甲型肝炎病毒和戊型肝炎病毒免疫球蛋白抗体与肝功能指标表达水平

目的探究甲型肝炎病毒(HAV)和戊型肝炎病毒(HEV)、免疫球蛋白M(IgM)抗体与肝功能指标的相关性。方法收集甲型病毒性肝炎、戊型病毒性肝炎患者为研究对象,测定纳入者HAV-IgM抗体、HEV-IgM抗体和肝功能指标。依据患者病毒-IgM抗体检测结果,将其分为抗体阴性组和阳性组。比较两组肝功能指标表达水平。结果与病毒-IgM抗体阴性组比,抗体阳性组血清AST、ALT、AST/ALT、DBIL、TBIL、TBA水平升高(P<0.05),且病毒-IgM抗体强阳性表达者血清AST、ALT、AST/ALT、DBIL、TBIL、TBA水平高于病毒-IgM抗体中度强度表达者和病毒-IgM抗体弱度表达者,病毒-IgM抗体中度表达者血清水平高于病毒-IgM抗体弱度表达者(P<0.05)。结论HAV-IgM抗体和HEV-IgM抗体阳性,甲型病毒性肝炎和戊型病毒性肝炎患者更易出现肝功能损伤,且病毒-IgM抗体表达强度越高,肝损伤越严重。

血游离轻链与M蛋白检测在膜性肾病合并MGUS患者中的临床意义

目的探讨血游离轻链(sFLC)与M蛋白检测在膜性肾病(MN)合并意义未明单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)患者中的临床意义。方法研究采用前瞻性设计,纳入2021年1月至2023年10月在西安交通大学第一附属医院榆林医院诊治的82例MN患者,根据是否合并MGUS分为MN组(53例)和merge组(29例)。merge组男18例、女11例,年龄(52.64±7.33)岁;MN组男33例、女20例,年龄(55.35±6.89)岁。采用血清学检测方法对患者进行sFLC[κ轻链(sFLCκ)、λ轻链(sFLCλ)]与M蛋白检测,并通过logistic回归分析探讨其与MN合并MGUS的关系,并使用受试者操作特征曲线(ROC)检测sFLC联合M蛋白在MN合并MGUS诊断中的性能。统计学方法采用t检验、χ^(2)检验。结果merge组红细胞沉降率(ESR)、血清肌酐(Scr)、C反应蛋白(CRP)和血尿素氮(BUN)指标均高于MN组[(48.52±5.65)mm/h比(36.34±4.35)mm/h、(84.51±10.26)μmol/L比(72.65±8.25)μmol/L、(2.18±0.64)mg/L比(1.26±0.35)mg/L、(6.45±1.27)mmol/L比(5.12±1.12)mmol/L],差异均有统计学意义(t=10.884、5.702、8.434、4.902,均P<0.05)。merge组阳性率为96.55%(28/29),高于MN组的3.77%(2/53),差异有统计学意义(χ^(2)=69.543,P<0.05)。merge组sFLCκ水平及sFLCκ/λ比值均高于MN组[(453.51±123.57)mg/L比(62.84±100.25)mg/L、(15.89±2.84)比(1.11±0.26)],sFLCλ水平低于MN组[(28.54±23.84)mg/L比(56.77±18.35)mg/L],差异均有统计学意义(t=15.520、37.791、5.979,均P<0.05)。相关性分析结果显示,sFLCκ、sFLCκ/λ比值与肾功能损害及炎症水平有显著相关性,而sFLCλ相关性相对较弱。逻辑回归分析显示,sFLCκ、sFLCκ/λ比值对诊断具有显著影响,而sFLCλ具有负向影响。ROC分析显示,sFLC联合M蛋白进行诊断时,灵敏度为96.6%,特异度为77.4%,约登指数为73.9%,曲线下面积为0.933,95%CI 0.884~0.982。结论sFLC与M蛋白检测对于MN合并MGUS患者的诊断和疾病活动度评估具有重要临床意义,与肾功能损害程度密切相关,可为监测和治疗效果评估提供重要参考。

表达分泌型与膜结合型HH7N9 AIV血凝素蛋白重组NDV载体疫苗的免疫原性比较

研究以新城疫病毒(NDV)弱毒株LX为载体,构建了一株表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)血凝素(HA)胞外区的重组病毒(LXs HA),并与一株前期构建的表达膜结合型HA的重组病毒(LXHAF)进行比较。生物学特性评价显示,两株病毒均为弱毒且在鸡胚中的繁殖性能较强。此外,LXs HA主要以分泌形式表达HA蛋白,而LXHAF则以膜结合形式表达HA。鸡的免疫试验显示,两株重组病毒在一次免疫后均能诱导针对NDV载体的血凝抑制抗体,但LXHAF能够诱导较高水平的H7N9 AIV特异性Ig Y抗体,而LXs HA不能诱导H7N9 AIV抗体应答。结果表明,表达膜结合型HA的重组病毒具有针对H7N9 AIV较好的免疫原性,而表达分泌型HA的重组病毒免疫原性较差。这为研发H7N9亚型禽流感载体疫苗提供新的信息与参考。

