阳离子膜融合脂质体介导反义寡核苷酸在Hela细胞中的转染实验研究

目的 研究阳离子膜融合脂质体 (CFL)介导反义寡核苷酸 (ASON)的细胞转染效率及影响因素。方法逆相蒸发法制备 3种不同阳离子含量的脂质体 (CL) ,在CL上引入仙台病毒形成CFL ,将制得的阳离子膜融合脂质体与反义寡核苷酸混合得到复合物 ,考察形态学及载药量 ,用MTT法考察该载体的细胞毒性 ,流式细胞仪测定阳性细胞百分率和平均荧光强度。结果 制得的CFL形态均匀 ,粒径为 (16 8± 6 5 )nm。载药量随着磷脂 ASON(+ - )电荷比增加而增加。CFL细胞毒性明显低于相同电荷比的CL ,细胞转染效率是随阳离子含量、磷脂 ASON(+ - )电荷比增加而增加 ,血清和低温均对CFL的细胞转染有影响。结论 阳离子膜融合脂质体作为载体在低电荷比条件下可降低细胞毒性并可提高细胞转染效率 ,可作为该ASON的给药系统而进一步研究。

阳离子膜融合脂质体包裹DNA体外转染和稳定性研究

目的 研究阳离子膜融合脂质体包裹DNA的体外稳定性以及体外细胞转染。方法 采用表达E .coilβ 半乳糖苷酶的pSV4 0 β报告基因质粒及组化染色评价阳离子膜融合脂质体的转染效率。用DNase 1考察阳离子膜融合脂质体的体外稳定性。结果 当阳离子膜融合脂质体 (CFL)及阳离子脂质体 (CL)与DNA电荷比为 (2∶1)时 ,CFL的转染效率为 (4 2 .3±4 .3) % ,明显高于CL的转染效率 (2 3.9± 2 .1) % ,且有很较高的稳定性。结论 CFL可作为载体有待进一步研究。

阳离子膜融合脂质体的细胞转染机制及其保护作用

目的探讨阳离子膜融合脂质体(CFL)介导反义寡核苷酸(ASON)的细胞转染机制和抗核酸酶的作用。方法用流式细胞仪检测不同转染条件下,阳离子膜融合脂质体(CFL)介导反义寡核苷酸(ASON)细胞摄取的情况,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测阳离子膜融合脂质体对反义寡核苷酸的保护作用。结果在转染4h后,细胞内总荧光强度已达峰,此时CFL/ASON细胞摄取效率约为游离ASON的30倍。在低能量(4℃)或有溶酶体酶抑制剂(氯喹)的条件下,细胞内的荧光强度未发生明显改变,可推测阳离子膜融合脂质体介导的细胞转染机制主要是融合而非内吞途径。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳证实阳离子膜融合脂质体具有保护ASON的抵抗核酸酶降解的作用。结论阳离子膜融合脂质体有望成为ASON理想的传递系统。

以膜融合脂质体为载体治疗肿瘤的研究进展

本文介绍了膜融合脂质体的膜融合机制、制备及其在近几年来肿瘤治疗方面的研究进展，研究显示膜融合脂质体具有制备方法简单，不良反应小，有融合特性等特点，作为一种新型的载体系统，在肿瘤治疗方面有着广阔的发展前景。

膜融合脂质体给药系统的研究进展

膜融合脂质体是在传统脂质体基础上引入具有融合特性的病毒而形成的一种新的给药系统 ,它是介于病毒与非病毒性载体之间的杂合体 ,本文主要对膜融合脂质体给药系统的构建、特点。

膜融合脂质体为载体的黑色素瘤疫苗的研究

目的 制备膜融合脂质体为载体的黑色素瘤疫苗 ,并评价免疫小鼠所产生的细胞免疫和体液免疫。方法 从B16黑色素瘤中提取混合蛋白质作为抗原 ,将其包封在脂质体中并与仙台病毒融合形成的膜融合脂质体 ,制成疫苗。考察膜融合脂质体的形态及粒径分布 ,测定小鼠免疫后的细胞毒T淋巴细胞 (CTL)反应活性及血浆中总的IgG的浓度。结果 以普通脂质体为载体或游离的蛋白质制备的疫苗只能产生体液免疫反应而不能诱发细胞毒T淋巴细胞反应 ;以膜融合脂质体为载体的疫苗既可产生体液免疫又可诱发强烈的CTL反应 (P <0 .0 0 1) ,并能抑制肿瘤细胞的生长。

膜融合脂质体作为疫苗载体的研究进展

目的 对病毒 脂质体融合形成的膜融合脂质体的融合机制、制备方法、抗原导入、抗原呈递及其作为疫苗导入载体的研究进展做一分析和总结。方法 总结近几年来有关方面的文献。结果 膜融合脂质体可以将抗原导入到细胞质中 ,并诱发强烈的CTL反应。膜融合脂质体的融合为融合蛋白的空间结构发生变化所致。结论 膜融合脂质体是一种非常有发展前景的抗原导入载体。

新型脂质体的研究进展

作为药物传递系统的载体,几种新型脂质体如膜融合脂质体、柔性脂质体、表面修饰脂质体等的研究己取得显著进展。本文归纳和分析了近期有关脂质体稳定性、靶向性及修饰材料的文献。

中药脂质体应用研究进展

中药脂质体在我国的研究主要是在单味药方面,主要因为质量标准和制剂工艺较难。所以应从药味少、疗效较好的中药方入手。针对中药提取物成分复杂,提取物量大的特点,应以将中药有效成分或较纯的有效部位制成脂质体着手。口服给药途径为主是中药的重要特点之一,但有关脂质体口服给药后对中药活性成分吸收、分布、代谢、排泄的影响还需要更多的研究。中药脂质体的制备应根据其有效成分的靶点并结合中医理论,与时代结合开发新的剂型。