脉冲的变化来寻找细胞。结果 能成功地进行视皮层全细胞记录。结论 本法操作简便 ,所需仪器简单 ,易于推广应用。

与视皮层脑片膜片钳全细胞记录相结合的生物素标记技术

目的 在视皮层脑片膜片钳全细胞记录的同时 ,建立神经元的生物胞素标记技术。方法 利用盲法获得视皮层脑片膜片钳全细胞记录 ,在电生理记录的同时 ,Biocytin通过记录电极尖端灌注到所记录的细胞内 ,标记成功后再进行组织学染色。结果 能观察视皮层同一细胞的电生理和形态学特性及神经元之间的染色耦合。结论 本法操作简便 ,细胞标记成功率高 ,易于推广使用。

在体大鼠膜片钳全细胞记录技术初探

目的 :建立在体大鼠膜片钳全细胞记录方法。方法 :固定麻醉大鼠后对其顶叶皮层锥体神经元行全细胞记录。结果 :成功记录到顶叶内锥体层神经元电压门控性钠离子通道电流及自发突触活动电流。结论 :初步建立了在体大鼠膜片钳全细胞记录方法 。

穿孔膜片钳记录猪冠状动脉平滑肌细胞K^+电流技术初探

常规全细胞膜片钳模式形成的同时,细胞内液与电极液交换造成细胞内物质丢失,此现象对小细胞的影响更为明显。穿孔膜片钳技术使电极与细胞胞质之间保持电学连续性,它使细胞内环境保持稳定,利于研究胞内信息传导机制,并可改善常规全细胞膜片钳时破膜所造成的封接稳定性的破坏,有望提高实验的成功率。本研究报道应用此技术在猪冠状动脉平滑肌细胞上记录的全细胞K+电流和由大电导钙激活钾通道BKCa所介导的自发瞬时外向电流ISTOCs。

大鼠心室肌细胞单通道钙电流的记录及其电生理学特性分析

目的分离大鼠心室肌细胞,记录大鼠心室肌细胞的单通道钙电流,并分析其基本电生理学性质。方法胶原酶法分离大鼠心室肌细胞;应用膜片钳技术细胞贴附式和内膜向外式记录L-型钙通道的电流,并用pClamp10分析软件进行分析。结果分离得到大鼠心室肌细胞,细胞存活形态良好,呈杆状或柱状,具有清晰的横纹。记录到的L-型钙通道单通道电流,平均电流幅度为(1.13±0.01)pA,电导为19 pS,平均开放时间常数为(1.35±0.03)ms,平均关闭时间常数为(46.75±10.04)ms。此外,还记录到L-型钙通道的Run-down现象。结论本实验分离得到的大鼠心室肌细胞适用于膜片钳单通道记录模式;记录到的L-型钙通道的基本电生理学性质与文献报道相符。

膜片钳技术与离子通道的研究

膜片钳技术（patch clamp recording techniques）是一项新兴的技术,它是通过记录离子通道的离子电流来反映细胞膜上单一离子通道的分子活动[1]。以后经Neher等<sup>[2]的进一步完善,其电流测量灵敏度达1pA,空间分辨达1μm和时间分辨率达10μs,从而可对通道的电导及动力学特性、离子选择性、药物学特性,以及通道的调节机制等方面进行深入细致的研究。

膜片钳实验技术系列讲座──第四部分 全细胞记录法和穿孔膜片钳法（续）

膜片钳实验技术系列讲座──第四部分全细胞记录法和穿孔膜片钳法（续）陈军译、李继硕校阅（第四军医大学解剖学教研室，梁琚脑研究中心，西安７１００３２）（八尾宽：日本生理学杂志１９９４，５６：３０５～３３２）２．离子通道微观性质分析２．１突触电流的分析通过...

