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线粒体膜间蛋白在凋亡中的作用 被引量:1
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作者 蒋建明 李电东 《国外医学(老年医学分册)》 2004年第2期59-63,共5页
线粒体在衰老中起重要作用不仅由于它是反应氧簇的主要来源和目标,而且在于它能调节应激反应和细胞凋亡。本文就细胞凋亡中起重要作用的线粒体膜间蛋白如细胞色素c、Smac/DIABLO、凋亡诱导因子、核酸内切酶G、Omi/TtrA2等进行了综述。
关键词 线粒体 膜间蛋白 细胞凋亡 细胞色素C 应激反应
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绿色荧光蛋白滑膜间充质干细胞抑制大鼠骨关节炎的实验研究
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作者 唐涛 张继虹 +7 位作者 孙先润 李治 王波 刘颖 李亚国 肖壮 李连娥 李晓云 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期913-917,共5页
目的探讨关节腔内注射绿色荧光蛋白(GFP)滑膜间充质干细胞防治骨关节炎的有效性。方法增殖培养GFP滑膜间充质干细胞至第3代,收集并调整细胞浓度至1.0×108/m L后行关节腔内细胞移植。15只SD大鼠经改良Hulth手术造骨关节炎模型,同一... 目的探讨关节腔内注射绿色荧光蛋白(GFP)滑膜间充质干细胞防治骨关节炎的有效性。方法增殖培养GFP滑膜间充质干细胞至第3代,收集并调整细胞浓度至1.0×108/m L后行关节腔内细胞移植。15只SD大鼠经改良Hulth手术造骨关节炎模型,同一大鼠左腿为对照组,右腿为治疗组。于1周、2周时麻醉状态下CT扫描后处死大鼠,取全膝关节置于4%多聚甲醛液固定、制片,番红-O染色后进行病理图像系统分析,经Mankin′s评分,分析评价骨关节炎中2组关节软骨破坏进展。结果 CT显示治疗组较对照组骨赘和软骨下硬化减少,关节软骨破坏轻。第2周时胫骨关节软骨Mankin′s评分对照组为10.07±0.63,治疗组为3.56±0.21,2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论关节腔内注射GFP滑膜间充质干细胞能有效抑制关节软骨的破坏进展。 展开更多
关键词 骨关节炎 关节软骨 绿色荧光蛋白充质干细胞移植
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羊布鲁杆菌M5-90BP26抗原单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1
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作者 丘金浪 吴静波 +1 位作者 黎诚耀 王文敬 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期361-364,共4页
目的制备高亲和性的羊布鲁杆菌M5—90BP26抗原单克隆抗体,并对抗体进行鉴定。方法将质粒pET-28a—BP26转化感受态大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3),构建原核表达质粒pET-28a—BP26,用镍离子金属螯合亲和层析法(Ni—NTA)纯化、重组... 目的制备高亲和性的羊布鲁杆菌M5—90BP26抗原单克隆抗体,并对抗体进行鉴定。方法将质粒pET-28a—BP26转化感受态大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3),构建原核表达质粒pET-28a—BP26,用镍离子金属螯合亲和层析法(Ni—NTA)纯化、重组BP26蛋白(rBP26)。将纯化后的rBP26蛋白与弗氏完全佐剂等体积混合成乳化抗原。按每只100μg/0.1ml在BALB/c小鼠皮下多点注射进行初次免疫;2周后,按每只50μg/0.1ml在小鼠皮下多点注射进行再次免疫。再次免疫后2周,小鼠尾静脉取血测效价,检测免疫效果;在细胞融合前3天,将乳化抗原按每只小鼠50μg腹腔注射加强免疫。将小鼠骨髓瘤SP2/O细胞与脾细胞按1:5比例在聚乙二醇(PEG)1450作用下进行细胞融合,置于37℃、5%CO2培养箱中培养;10d后取细胞培养上清液,用间接酶联免疫吸附法(ELISA)测定,筛选分泌抗rBP26抗体的杂交瘤细胞;再经过反复3次克隆,筛选出单克隆全阳性的杂交瘤细胞建株,用杂交瘤细胞株制备BP26抗原单克隆抗体,并以初始杂交瘤细胞克隆号命名。利用羊布鲁杆菌M5~90疫苗株制备膜蛋白提取物(NMP),采用免疫印迹法(Western)及斑点间接酶联免疫吸附法(Dot—ELISA)对筛选的单克隆抗体进行免疫学特性鉴定,用单克隆抗体亚型试剂盒进行抗体分型和Kappa(K)和Lambda(入)轻链鉴定。结果成功地获得2株能稳定分泌抗rBP26抗原的高亲和性杂交瘤3C3和5A5单克隆抗体,并能与羊布鲁杆菌M5—90疫苗株上的NMP结合,构建成M5—90BP26抗原单克隆抗体,抗体亚型分别为IgG1和IgG2b,轻链均为K链。结论鉴定结果表明,成功制备2株羊布鲁杆菌BP26抗原的高亲和性单克隆抗体,抗体具有识别M5—90疫苗株的膜蛋白构象表位的能力,优势表位的识别可为羊布鲁杆菌M5—90疫苗株的改造提供实验依据。 展开更多
关键词 布鲁杆菌 蛋白BP26 抗体 单克隆
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