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泛素介导的植物膜蛋白转运及其研究方法 被引量:3
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作者 苏泊丹 林金星 肖建伟 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期387-395,共9页
泛素(Ub)是一类小分子多肽,可通过赖氨酸残基与靶蛋白结合,进而决定靶蛋白的去向。泛素分子对靶蛋白进行特异性修饰的过程称为泛素化。相较于动物和酵母细胞,植物细胞中泛素介导的蛋白动态循环,尤其是膜蛋白胞吞动态循环研究相对滞后。... 泛素(Ub)是一类小分子多肽,可通过赖氨酸残基与靶蛋白结合,进而决定靶蛋白的去向。泛素分子对靶蛋白进行特异性修饰的过程称为泛素化。相较于动物和酵母细胞,植物细胞中泛素介导的蛋白动态循环,尤其是膜蛋白胞吞动态循环研究相对滞后。随着生物化学以及显微技术的发展,人们对泛素介导的植物细胞膜蛋白转运有了新的认识。该文阐述了泛素及类泛素在蛋白转运中的作用,总结了泛素化(ubiquitylation)调控膜蛋白转运的分子生物学机制和常用的研究方法,并对今后该领域的研究进行了展望。 展开更多
关键词 膜蛋白转运 泛素 泛素化
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超表达转运膜蛋白21对介导阿尔茨海默氏病γ分泌酶复合物重要组分PS-1及NCT蛋白表达量的影响
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作者 博·格日勒图 董贵成 +4 位作者 王迎春 阿拉坦高勒 王静 门中华 赵俊利 《内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版)》 CAS 2009年第2期198-202,共5页
研究转运膜蛋白21(TMP21)在小鼠胚胎成纤维细胞中超表达对PS-1及NCT蛋白表达量的影响.脂质体介导TMP21 cDNA转染敲除淀粉样前体蛋白表达基因的小鼠胚胎成纤维细胞系(MEF(KO)),以梯度浓度G418筛选TMP21表达量最高的细胞.处理超表达组(T)... 研究转运膜蛋白21(TMP21)在小鼠胚胎成纤维细胞中超表达对PS-1及NCT蛋白表达量的影响.脂质体介导TMP21 cDNA转染敲除淀粉样前体蛋白表达基因的小鼠胚胎成纤维细胞系(MEF(KO)),以梯度浓度G418筛选TMP21表达量最高的细胞.处理超表达组(T)和对照组(C)细胞,并收集纯化过程中含γ分泌酶复合物的样本,用Western blotting检测γ分泌酶复合物重要组分Nicastrin(NCT)、Presenilin-1(PS-1)以及TMP21的蛋白表达量.结果表明,样本T1、T2及IPT2所含TMP21的蛋白表达量较相应对照组样本C1、C2和IPC2分别上升11.5%(P=0.08)、28.1%(P<0.01)及69.1%(P<0.001),提示经TMP21 cDNA转染后MEF(KO)细胞中TMP21蛋白表达明显提高,而转染组和对照组中,构成γ分泌酶复合物的重要组分NCT与PS-1蛋白表达量无明显变化.这表明在TMP21蛋白高表达状态下,不会影响MEF(KO)细胞中γ分泌酶复合物的重要组分NCT与PS-1蛋白表达量. 展开更多
关键词 脱氧核糖核酸超表达 转运膜蛋白21 Presenilin-1(PS-1) Nicastrin(NCT) 免疫印迹反应 Γ分泌酶
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超表达状态下的TMP21对介导阿尔茨海默氏病γ分泌酶复合物活性影响的研究
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作者 董贵成 王迎春 +4 位作者 阿拉坦高勒 王静 门中华 赵俊利 博.格日勒图 《内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版)》 CAS 2009年第2期203-208,共6页
研究转运膜蛋白21(TMP21)在小鼠成纤维细胞中超表达状态下,对γ分泌酶活性的影响.利用TMP21 cDNA转染敲除淀粉样前体蛋白表达基因的小鼠胚胎成纤维细胞系(MEF(KO)),以梯度浓度G418筛选TMP21表达量最高的细胞.处理超表达组(T)和对照组(C... 研究转运膜蛋白21(TMP21)在小鼠成纤维细胞中超表达状态下,对γ分泌酶活性的影响.利用TMP21 cDNA转染敲除淀粉样前体蛋白表达基因的小鼠胚胎成纤维细胞系(MEF(KO)),以梯度浓度G418筛选TMP21表达量最高的细胞.处理超表达组(T)和对照组(C)细胞,并收集纯化含γ分泌酶复合物的样本.用Western blotting检测TMP21蛋白表达量,选用饱和浓度的γ分泌酶底物C99,运用ELISA检测A-βpeptide40和A-βpeptide42的生成总量.结果表明,样本T1、T2及IPT2所含TMP21的蛋白表达量较相应对照组样本C1、C2和IPC2分别上升11.5%(P=0.08),28.1%(P<0.01),69.1%(P<0.001),提示经TMP21 cDNA转染后MEF(KO)细胞中TMP21蛋白表达明显提高.同时,对照样本C1、C2及IPC2,样本T1、T2及IPT2中所含γ分泌酶活性分别降低33.4%(P=0.01),71.9%(P<0.001),96.5%(P<0.001).转染组样本中,样本IPT2所含γ分泌酶活性最低,提示经处理γ分泌酶得到明显纯化分离,与Western blotting所得结果一致.因此,高表达状态下的TMP21蛋白,对MEF(KO)细胞中γ分泌酶的活性具有明显的降低作用,表明TMP21为γ分泌酶的负调控因子之一. 展开更多
