自发性系膜缘结肠穿孔7例临床诊治分析

目的探讨自发性系膜缘结肠穿孔的临床特点、诊治方法及转归。方法对我科1998年8月至2012年2月收治的自发性系膜缘结肠穿孔的相关资料进行回顾性分析。结果 4例初诊"机械性肠梗阻"予对症保守治疗24～48h无好转而行剖腹探查,3例因有先前经验或腹部CT提示而直接行剖腹探查,证实系膜缘结肠穿孔。结论自发性系膜缘结肠穿孔临床少见,容易误诊漏诊,CT能提高诊断率,剖腹手术能确诊并能治愈。

膜缘柴胡解表退热功效研究

目的：研究膜缘柴胡解表退热功效，为临床合理使用柴胡提供指导。方法：采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀，干酵母致大鼠发热模型的方法。结果：膜缘柴胡能极显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀，极显著降低酵母致大鼠发热温度。结论：膜缘柴胡有良好解表退热功效。

自体角膜缘干细胞移植联合丝裂霉素治疗翼状胬肉的临床效果

目的:探讨治疗、防止翼状胬肉复发的手术方式。方法:对399例469眼施行翼状胬肉切除基础上运用丝裂霉素C联合角膜缘干细胞移植。结果:399例469眼,其中456眼未出现复发,仅13眼复发,复发率为2.8%。结论:自体角膜缘干细胞移植联合丝裂霉素C治疗翼状胬肉是目前比较有效的防止复发的手术方法,值得推广。

角膜缘上皮联合带筋膜球结膜治疗翼状胬肉临床观察

目的 探讨翼状胬肉更实用的手术方法。方法 采用角膜缘上皮联合带筋膜球结膜移植覆盖胬肉切除后的巩膜面治疗翼状胬肉。结果 术后132例（眼）随访0．5～2年，平均15个月。治愈124眼（93．94％），复发8眼（6．06％）。早期（1个月内）无1例并发症发生。结论 基层医院采用角膜缘上皮联合带筋膜球结膜移植治疗翼状胬肉行之有效，且并发症很少。

膜缘柴胡与柴胡(北柴胡)抗炎、解热作用的比较

目的:常用中药柴胡临床使用时存在品种和入药部位的差异,本研究紧密结合柴胡的功效,选有柴胡主流品种以根入药的北柴胡与以地上部分入药的膜缘柴胡进行主要有关药效学的研究,进而明确两者解表退热功效的差异,以期为临床有效、合理使用柴胡提供指导。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀,干酵母致大鼠发热模型,分别研究膜缘柴胡和北柴胡的抗炎、解热作用。结果:膜缘柴胡和北柴胡均可抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀,均可显著降低酵母致大鼠发热的温度。结论:膜缘柴胡、北柴胡都有良好的抗炎、解热作用,两者比较以北柴胡解热作用更强,因此两者能解表退热,其中北柴胡退热功效强于膜缘柴胡。

中华水韭叶舌和缘膜的发生及其发育进程研究

采用石蜡切片技术,以人工培养的中华水韭幼苗的最初几枚叶至成熟植株的叶为实验材料,连续解剖观察其叶舌和缘膜的发生、发育进程,并分析其发育进程与孢子囊和叶片的关系。结果显示:(1)中华水韭叶舌与叶片在其个体发育早期来自于同一原基,但叶舌最初的发育速度快于叶片。(2)中华水韭的苗龄达到15枚叶时开始有孢子囊发生,此时的叶舌下方有明显的缘膜结构。(3)当中华水韭的孢子体达到30枚叶片以上时,早期产生于植株外围的孢子囊已经发育成熟,可以清楚地区分出大、小孢子囊,其中在已经成熟的大孢子叶上,叶舌相对于孢子囊的长度变短,下唇萎缩,缘膜消失;成熟小孢子叶的叶舌比大孢子叶的叶舌长,上翻程度大,下唇萎缩程度不如大孢子叶明显,缘膜也退化消失。研究认为,缘膜是水韭系统发育早期的普遍结构,而演化后期一些地区的缘膜则显著退化甚至消失;对于系统发育初期的中华水韭,其叶舌与叶片的差异并不像现代水韭那么明显。

仔猪小肠上皮细胞刷状缘膜囊制备方法的研究

采用CaCl2 和MgCl2 两种沉淀法制备了断奶仔猪小肠上皮细胞刷状缘膜囊 (BBMV) ,并通过测定BBMV制备过程中的细胞膜或细胞器标志酶酶活、核糖核酸和脱氧核糖核酸含量等指标对所制备的BBMV的纯度进行了评价。结果表明采用MgCl2 沉淀方法制备的断奶仔猪小肠BBMV纯度优于CaCl2 沉淀法。

