磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B与子宫内膜蜕膜化关系的研究进展

子宫内膜蜕膜化是决定妊娠能否成功的关键因素之一。磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)是哺乳动物细胞内基础信号转导通路中的主要细胞因子,在细胞的生长、增殖、凋亡、自噬、血管生成等生理和病理过程中发挥着极其重要的生物学功能。PI3K/蛋白激酶B(PKB/Akt)信号通路在细胞代谢、迁移、分化等方面影响子宫内膜蜕膜化。深入研究PI3K/Akt在子宫内膜蜕膜化中的作用,可为蜕膜化缺陷相关疾病的诊断和治疗提供新思路,对更好地指导临床、提高妊娠成功率具有重要意义。

过表达线粒体融合蛋白2对膜相关磷脂酰肌醇转移蛋白3阳性的肝癌细胞株SMMC-7721侵袭和迁移的影响

目的观察过表达线粒体融合蛋白2(Mfn2)对膜相关磷脂酰肌醇转移蛋白3(PITPNM3)表达阳性肝癌细胞株侵袭和迁移的作用。方法以PITPNM3表达阳性乳腺癌细胞株McF-7作为阳性对照组,筛选PITPNM3表达阳性的SMMC-7721肝癌细胞株用于实验,使用CC型趋化因子配体18(CCL18),以20μg/L的CCL18浓度建立PITPNM3表达阳性肝癌细胞侵袭和迁移模型;于PITPNM3表达阳性肝癌细胞转染含Mfn2腺病毒载体36 h后,检测PITPNM3表达变化以及其对肝癌细胞侵袭和迁移的影响。应用SPSS 19.0统计软件进行分析。结果肝癌细胞株SMMC-7721中PITPNM3的mRNA呈高表达,相对表达量为3.4;HepG2中PITPNM3相对表达量为1.6,McF-7中PITPNM3相对表达量为4.5,SMMC-7721与HepG2比较,差异有统计学意义(t=3.653,P<0.05);SMMC-7721与McF-7比较,差异无统计学意义(t=0.915,P>0.05);20μg/L的CCL18可有效下调肝癌细胞株SMMC-7721中E-Cadherin表达,上调Snail和Vimentin的表达,促进SMMC-7721侵袭和迁移;Mfn-2可导致肝癌细胞株SMMC-7721的PITPNM3蛋白表达显著下降,侵袭和迁移能力受到抑制,但并未下调PITPNM3的mRNA量,实验组PITPNM3的mRNA相对表达量为0.903,阳性对照组PITPNM3的mRNA相对表达量为1.128,组间比较差异无统计学意义(t=0.577,P>0.05)。结论Mfn2可有效下调PITPNM3表达,抑制肝癌细胞株SMMC-7721侵袭和迁移的能力。

线粒体融合蛋白2与膜相关磷脂酰肌醇转移蛋白3表达的关系及其在肝细胞癌肝内转移中的作用

目的探讨肝细胞癌(HCC)中线粒体融合蛋白2(Mfn2)与膜相关磷脂酰肌醇转移蛋白3(PITPNM3)表达与HCC肝内转移率的关系。方法选取149例HCC患者手术切除标本和完整临床随访资料。取得的病理石蜡组织切片应用免疫组织化学方法分别进行Mfn2和PITPNM3染色,将免疫组织化学评分结果与患者的临床病理资料进行统计学分析。结果Mfn2表达阴性组中,54.55%患者PITPNM3表达为强阳性;而Mfn2表达强阳性组中,52.17%患者PITPNM3表达为阴性,说明Mfn2的表达与PITPNM3的表达呈负相关;PITPNM3强阳性表达的HCC患者56.34%发生肝内转移,且组织学分级高,临床分期晚,预后较差;Mfn2强阳性表达的HCC患者仅14.08%发生肝内转移,且组织学分级低,临床分期早,预后较好。结论Mfn2可能是抑制HCC发生肝内转移的关键蛋白。

基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/核因子κB通路探讨高原缺氧对大鼠蛛网膜下腔出血后血脑屏障的作用

