抗膜联蛋白A5抗体在抗磷脂综合征中的临床意义

目的探讨抗膜联蛋白A5(annexin A5,ANX A5)抗体与抗磷脂综合征(APS)患者临床特征的相关性及其检测的临床价值。方法2014年10月至2020年4月北京协和医院序贯纳入符合2006年悉尼修订APS分类标准的APS患者,收集患者人口统计学信息、临床特征及实验室检查结果,比较抗体阴性及阳性两组患者的组间差异。结果研究共纳入140例APS患者,其中抗ANX A5抗体阳性组57例(40.7%),阴性组83例(59.3%)。两组患者性别、年龄、病程、继发性APS比例无显著差异。临床特征中,抗ANX A5抗体阳性组(IgG/M阳性)较抗体阴性组合并脑梗死比例显著增多(33.3%vs.12.0%,P=0.003),其OR值为3.650,95%CI=1.544~8.628;抗ANX A5抗体双阳组(IgG及IgM均阳)脑梗死比例高达38.5%,OR值4.563,95%CI=1.246~16.711;其余部位血栓事件及病理妊娠无显著差异。实验室检查方面,两组间的抗心磷脂抗体(ACL)、抗β_(2)糖蛋白Ⅰ(β_(2)GPI)抗体、狼疮抗凝物(LA)等抗磷脂抗体阳性率比较,差异无统计学意义。结论APS患者中抗ANXA5抗体与脑梗死相关;合并该抗体阳性患者应警惕神经系统损害。

老年晚期肝癌患者TACE治疗前后膜联蛋白A5表达变化及其预后价值

目的探讨分析老年晚期肝癌患者经导管肝动脉化疗栓塞术(Transcatheter Arterial Chemoembolization,TACE)治疗前后膜联蛋白A5表达变化及其预后价值。方法选取2020年10月至2021年3月我院收治的84例预行TACE治疗的晚期肝癌患者,随访术后6个月内患者肿瘤控制情况,将患者分为无进展组(n=30)和进展组(n=54)。分别于术前和术后采用酶联免疫吸附法检测血清膜联蛋白A5水平,比较其变化情况,及其水平变化与患者预后的关系。结果肿瘤最大直径>5 cm患者术前血清膜联蛋白A5水平高于肿瘤最大直径≤5 cm患者,多个癌灶患者术前血清膜联蛋白A5水平高于单个癌灶患者(P<0.05)。Logistics回归分析结果显示,老年晚期肝癌患者肿瘤最大直径>5 cm(OR=1.881,95%CI:1.203~2.941)、癌灶个数≥2个(OR=1.728,95%CI:1.125~2.654)是术前血清膜联蛋白A5水平与升高的重要影响因素(P<0.05)。两组患者术后1 d、7 d时血清膜联蛋白A5水平较术前升高;术后30 d时两组患者血清膜联蛋白A5水平较术前降低(P<0.05),且进展组血清膜联蛋白A5水平高于无进展组(P<0.05);两组患者术前、术后1 d、术后7 d时各时间点血清膜联蛋白A5水平无显著差异(P>0.05)。随访截至2022年3月31日,随访患者生存时间为8~36个月,中位生存时间(26.37±4.58)个月。根据Kaplan-Meier生存曲线结果显示,术前膜联蛋白A5水平高表达患者生存期[(24.26±2.35)个月]低于膜联蛋白A5水平低表达者[(27.64±2.34)个月];术后30 d膜联蛋白A5水平高表达患者生存期[(24.52±2.16)个月]低于膜联蛋白A5水平低表达者[(27.43±2.22)个月],差异具有统计学意义(P<0.05)。肿瘤最大直径>5 cm、多个癌灶、术前膜联蛋白A5、术后30 d膜联蛋白A5水平存在显著差异(P<0.05),提示肿瘤最大直径、癌灶个数、术前膜联蛋白A5水平、术后30 d血清膜联蛋白A5水平与老年晚期肝癌TACE治疗后生存期有关。多因素Cox分析结果显示,肿瘤最大直径(HR=2.094,95%CI:1.377~3.185)、术后30 d血清膜联蛋白A5水平(HR=3.177,95%CI:1.690~5.972)是影响老年晚期肝癌TACE治疗后无进展生存期的独立危险因素(P<0.05)。结论肿瘤最大直径、术后30 d血清膜联蛋白A5水平是老年晚期肝癌无进展生存期的重要影响因素,对预后评估具有重要参考价值。

