小麦分离合子与幼胚中膜钙和钙调素的分布

用非酶手工显微解剖法分离小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）合子与幼胚。应用金霉素（ＣＴＣ）和氟奋乃静（ＦＰＺ）荧光探针，观察了合子与胚胎发育过程中膜钙和活化钙调素的分布。合子原生质体ＣＴＣ荧光呈极性分布。二细胞至十几个细胞原胚时期各细胞间的ＣＴＣ和ＦＰＺ荧光均匀分布。幼小梨形胚胚体ＣＴＣ和ＦＰＺ荧光稍强于胚柄。接近分化的梨形胚ＣＴＣ荧光仅位于胚体与胚柄之间的几层细胞和胚体腹侧中部的几个细胞中。胚芽刚分化时，胚基部ＣＴＣ荧光较强，ＦＰＺ荧光则仅出现在胚基部。讨论了合子分离技术和膜钙与钙调素（ＣａＭ）在胚胎发育中的可能作用。

胰岛素作用的跨膜钙离子流变化与人肝癌细胞增殖的关系

目的 :揭示胰岛素影响人肝癌细胞增殖的机制。方法 :利用人肝癌细胞系 (HepG - 2 )为靶细胞 ,以原子吸收光谱技术检测胰岛素对靶细胞跨膜钙离子流影响 ,同时结合钙离子拮抗剂 (isoptin)的作用来研究靶细胞的增殖变化。结果 :胰岛素能明显促使靶细胞跨膜钙离子内流而改变其恒态 ,并对靶细胞增殖有明显的促进作用 ;而钙离子拮抗剂却明显抑制其细胞的增殖。结论 :胰岛素促使人肝癌细胞增殖的机制与其细胞跨膜钙离子流恒态的变化密切相关。

老化红细胞变形能力与膜钙依赖中性蛋白酶活性的关系

Objective: To explore the correlation between erythrocyte deformability and the activity of Ca 2+ dependent protease(calpain) in aging erythrocyte. Methods: The erythrocyte filtration index(EFI), calpain and Ca 2+ ATPase activities, and the content of spectrin(SP) were determined respectively in young and aged erythrocyte of 42 healthy subjects by using the erythrocyte deformability apparatus, spectrophotometry and gel electrophoretic analysis. Results: The EFI and the activity of calpain were significantly higher, the activity of Ca 2+ ATPase and the relative content of SP in erythrocyte membrane were significantly lower in aged erythrocytes than those in young( P all < 0.001 ). The EFI was positively correlated with calpain activity in aged erythrocyte( r = 0.627 , P < 0.001 ), negatively correlated with Ca 2+ ATPase activity and SP relative content( r = -0.505 , -0.611 , P < 0.001 ). The erythrocyte membrane Ca 2+ ATPase activity and SP relative content were negatively correlated with the calpain activity( r = -0.614 , -0.592 , P < 0.001 ). Conclusion: The decrease of aged erythrocyte deformability was closely related to the hemolysis and degradation of erythrocyte membrane skeleton proteins caused by the increase of calpain activity in aged erythrocytes.

大鼠胰岛β细胞原代分离培养及近膜钙离子测定技术研究

目的探讨一种简单易行的大鼠胰岛β细胞的原代分离及培养方法,并探索近细胞膜钙离子的测定技术。方法雄性SD大鼠胰腺用V型胶原酶消化分离得到胰岛,胰酶逐级消化胰岛,分离出β细胞,从而建立大鼠胰岛β细胞分离、原代培养方法。用近膜钙离子荧光探针FFP-18/AM孵育、负载β细胞,利用激光共聚焦技术测定β细胞近膜钙离子的分布和变化。结果原代分离获得的胰岛具有良好的活性,β细胞经鉴定纯度较好。激光共聚焦测定FFP-18/AM负载胰岛β细胞,近膜钙离子呈蓝色荧光,不均匀分布于近细胞膜附近。结论建立了大鼠胰岛β细胞的原代分离、培养方法,以及β细胞近膜钙离子测定技术。