断奶仔猪小肠刷状缘膜囊中小肽水解的研究

通过孵育试验研究了L 亮 甘 (Leu Gly)和 β 丙 组 (Ala His)等两种二肽在断奶仔猪小肠刷状缘膜囊 (BrushBorderMembraneVesicles,BBMV)中的水解状况。结果表明 ,孵育液pH(分别为 3.5 ,4 .0 ,4 .5 ,5 .0 ,5 .5 ,6 .0 ,6 .5 ,7.0 ,7.5和 8.0 )、孵育温度 (2 5℃和 37℃ )、孵育时间 (0 .5 ,1,2 ,5 ,10 ,2 0 ,30和 4 0min)以及BBMV(可能含二肽酶 )的添加量对两种二肽在断奶仔猪小肠BBMV孵育体系中浓度没有影响。结果表明 ,Leu Gly和Ala

大弹涂鱼和中华乌塘鳢肠刷状缘膜消化酶活性的比较

采用酶学分析的方法,研究了大弹涂鱼和中华乌塘鳢肠刷状缘膜的麦芽糖酶、蔗糖酶、乳糖酶、海藻糖酶、纤维二糖酶、碱性磷酸酶、氨基肽酶和γ-谷氨酰转肽酶等8种消化酶的活性。结果表明:1)大弹涂鱼肠Ⅱ刷状缘膜的麦芽糖酶、蔗糖酶、乳糖酶、海藻糖酶和纤维二糖酶等5种二糖酶的比活力均显著高于肠Ⅰ和肠Ⅲ(P<0·05);中华乌塘鳢肠Ⅰ刷状缘膜除乳糖酶外,其余4种二糖酶的比活力均显著高于肠Ⅱ和肠Ⅲ(P<0·05);大弹涂鱼肠Ⅲ碱性磷酸酶、氨基肽酶和γ-谷氨酰转肽酶等3种消化酶的比活力均显著高于肠Ⅰ和肠Ⅱ(P<0·05);中华乌塘鳢肠Ⅱ的这3种消化酶的比活力均显著高于肠Ⅰ和肠Ⅲ(P<0·05);2)大弹涂鱼各段肠刷状缘膜的5种二糖酶的比活力均显著高于中华乌塘鳢(P<0·05),前者肠刷状缘膜碱性磷酸酶、氨基肽酶和γ-谷氨酰转肽酶等3种消化酶的比活力整体上也稍微高于后者。由此说明:8种消化酶的活性在大弹涂鱼和中华乌塘鳢肠刷状缘膜中的分布模式明显不同,大弹涂鱼和中华乌塘鳢对二糖的消化和吸收的主要部位分别是在肠Ⅱ和肠Ⅰ,而二者对蛋白质、脂类和无机盐等营养吸收的主要部位分别是在肠Ⅲ和肠Ⅱ;大弹涂鱼和中华乌塘鳢肠刷状缘膜的5种二糖酶的活性与两者的食性关系密切,而碱性磷酸酶、氨基肽酶和γ-谷氨酰转肽酶等3种消化酶的活性与两者的食性并无密切的相关性。

二肽在断奶仔猪小肠刷状缘膜囊中水解状况的研究

通过孵育试验研究了甘- L- 亮(Gly -Leu)和- L- 组 L- 亮(His- Leu) 2 种二肽在断奶仔猪小肠刷状缘膜囊(Brush Border Memlorane Vesides,BBMV)中的水解状况。结果表明,孵育液 pH值(分别为 3.5、4.0、4.5、5.0、5 5、6.0、6.5、7.0、7.5和8.0)、孵育温度(25 ℃和 37 ℃)、孵育时间(0 5、1、2、5、10、20、30 和 40 min)以及 BBMV(二肽酶)的添加量均不影响此 2 种二肽在断奶仔猪小肠 BBMV孵育体系中的水解。结果提示,Gly- Leu和 His- Leu 2种二肽在断奶仔猪小肠BBMV体系中均不水解。

甘-L-脯二肽在仔猪小肠刷状缘膜囊中的抗水解研究

通过孵育试验研究了甘-L-脯(Gly-Pro)二肽在断奶仔猪小肠刷状缘膜囊(Brush Border MemloraneVesides,BBMV)中的水解状况。结果表明,孵育液pH值(分别为3.5,4.0,4.5,5.0,5.5,6.0,6.5,7.0,7.5和8.0)、孵育温度(25℃和37℃)、孵育时间(0.5,1,2,5,10,20,30和40 min)以及BBMV的添加量均不影响此二肽在断奶仔猪小肠BBMV孵育体系中的水解。结果提示,Gly-Pro二肽在断奶仔猪小肠BBMV体系中不水解。