关键词 脱氧核糖核酸超表达 转运膜蛋白21 γ分泌酶活性 酶联免疫反应 免疫印迹反应
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肝细胞极性与膜蛋白分选的分子机制 被引量:1
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作者 聂萌 王林 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2014年第1期1-13,共13页
肝细胞是高度特化的极性上皮细胞,细胞质膜蛋白的分选和极性转运对于肝细胞极性的建立与维持至关重要.首先,膜蛋白在内质网中合成,随后经高尔基体加工修饰,再由反面高尔基体进一步分选,最后通过膜泡运输等不同的机制分别转运到胆汁腔面... 肝细胞是高度特化的极性上皮细胞,细胞质膜蛋白的分选和极性转运对于肝细胞极性的建立与维持至关重要.首先,膜蛋白在内质网中合成,随后经高尔基体加工修饰,再由反面高尔基体进一步分选,最后通过膜泡运输等不同的机制分别转运到胆汁腔面或窦状隙面,行使其特殊的功能.近些年来,细胞内负责转运的细胞器和主要的分选信号已逐步被揭示.特别是循环内体也被证明参与了胆汁腔面和窦状隙面膜蛋白的极性分选和转运.肝细胞的极性一旦遭到破坏,将会引起胆汁分泌障碍以及其他肝脏功能的损伤,从而可能导致肝脏糖脂代谢紊乱,甚至丧失正常的生理功能.因此,深入研究肝脏细胞极性的形成与维持机制,将为多种肝脏疾病的预防和治疗寻找到新的方向和靶点,具有重要的理论和临床实践意义. 展开更多
关键词 肝细胞极性 胆汁腔面 窦状隙面 膜蛋白极性转运 循环内体 胆汁淤积
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伊立替康用于晚期结肠癌患者临床效果观察 被引量:5
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作者 陈贵生 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第32期79-81,共3页
目的探讨伊立替康对晚期结肠癌的治疗作用及其机制。方法选择晚期(Ⅳ期)结肠癌患者68例,根据患者治疗意愿分为观察组34例和对照组34例。两组均予5-氟尿嘧啶(5-FU)联合甲酰四氢叶酸钙(LV)方案化疗,观察组在此基础上静滴伊立替康180 mg/m... 目的探讨伊立替康对晚期结肠癌的治疗作用及其机制。方法选择晚期(Ⅳ期)结肠癌患者68例,根据患者治疗意愿分为观察组34例和对照组34例。两组均予5-氟尿嘧啶(5-FU)联合甲酰四氢叶酸钙(LV)方案化疗,观察组在此基础上静滴伊立替康180 mg/m2。两组均连续化疗3个周期评价疗效;化疗前及化疗3个周期结束时分别采集外周空腹静脉血,采用ELISA法检测血清ABC转运蛋白超家族跨膜蛋白2(ABCG2)、成纤维细胞生长因子结合蛋白1(FGFBP1);比较两组化疗期间不良反应(消化道反应及骨髓抑制)发生情况。结果观察组及对照组治疗有效率分别为41.38%、23.53%(P<0.05)。化疗前两组血清ABCG2、FGFBP1水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。观察组化疗后血清ABCG2、FGFBP1水平均较化疗前下降,且均低于对照组化疗后(P均<0.05)。对照组化疗后血清FGFBP1水平较化疗前下降(P<0.05),化疗前后血清ABCG2水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组化疗期间不良反应发生情况比较无明显差异。结论伊立替康用于晚期结肠癌安全、有效,降低血清ABCG2、FGFBP1水平可能是其作用机制。 展开更多
关键词 结肠癌 伊立替康 ABC转运蛋白超家族跨膜蛋白2 成纤维细胞生长因子结合蛋白1
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Retinal dopamine transporter in experimental myopia 被引量:2
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作者 席晓勍 褚仁远 +2 位作者 周行涛 卢奕 刘兴党 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第7期1027-1030,149,共4页
OBJECTIVE: To investigate the distribution, changes and a possible role for retinal dopamine transporter (DAT) in experimental myopia in chickens. METHODS: Two-day-old chickens were divided into four groups. Chicken e... OBJECTIVE: To investigate the distribution, changes and a possible role for retinal dopamine transporter (DAT) in experimental myopia in chickens. METHODS: Two-day-old chickens were divided into four groups. Chicken eyes were fitted with lenses of -10D,-20D and translucent goggles unilaterally. Normal eyes were used as controls. After 3 wk, all chickens