抗膜联蛋白A5抗体与反复妊娠丢失的相关性研究

目的 通过检测反复妊娠丢失(RPL)患者血清抗膜联蛋白A5抗体的表达情况,探讨其与RPL的关系,为临床治疗提供理论依据。方法 采用酶联免疫吸附试验法对160例RPL患者、70例健康对照者进行抗膜联蛋白A5抗体检测,分析其在RPL患者中的表达情况,并观察RPL患者妊娠结局、妊娠并发症以及新生儿情况。结果 RPL组的抗膜联蛋白A5抗体的阳性率高于对照组(P <0.05);RPL组的抗膜联蛋白A5抗体水平为(29.95±11.53)ng·mL^(-1),高于对照组的(22.48±9.82)ng·mL^(-1)(P <0.05);2次流产组、3次流产组、4次流产组的抗膜联蛋白A5抗体水平分别为(28.98±11.83)、(31.26±9.52)、(34.70±13.25)ng·mL^(-1),均高于对照组(P<0.05),但不同流产次数组间的抗膜联蛋白A5抗体水平差异无统计学意义(P>0.05);抗膜联蛋白A5抗体阳性组出生体重低于阴性组(P<0.05),其余妊娠结局指标及妊娠并发症方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论 抗膜联蛋白A5抗体与RPL关系密切,可作为RPL的危险因素。

膜联蛋白A5低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨膜联蛋白A5(ANXA5)低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组、转染试剂对照组和空白对照组,采用脂质体转染法将siRNA转染干扰组HeLa细胞,在转染72h后采用RT-PCR和Western blotting检测各组ANXA5的表达以鉴定抑制效率;细胞划痕实验检测各组HeLa细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组HeLa细胞的侵袭能力;RT-PCR和Western blotting分别检测ANXA5低表达对E-钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA及蛋白表达的影响。结果干扰组ANXA5蛋白及mRNA的表达均明显低于阴性对照组(P<0.05);其表达均被显著抑制,干扰组细胞的迁移及侵袭能力比阴性对照组明显增强(P<0.05),E-cadherin mRNA及蛋白的表达显著低于阴性对照组(P<0.05);干扰组MMP-9mRNA及蛋白的表达均显著高于阴性对照组(P<0.05)。结论靶向ANXA5的siRNA可有效抑制ANXA5的表达,且ANXA5低表达可能通过影响E-cadherin和MMP-9的表达来促进HeLa细胞的迁移和侵袭能力。

膜联蛋白A5在人子宫颈鳞癌组织中的表达

目的探讨人子宫颈鳞癌发生发展过程中,膜联蛋白A5(ANXA5)表达的变化。方法收集人子宫颈鳞癌组织25例和人正常子宫颈组织15例,细胞裂解液裂解组织细胞,蛋白定量试剂盒进行蛋白定量后,Western blotting法检测ANXA5在人子宫颈鳞癌组织和人正常子宫颈组织中的表达;为进一步确定ANXA5的表达部位及其变化,我们收集人子宫颈鳞癌蜡块45例和人正常子宫颈组织蜡块20例,用免疫组织化学ABC法对两种组织ANXA5的表达进行检测,原位杂交法在RNA水平进行检测。结果Westen blotting显示人子宫颈鳞癌组织ANXA5比人正常子宫颈组织表达增强;免疫组织化学及原位杂交均显示人子宫颈癌组织中ANXA5的染色比人正常子宫颈组织染色重,阳性信号分布于细胞质和细胞膜。结论ANXA5在人子宫颈鳞癌组织中的表达比在人正常子宫颈组织中的表达增高;ANXA5与人子宫颈鳞癌的发生有密切联系。

