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弓形虫膜蛋白抗原的研究 Ⅰ.虫膜蛋白抗原制备方法的探讨 被引量:5
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作者 杨惠珍 姜昌斌 +2 位作者 杨杨 徐克继 钱宗立 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1993年第4期286-287,共2页
近10年来,由于分子生物学的进展、单克隆抗体技术的问世,对于细胞膜的结构和功能有了进一步的了解,膜组分的研究成为细胞生物学、分子生物学和遗传学的热点。弓形虫速殖子的表膜同样具有一定的抗原决定簇和能被宿主免疫系统所识别的受... 近10年来,由于分子生物学的进展、单克隆抗体技术的问世,对于细胞膜的结构和功能有了进一步的了解,膜组分的研究成为细胞生物学、分子生物学和遗传学的热点。弓形虫速殖子的表膜同样具有一定的抗原决定簇和能被宿主免疫系统所识别的受体。因此深入膜蛋白组分生化特性的研究,对弓形虫的抗原特性、致病机制、免疫病理等方面起着重要的作用。本文采用不同表面活性剂制备虫膜蛋白,并对不同的方法加以比较与分析。材料与方法一、表面活性剂(Biological Detergents) (1) Nonidet-40(Sigma):临界胶束浓度(CMC)0.29,分子量为602.8,属无离子型,胶状液; (2)Triton X-100(Robm-mass公司):临界胶束浓度(CMC)0.24,分子量为624.9属无离子型,胶状液; 展开更多
关键词 弓形体 膜蛋白抗原
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骨骼肌肉膜蛋白抗原检测相关抗体提高重症肌无力诊断的价值
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作者 涂来慧 《现代诊断与治疗》 CAS 1990年第2期105-109,共5页
本文根据烟碱型乙酰胆碱受体抗体(nAchR-Ab)及柠檬酸提取物抗体(CAE-Ab)的检测结果,讨论人类骨骼肌肉膜蛋白抗原对提高重症肌无力(MG)诊断水平及研究发病机理的意义。简述肉膜中nAchR及CAE二种蛋白抗原的特性和提取方法;二种抗原相应的... 本文根据烟碱型乙酰胆碱受体抗体(nAchR-Ab)及柠檬酸提取物抗体(CAE-Ab)的检测结果,讨论人类骨骼肌肉膜蛋白抗原对提高重症肌无力(MG)诊断水平及研究发病机理的意义。简述肉膜中nAchR及CAE二种蛋白抗原的特性和提取方法;二种抗原相应的抗体检测原理、结果和临床意义。由于胸腺与骨胳肌有着共同的nAchR及CAE抗原,深入研究肉膜蛋白抗原与MG的关系,将进一步阐明MG的发病机理。 展开更多
关键词 重症肌无力 膜蛋白抗原 抗体 检测
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肝癌相关膜蛋白抗原(HAg 18—1)检测诊断原发性肝细胞癌的应用研究
3
作者 胡时先 《华南国防医学杂志》 CAS 1997年第1期30-32,共3页
1964年Tatarinov报导自PHCC患者血清中检出AFP,在1000多例的肝癌病例中,大约70%的病例,用免疫扩散法检测血清AFP呈阳性,肝癌高发区可高达80%以上。第12届国际癌症会议上确认AFP是一种特异性的肿瘤生物标志物,阳性率为68.5%—76.5%。... 1964年Tatarinov报导自PHCC患者血清中检出AFP,在1000多例的肝癌病例中,大约70%的病例,用免疫扩散法检测血清AFP呈阳性,肝癌高发区可高达80%以上。第12届国际癌症会议上确认AFP是一种特异性的肿瘤生物标志物,阳性率为68.5%—76.5%。但AFP的含量与肝细胞的分化程度及瘤体大小有关。一部分PHCC病人可出现AFP阴性或低浓度。转移性肝癌及良性肝病亦可出现AFP含量升高。因此,寻找更灵敏、 展开更多
关键词 膜蛋白抗原 检测诊断 原发性肝癌 PHCC 阳性率 细胞癌 研究进展 肿瘤生物标志物 胃肠道恶性肿瘤 放射免疫
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A组乙型溶血性链球菌膜蛋白抗原纯化及其在风湿性心脏炎发病中意义的探讨 被引量:5
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作者 张韶冈 古洁若 +1 位作者 余步云 张汉伟 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期136-140,共5页