血清APOL-1、TN、APOM及免疫球蛋白轻链检测在诊断寒湿型腰椎间盘突出症中的应用价值

目的:分析血清载脂蛋白L1(APOL-1)、四连接素(TN)、载脂蛋白M(APOM)及免疫球蛋白轻链检测在诊断寒湿型腰椎间盘突出症中的应用价值。方法:将2018年10月至2019年10月期间湖南中医药高等专科学校附属第一医院收治的23例寒湿型腰椎间盘突出症患者及同期在该院进行健康体检的20例健康人作为研究对象。将其中20例健康人设为对照组,将其中23例寒湿型腰椎间盘突出症患者设为观察组。对两组受检者均进行血清载脂蛋白L1(APOL-1)、四连接素(TN)、载脂蛋白M(APOM)、免疫球蛋白轻链检测。然后,对比两组受检者血清APOL-1、TN、APOM、免疫球蛋白轻链的水平。结果:与对照组受检者相比,观察组患者血清APOL-1的水平更高,其血清TN、APOM、免疫球蛋白轻链的水平均更低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:血清APOL-1、TN、APOM及免疫球蛋白轻链检测在诊断寒湿型腰椎间盘突出症患者病情中的应用价值较高。

前列腺癌PC-3M细胞株膜结合型唾液酸酶的活性测定与基因表达

目的 :研究前列腺癌 PC- 3M细胞株膜结合型唾液酸酶 ( hm SD)的活性和基因表达。方法 :收集指数生长期的 PC- 3M细胞 ,匀浆后离心取上清 ,与底物共同孵育 ,以 TBA显色反应检测所生成的唾液酸 ,计算唾液酸酶活性 ;应用 RT- PCR方法检测 hm SD的 m RNA表达。结果 :在 PC- 3M细胞株可检测到 hm SD活性及其 RNA的表达。结论 :PC- 3M细胞在基因和蛋白水平有 hm SD的表达。

免疫球蛋白M(lgM)非标记免疫传感器的研究

本文介绍用醋酸纤维素-戊二醛-己二胺-抗体抗原膜与专用原电极研制的lgM非标记免疫传感器.采用均匀设计法优化了膜结合抗原抗体的实验条件,研究了抗体浓度对电极灵敏度及线性范围的影响,并对抗原抗体结合时间、测试介质等条件进行了选择.与同类电极相比,该电极使用方便、响应快、灵敏度高、重现性和稳定性较好.在最佳测试条件下,电极线性范围47~850μg/mL,相关系数0.9973.用于血清样品测量,取得满意结果.

丹参酮ⅡA对HCY诱导增殖血管平滑肌细胞ERS相关基因免疫球蛋白重链结合蛋白表达的影响

目的探究丹参酮ⅡA对同型半胱氨酸(HCY)诱导增殖血管平滑肌细胞(VSMC)内质网应激(ERS)相关基因免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)表达的影响。方法通过HCY诱导构建兔VSMC增殖模型,给予瑞舒伐他汀或不同浓度的丹参酮ⅡA进行培养,采用实时荧光定量PCR测定实验兔Bip mRNA基因表达。结果模型组Bip mRNA表达(3.27±0.30)高于空白对照组(0.13±0.35),差异具有统计学意义(P<0.05);丹参酮ⅡA组0.5 mg/L剂量的Bip mRNA表达(4.53±0.60)、1.0 mg/L剂量的Bip mRNA表达(12.71±0.27)、瑞舒伐他汀组Bip mRNA表达(8.80±0.21)均高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA对HCY诱导增殖VSMC ERS相关基因Bip表达具有明显作用。