膜联蛋白A5在不同临床分期结肠癌患者中的表达及意义

目的检测膜联蛋白A5(Annexin A5)在结肠癌患者外周血清中的含量及癌组织中的表达以及临床意义。方法收集81例结肠癌患者外周血清和35例正常人外周血清,采用酶联免疫吸附法测定血清中Annexin A5的含量;取本组结肠癌患者的癌组织81例,运用免疫组织化学法检测Annexin A5在癌组织中的表达情况。结果 TNMⅢ/Ⅳ期的结肠癌患者血清Annexin A5含量高于TNMⅠ/Ⅱ期和正常人,差异有统计学意义(P<0.05),Annexin A5表达与淋巴结转移密切相关(P<0.05)。Annexin A5在结肠癌癌组织中主要表达于肿瘤细胞或间质细胞胞浆,并随结肠癌TNM分期升高其阳性表达率逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。血清Annexin A5含量与结肠癌组织Annexin A5表达相关,其阳性检出率明显高于癌胚抗原阳性检出率(P<0.05)。结论结肠癌患者血清Annexin A5的含量与癌组织Annexin A5表达相关,与结肠癌的分期、转移等临床病理学指标密切关联,具有一定的潜在诊断价值。

膜联蛋白A5过表达对宫颈癌细胞系SiHa细胞凋亡的影响

目的:构建膜联蛋白A5的重组表达质粒,转染宫颈癌细胞使其过表达后检测宫颈癌细胞的凋亡情况。方法:PCR法从pJLA503膜联蛋白A5中获得膜联蛋白A5基因;磷酸钙共沉淀法转染宫颈癌细胞系SiHa细胞,免疫印迹法和免疫组织化学ABC法检测了细胞中膜联蛋白A5蛋白的过表达;对过表达膜联蛋白A5的细胞采用免疫荧光法检测其细胞凋亡情况。结果:重组质粒中膜联蛋白A5基因序列正确;转染重组质粒后的SiHa细胞过表达膜联蛋白A5蛋白;过表达膜联蛋白A5的SiHa细胞凋亡显著增多。结论:膜联蛋白A5可促进宫颈癌细胞系SiHa细胞的凋亡。

膜联蛋白A5与宫颈黏膜上皮细胞癌变的关系

目的：确定在宫颈癌细胞系Hela细胞和SiHa细胞中是否有膜联蛋白A5(anxA5)的表达,为研究anxA5的功能及其与宫颈癌的关系奠定基础。方法：培养Hela细胞和SiHa细胞。TRIzol法提取细胞总RNA,RT- PCR法检测anxA5在mRNA水平的表达并将其基因片段连接于T载体,测序仪测序；Western印迹法和免疫细胞化学ABC法检测anxA5的表达。结果：两种宫颈癌细胞的RT-PCR结果和Western印迹法均显示目的条带；免疫细胞化学染色可见胞质和核膜被染成棕黄色；测序并经NCBI的BLAST进行比对,显示为人anxA5。结论：anxA5在宫颈癌细胞系Hela细胞和SiHa细胞的mRNA水平和蛋白质水平均有表达。

膜联蛋白A5低表达对人宫颈癌细胞系HeLa细胞增殖与凋亡的影响

目的观察宫颈癌细胞系HeLa细胞在膜联蛋白A5表达降低后，细胞增殖和凋亡的情况。方法采用RNA干扰的方法，通过免疫印迹法筛选出对HeLa细胞中膜联蛋白A5的表达抑制效率最高的siRNA，脂质体法将siRNA转染入细胞48h后，用MTr法检测细胞增殖的改变情况，用细胞凋亡光学检测试剂盒检测细胞的凋亡。结果HeLa细胞中膜联蛋白A5的表达被显著抑制，其增殖速度与未转染siRNA的普通HeLa细胞相比，无显著性差异；细胞凋亡显著减少，与未转染siRNA的普通HeLa细胞相比，有显著性差异。结论膜联蛋白A5低表达对宫颈癌细胞系HeLa细胞的增殖未见显著影响，但可能影响了细胞的凋亡。