钙化条件对海藻酸钙膜钙含量和拉伸强度的影响

采用不同钙源制备海藻酸钙膜,根据膜的钙含量和拉伸强度确定了钙源的种类、钙化温度、钙化时间和钙化浓度。结果表明,在钙源选择氯化钙,钙化溶液的温度选择40℃,钙化时间选择20 min,钙化质量分数选择3%时,得到的海藻酸钙膜的钙含量最多、拉伸强度最大,并且膜拉伸强度的变化趋势与钙含量变化趋势基本一致。

跨膜钙梯差对葡萄糖转运体构象与活性的影响

用正向封闭的血影膜囊泡(ROVs)或重组脂蛋白体分别研究了跨膜Ca^(2+)梯差对人红细胞葡萄糖转运体(Glut 1)活性的影响。结果表明在跨膜Ca^(2+)梯度100倍时(Ca_o:Ca_i=1 000μmol/L:10μmol/L)Glut 1的转运活性为最高。然后,随着跨膜Ca^(2+)浓度梯度的降低,Glut 1的活性也逐渐下降。对跨膜Ca^(2+)梯差影响Glut 1构象进行了以下研究:(1)用ATP或D-葡萄糖对Glutl荧光淬灭滴定;(2)Glut 1内源荧光强度测定与荧光淬灭;(3)用IAEDANS和NPM分别对Glut 1胞浆微区巯基(cys-207)与膜微区的巯基进行标记;(4)用DPH荧光探针测定膜的流动性等。结果表明一个合适的跨膜Ca^(2+)浓度梯度的存在对于调节Glut 1的功能和构象具有重要意义。

锌钙系复合磷化膜的制备及其对16Mn钢腐蚀防护性能的影响

通过磷酸盐沉淀结晶过程将聚四氟乙烯(PTFE)颗粒引入锌钙系磷化膜中获得锌钙系复合磷化膜,并研究PTFE颗粒分散液添加量和搅拌速度对锌钙系磷化膜的微观形貌、化学组成、PTFE颗粒含量、厚度以及对16Mn钢的腐蚀防护性能的影响。结果表明:改变PTFE颗粒分散液添加量或搅拌速度制备的不同锌钙系复合磷化膜晶粒大小较均匀,但是呈散乱无序状堆积,PTFE颗粒附着在晶粒表面并填补晶粒间孔洞,起到阻挡腐蚀介质并阻碍腐蚀反应的作用,明显提高锌钙系复合磷化膜的耐腐蚀性能。当搅拌速度为300 r/min时,添加25 mL/L PTFE颗粒分散液制备的锌钙系复合磷化膜晶粒表面附着较多PTFE颗粒,并且颗粒呈较均匀分散状态很好的填补晶粒间孔洞。该复合磷化膜含有Zn、Ca、P、O、C和F元素,PTFE颗粒的含量和厚度分别达到4.1%、12.4μm,具有最高的电荷转移电阻8528Ω·cm^(2)和低频阻抗值6015Ω·cm^(2),表现出优异的耐腐蚀性能,使16Mn钢的腐蚀防护性能明显优于常规锌钙系磷化膜。

氯化钙/聚乙烯醇涂膜处理对脆红李生理生化的影响

为降低脆红李采后腐烂率,减缓果实后熟与衰老,延长货架期,以脆红李为试材,对比2%氯化钙浸泡、聚乙烯醇涂膜、2%氯化钙浸泡+聚乙烯醇涂膜3种保鲜处理在4℃贮藏环境中对脆红李的可滴定酸(TA)、可溶性固形物(SSC)、呼吸强度、硬度、丙二醛含量(MDA)、多聚半乳糖醛酸酶(PG)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性等生理、生化指标的影响。结果表明:2%氯化钙浸泡+聚乙烯醇涂膜的复合保鲜方式有效延缓TA含量降低并维持在0.8%以上,减缓SSC含量上升(P<0.05),保持在16°Brix左右,将果实硬度保持在14.11 N以上,较好地维持了脆红李风味及口感,同时把呼吸强度维持在4.9758~19.9898 mg/h·kg范围波动,抑制脆红李的呼吸强度(P<0.05),第30天时PG活性才逐步上升至70.72μg/h·g FW,显著抑制PG活性(P<0.05),降低MDA累积,在12~24 d内显著抑制PPO活性(P<0.05)使其从0.2 U/g FW逐步下降至0.058 U/g FW,延缓了果实的后熟与衰老。采后用2%氯化钙浸泡后结合聚乙烯醇涂膜复合处理的脆红李在4℃冷藏条件下保鲜效果最好,能有效延缓脆红李的衰老变质。