环孢素联合激素治疗抗M型磷脂酶A2受体阳性膜性肾病的效果分析

目的:探讨环孢素(CsA)联合激素治疗抗M型磷脂酶A2受体(PLA2R)阳性膜性肾病(MN)的效果。方法:将吴川市人民医院2018年5月—2021年5月收治的61例PLA2R阳性MN患者按照随机数表法分为对照组和观察组,两组均接受醋酸泼尼松片治疗,在此基础上,对照组30例给予环磷酰胺治疗,观察组31例给予CsA治疗。观察两组的临床疗效、肾功能、免疫功能及不良反应发生率。结果:观察组总有效率(93.55%)高于对照组(70.00%),差异有统计学意义(P<0.05);治疗前,两组血清肌酐(Scr)、血清白蛋白(ALB)、内生肌酐清除率(Ccr)及估算的肾小球滤过率(eGFR)比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗6个月后,两组Scr均下降且观察组低于对照组,两组ALB、Ccr及e GFR均升高且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组成熟T淋巴细胞(CD3^(+))、诱导性T细胞/辅助性T细胞(CD4^(+))、抑制性T细胞/细胞毒性T细胞(CD8^(+))比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗6个月后,两组CD3^(+)、CD4^(+)均高于治疗前且观察组高于对照组,两组CD8^(+)低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率(9.68%)低于对照组(33.33%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CsA联合激素治疗PLA2R阳性MN患者,通过有效调节免疫功能,改善肾功能,进而提高临床疗效且不良反应发生率更低。

HCG联合免疫球蛋白对溴隐亭致大鼠流产模型Th1/Th2型细胞因子的影响

目的:研究人绒毛膜促性腺激素(HCG)联合免疫球蛋白对溴隐亭致大鼠流产模型蜕膜局部Th1/Th2型细胞因子及妊娠结局的影响。方法:采用孕第6、7、8天大鼠皮下注射溴隐亭0.3mg/kg,诱导SD大鼠流产模型,随机分为4组:即流产模型(A)组、HCG(B)组、HCG联合免疫球蛋白(IVIG)(C)组及正常妊娠(D)组,每组10只,妊娠第14天麻醉处死并观察妊娠结局,取胚胎吸收邻近的蜕膜研磨并裂解,离心后取上清液,-80℃保存。ELISA方法测定标本中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)以及白细胞介素-10(IL-10)的水平。结果:胚胎吸收率:A组明显高于其余3组,B组高于C、D组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Th1型细胞因子(TNF-α、IFN-γ)水平,A组明显高于其余3组,差异有统计学意义(P<0.05);Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)水平,A组明显低于其余3组,差异均有统计学意义(P<0.05);IL-10细胞因子水平,B、D组低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HCG联合免疫球蛋白通过上调蜕膜局部细胞因子IL-10水平来改善胚胎发育,二者具有协同作用。

免疫固定电泳分型技术在M蛋白相关疾病诊断中的应用

目的探讨免疫固定分型技术在M蛋白相关疾病诊断中的应用价值。方法采用免疫球蛋白定量、血清及尿蛋白电泳、血清及尿本周蛋白免疫固定电泳及其他试验,对2例患者标本进行检测和确认。结果结合实验室检测及患者临床体征,1例患者确诊为血清单克隆IgA-κ轻链型多发性骨髓,1例患者确诊为血清IgM-λ型巨球蛋白血症。结论随着电泳技术发展,免疫固定电泳分型技术在M蛋白鉴定中具有较高的特异性和敏感性,应加强其临床应用。

成人特发性膜性肾病血清抗M型磷脂酶A2受体抗体与病情的相关性研究

目的通过研究成人特发性膜性肾病(IMN)血清抗M型磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体的阳性滴度与其他实验室指标的相关性,进一步探讨抗PLA2R抗体对IMN诊断及病情评估的作用。方法选取B超引导下肾穿刺活检证实为IMN患者55例,追踪观察6个月,同时选取15例健康体检者为对照组,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清抗PLA2R抗体,同时对IMN患者24 h尿蛋白定量、血清总蛋白、血清白蛋白、血清总胆固醇、血清肌酐进行检测。结果经过3和6个月治疗后,血清抗PLA2R抗体较治疗前降低(P<0.05)。55例IMN患者治疗前血清抗PLA2R抗体阳性患者47例,阳性率为85.45%;治疗3个月后血清抗PLA2R抗体阳性患者36例,阳性率为65.45%,治疗6个月后血清抗PLA2R抗体阳性患者25例,阳性率45.45%。且治疗前血清抗PLA2R抗体滴度与尿蛋白定量呈正相关,与血清白蛋白、总蛋白呈负相关;治疗6个月后血清抗PLA2R抗体滴度与尿蛋白定量呈正相关,与血清白蛋白、总蛋白呈负相关。结论血清抗PLA2R抗体可作为IMN血清学诊断的指标之一,血清抗PLA2R抗体滴度下降与尿蛋白的减少密切相关,与疾病预后、病情转归也可能相关。