膜联蛋白A5对胶质瘤细胞侵袭和迁移的调节作用及机制

目的研究膜联蛋白A5对胶质瘤细胞侵袭和迁移的调节作用及机制。方法免疫组化法检测100例神经胶质瘤组织和20例正常脑组织中膜联蛋白A5的表达。对人神经胶质瘤细胞系(U251)转染靶向膜联蛋白A5的siRNA(si-Annexin A5组),并通过RT-PCR和蛋白印迹分析验证膜联蛋白A5表达下调。MTT实验和集落形成实验检测U251细胞的增殖能力,流式细胞术和Hoechst 33258染色检测U251细胞凋亡,伤口愈合实验和Matrigel Transwell侵袭实验观察U251细胞的迁移和侵袭能力。蛋白印迹分析U251细胞中Raf、p-Raf、MEK1/2、p-MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2、c-Myc和E-Cadherin的表达。结果与正常脑组织相比,胶质瘤组织中的膜联蛋白A5的mRNA表达升高了2.45倍,蛋白表达升高了2.87倍(P<0.001);Pearson相关分析显示,随着肿瘤级别的升高,膜联蛋白A5阳性率逐渐升高,并且肿瘤级别与阳性率呈正相关(r=1.000,P<0.001)。与对照组相比,si-Annexin A5组的U251细胞在培养48、72 h的细胞活力分别降低了29.46%和40.43%(P<0.001)。与对照组相比, si-Annexin A5组的集落形成率降低了68.58%,而细胞凋亡率升高了24.41倍(P<0.001);si-Annexin A5组的迁移细胞率降低了65.35%,侵袭细胞率降低了68.80%(P<0.001);si-Annexin A5组的p-Raf、p-MEK1/2、p-ERK1/2和c-Myc的蛋白表达均明显降低(依次降低54.67%、70.37%、60.26%、54.95%),而E-Cadherin升高了3.58倍(P<0.001)。结论下调膜联蛋白A5通过抑制Raf/MEK/ERK信号通路抑制胶质瘤细胞的生长和运动能力,并诱导细胞凋亡。

膜联蛋白A5在人宫颈鳞癌不同分化型的表达及临床意义

目的:检测膜联蛋白A5(ANXA5)在不同分化的宫颈癌细胞中的表达差异,探讨其作为宫颈鳞癌组织分化标志物的可行性。方法:将收集的宫颈鳞癌组织52例HE染色后分为高分化型12例,中分化型25例,低分化型15例。RT-PCR法和WesternBlot法分别在mRNA转录水平和蛋白水平检测ANXA5在各分化型宫颈鳞癌的表达情况;用免疫组织化学法对其在细胞内的定位以及表达量进行检测。结果:随着癌细胞分化从高到低,ANXA5在mRNA水平的表达逐渐增高,且组间多重比较差异均有统计学意义(均P<0.01)。在蛋白水平,高分化型组表达低于中、低分化型组(均P<0.01),中、低分化组之间差异无统计学意义(P>0.05)。ANXA5主要定位于宫颈癌细胞的细胞质中。结论:ANXA5具有作为临床宫颈癌细胞分化标志物的潜在可能。

宫颈鳞癌患者血清膜联蛋白A5含量的检测及其临床意义

目的检测膜联蛋白A5(ANXA5)在人宫颈鳞癌患者外周血中的含量改变,探讨ANXA5作为宫颈癌诊断标志物的可行性。方法收集人宫颈鳞癌患者外周血清48例和正常育龄妇女外周血清38例,低速离心取上清,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别检测血清中ANXA5和鳞状细胞癌抗原(SCCAg)的含量;离心后取红细胞行RT-PCR进行患者与正常组ANXA5表达的检测。组间检验采用t检验;并进行肿瘤患者中ANXA5与SCCAg的相关性分析。结果宫颈鳞癌患者血清中ANXA5的含量均比正常人显著增多,血细胞中ANXA5mRNA的表达显著增多,差异有显著性(P<0.05);SCCAg在肿瘤组中的含量同样显著高于正常组(P<0.05);ANXA5与SCCAg具有明显的相关性,但ANXA5的阳性率大于SCCAg。结论 ANXA5在宫颈鳞癌患者外周血中含量增高,特异性和敏感性较高,可作为临床诊断和预后宫颈鳞癌的备选标志物。

