膝痹宁Ⅱ联合脂肪干细胞外泌体调控线粒体自噬改善膝骨关节炎的机制

目的:观察膝痹宁Ⅱ及脂肪干细胞外泌体(ADSC-Exos)单独及联合应用对软骨退变及线粒体自噬的影响,探讨其改善膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法:将40只SD大鼠分为假手术组、模型组、ADSC-Exos组(4×10^(8)个/周)、膝痹宁组(8 g·kg^(-1)·d^(-1))和ADSC-Exos(4×10^(8)个/周)+膝痹宁(8 g·kg^(-1)·d^(-1))组。采用用前交叉韧带切断术(ACLT)建立膝骨关节炎模型。评估大鼠痛敏状态、微计算机断层扫描技术(Micro-CT)及病理染色检测膝关节及软骨组织退变程度、免疫荧光观察p62和微管相关蛋白1轻链3(LC3)B表达情况、酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-15水平、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、含血小板结合蛋白基序的解聚素金属5(ADAMTS5)、Ⅱ型胶原(ColⅡ)、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)、软骨蛋白聚糖抗体(ACAN)、PTEN诱导激酶1(PINK1)、帕金蛋白(Parkin)、p62、LC3A/B蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠冷刺激缩足阈值及机械痛敏阈值逐渐下降,软骨组织出现不同程度的磨损及缺失,软骨组织退变,血清IL-1β、IL-6、IL-15和TNF-α含量明显升高(P<0.01),软骨组织中MMP-3、MMP-13和ADAMTS5蛋白表达升高,ColⅡ、TIMP1和ACAN蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠冷刺激缩足阈值及机械痛敏阈值升高,软骨组织退变程度减轻,血清IL-1β、IL-6、IL-15和TNF-α含量降低(P<0.05,P<0.01),软骨组织中MMP-3、MMP-13和ADAMTS5蛋白表达降低,ColⅡ、TIMP1和ACAN蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);且以Exos+膝痹宁组改变最为明显。结论:ADSCs-Exos及膝痹宁Ⅱ均可以通过促进PINK1/Parkin信号通路表达,提高软骨细胞线粒体自噬水平,延缓软骨组织退变,且二者联用可以增强疗效。

膝痹宁Ⅱ方内服治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎临床疗效的回顾性队列研究

目的:回顾性分析膝痹宁Ⅱ方在内服药物治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎中的临床疗效,探索终点事件的影响因素。方法:采用真实世界回顾性队列设计,收集江苏省中医院骨科门诊内服药物治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎病案资料。所有患者接受西医常规治疗,根据是否服用膝痹宁Ⅱ方治疗分为非暴露组(573例)和暴露组(427例),应用IBM SPSS 27.0对筛选出的1000例基线资料进行描述性分析。依据病案基线资料,采用倾向性评分匹配法匹配出334对,两组共668例病案,比较两组治疗前,治疗2、6、12周后视觉模拟评分法(VAS)、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)总评分、日本膝骨关节炎功能评估量表(JKOM)评分、中医证候积分的变化,不良反应发生情况。根据治疗前后WOMAC总分改善率判定的临床治愈作为终点事件进行多因素logistic回归分析,分析终点事件的影响因素。结果:治疗12周后,与治疗前比较,两组患者VAS、WOMAC总评分、JKOM评分、中医证候积分均显著降低(P<0.01);与非暴露组比较,暴露组VAS、WOMAC总评分、JKOM评分、中医证候积分显著降低(P<0.01)。治疗12周后,与非暴露组比较,暴露组临床治愈率、显效率更高(χ^(2)=14.36、64.80,P<0.05)。与本组治疗前比较,两组治疗2、6、12周后VAS,WOMAC疼痛、僵硬、功能评分、JKOM评分、中医症状积分显著降低(P<0.01)。与同时间点非暴露组比较,暴露组治疗2、12周后VAS,6、12周后WOMAC疼痛,12周后功能评分明显降低(P<0.05,P<0.01);暴露组治疗6、12周后JKOM评分降低,治疗2、6、12周后中医症状积分明显降低(P<0.05,P<0.01)。治疗12周后的多因素logistic回归显示影响临床治愈的因素包括病程,饮酒史,高血压,冠心病和服用膝痹宁Ⅱ(P<0.05,P<0.01)。与同时间点非暴露组比较,暴露组治疗2、12周后胃脘不适发生率显著降低(P<0.01);腹泻、呕吐的发生稍高于非暴露组,但差异无统计学意义。结论:临床应用膝痹宁Ⅱ口服联合常规西药治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎疗效优于常规西药治疗,可显著降低VAS、WOMAC总评分、JKOM评分、中医症状积分,其中远期疗效差异更明显,不良反应发生率低。