T细胞大颗粒淋巴细胞白血病伴单克隆IgM相关轻链型淀粉样变性1例报道

T细胞大颗粒淋巴细胞白血病(T-LGLL)是一种少见的T淋巴细胞增殖性疾病,年发病率约(0.2~0.72)/100万[1]。而轻链型淀粉样变性(AL)是来源于单克隆浆细胞或B细胞的淋巴增殖性疾病,年发病率约(5.1~12.8)/100万[2],一般AL中,最常见的单克隆免疫球蛋白(Ig)为IgA、IgG,而单克隆IgM相关AL(IgM-AL)少见,仅占AL 5%~7%[3]。T-LGLL和IgM-AL均为罕见病,并存者则更为罕见,目前国内尚未见报告,我科近期诊治1例,现报道如下。

肾组织M型磷脂酶A2受体免疫组织化学染色结果的研究

目的探讨肾组织M型磷脂酶A2受体(PLA2R)免疫组织化学染色阳性的标准。方法回顾性分析2010年1月至2020年12月首都医科大学附属北京安贞医院诊断为特发性膜性肾病(IMN)583例患者的临床资料。根据肾组织PLA2R免疫组织化学染色结果将患者分为PLA2R阳性组、PLA2R可疑阳性组和PLA2R阴性组。收集3组临床资料及免疫球蛋白G(IgG)亚类分布情况。比较PLA2R可疑阳性组和PLA2R阴性组1型血小板反应蛋白7A域(THSD7A)和神经表皮生长因子样1蛋白(NELL-1)免疫组织化学染色情况。结果肾组织PLA2R免疫组织化学染色结果显示,PLA2R阳性组患者548例、PLA2R可疑阳性组14例、PLA2R阴性组21例。PLA2R阳性组低倍镜可见PLA2R阳性沉积在肾小球,强阳性,呈深红色;高倍镜见上皮下沉积、沿毛细血管壁分布;油镜下形态为点-线样、粗或细的颗粒状。3组患者性别、年龄、尿蛋白定量、血清白蛋白、血肌酐水平及肾病综合征比例差异均无统计学意义(均P> 0.05)。PLA2R阳性组血清抗PLA2R抗体阳性比例高于PLA2R阴性组、PLA2R可疑阳性组,IgG4阳性率、IgG4阳性为主比例均高于PLA2R阴性组、PLA2R可疑阳性组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。PLA2R阴性组与PLA2R可疑阳性组上述指标差异均无统计学意义(均P> 0.05)。PLA2R可疑阳性组THSD7A阳性、NELL-1阳性、THSD7A和NELL-1均阴性比例与PLA2R阴性组比较[14.3%(2/14)比14.3%(3/21)、57.1%(8/14)比28.6%(6/21)、28.6%(4/14)比57.1%(12/21)],差异均无统计学意义(均P> 0.05)。结论 PLA2R可疑阳性与PLA2R阴性IMN患者临床及相关病理资料结果表现较为一致,因此PLA2R可疑阳性的沉积形态应该判读为PLA2R阴性。PLA2R阳性标准为PLA2R在肾小球上皮下沿毛细血管壁呈点-线样、粗或细的颗粒状沉积。

肌球蛋白结合蛋白C的表达和鉴定

目的:探讨优化原核表达方法以及用亲和层析的方法制备重组人快型肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC2)。方法:根据MYBPC2的序列设计一对引物,在上下游引物的5’端分别加上BamHI和HindⅢ酶切位点。以健康人骨骼肌cDNA为模版,扩增第284位至第579位氨基酸残基对应的碱基序列,经双酶切后插入pMalc-5e载体中,测序鉴定重组质粒的序列,将构建好的重组质粒转化大肠杆菌中,IPTG诱导重组蛋白MYBPC2-MBP的表达,亲和层析纯化重组蛋白,蛋白电泳法鉴定蛋白的分子量及纯度,测定蛋白浓度并估算蛋白纯化后得率。用商品化的抗MYBPC2抗体证实所表达蛋白序列的正确性。以纯化的蛋白免疫动物获得动物免疫血清,用Western Blot的方法鉴定此蛋白的免疫原性。结果:人MYBPC2蛋白表达载体构建成功,每升大肠杆菌菌液可生产纯化后的重组MYBPC2蛋白约30mg,Western Blot显示重组蛋白与其抗体及抗血清特异结合。结论:本方法可以高效制备生产人MYBPC2蛋白片段,具备良好的抗原特异性和免疫原性。

抗M型PLA_2R抗体在特发性膜性肾病中的研究进展

膜性肾病（membranous nephropathy, MN）是临床上以无症状蛋白尿或肾病综合征为主要表现,病理以肾小球基底膜上皮下弥漫的免疫复合物沉积伴基底膜弥漫增厚为特点的一组疾病,分为特发性和继发性.特发性膜性肾病（idiopathic membranous nephropathy,IMN）病因不明,继发性MN常继发于肿瘤、感染、药物和自身免疫性疾病等,在诊断为IMN之前须排除继发因素[1].MN是白种人肾病综合征（nephrotic syndrome,NS）的最常见病因,约占25%～40%[2],在国内南京军区总院的单中心研究报道中,其占原发性肾小球疾病的9.98%[3].