目的 探讨纯化A组乙型溶血性链球菌膜蛋白抗原 (A HSMPA)的方法及其在风湿性心脏炎发病免疫过程中的意义。方法 用反胶束萃取法提纯 ,分别检测提纯前后A HSMPA的成分及抗原性 ,再以A HSMPA及粒细胞 /单核细胞集落刺激因子 (GM CSF)分... 目的 探讨纯化A组乙型溶血性链球菌膜蛋白抗原 (A HSMPA)的方法及其在风湿性心脏炎发病免疫过程中的意义。方法 用反胶束萃取法提纯 ,分别检测提纯前后A HSMPA的成分及抗原性 ,再以A HSMPA及粒细胞 /单核细胞集落刺激因子 (GM CSF)分别刺激风湿性心脏炎组、风湿性心脏病静止期组、急性风湿性关节炎组、自身免疫性疾病组、非风湿性心脏病组、链球菌感染相关性疾病组及健康人对照组的外周血淋巴细胞 ,检测其人类白细胞抗原DR亚型 (HLA DR)分子表达量的改变。结果  1 提纯后的A HSMPA基本为蛋白成分 ,提纯前后抗原检测外周淋巴细胞促凝血试验结果无显著差异 ,链球菌壁多糖抗体则差异显著。 2 加入A HSMPA孵育后 ,风湿性心脏炎组HLA DR分子表达量的增加为 (19 5 5± 4 32 )× 10 -6A/cell,对照组为 (12 2 2± 6 2 9)× 10 -6A/cell,各组有显著性差异 ;而经GM CSF刺激后 ,以上各组无明显差别。 3 A HSMPA对风湿性心脏炎患者的刺激作用较GM CSF明显。 4 风湿性心脏炎患者随着症状的好转其HLA DR表达量亦减少。结论  1 反胶束萃取法可提纯A HSMPA并保持其抗原性不变 ,且简便可靠。 2 A HSMPA与HLA DR分子表达量的改变均在风湿性心脏炎发展成为风湿性心脏病过程中起了重要作用。 3 监测A 展开更多
关键词 抗原 风湿性心脏病 HLA-DR抗原 A组乙型溶血性链球菌膜蛋白抗原 纯化 A-HSMPA
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肺炎支原体重组蛋白抗原与膜蛋白抗原诊断试剂在临床应用中的比较 被引量:1
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作者 赵芝娜 李保强 +2 位作者 宋焕景 宋娟 王桂珍 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第11期804-805,826,共3页
目的以肺炎支原体(Mp)重组蛋白做包被抗原检测临床呼吸道感染患儿血清标本,验证重组蛋白抗原的诊断价值。方法利用Mp重组蛋白抗原包被酶标板,ELISA法检测临床疑似Mp感染患儿的血清标本,同时用Mp膜抗原被动凝集试验平行检测,并对比分析... 目的以肺炎支原体(Mp)重组蛋白做包被抗原检测临床呼吸道感染患儿血清标本,验证重组蛋白抗原的诊断价值。方法利用Mp重组蛋白抗原包被酶标板,ELISA法检测临床疑似Mp感染患儿的血清标本,同时用Mp膜抗原被动凝集试验平行检测,并对比分析两种方法的检测结果。结果重组蛋白抗原ELISA检测Mp抗体的阳性率为49.00%(98/200),膜抗原被动凝集试验Mp抗体的阳性率为63.50%(127/200)。两种检测方法的总符合率为70.50%。阳性符合率为58.45%。结论Mp重组蛋白抗原ELISA检测肺炎支原体感染有诊断价值,其特异性优于膜抗原被动凝集试验。 展开更多
关键词 肺炎支原体 重组蛋白抗原 膜蛋白抗原 ELISA
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泡桐丛枝植原体抗原膜蛋白基因序列分析与蛋白结构预测 被引量:5
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作者 岳红妮 吴云锋 史英姿 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第2期147-151,共5页
Paulownia witches’-broom disease which was caused by the paulownia witches’-broom phytoplasma(PaWB) is one of the severest diseases in paulownia production.Antigenic membrane protein(Amp) gene was cloned from Paulow... Paulownia witches’-broom disease which was caused by the paulownia witches’-broom phytoplasma(PaWB) is one of the severest diseases in paulownia production.Antigenic membrane protein(Amp) gene was cloned from Paulownia plants infected with Paulownia witches’-broom phytoplasma in Shaanxi Province.The gene was 696 bp in length,encoding a predicted protein of 231 amino acids.Homology analysis of sequence from PaWB and other 8 phytoplasmas of GenBank available showed that amp gene of