膜联蛋白A5在结肠癌患者血清及癌组织中的表达及其意义

目的探讨膜联蛋白A5在结肠癌患者血清及癌组织中的表达及意义。方法选取2015年2月至2017年3月在新疆维吾尔自治区人民医院治疗的结肠癌患者93例(结肠癌组),另选择同期来院体检的健康者40名为对照组,采用全自动生化分析仪对2组研究对象血清膜联蛋白A5含量进行检测,并对结肠癌组织标本膜联蛋白A5的表达情况进行免疫组织化学检测,分析结肠癌患者血清与癌组织中膜联蛋白A5表达的相关性以及血清膜联蛋白A5对结肠癌的诊断价值。结果膜联蛋白A5在不同性别、年龄和肿瘤直径患者结肠癌组织中的阳性表达率差异均无统计学意义(均P>0.05);淋巴结转移患者结肠癌组织中膜联蛋白A5阳性表达率高于无淋巴结转移患者[79.3%(23/29)比48.4%(31/64)],Ⅲ～Ⅳ期患者阳性表达率高于Ⅰ～Ⅱ期患者[87.0%(40/46)比29. 8%(14/47)],差异均有统计学意义(均P <0.05)。结肠癌组血清膜联蛋白A5水平高于对照组[(0. 18±0.04)μg/L比(0. 16±0.05)μg/L],差异有统计学意义(t=2.904,P<0.05)。结肠癌组织中膜联蛋白A5阳性表达患者54例,阴性表达39例,膜联蛋白A5阳性表达者血清膜联蛋白A5水平高于阴性表达者[(0. 215±0.044)μg/L比(0. 180±0. 021)μg/L],差异有统计学意义(t=4.599,P<0.05)。结肠癌患者血清膜联蛋白A5与结肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.312,P<0.05)。血清膜联蛋白A5为0.148μg/L时,诊断结肠癌的敏感度为83.9%,特异度为57.5%。结论结肠癌患者癌组织膜联蛋白A5表达与临床病理学指标有一定的关系;血清膜联蛋白A5含量与癌组织中膜联蛋白A5表达相关,具有一定的诊断价值。

敲低膜联蛋白A5对人胃癌MGC-803和MKN-45细胞周期的影响

目的探讨敲低膜联蛋白A5(ANXA5)对人胃癌细胞系MGC-803、MKN-45细胞周期相关蛋白表达的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组及空白对照组,采用脂质体转染法将靶向膜联蛋白A5的siRNA以及阴性siRNA分别转染干扰组和阴性对照组MGC-803、MKN-45细胞,空白对照组不加任何试剂。转染后48 h采用Real-time PCR和Western bloting分别从mRNA和蛋白水平检测ANXA5的表达,确定ANXA5被敲低之后,Realtime PCR和Western bloting检测各组p21^(cip1)mRNA和P21^(cip1)的表达,Western bloting检测各组细胞周期蛋白D1(cyclin D1)蛋白的表达,流式细胞术检测各组细胞周期的变化情况。结果敲低ANXA5后,与阴性对照组和空白对照组相比,两种细胞的p21^(cip1)mRNA和P21^(cip1)蛋白均显著降低(P<0.05),cyclin D1(P<0.05)也显著降低。结论敲低ANXA5可下调MGC-803、MKN-45细胞中p21^(cip1)mRNA和P21^(cip1)蛋白以及cyclin D1的表达,推测ANXA5可能通过作用于细胞周期相关蛋白而引发细胞周期阻滞从而影响着胃癌的发展。

膜联蛋白A5在喉癌组织中的表达及临床意义

目的通过观察膜联蛋白A5(annexin A5,ANXA5)在喉癌组织中的表达,探讨ANXA5在喉癌中的作用。方法采用免疫组化SP法及RT-PCR法检测53例不同临床分期、病理学分级及颈部淋巴结转移的喉癌组织与25例癌旁组织标本中ANXA5及其基因的表达情况。结果喉癌组织中ANXA5水平高于癌旁组织中ANXA5的水平(P<0.0 5);ANXA5的表达与临床分期、病理学分级及颈部淋巴结转移密切相关(P<0.05),与患者年龄、性别及临床分型无关(P>0.05)。结论 ANXA5可能在喉癌的发生、发展中发挥重要作用。

膜联蛋白A5水平检测在妊娠中期胎儿宫内生长受限诊断中的应用

目的：探讨妊娠中期羊水中膜联蛋白A5水平检测在胎儿宫内生长受限诊断中的应用价值。方法以137例孕15～24周孕妇为研究对象，行羊膜腔穿刺获取羊水标本，行ELISA检测确定膜联蛋白A5的水平。将最终出现胎儿宫内生长受限的资料（27例）与其余资料（110例）进行比较分析；同时以20ng／L作为膜联蛋白A5水平分界线，比较水平内（92例）和水平外（45例）孕妇出现胎儿宫内生长受限的比例。结果胎儿宫内生长受限孕妇膜联蛋白A5水平为（26.54±2.77）ng／L，而其余孕妇为（19.42±2.21）ng／L；膜联蛋白A5水平超过20ng／L的孕妇其胎儿宫内生长受限发生率为26.1％（24／92），低于20ng／L者其发生率为6.7％（3／45）。上述差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论膜联蛋白A5水平与妊娠中期胎儿宫内生长受限存在一定的相关性，对于该蛋白水平超过20ng／L的孕妇，需要重点预防胎儿宫内生长受限问题。