二肽在仔猪小肠刷状缘膜囊中跨膜转运的动力学特点研究

为研究二肽在仔猪小肠刷状缘膜囊(Brush border membrane vesicles,BBMV)中跨膜转运的动力学特点,采用同位素示踪及体外孵育技术,观察了几种不同条件下Gly-Pro的跨膜转运量。结果表明:(1)在有Na+和无Na+的条件下,Gly-Pro的转运均受到Leu-Gly、Ala-His、Gly-Leu和His-Leu等二肽的极显著抑制(P<0.01),但不受甘氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-亮氨酸、L-精氨酸、L-谷氨酰胺和L-蛋氨酸的影响;(2)仔猪小肠BBMV对Gly-Pro的转运呈现非线性关系,但是遵从Michaelis-Menten动力学方程,其Kt(亲合常数)值为0.64 mmol/L,而Vmax为7.42 nmol/(min.mg)膜蛋白;(3)仔猪小肠BBMV对Gly-Pro的摄取是由于Gly-Pro直接进入BBMV内部的结果,而不是仅仅结合在BBMV上所引起的。结果提示,Gly-Pro在仔猪小肠BBMV中的跨膜转运具有载体介导的转运特点。

细鳞鱼仔鱼肠上皮细胞刷状缘膜囊制备方法的研究

本试验以细鳞鱼仔鱼肠道为材料,通过梯度离心法对刷状缘膜进行了分离纯化。以刷状缘膜酶、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰胺转移酶为标志酶,以钠-钾-ATP酶代表底侧膜,琥珀酸脱氢酶指示线粒体。经两个梯度离心处理后,刷状缘膜酶得到了富积纯化。在28000g离心处理中,碱性磷酸酶、γ-谷氨酰胺转移酶富积系数分别超过13倍和10倍,检测不到钠-钾ATP酶,琥珀酸脱氢酶仅为初始匀浆的0.01%;而43000g处理,碱性磷酸酶、γ-谷氨酰胺转移酶富积系数也分别超过13倍和10倍,检测不到钠-钾-ATP酶和琥珀酸脱氢酶。通过刷状缘膜上相关酶类活性测定对分离结果进行了评价。结果显示,以镁为沉淀剂,对肠道匀浆以43000g二次离心可以提高富积系数并降低污染,制作出了适用于营养吸收研究的细鳞鱼仔鱼肠道刷状缘膜囊。

厚颌鲂幼鱼肠上皮细胞刷状缘膜囊的提取

根据沉淀方法和离心速度的不同分为4个试验组提取厚颌鲂(Megalobrama pellegrini)70日龄幼鱼的肠上皮细胞刷状缘膜囊(BBMV)。四个试验组如下:A组-钙离子沉淀法,28 000 g离心;B组-钙离子沉淀法,43000 g离心;C组-PEG沉淀法,28 000 g离心;D组-PEG沉淀法,43 000 g离心。采用细胞器和细胞膜指示酶的富集系数、核糖核酸和脱氧核糖核酸含量来评价各试验组提取BBMV的纯度。结果表明:肠上皮细胞刷状缘膜囊提取后,DNA的富集系数各组排列为D<B<C<A,D组的富集系数为0;RNA的富集系数排列为D<B<C<A,D组的富集系数为0.007;各组的蔗糖酶、γ谷氨酰转移酶(γ-GT)及碱性磷酸酶(AKP)富集系数排列为A<C<B<D,D组各酶的富集系数分别为:6.172、12.700、20.185。麦芽糖酶的富集系数排列为A<C<D<B,B组的富集系数为5.789;而Na+-K+-ATP酶和琥珀酸脱氢酶(SDH)在采用43 000 g离心后均为0。上述结果说明采用PEG沉淀法、43 000 g离心试验组提取的BBMV的纯度优于其余各试验组。