目的探讨高原缺氧对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后血脑屏障的作用及其机制。方法SPF级健康成年雄性SD大鼠(n=78),随机分为4组:假手术组(sham)、蛛网膜下腔出血模型组(SAH)、高原缺氧假手术组(Hp sham)和高原缺氧蛛网膜下腔出血模型组(Hp SAH)。通过低压模拟舱(海拔5000 m)饲养4 d建立高原缺氧大鼠动物模型,采用颈内动脉刺破法建立SAH大鼠动物模型。SAH后24 h,各组大鼠进行神经功能学评分和出血严重程度评估,Nissl染色和TUNEL染色分别观察大鼠海马组织CA1区神经元形态变化和神经细胞凋亡,Western blotting检测大鼠海马组织磷酸化PI3K(p-PI3K)、PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)、Akt、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、NF-κB及基质金属蛋白酶9(MMP-9)、闭锁蛋白(occludin)、紧密连接蛋白-5(claudin-5)的表达,免疫荧光染色观察大鼠海马组织CA1区occludin、claudin-5蛋白表达。结果SAH后24 h,SAH组与Sham组、Hp SAH组与Hp Sham组比较,大鼠神经功能评分明显下降,颅底出血量明显增加(P<0.05),Hp SAH组与SAH组比较,神经功能评分明显下降(P<0.05);SAH组与sham组比较,大鼠海马组织CA1区神经元形态萎缩变形,神经元细胞排列紊乱,神经元数量明显下降,神经细胞凋亡明显增加(P<0.05),高原缺氧后上述神经元形态损伤和神经细胞凋亡进一步加重;SAH组与sham组、Hp SAH组与Hp sham组比较,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、occludin及claudin-5蛋白的表达明显下降,p-NF-κB/NF-κB和MMP-9蛋白表达明显升高(P<0.05),Hp SAH组与SAH组比较,p-PI3K/PI3K和MMP-9蛋白表达明显升高,Hp sham组与sham组比较,claudin-5蛋白表达明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);免疫荧光染色发现,SAH组大鼠海马组织CA1区occludin、claudin-5蛋白的表达下降,高原缺氧后occludin、claudin-5蛋白的表达进一步降低。结论高原缺氧通过抑制PI3K/Akt/NF-κB通路加重蛛网膜下腔出血大鼠模型后血脑屏障破坏。

磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α通过调控跨膜受体蛋白1对子宫内膜癌病人中性粒细胞的影响

目的探究磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(PIK3CA)基因通过调控跨膜受体蛋白1(Notch1)的表达对子宫内膜癌病人血中性粒细胞的影响。方法选择2020年3月至2021年9月在海南医学院第一附属医院接受治疗的50例子宫内膜癌病人(病例组)和50例健康女性(对照组)为分析对象。检测病例组和实验组血清中中性粒细胞(NE)、淋巴细胞(LY)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT),计算NLR指数(中性粒细胞计数/淋巴细胞计数)。逆转录PCR(RT-PCR)和Western blotting检测PIK3CA和Notch1的相对表达量。选取人原髓细胞白血病细胞/全反式维甲酸细胞(HL-60/ATRA细胞),在不同时间下进行培养,验证PIK3CA通过Notch1对NE的影响。结果病例组病人NE、LY、PLT指标以及NLR指数为(6.03±0.40)×10^(9)/L、(2.15±0.31)×10^(9)/L、(257.40±37.51)×10^(9)/L、(3.69±0.41)分别高于对照组的(5.13±0.50)×10^(9)/L、(1.68±0.16)×10^(9)/L、(202.10±23.39)×10^(9)/L、(2.44±0.39),病例组病人Hb水平为(138.72±13.79)g/L低于对照组Hb水平(149.52±10.65)g/L,说明子宫内膜癌病人炎症微环境异常。病例组PIK3CA和Notch1相对表达量为(3.351±0.496)、(3.467±0.440)高于对照组的(1.581±0.275)、(1.519±0.279)。HL-60/ATRA细胞培养实验验证了PIK3CA高表达促进Notch1高表达进而抑制NE的增殖。结论在NE中,Notch1表达量随着PIK3CA表达量升高而升高,NE细胞活力逐渐下降,初步证实了PIK3CA基因通过调控Notch1的表达对子宫内膜癌中NE产生影响。

Yes相关蛋白(YAP)通过激活PI3K/AKT通路促进皮肤鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移