促进剂对建筑结构钢锌钙系磷化膜形貌和耐蚀性的影响

在含硝酸盐的基础磷化液中分别添加钼酸钠、硝酸镧以及它们的组合作为促进剂,在建筑结构钢表面制备出不同锌钙系磷化膜。研究了促进剂对不同磷化膜的形貌、成分和耐蚀性的影响。结果表明:钼酸钠、硝酸镧以及它们的组合作为促进剂都可以使磷化膜结晶致密化,进而提高磷化膜的耐蚀性。尤其是钼酸钠和硝酸镧的组合作为促进剂,可以明显改善磷化膜的形貌,获得的磷化膜具有良好的耐蚀性,其容抗弧半径最大,电荷转移电阻和低频时的阻抗值分别达到2.476 kΩ·cm^(2)、2.147 kΩ·cm^(2),表面的液滴变色时间达到165 s。硝酸镧作为促进剂不会对磷化膜的成分产生影响,而钼酸钠以及钼酸钠和硝酸镧的组合作为促进剂对磷化膜的成分有一定影响。使用含钼酸钠和硝酸镧的基础液获得的锌钙系磷化膜更适用于建筑结构钢防腐蚀保护。

地氟醚对大鼠心肌细胞质膜钙ATP酶活性的影响

目的 观察地氟醚对心肌细胞质膜Ca2 + ATPase活性的影响 ,探讨其心肌抑制作用的机制。方法 参照文献方法制备大鼠心肌细胞质膜 ,观察不同浓度 (0 %～ 11% )地氟醚在底物缓冲液不同钙离子浓度 (0 4～ 2 0 μmol/L)或反应温度 (2 5℃、37℃ )时 ,对质膜Ca2 + ATPase活性的影响。结果 随地氟醚浓度的升高 ,质膜Ca2 + ATPase活性逐渐下降。同一浓度地氟醚对Ca2 + ATPase的抑制作用在反应底物缓冲液中钙离子浓度低时大于高时 ,37℃时大于 2 5℃时。结论 临床使用浓度的地氟醚抑制心肌细胞Ca2 + ATPase的活性 。

银杏嫁接体的愈伤组织发生与膜钙离子的变化

银杏幼苗嫁接体早期发育过程中愈伤组织发生与胞内钙离子变化的关系 .嫁接后第 2天 ,嫁接面上部分未受伤的皮层薄壁组织细胞和髓薄壁组织细胞开始脱分化或已进行细胞分裂 .嫁接后第 8天 ,皮层和韧皮部中产生了大量的愈伤组织细胞 ,连接砧木与接穗的愈伤组织桥也已在皮层细胞的愈伤组织中形成 .用膜钙离子探针氯四环素 (CTC)检测胞内钙离子分布时 ,发现皮层薄壁组织细胞和髓薄壁组织细胞最早显示出明显增强的CTC Ca2 + 荧光 .