were given an intramuscular injection of (125)I-beta-CIT 2beta-carbomethoxy-3beta-(4-iodophenyl)tropane and sacrificed two hours post injection. Retinal pigment epithelium (RPE) and the neural retina were obtained together or RPE was dissected out from the neural retina. Radioactive DAT from each specimen was assayed by gamma-counter. RESULTS: Retinal DAT was detected in RPE specimens rather than in the neural retina in all eyes. Radioactive DAT in myopic eyes was higher, compared with control eyes. CONCLUSIONS: Retinal DAT is mainly located in the RPE and may be involved in the formation of lens induced myopia (LIM) and form deprivation myopia (FDM). These methods may provide a new approach for further studying the role of the dopamine system in experimental myopia. 展开更多
关键词 Membrane Glycoproteins Nerve Tissue Proteins ANIMALS CHICKENS Dopamine Plasma Membrane Transport Proteins Eye Membrane Transport Proteins MYOPIA Research Support Non-U.S. Gov't RETINA
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Synthesis and optical behaviors of 6-seleno-deoxyguanosine
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作者 KAUR Manindar HUANG Zhen 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2014年第2期314-321,共8页
We have developed a simple method to synthesize 6-seleno-2′-deoxyguanosine(SedG)by selectively replacing the 6-oxygen atom with selenium.This selenium-atom-specific modification(SAM)alters the optical properties of t... We have developed a simple method to synthesize 6-seleno-2′-deoxyguanosine(SedG)by selectively replacing the 6-oxygen atom with selenium.This selenium-atom-specific modification(SAM)alters the optical properties of the naturally occurring2′-deoxyguanosine(dG).Unlike the native dG,the UVabsorption ofSedG is significantly influenced by the pH of the aqueous solution.Moreover,SedG is fluorescent at the physiological pH and exhibits pH-dependent fluorescence in aqueous solutions.Furthermore,SedG has noticeable fluorescence in non-aqueous solutions,indicating its sensitivity to environmental changes.This is the first time a fluorescent nucleoside by single-atom alteration has been observed.Fluorescent nucleosides modified by a single atom have great potential as molecular probes with minimal perturbations to investigate nucleoside interactions with proteins,such as membrane-transporter proteins. 展开更多
关键词 selenium derivatization and fluorescence nucleoside with single-atom modification fluorescent DNA RNA nucleicacid probes
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