目的探讨Yes相关蛋白(YAP)在皮肤鳞状细胞癌(cSCC)中表达及与cSCC侵袭和迁移中的作用。方法通过免疫组织化学染色法检测cSCC、鲍温病(BD)、癌旁正常皮肤组织中YAP的表达水平,并分析与临床病理参数之间的关系;利用慢病毒转染构建YAP基因敲低的A431稳定细胞株,利用四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽检测A431细胞微丝分布和数量,Transwell TM实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测A431细胞的迁移能力;免疫荧光细胞化学染色法观察敲低YAP后上皮间质转化(EMT)相关标志物上皮钙黏素(E-cadherin)、锌指转录因子Snail的表达;Western blot法检测E-cadherin、Snail、β-catenin、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)、核糖体蛋白S6(S6)、磷酸化S6(p-S6)、4E结合蛋白1(4EBP1)、磷酸化的4EBP1(p-4EBP1)的表达。结果YAP在cSCC和BD中表达显著高于癌旁正常皮肤组织;cSCC中YAP高表达与肿瘤大小、分化程度、侵袭程度密切相关,与患者的性别、年龄、发病部位、形态类型、是否神经脉管侵犯不相关;敲低A431细胞中YAP后,肿瘤细胞的侵袭、迁移能力降低,细胞微丝变细、伪足变少;E-cadherin表达增加,Snail和β-catenin蛋白表达降低,p-AKT、p-S6及p-4EBP1蛋白表达降低。结论YAP在cSCC中高表达,YAP激活PI3K/AKT信号通路促进cSCC的侵袭、迁移及EMT过程。

磷脂酰肌醇转移蛋白质家族的研究进展

脂类的单体转移是由一类蛋白质来执行的,这组蛋白质把脂类结合到疏水腔,从而使脂类避开了含水环境.其中的这样一组蛋白质是磷脂酰肌醇转移蛋白质家族(PITPs),能结合磷脂酰肌醇和磷脂酰胆碱,把它们从一个膜区转移到另一膜区.PITPs是在单细胞和多细胞组织中发现的,但在细菌中没有发现.在鼠和人类中,人们发现负责脂类转移的PITP结构域有五个蛋白,按照序列分成两类:类型Ⅰ PITPs由两个家族成员α,β构成,它们是小蛋白35 kDa,有一个PITP结构域,可以普遍表达;类型ⅡA PITPs(RdgB αⅠ和Ⅱ)是很大的蛋白质,有另外的结构域,把蛋白质靶向膜,仅能结合脂类,但不能介导转移.类型ⅡB PITP(RdgB β)与类型Ⅰ在大小(38kDa)上相似,也是普遍表达的.类型ⅢPITPs,以Sec14p家族为代表,是在酵母和植物中发现的,但是在序列和结构上与类型Ⅰ和类型ⅡPITPs相似.讨论了PITP蛋白是被动转运蛋白还是调节蛋白,在行使肌醇脂类和膜转换的专门的生物功能时,能否把转运和结舍性质偶连起来.

在肿瘤细胞模型中联合应用磷脂酰肌醇3激酶/蛋白酶B通路抑制剂BEZ235和细胞外调解蛋白激酶/丝裂原活化蛋白激酶通路抑制剂U0126的效果

目的探讨通过联合应用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白酶B(AKT)通路抑制剂BEZ235和细胞外调解蛋白激酶(ERK)通路抑制剂U0126抑制膜受体酪氨酸激酶/PI3K/AKT/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路与ERK/丝裂原活化蛋白激酶通路对细胞增殖的影响。方法以磷酸酶和张力蛋白同源物缺失(PTEN-/-)的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)系作为研究对象,联合应用PI3K、mTOR双重抑制剂BEZ235及ERK激酶抑制剂U0126,通过MTT和Western blot方法检测药物对细胞增殖的影响。结果 BEZ235及U0126对PTEN-/-MEF细胞均有抑制作用,二者半数抑制浓度分别为6.257 nmol/L及22.85μmol/L。但联合应用BEZ235与U0126,二者表现为拮抗的作用方式。结论在PTEN缺失的细胞系中或PTEN突变的肿瘤的联合靶向治疗中,不推荐应用BEZ235与U0126联合使用。