PaWB was 100% identical to PaWB-Japan,and closely related to those of onion yellow(AY) and aster yellow(OY) in the same 16Sr Ⅰgroup with nucleotide acids sequences homology rate of 97%;However it had a lower nucleotide acids sequences homology rate of 37% with western X disease in 16Sr Ⅲ group.Prediction of protein structure showed that molecular weight of Amp was 24.7 ku and isoelectric point was 9.935.The Amp protein possessed acentral hydrophilic region and two hydrophobic transmembrane regions.There were several potential cleavage sites of signal peptide,the strongest cleavage site was at the end of Amp and there was no potential cleavage sites in the middle Amp.The information suggested that the protein should be of good antigenicity. 展开更多
关键词 泡桐丛枝植原体 抗原膜蛋白基因 同源性 蛋白结构
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HCV协同感染因子La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白和真核细胞翻译起始因子第三亚单位特异性siRNAs的筛选
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作者 王美霞 金铭 +2 位作者 段瑾 傅晓晴 徐斌 《医学研究杂志》 2012年第5期45-49,共5页
目的筛选Huh7细胞内La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白(hVAP-33)和真核细胞翻译起始因子第三亚单位(eIF2Bgamma)的特异性siRNAs。方法根据Genebank中的序列设计3种基因的特异性引物,在Huh7细胞中通过荧光定量PCR方法检测上述3种分子;根... 目的筛选Huh7细胞内La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白(hVAP-33)和真核细胞翻译起始因子第三亚单位(eIF2Bgamma)的特异性siRNAs。方法根据Genebank中的序列设计3种基因的特异性引物,在Huh7细胞中通过荧光定量PCR方法检测上述3种分子;根据siRNA设计原则针对每种基因设计合成3条siRNAs;分别将不同序列siRNA转染Huh7细胞,利用荧光定量PCR方法并计算ΔΔCT值筛选出针对每种基因抑制效率最高的一条siRNA。结果荧光定量PCR方法检测到了上述3种分子的存在;每种基因的3条不同siRNA对相应基因具有不同程度的沉默作用,通过ΔΔCT值的计算找出其中效率最高的一条。结论 Huh7细胞内可以检测到La自身抗原、hVAP-33和eIF2Bgamma基因,其特异性siRNAs可以沉默相应基因表达。 展开更多
关键词 RNA La自身抗原33kDa人类囊相关膜蛋白 真核细胞翻译起始因子第三亚单位
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查菲埃立克体120kDa抗原蛋白基因的克隆与表达
8
作者 陈亮 严延生 +2 位作者 翁育伟 王惠榕 于恩庶 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期13-16,共4页
目的 克隆查菲埃立克体 12 0kDa膜表面免疫决定性蛋白基因 ,并使之在原核表达系统中表达。方法 查菲埃立克体分离株 (91HE17)感染DH82细胞 40天后收集DH82细胞。根据查菲埃立克体P12 0蛋白基因序列设计特异性引物 ,套式PCR扩增查菲埃... 目的 克隆查菲埃立克体 12 0kDa膜表面免疫决定性蛋白基因 ,并使之在原核表达系统中表达。方法 查菲埃立克体分离株 (91HE17)感染DH82细胞 40天后收集DH82细胞。根据查菲埃立克体P12 0蛋白基因序列设计特异性引物 ,套式PCR扩增查菲埃立克体P12 0蛋白基因部分片段 ,将PCR扩增产物用BamHⅠ和EcoRⅠ限制性内切酶双酶切后与 pUC18载体连接 ,在获得阳性克隆子后用限制性内切酶将克隆片段切下 ,定向插入原核表达载体pProEXHTb构建 pProEXHTb/P12 0重组质粒。将重组质粒转化E .coliDH5α ,并使之在IPTG的诱导下进行蛋白质表达。结果 裁短成 10 80bp的查菲埃立克体P12 0蛋白基因克隆到 pUC18载体 ,用IPTG诱导 pProEXHTb/P12 0重组质粒转化的E .coliDH5α ,表达一分子量大小约为 47kDa的融合蛋白。结论 查菲埃立克体 12 0kDa抗原蛋白基因能在原核表达系统中表达 ,为诊断试剂盒的研制及其它研究工作提供了基础。 展开更多