M型磷脂酶A2受体及其抗体与膜性肾病关系研究进展

膜性肾病（MN）是成人肾病综合征最为常见的病理类型之一,占原发性肾小球肾炎的9.89％～30％,其特征性病理改变为肾小球上皮细胞下免疫复合物沉积伴肾小球基底膜弥漫性增厚,根据其病因可以分为原发性、继发性和家族性.研究发现,M型磷脂酶A2受体（PLA2R1）及其抗体在MN病因诊断及预后评估中具有重要作用,现将其做一概述,报道如下.

成人特发性膜性肾病肾组织M型磷脂酶A2受体1抗原的检测

目的检测在成人特发性膜性肾病患者肾组织中M型磷脂酶A2受体1(PLA2R1)抗原的阳性率及其与特发性膜性肾病关系。方法选取经肾活检证实的108例肾小球疾病患者,其中包括41例特发性膜性肾病、2例乙型肝炎病毒相关性膜性肾病、8例V型狼疮肾炎、27例Ig A肾病、19例微小病变性肾病、5例轻度系膜增生性肾小球肾炎和6例局灶节段性肾小球硬化。应用间接免疫荧光法检测患者肾组织中PLA2R1抗原。结果 41例特发性膜性肾病患者中35例肾组织PLA2R1抗原阳性,阳性率为85.37%。其中PLA2R1沿着肾小球毛细血管襻呈细颗粒状沉积。在V型狼疮性肾炎、乙型肝炎病毒相关性膜性肾病及其他肾小球疾病肾组织中均未发现PLA2R1抗原沉积。特发性膜性肾病PLA2R1阳性患者与PLA2R1阴性患者相比较,年龄、血肌酐、血清白蛋白、24 h尿蛋白定量均无统计学差异(P>0.05)。结论在成人特发性膜性肾病患者肾组织中应用间接免疫荧光法证实PLA2R1抗原的阳性率为85.37%,PLA2R1阳性与阴性患者在临床表现上无统计学差异。

尿免疫球蛋白和补体C_2测定对肾脏病变程度和激素治疗效果的判定

我院自1987年8月至1988年2月,对40例肾脏病人测定尿免疫球蛋自、C3来判断肾小球病损程度及激素治疗效果的研究,现报告于下。资料与方法肾病组40例中男37人、女3人,年龄12～70岁。正常人组20名,男12、女8例,年龄19～40岁。急性肾炎4例,慢性肾炎普通型2例、高血压型2例,肾病综合征Ⅰ型18例、Ⅱ型11例,狼疮性肾炎3例。有18例作了肾活检,其中系膜增生性肾炎9例,膜增生性肾炎2例,膜性肾炎3例,硬化性肾炎3例,微小病变性肾病1例。

血清抗M型磷脂酶A2受体抗体对特发性膜性肾病的诊断价值

目的研究血清抗M型磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体对特发性膜性肾病(IMN)的诊断价值。方法回顾性分析纳入2019年1月至2020年1月于南京医科大学第一附属医院住院且经肾组织活检病理诊断为IMN的75例患者的临床资料(IMN组)。另选取同期于本院住院治疗的35例非IMN的肾病患者(非IMN组)。采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测患者血清抗PLA2R抗体。比较2组血清、尿液中生化及免疫指标水平。结果IMN组血清抗PLA2R抗体水平、抗PLA2R抗体阳性率均显著高于非IMN组[101.30(56.90,219.80)RU/ml比1.36(1.24,8.34)RU/ml、97.3%(73/75)比11.4%(4/35)](均P<0.01)。2组血清总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白G(IgG)、IgA、IgM、补体C3、补体C4及尿游离κ轻链、尿游离λ轻链水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。Pearson相关性分析结果显示,IMN患者血清抗PLA2R抗体与尿游离κ轻链、尿游离λ轻链呈正相关(均P<0.01)。结论IMN患者血清抗PLA2R抗体水平显著升高,可作为特异性血清学检测指标。