黄芩素抑制磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路并诱导MGC-803细胞自噬

目的研究黄芩素(BAI)对胃癌细胞系MGC-803细胞自噬的影响。方法使用(0、 5、 15、 25、 50)μmol/L BAI处理胃癌MGC-803细胞24、 48、 72 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖活性,吖啶橙(AO)染色结合免疫荧光细胞化学染色观察微管相关蛋白1轻链3(LC3)和P62的表达确定MGC-803细胞的自噬情况, Western blot法检测细胞LC3、 P62、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化的PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、 p-AKT的蛋白水平。结果与对照组相比, BAI可显著抑制MGC-803细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性;BAI处理的MGC-803细胞内酸性溶酶体显著增加, LC3表达增强;BAI处理后可显著降低PI3K和AKT蛋白的磷酸化, LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加、上调P62蛋白的表达。结论黄芩素抑制PI3K/AKT信号通路诱导MGC-803细胞发生自噬。

清肠解毒汤对溃疡性结肠炎相关癌变的治疗作用及PI3K/Akt/m TOR通路调控机制

目的观察清肠解毒汤对溃疡性结肠炎相关癌变的治疗作用,并探讨通过PI3K/Akt/mTOR信号通路的调控机制。方法取50只SPF级大鼠,随机分为5组,模型组、低、中、高剂量组采用氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(AOM/DSS)复合法建立溃疡性结肠炎相关癌变模型,对照组饮用水不变,生理盐水替换二甲肼(DMH);低、中、高剂量组灌胃4.5、9、1.8 g/kg的清肠解毒汤,模型组和对照组灌胃生理盐水,持续8周。观察各组大鼠一般情况,并对比灌胃1 d、2周、4周时疾病活动指数评分(DAI),大肠前、中、后段典型增生/癌变数,结肠黏膜组织病理学变化,PI3K、AKT、m TOR mRNA表达情况及AKT/p AKT差异。结果模型组大鼠精神萎靡,伴血便、腹泻,3剂量组给药后精神状态逐渐好转,高剂量组好转最为明显。干预期间对照组DAI评分均为0分,DAI组间、时间、交互比较(P<0.05)。对照组大鼠无溃疡性结肠炎相关癌变,其余4组结肠前段、中段及后段不典型增生/癌变数组间比较(P<0.05)。组织病理学观察发现,模型组结肠黏膜上皮细胞脱落,部分可见低度不典型增生、癌变,固有腺体萎缩,伴有大量炎性细胞浸润,3剂量组上述病理变化均有所减轻,其中高剂量组减轻最为明显,个别低度不典型增生和淋巴滤泡出现,未见癌变。AKT mRNA相对表达量组间比较(P>0.05),PI3K、m TOR mRNA和蛋白相对表达量及AKT/p AKT组间比较(P<0.05)。结论清肠解毒汤可通过抑制PI3K/Akt/m TOR通路发挥治疗溃疡性结肠炎相关癌变的作用,其中1.8 g/kg清肠解毒汤治疗效果最佳。

结直肠癌肝转移患者白细胞介素-18、促肝再生磷酸酶蛋白3表达与PI3K及AKT蛋白的关系

目的探讨结直肠癌肝转移患者癌组织中白细胞介素-18(IL-18)、促肝再生磷酸酶蛋白3(PRL-3)表达与临床病理特征及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝苏氨酸蛋白激酶B(AKT)蛋白水平的关系。方法选取2019年10月至2021年10月于上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院行同期切除术的85例结直肠癌肝转移患者(肝转移组)的癌组织样本及癌旁正常组织(距肿瘤切缘4 cm),以及同期65例未发生肝转移结直肠癌患者(未肝转移组)的癌组织为研究对象。免疫组织化学S-P法检测不同组织中IL-18、PRL-3阳性表达率,Western blot检测癌组织中PI3K、p-AKT相对表达水平,分析IL-18、PRL-3与患者临床病理的关系及其与PI3K、p-AKT表达的相关性。结果与未肝转移组比较,肝转移组TNM分期IV期、低分化程度比例较高(P<0.05)。肝转移患者癌组织中IL-18、PRL-3、PI3K、p-AKT蛋白阳性表达率高于其癌旁正常组织和未肝转移患者癌组织,且未肝转移患者癌组织中IL-18、PRL-3、PI3K、p-AKT蛋白阳性表达率高于肝转移患者癌旁正常组织(P<0.05)。相关性分析示,肝转移患者癌组织中IL-18、PRL-3表达与PI3K、p-AKT均呈正相关(P<0.05);未转移癌组织中IL-18表达与PI3K、p-AKT均呈正相关(P<0.05),PRL-3表达与p-AKT均呈正相关(P<0.05),且IL-18与PRL-3呈显著正相关(P<0.05)。结论IL-18、PRL-3可能通过激活PI3K/AKT信号通路从而参与结直肠癌肝转移过程。