关键词 查菲埃立克体 膜蛋白抗原 基因克隆 表达
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泡桐丛枝植原体抗原膜蛋白抗血清的制备及应用 被引量:9
9
作者 牟海青 周涛 +5 位作者 赵文军 朱水芳 林彩丽 李怀方 范在丰 田国忠 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期161-170,共10页
根据报道的泡桐丛枝植原体(Paulownia witches'-broom phytoplasma,PaWB)抗原膜蛋白(antigenic membrane pro-tein,AMP)基因的核苷酸序列设计引物,提取发病泡桐总DNA,经PCR扩增并成功克隆泡桐丛枝植原体amp基因。序列分析表明,amp... 根据报道的泡桐丛枝植原体(Paulownia witches'-broom phytoplasma,PaWB)抗原膜蛋白(antigenic membrane pro-tein,AMP)基因的核苷酸序列设计引物,提取发病泡桐总DNA,经PCR扩增并成功克隆泡桐丛枝植原体amp基因。序列分析表明,amp基因由696个核苷酸组成,编码231个氨基酸残基,与GenBank中登录的2个泡桐丛枝植原体的膜蛋白核苷酸序列同源性为100%。将amp基因91-604 nt部分序列(命名为ampd)克隆到原核表达载体pGEX-4T-3,诱导后,经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表明融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了高效表达。以纯化的带GST标签的AMPD融合蛋白为抗原免疫德国大白兔,制备了PaWB-AMPD抗血清。利用该血清,通过Western印迹、点印迹、ELISA、间接免疫荧光和免疫捕获PCR试验均能在发病泡桐组织中特异检测到泡桐丛枝植原体。 展开更多
关键词 泡桐丛枝病 植原体 抗原膜蛋白 大肠杆菌
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间接ELISA法检测生殖器支原体抗体及湖北省出入境人员生殖器支原体感染的调查
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作者 秦红 牛丽莉 +1 位作者 汤纪路 刘先洲 《旅行医学科学》 2005年第1期10-13,共4页
目的寻找特异、灵敏、快速的临床检测支原体方法和对湖北省出入境人员不同人群进行 Uu、Mh、Mg 的感染情况进行分析。方法(1)应用解脲脲原体8、6血清型标准株、人型支原体标准株、生殖器支原体标准株提取 Uu、Mh、Mg 膜蛋白抗原。采用间... 目的寻找特异、灵敏、快速的临床检测支原体方法和对湖北省出入境人员不同人群进行 Uu、Mh、Mg 的感染情况进行分析。方法(1)应用解脲脲原体8、6血清型标准株、人型支原体标准株、生殖器支原体标准株提取 Uu、Mh、Mg 膜蛋白抗原。采用间接 ELISA 法检测 Uu、Mh、Mg 血清抗体。(2)ELISA 检测、分离培养及 PCR 检测三种方法对支原体 Uu、Mh、Mg 的检测结果进行列联比较。(3)同时采用间接 ELISA 法对湖北省出入境人员不同人群进行 Uu、Mh、Mg 的检测和分析。结果对100例STD 病人分离培养阳性结果为 Uu42株,Mh19株;PCR 阳性结果为 Uu45例。Mh24例,Mg8例。ELISA 血清抗体检查结果为 Uu 阳性38份,Mh 阳性22份,Mg 抗体阳性为7份;ELISA 检测 Uu、Mh、Mg 血清抗体与 PCB、分离培养方法检测结果比较无显著性差异;STD 门诊的 Uu、Mh 抗体阳性检出率明显高于湖北省出入境各类人群的 Uu、Mh 抗体检出率。结论间接 ELISA 法检测 Uu、Mh、Mg 血清抗体与分离培养及 PCR 检测的特异性、灵敏性相当,而且快速、简便,是一种较为理想的新临床及流行病学检测手段。Uu、Mh 的感染与性传播疾病有密切的相关性,定期检测支原体将是及时发现与控制相关妇科疾病和 STD 的重要措施。 展开更多
关键词 ELISA法检测 出入境人员 生殖器支原体感染 湖北省 支原体抗体 ELISA检测 间接ELISA法 PCR阳性结果 PCR检测 血清抗体 分离培养方法 不同人群 解脲脲原体 人型支原体 膜蛋白抗原 检测和分析 STD病人 显著性差异 STD门诊
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