膜联蛋白A5重组质粒的构建及其过表达对SiHa细胞增殖的影响

目的构建膜联蛋白．A5（ANXA5）重组质粒并探讨过表达ANXA5对宫颈癌SiHa细胞的增殖产生的影响。方法将ANXA5基因克隆入含His标签的pcDNA3．1质粒载体，构建pcDNA3．1-ANXA5重组质粒；用磷酸钙共沉淀法将重组质粒和pcDNA3．1空质粒分别转染宫颈癌细胞系SiHa细胞，G418加压培养，免疫印迹法筛选过表达ANXA5的细胞克隆，免疫组织化学筛选已转染pcDNA3．1空质粒的细胞克隆；将过表达ANXA5蛋白的细胞、载有pcDNA3．1空质粒的细胞以及未处理的SiHa细胞分别进行四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）实验和CCK．8实验检测细胞增殖情况。结果成功构建了pcDNA3．1-ANXA5重组质粒，测序证实ANXA5基因序列正确；普通未处理的SiHa细胞和转染了pcDNA3．1空质粒的SiHa细胞生长速度较快，两组间无显著性差异（P〉0．05）；过表达ANXA5的SiHa细胞其增殖速度比前两组显著降低（P〈0．05）。结论膜联蛋白A5可能对宫颈癌细胞系SiHa细胞的增殖具有抑制作用。

乳腺癌组织EphA7蛋白和膜联蛋白A5的水平研究

目的探讨乳腺癌组织中Eph基因家族A 7蛋白(EphA 7)和膜联蛋白A 5(ANXA 5)的表达水平及临床意义。方法采用免疫印迹法检测84例乳腺癌组织及对应癌旁组织的EphA 7和ANXA 5蛋白水平,分析两者的相关性及与乳腺癌不同临床病理特征的关系。结果乳腺癌组织中EphA 7和ANXA 5的蛋白水平均高于癌旁组织(P<0.05),且乳腺癌组织中两者的蛋白水平在瘤体直径、临床分期及脉管癌栓上的分布均有统计学差异,且"瘤体直径>2 cm"、"临床分期为Ⅲ+Ⅳ"、及"伴有脉管癌栓"的水平较高(P<0.05);不同淋巴结转移情况的EphA 7蛋白水平差异有统计学意义;乳腺癌组织中EphA 7和ANXA 5的蛋白水平呈正相关(r=0.715,P<0.05)。结论乳腺癌组织中EphA 7和ANXA 5的蛋白水平较高,且与肿瘤的发生发展密切相关,有可能成为乳腺癌诊断、治疗及预后预测的重要指标。

膜联蛋白A5 cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的 :克隆人膜联蛋白 A5 c DNA并在大肠杆菌系统内作表达。 方法 :利用 RT- PCR技术从人胎盘组织的总 RNA扩增膜联蛋白 A5的 c DNA序列 ,将该基因插入 GST融合表达载体 p GEX- 5 T,在 tac启动子控制下 ,IPTG诱导表达 GST融合蛋白。以亲合层析法纯化表达的融合蛋白 ,用 KPTT法验证抗凝血活性。结果 :凝胶电泳显示 PCR扩增产物的长度为 978bp,重组质粒测序结果表明 ,插入片段与人膜联蛋白 A5的序列完全一致。在 IPTG诱导下 ,K80 2重组菌高效表达出相对分子质量为 5 80 0 0的融合蛋白 ,表达量占菌体总蛋白的 2 6 %。纯化蛋白具有很强的抗凝血活性。 结论 :成功克隆人膜联蛋白

膜联蛋白A5在宫颈癌细胞系中的表达

目的:检测膜联蛋白A5(ANXA5)在宫颈癌细胞系Hela细胞和SiHa细胞中的表达,为研究ANXA5在宫颈癌中的作用奠定基础。方法:采用Western blot和ABC免疫组化法在蛋白水平检测ANXA5的表达。结果:在Hela细胞和SiHa细胞中均检测到了ANXA5的表达,阳性产物位于细胞浆,少数细胞在胞膜和胞核上也有表达。结论:ANXA5在宫颈癌细胞系Hela细胞和SiHa细胞中均有表达。