基于瘦素介导的PI3K/AKT通路探讨二甲双胍对脑卒中相关性肺炎大鼠肺损伤的作用机制

目的:探究二甲双胍对脑卒中相关性肺炎大鼠肺损伤的作用及其对瘦素介导的磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路的影响。方法:无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠85只,随机选取12只作为假手术组,其余73只进行模型制备,其中1只造模失败,剩余72只随机分为模型组、瘦素组、瘦素+PI3K/AKT抑制剂组、二甲双胍组、二甲双胍+瘦素组、二甲双胍+PI3K/AKT激活剂组,每组12只。测定大鼠动脉血氧分压(PaO_(2)),计算氧合指数(OI);测定各组大鼠血清瘦素、支气管肺泡灌洗液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、C反应蛋白(CRP)水平;计算大鼠右肺湿质量/干质量;观察大鼠左肺组织病理;测定肺组织PI3K/AKT通路蛋白水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠肺部损伤加重,PaO_(2)、OI水平降低(P<0.05),血清瘦素、TNF-α、IL-1β、CRP水平,右肺湿质量/干质量,大鼠肺组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT升高(P<0.05)。与模型组比较,瘦素组大鼠肺部损伤加重,PaO_(2)、OI水平降低(P<0.05),血清瘦素、TNF-α、IL-1β、CRP水平,右肺湿质量/干质量,大鼠肺组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT升高(P<0.05);二甲双胍组大鼠肺部损伤减轻,PaO_(2)、OI水平升高(P<0.05),血清瘦素、TNF-α、IL-1β、CRP水平,右肺湿质量/干质量,大鼠肺组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT降低(P<0.05)。与瘦素组比较,瘦素+PI3K/AKT抑制剂组、二甲双胍+瘦素组大鼠肺部损伤减轻,PaO_(2)、OI水平升高(P<0.05),血清瘦素、TNF-α、IL-1β、CRP水平,右肺湿质量/干质量,大鼠肺组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT降低(P<0.05)。与二甲双胍组比较,二甲双胍+PI3K/AKT激活剂组大鼠肺部损伤加重,PaO_(2)、OI水平降低(P<0.05),血清瘦素、TNF-α、IL-1β、CRP水平,右肺湿质量/干质量,大鼠肺组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT升高(P<0.05)。结论:二甲双胍对脑卒中相关性肺炎大鼠肺损伤有保护作用,可能是通过抑制瘦素介导的PI3K/AKT通路实现的。

茯苓酸调节PI3K/AKT/NF-κB信号通路对大鼠幽门螺旋杆菌相关性胃炎的治疗作用

目的 探讨茯苓酸(PA)对大鼠幽门螺旋杆菌(Hp)相关性胃炎的治疗效果及作用机制。方法 建立Hp相关性胃炎大鼠模型;所有大鼠分为对照组(CT组)、模型组(M组)、PA低剂量组(PA L组)和PA高剂量组(PA H组)、PA H+磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)激活剂(740 Y-P)组;评估各组大鼠胃黏膜损伤指数(UI),透射电子显微镜观察胃黏膜细胞形态学,HE染色评价胃黏膜病理学特征,ELISA检测胃组织白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平,Western blot法检测PI3K、磷酸化-PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子(NF)-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达。结果 与CT组比较,M组大鼠胃黏膜糜烂,上皮水肿、充血、溃疡严重,上皮细胞固缩,炎性细胞浸润,UI、IL-6、TNF-α、iNOS以及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平升高,IL-10和SOD水平降低(P<0.05);与M组比较,PA L组、PA H组大鼠胃黏膜损伤改善,炎性细胞浸润减少,UI、IL-6、TNF-α、iNOS以及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平降低,IL-10和SOD水平升高(P<0.05);与PA H组比较,PA H+740 Y-P组大鼠胃黏膜病理损伤加重,上皮细胞固缩,UI、IL-6、TNF-α、iNOS以及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平升高,IL-10和SOD水平降低(P<0.05)。结论 PA可能通过抑制PI3K/AKT/NF-κB信号通路发挥对大鼠Hp相关性胃炎的治疗作用。