HPLC法测定仔猪小肠刷状缘膜囊孵育体系中的二肽含量

用高效液相色谱法测定了经仔猪小肠刷状缘膜囊水解后的甘 - L-脯、L-亮 -甘和 β-丙 -组共 3种二肽的剩余含量。分别以水 -三氟乙酸 (质量浓度分别为 0 .1 % ,0 .0 8%和 0 .1 % ,p H值分别为 2 .2 0 ,2 .30和 2 .2 0 )和乙腈 -三氟乙酸 (三氟乙酸质量浓度 0 .1 % )为流动相 ,经 Phenomennex ODS分析柱 (2 50 mm× 4.60 mm,5μm,C1 8)分离 ,在 2 0 0～ 40 0 nm处检测。结果表明 ,3种二肽在 0～ 30 0 μg.m L-1之间 ,其峰面积 (X)对质量浓度 (Y,μg.m L-1 )回归得方程分别为 Y=0 .0 0 0 1 X- 5.6945,(R2 =0 .9946) ;Y=0 .0 0 0 4 X- 1 .41 6 7,(R2 =0 .9999) ;Y=0 .1 842 X- 7.365 4,(R2 =0 .9948)。平均回收率依次为 1 0 0 .0 0 % ,1 0 0 .0 1 %和 99.92 % ,保留时间依次为 7.63,8.0 1和 4.1 7min,最大吸收波长依次为 2 0 1 ,2 0 0和 2 80 nm。该方法快速、简便和准确 ,结果稳定 ,重现性好 。

膜电位对仔猪小肠刷状缘膜囊中二肽跨膜转运的影响

为研究膜电位与仔猪小肠刷状缘膜囊(brush border membrane vesicles,BBMV)中二肽跨膜转运之间的关系,采用膜电位诱导、体外孵育及同位素示踪技术,分别观察由缬氨霉素和羰基氰化物三氟甲氧基苯腙(carbonylcyanide p-(Tri-fluoromethoxy)phenylhydrazone,FCCP)诱导仔猪小肠BBMV产生的K+扩散电位(膜囊内负)和H+扩散电位(膜囊内正)对Gly-Pro二肽跨膜转运的影响。结果表明:在有Na+和无Na+的状况下,K+扩散电位均促进Gly-Pro二肽由膜囊外进入膜囊内部;H+扩散电位抑制Gly-Pro二肽由膜囊外进入膜囊内部。结果提示:在仔猪小肠BBMV转运体系中,Gly-Pro二肽的跨膜转运具有与非Na+的阳离子协同转运的特点。

钠离子对仔猪小肠刷状缘膜囊二肽跨膜转运的影响(英文)

为研究Na+在仔猪小肠Gly-Pro跨膜转运中的作用,采用同位素示踪及体外孵育技术,观察在不同Na+浓度梯度条件下Gly-Pro在仔猪小肠刷状缘膜囊(brush border membrane vesicles,BBMV)的跨膜转运量。结果表明:(1)用K+替代Na+,并没有降低Gly-Pro在BBMV中的转运量,在孵育前20min时间内,Gly-Pro的转运量稍稍提高;(2)Na+可使BBMV对L-丙氨酸的转运量提高到4.6倍,但不影响Gly-Pro的转运;二氢骆驼蓬碱显著地降低L-丙氨酸的转运,但对Gly-Pro的转运无影响。研究提示,Gly-Pro在仔猪小肠BBMV体系中的转运与Na+不存在依赖性的关系。

Vip3Aa10与甜菜夜蛾刷状缘膜囊泡的结合特性

【目的】营养期杀虫蛋白Vip3A是一种由苏云金芽孢杆菌在对数生长期产生的新型杀虫毒素。Vip3A与敏感昆虫中肠上皮细胞的结合是其发挥杀虫活性的关键步骤。为进一步探究Vip3A毒素的杀虫机理,研究Vip3Aa10与甜菜夜蛾刷状缘膜囊泡(BBMVs)的结合特性。【方法】在大肠杆菌中用IPTG诱导表达Vip3Aa10,用亲和层析和离子交换层析的方法纯化蛋白,并用胰蛋白酶活化Vip3Aa10,得到Vip3Aa10-T。然后分析Vip3Aa10前毒素和Vip3Aa10-T对甜菜夜蛾的杀虫活性,用免疫印迹法和配体印迹法分析Vip3Aa10-T与甜菜夜蛾BBMVs的结合特性以及在甜菜夜蛾BBMVs上的结合蛋白。【结果】Vip3Aa10-T与Vip3Aa10前毒素对甜菜夜蛾的杀虫活性很高。Vip3Aa10-T在pH8.0时更容易与甜菜夜蛾BBMVs结合,并且能够与非敏感性昆虫黄粉虫BBMVs结合。在相同pH条件下,Vip3Aa10前毒素比Vip3Aa10-T更容易与甜菜夜蛾BBMVs结合。Vip3Aa10-T在甜菜夜蛾BBMVs上有4条结合蛋白,其分子量分别为80、38、31和22kDa。【结论】活化的Vip3Aa10与甜菜夜蛾BBMVs的结合是pH依赖性的,并且能与BBMVs上的4个蛋白结合。