砾石钙膜显微纹层的扫描图像分析及其测年意义

砾石钙膜作为一种反映环境变化的沉积物标志 ,记录了比较完整的环境和气候信息 ,其实物的直接表现形式就是沉积了明暗相间的纹层 ,而形成明暗纹层的主要原因是受沉积时碳酸盐的纯度和结晶物的粒度以及杂质等的影响。作者用普通的扫描仪获取钙膜纹层明暗度图像 ,通过计算机自动识别获取明暗度变化的特征曲线 ,并将其与深海氧同位素曲线、黄土 -古土壤序列、黄土粒度曲线、磁化率曲线等进行对比分析 ,从而达到确定砾石钙膜所代表的地貌面年龄的目的 ,同时分析其气候效应。初步研究表明 ,这种方法是可行的 ,它不仅提高了定年的精度和时间跨度 ,同时也拓宽了沉积物年代学方法在古环境及古气候研究中的应用。

玉树活动断裂带古地震落石的钙膜U系年代学测试分析及其意义探讨

在2010年青海玉树7.1级大地震中,沿发震断裂带多处出现了明显的地震落石现象。地表调查发现,典型的最新地震落石发育区均存在非常典型的具原地复发特征的多期古地震落石现象,且落石表面常见薄层（厚度≤2mm）钙膜发育。在对几处典型古地震落石钙膜进行系统采样的基础上,应用稀酸淋滤法,开展了地震落石钙膜的U系年代测定分析工作。测年结果指示,其年龄主要分布在69 980a、36 300a、14 900-12 700a、6 030a、4 720a、3 560-3 530a、2 010-1 090a、760a和230a左右。这一结果与地表观测到的地震落石多期性特征基本吻合,也与古地震探槽和古地震滑坡所揭示的古地震事件年龄大致吻合,这进一步证实了玉树活动断裂带附近的地震落石发育具有明显的多期性特征,并且多期落石很可能与该区的古地震活动之间存在密切的成因联系。进一步结合野外调查结果及已有的古地震研究资料推断,该区几处较大规模的古地震落石现象应该主要是Q3p晚期以来较大强度古地震事件的反映,其中发生在3 560-3 530a BP和14 900-12 700a BP左右的2期古地震事件的强度可能最大。上述探索性研究工作表明,地震落石的钙膜测年有可能成为研究活动构造区古地震活动的新途径。

海藻酸钙膜引导兔颌骨缺损骨再生的对照实验

目的 比较观察两种国产可吸收性生物膜对引导性骨再生的影响 ,探讨海藻酸钙膜在骨缺损应用中的优势。方法 以家兔为研究对象 ,在其双侧下颌角前切迹处造成洞形骨缺损 ,实验侧覆盖海藻酸钙膜 ,对照侧覆盖胶元膜 ,分别在术后 1、2、4、6、8周时取出下颌骨 ,进行大体观察、X线观察、组织学观察、电镜观察以及免疫组化染色后对 3种骨诱导因子含量进行测量。结果 海藻酸钙膜 4～ 6周吸收 ,胶元膜 6～ 8周吸收 ;前者组织反应程度轻 ,后者反应程度重 ;术后 6周内实验侧BMP、骨钙素、VEGF总体含量明显高于对照侧 (P <0 .0 1) ;电镜下实验侧胶原纤维和骨小梁比对照侧出现早、多、有序。

用^(45)Ca跨膜测量技术研究藿香、佩兰的钙拮抗作用的活性成分

为了研究藿香、佩兰治疗冠心病的有效成分，依次用正己烷、氯仿、甲醇和水进行分离提取，并用４５Ｃａ跨膜测量技术进行钙拮抗作用分析。结果表明：正己烷提取部分钙拮抗作用最好；将正己烷组分作柱层析，发现七个组分具有活性；藿香中的墨绿色带、佩兰中的橙色带的钙桔抗作用最强。

海藻酸钙膜引导下颌骨缺损再生机理的实验研究

目的:实验已经研究了海藻酸钙膜应用于骨缺损再生的有效性和优越性,作者进一步探讨其引导骨再生的机制。方法:以家兔为研究对象,在其双侧下颌骨形成洞形骨缺损,实验侧骨缺损上覆盖海藻酸钙膜,对照侧未覆盖任何膜,分别在术后1、2、4、6、8周时取出下颌骨,进行大体观察、X线观察、组织学光镜观察、电镜观察以及TGF-β、VEGF免疫组化染色。结果:海藻酸钙膜4～6周吸收;实验侧术后18天X线观察可见骨密度接近正常皮质骨,对照侧4周才达到;前者大体观骨缺损愈合表面平整,后者表面不连续;实验侧术后2周光镜下可见骨小梁构成编织骨,对照侧4周方可见;电镜下术后6周实验侧骨痂致密,对照侧骨痂疏松。TGF-β、VEGF免疫组化表达则有其成骨作用的时空性。结论:海藻酸钙膜通过对骨诱导因子的早期调控引导骨再生,更快地促进骨缺损的愈合,且4～6周降解不影响骨再生修复。