基于PI3K/PKB信号通路变化探究清胰汤在急性胰腺炎相关性肺损伤治疗中的应用价值及作用机制

目的:基于磷脂酰肌醇3羟激酶(PI3K)/磷酸化蛋白激酶B(PKB)信号通路变化探究清胰汤在急性胰腺炎相关性肺损伤治疗中的应用价值及作用机制。方法:选取2020年8月~2022年11月我院收治的98例急性胰腺炎相关性肺损伤患者,随机分为对照组与观察组各49例,对照组给予常规西药治疗,观察组在对照组基础上加用中药清胰汤治疗,均治疗2周,比较两组患者的临床疗效,肠胃恢复状况(发热、腹胀腹痛、恶心呕吐及肠鸣音恢复时间),血氧指标[血氧分压(PaO_(2))、氧合指数(OI)水平],血清学指标[淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LPS)、PI3K、PKB水平],生活质量[生活质量核心问卷(QLQ-C30)评分]以及不良反应发生情况。结果:治疗后,观察组患者的总有效率为91.84%高于对照组的73.47%(P<0.05);观察组患者恶心呕吐、腹胀腹痛、发热、肠鸣音等肠胃状况恢复时间均短于对照组(P<0.05);观察组患者的PaO_(2)、OI水平均高于对照组(P<0.05);观察组患者的血清AMY、LPS、PI3K、PKB水平均低于对照组(P<0.05);观察组患者的QLQ-C30评分低于对照组(P<0.05);两组患者均未见有明显严重不良反应发生,且两组间不良反应发生率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:清胰汤对急性胰腺炎相关性肺损伤有较好的临床治疗效果,可有效缓解患者症状,提高生活质量,用药安全性好,PI3K/PKB信号通路激活被抑制是其主要作用机制之一。

老年结直肠癌肝转移病人IL-18、PRL-3表达与PI3K/AKT信号通路关系探究

目的 探讨老年结直肠癌(CRC)肝转移病人IL-18、促肝再生磷酸酶蛋白(PRL-3)的表达水平与磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路关系。方法 选取我院2019年6月至2021年6月100例老年CRC病人,其中肝转移病人34例,非肝转移病人66例。采用蛋白免疫印迹法检测病人癌组织及癌旁组织中IL-18、PRL-3、PI3K、AKT蛋白表达情况并进行比较分析。采用Logistic回归分析影响老年CRC肝转移的危险因素,Pearson相关系数评估肝转移病人IL-18、PRL-3表达与PI3K/AKT信号通路的关系。结果 癌组织中IL-18、PRL-3、PI3K及AKT蛋白表达水平均高于癌旁组织(P<0.05);肝转移病人癌组织中IL-18、PRL-3、PI3K及AKT蛋白表达水平均高于非肝转移病人(P<0.05);肝转移病人癌灶浸润深度T3~T4、低中分化、淋巴结转移比例均高于非肝转移病人(P<0.05);Logistic回归分析显示,IL-18、PRL-3、PI3K及AKT蛋白阳性表达、癌灶浸润深度T3~T4、低中分化、淋巴结转移均为老年CRC肝转移的独立危险因素(P<0.05);Pearson相关分析显示,老年CRC肝转移病人癌组织中IL-18、PRL-3蛋白表达水平与PI3K、AKT蛋白表达水平呈正相关(P<0.05)。结论 老年CRC肝转移病人IL-18、PRL-3呈高表达状态,两者表达水平均与PI3K、AKT蛋白水平呈正相关,IL-18、PRL-3是老年CRC肝转移的独立危险因素。