离子单通道记录数据分析的程序

本文介绍了一份自行设计的软件。该软件使用通用微机(IBM—PC)对patch clamp实验结果进行采样和自动分析。本文对于软件的基本内容和设计思想做了简要介绍。于说明数据分析在patch clamp实验中的重要性的同时,可以看出开发该项工作的实用意义。

大鼠心室肌细胞的分离及其单通道钙电流的记录

采用Langendorff灌流、Worthington胶原酶法分离大鼠心室肌细胞,应用膜片钳制技术单通道模式记录大鼠心室肌细胞的钙电流,并进行膜片钳电生理学研究.

膜片钳技术在神经干细胞领域的研究现状及应用展望

膜片钳技术(patch-clamp technique)是1976年由Nehetr和Sakmann在电压钳的基础上发展而来的一种记录细胞膜离子通道电生理活动的技术.其突出优点是能够在维持细胞兴奋过程中膜电位恒定的同时,直接记录离子通道电流,反映单一的(或多个的)离子通道分子活动.此技术的出现将细胞水平和分子水平的生理学研究联系在一起,同时又将神经科学的不同领域融汇成一体,是对生理科学和神经科学研究的重大变革.

基于隐Markov模型的离子单通道信号恢复及参数估计

离子单通道信号是皮安级的随机离子流 ,用膜片钳技术可以记录下来。由于信号的微弱性 ,记录中噪声往往占明显优势 ,传统上采用阈值检测器来恢复通道信号 ,这需要人为的设定阈值 ,受主观影响很大 ,尤其是信噪比低时 ,阈值检测器失效。文章对此进行分析 ,采用一种基于隐Markov模型的通道信号恢复及参数估计技术 ,其性能远比阈值检测器优越。

新一代细胞电生理仪器一膜片钳

膜片钳（Datch clamo)技术是继细胞内电位记录，电压钳（Voltage Clamp)记录以后出现约新一代细胞电生理技术，1976年Neher和Sakmann利用首次实现膜单通道记录，1981年后膜片钳逐渐在发达国家的电生理室普及，本文介绍膜片钳仪器原理。

生长抑素对人脐静脉内皮细胞Ca^(2+)及其膜通道的调控研究

目的:观察生长抑素(SOM)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)膜上Ca2+通道及胞浆内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的调控作用。方法:应用共聚焦激光扫描显微术(CLSM)和膜片钳单通道记录技术对体培养HUVEC胞浆内[Ca2+]i、膜上Ca2+通道开放情况进行观察。结果:SOM促使HUVEC胞浆内[Ca2+]i明显升高。胞膜上Ca2+通道的开放出现1～2 min的潜伏期后也开放但其开放概率明显降低。结论:SOM对HUVEC胞浆内[Ca2+]i的调节可能首先通过细胞内储存的Ca2+释放及稍后的细胞膜上Ca2+通道开放,从而达到其调节效应。

离子通道电流虚拟仿真实验在生理教学中的应用

利用模拟离子通道电流仿真实验教学设备替代高成本的膜片钳-离子通道测量平台,以降低实验成本,满足更多学生进行科研实验的需要。通过虚拟仿真实验,能够观察到离子通道蛋白分子的电流记录曲线,通过分析处理得到电压-电流分析曲线和通道关闭时间统计曲线,从而帮助学生理解离子通道蛋白的开-关特性和电压依赖特性,同时培养学生在离子通道蛋白的电生理特性科研方面的实际操作能力。

Cx43基因敲除小鼠心室肌细胞动作电位及钾离子通道电流的变化

目的研究缝隙连接蛋白43(Cx43)基因敲除对心室肌细胞钾离子通道电流的影响。方法选用2～3月大的Cx43基因敲除杂合子小鼠和相匹配的野生小鼠作对照,应用膜片钳全细胞记录技术记录小鼠心室肌细胞动作电位和钾离子流;电流钳状态下,记录心室肌细胞静息电位和动作电位;电压钳状态下,用钾离子通道外液灌流5min,依次记录内向整流性钾电流(IK1)和4-氨基吡啶不敏感的外向钾电流(ISS)。结果Cx43基因敲除小鼠心室心肌细胞动作电位复极到50%和90%的时间缩短,IK1离子流没有变化,而ISS离子流增加。结论Cx43基因敲除导致心室肌细胞动作电位时程缩短,ISS离子流增加。