阿尔金山东段山前砾石钙膜累积速率及其在估算断层活动年代方面的应用

干旱—半干旱地区冲洪积物顶面土壤中发育的砾石钙膜含有明显的年龄信息，其厚度及由统计计算得到的累积速率可用来估算所在冲洪积物或土壤的形成年代。在阿尔金山东段北麓发育的５ 期洪积扇（中更新世晚期—全新世早期）上，砾石钙膜的厚度被进行了系统地测量。依据各期洪积扇的绝对年龄计算得到该区砾石钙膜的平均累积速率为０．０１ ｍ ｍ ／ｋａ。

蛋白激酶介导的系膜细胞内钙变化在早期糖尿病鼠肾小球高滤过中的作用

目的 探讨早期糖尿病肾病(DN)系膜细胞(GMC)收缩功能的变化及其与肾小球高滤过的关系。方法 Wistar大鼠正常组和糖尿病(DM)2周组,采用STZ诱导DM模型,进行成模后GMC培养,与体外高糖刺激系膜细胞对照,用Fluo-3荧光标记GMC,共聚焦显微镜测定GMC胞浆内基础Ca^(2+)水平,动态观察血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)刺激Ca^(2+)水平的变化,以及抑制蛋白激酶C(PKC)对Ca^(2+)水平的影响。结果 DM鼠的肌酐清除率(Ccr)在2周时明显升高。DM2周组GMC内基础Ca^(2+)水平低于正常,高糖组Ca^(2+)水平无明显下降,但各组对AngⅡ刺激反应均较正常有不同程度降低,以2周组最为显著。佛波酯作用24h能恢复2周组基础Ca^(2+)水平,部分恢复各组AngⅡ刺激引起的GMC内Ca^(2+)水平上升反应。结论 细胞内钙紊乱是GMC收缩失调的主要机制之一;PKC活化参与了GMC的收缩过程。GMC的收缩功能变化在DN早期肾小球高滤过的发生中起重要作用。

砾石钙膜纹层测年数据采集技术的实现方法及可行性分析

根据砾石钙膜纹层的明暗度测年是沉积物年代测定的一种新的思路.本文阐述了用扫描仪对砾石钙膜切面直接进行高分辨率扫描,继而通过计算机获取其明暗度值并绘制明暗度—厚度曲线图,将它与其它定年结果对比确定砾石钙膜开始形成的年代的思路和实现方法.同时分别对同一剖面多次扫描,同一样品不同部位和同一阶地面上所取不同样品的结果进行了相关性分析,结果表明此方法是可靠的.

海藻酸钙膜引导成骨作用的初步研究

目的 评价海藻酸钙膜在骨缺损应用中的有效性和优越性。方法 以家兔为研究对象,在其双侧下颌角前切迹处形成直径5mm的骨缺损,以覆盖海藻酸钙膜作为实验组,以覆盖胶原膜以及不作处理作为两个对照组。术后1、2、4、6周时取出下颌骨,进行常规组织学观察并进行组织计量学分析,计算成骨面积。结果 在各组内,覆盖海藻酸钙膜的缺损区新生骨面积均明显高于覆盖胶原膜以及空白对照组（P<0.01）。术后4周,覆盖海藻酸钙膜的缺损区已达骨性愈合,而覆盖胶原膜组组织反应明显,空白组纤维结缔组织较多。结论 海藻酸钙膜比胶原膜效果更好,能更快地促进骨缺损的愈合,组织反应过程短、程度轻。