血清AFP水平和组织GPC3、VEGF蛋白表达在丙肝相关肝癌中的意义

目的探讨在慢性丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染患者中检测血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)水平和组织中磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican-3,GPC3)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达在丙肝相关肝癌(HCV-related hepatocellular carcinoma,HCV-HCC)中的临床应用价值。方法采用电化学发光分析技术和免疫组化染色技术检测30例慢性丙型肝炎(chromc hepatitis C,CHC)、35例丙肝相关肝硬化(HCV-related liver cirrhosis,HCV-Cirr)、30例HCV-HCC患者和30例对照组血清AFP水平和组织中GPC3、VEGF蛋白的表达,分析评价在慢性HCV感染患者肝脏病变的不同阶段中血清AFP水平变化和组织中GPC3、VEGF蛋白的表达情况。结果血清AFP水平在HCV-HCC组和HCV-Cirr组均显著高于CHC组和对照组(P <0. 05),但HCV-HCC组与HCV-Cirr组之间血清AFP水平差异无统计学意义(P> 0. 05)。GPC3、VEGF蛋白在对照组无阳性表达,在HCV-HCC组的阳性表达率分别为86. 7%(26/30)、76. 7%(23/30),显著高于HCV-Cirr组的31. 4%(11/35)和40. 0%(14/35)(χ~2=20. 10、P <0. 001;χ~2=8. 86、P <0. 05)和CHC组的10. 0%(3/30)、16. 7%(5/30)(χ~2=35. 31、P <0. 001,χ~2=21. 69、P <0. 001),且HCV-Cirr组显著高于CHC组(χ~2=4. 39、P <0. 05,χ~2=4. 25、P <0. 05)。GPC3蛋白在中、低分化肝癌组中的阳性率显著高于高分化组(P <0. 05);而VEGF在高分化组与中、低分化组之间差异无统计学意义(P=0. 120)。HCV-HCC组中10例血清AFP阴性者组织中GPC3、VEGF蛋白阳性表达分别为6例和5例,且两者联合检测的阳性率为70. 0%(7/10); HCV-HCC组中GPC3与VEGF蛋白表达呈正相关(r=0. 479、P=0. 03)。结论 GPC3和VEGF蛋白在HCV-HCC组织中高表达与HCV-HCC的发生、发展有关。在HCV-Cirr患者的持续监测中联合检测血清AFP和组织中GCP3、VEGF蛋白有助于提高临床对HCV-HCC的鉴别水平。

PI3K/Akt通路蛋白表达对胃癌术后1年内骨转移的预测分析

目的:探讨胃癌组织磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路蛋白表达对术后1年内骨转移的预测价值。方法:取112例胃癌手术切除组织,分别采用免疫组化(SP)、蛋白免疫印迹法(WB)检测PI3K/Akt通路蛋白表达。对比胃癌组织、癌旁组织的蛋白阳性表达率和相对表达量;比较术后1年内骨转移发生者和未发生者蛋白阳性表达率和相对表达量;绘制受试者工作特征曲线,分析上述蛋白相对表达量对胃癌手术患者术后1年内骨转移的预测效能。结果:胃癌组织PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白阳性表达率及PI3K蛋白相对表达、p-Akt、p-mTOR水平均高于癌旁组织(P<0.05);术后1年内骨转移发生率为27.68%,发生骨转移患者癌组织PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白阳性表达率及PI3K蛋白相对表达、p-Akt、p-mTOR水平均高于未发生者(P<0.05);PI3K蛋白、p-Akt、p-mTOR预测术后1年内骨转移的最佳截断点分别为1.25、1.11、0.92,三者联合预测术后1年内骨转移发生的灵敏度、特异度、准确度、AUC分别为90.32%、90.12%、82.79%、0.889,其中灵敏度、准确度、AUC均高于单独预测。结论:胃癌组织PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平均较高,且术后1年内发生骨转移者PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平更高,三者联合对胃癌切除术后1年内骨转移发生率有良好的预测效能。

SREBP2及PI3K/Akt/mTORC2在喉癌中的表达及相关性研究

目的探究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白C2(mTORC2)信号通路分子及人胆固醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)分子在喉癌组织中的表达情况。方法选取本院2019年1月至2022年6月收治的原发性喉癌患者60例,取其肿瘤组织及癌旁组织样本,以免疫组织化学法测定PI3K、AKT、mTORC2及SREBP2表达情况并进行比较。结果肿瘤组织PI3K(88.3%vs.40.0%)、AKT(76.7%vs.31.7%)、mTORC2(78.3%vs.21.7%)、SERBP2(65.0%vs.8.3%)阳性表达率高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。肿瘤直径大于或等于3 cm患者AKT、mTORC2、SERBP2阳性表达率高于肿瘤直径小于3 cm患者,差异均有统计学意义(P<0.05);临床分期Ⅲ~Ⅳ期患者AKT、SERBP2阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05);不同分化程度患者mTORC2、SERBP2阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。PI3K、AKT、mTORC2、SERBP2阳性表达患者2年生存率低于阴性表达患者,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论喉癌患者肿瘤组织中PI3K/AKT/mTORC2信号通路分子及SREBP2均呈高表达,与肿瘤直径、临床分期及分化程度有相关性,是潜在的喉癌靶向代谢重编程治疗的靶点。

LncRNA MALAT1通过靶向miR-146a调节PI3K/Akt信号通路影响胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肺腺癌转移相关转录子1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)通过调节miR-146a对胃癌(gastric cancer, GC)细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法 收集GC组织和配对正常胃上皮组织,将GC细胞MNK-45分为空白对照(blank control, BC)组(未转染)、MALAT1 siRNA-NC组(转染MALAT1 siRNA-NC)、MALAT1 siRNA组(转染MALAT1 siRNA)、miR-146a mimics-NC组(转染miR-146a mimics-NC)、miR-146a mimics组(转染miR-146a mimics)、MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor-NC组(共转染MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor-NC)、MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor组(共转染MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor)。定量荧光PCR(qRT-PCR)检测胃组织或细胞中MALAT1、miR-146a表达量;CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力;RNA pull down实验、双荧光素酶报告实验分析MALAT1和miR-146a的结合情况;Western blot检测磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路蛋白及c-Myc、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)蛋白表达量。结果 转染MALAT1 siRNA可明显降低MNK-45细胞的MALAT1表达量,敲低MALAT1或过表达miR-146a可降低细胞活力、克隆能力、迁移和侵袭,增加miR-146a表达,降低PI3Kp85α、PI3Kp85β、c-Myc、MMP9蛋白表达量及p-Akt/Akt水平;MALAT1可结合并靶向下调miR-146a表达;低表达miR-146a可逆转敲低MALAT1对MNK-45细胞增殖、迁移和侵袭的抑制效应。结论 MALAT1可能作为ceRNA吸附并降解miR-146a,敲低MALAT1可上调miR-146a表达,并通过PI3K/Akt通路抑制GC细胞增殖、迁移和侵袭。

右美托咪定复合罗哌卡因髂筋膜间隙阻滞用于老年髋关节置换术的镇痛效果及对PI3K-Akt信号通路的影响

目的研究右美托咪定复合罗哌卡因髂筋膜间隙阻滞用于老年髋关节置换术的镇痛效果及对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法前瞻性选取2020年5月至2022年5月于南通市海门区人民医院接受髋关节置换术治疗的患者100例,按随机数字表法将其分为观察组和对照组,每组各50例。两组患者均行髋关节置换术,对照组患者行罗哌卡因髂筋膜间隙阻滞,观察组患者行右美托咪定复合罗哌卡因髂筋膜间隙阻滞。比较两组围手术期指标、血流动力学(心率、舒张压、收缩压)、镇痛效果[视觉模拟评分法(VAS)评分、Ramsay镇静评分]、认知功能[简易智能精神状态检查(MMSE)量表]、PI3K-Akt信号通路标志性蛋白(PI3K、Akt)表达水平及不良反应发生情况。结果两组手术时间、麻醉时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05),观察组术中出血量、输液量均低于较对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组麻醉诱导后5 min、插管、拔管时心率、收缩压、舒张压均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后2、6、12 h,观察组的VAS评分分别为(1.23±0.17)、(3.02±0.43)、(3.16±0.44)分,均低于对照组[(1.43±0.20)、(3.47±0.48)、(3.61±0.51)分],Ramsay镇静评分分别为(2.17±0.31)、(2.96±0.42)、(3.49±0.49)分,均高于对照组[(1.83±0.26)、(2.14±0.30)、(2.91±0.41)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。术后1、3、7 d,观察组认知功能评分分别为(27.58±3.94)、(28.63±4.09)、(29.16±4.15)分,均高于对照组[(24.13±3.30)、(24.70±3.37)、(25.05±3.61)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。术后6、12 h,观察组PI3K蛋白表达水平分别为0.90±0.13、0.79±0.11,Akt蛋白表达水平分别为1.09±0.15、1.10±0.15,均高于对照组(0.73±0.10、0.65±0.09和0.91±0.13、0.94±0.14),差异均有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论右美托咪定复合罗哌卡因髂筋膜间隙阻滞用于老年髋关节置换术具有出血量、输液量较少的优势,同时能使术中血流动力学维持稳定,降低术后疼痛,对PI3K-Akt信号通路有一定调节作用。