基于网络药理学及分子对接探讨桂龙护瘘酊治疗自体动静脉内瘘血管内膜增生的作用机制

目的:基于网络药理学方法以及分子对接探讨桂龙护瘘酊(GT)治疗自体动静脉内瘘(AVF)血管内膜增生(IH)的作用机制。方法:本研究基于HERB数据库并查阅相关文献,筛选GT方中药物的活性成分,按Lipinsk五原则筛选有效成分,并使用PubChem数据库获取成分的Smile,再用Swiss Target Prediction数据库预测成分靶点。利用GeneCards、Pharmgkb、OMIM数据库收集AVF血管内膜增生相关靶点。利用Venn在线网站得到GT-AVF血管内膜增生的交集靶点韦恩图。利用String平台构建以药物、活性成分、潜在靶点的PPI网络,利用DAVID数据库中对其进行GO富集分析和KEGG信号通路分析,采用分子对接进行验证。结果:通过网络药理学研究,GT方中共获取到主要活性成分81个、关键成分预测靶点30个,应用PPI网络得到ACE、NOS3等关键交集靶点。富集分析后得到221个GO相关条目、47条相关KEGG信号通路,GO分析结果主要集中在异种生物分解代谢过程、外源性药物分解代谢过程等,KEGG富集分析关键通路是钙信号通路、神经活性配体-受体相互作用通路等,关键靶点主要富集在ADRB3、NOS3、ADRB1等。分子对接显示(-)-Limonene、(-)-alpha-Pinene、Tridecnoic acid核心成分与NOS3蛋白(PDB:1d0c)核心靶点具有非常好的结合构象。结论:本研究采用网络药理学与分子对接技术,为GT治疗AVF血管内膜增生提供了(-)-Limonene、(-)-alpha-Pinene及Tridecnoic acid等多靶点;钙信号通路、神经活性配体-受体相互作用通路的作用特点,主要与调控NOS3蛋白表达水平有关,为后期进一步实验、临床研究提供了理论依据,也是对AVF瘘管处局部外用中药复方防治IH进行的新探索。

交感神经激活在自体动静脉内瘘新生内膜增生中的作用

自体动静脉内瘘(arteriovenous fistula,AVF)是血液透析治疗最常用的血管通路。然而,AVF失功问题严重制约着其临床应用,静脉流出道狭窄是AVF失功的常见原因,其病理基础是新生内膜增生(neointimal hyperplasia,NIH)。NIH的发生发展与血管内病理机制有关,包括炎症、氧化应激等一系列级联反应和血管重塑,导致血管狭窄、失功。终末期肾病患者存在交感神经的过度激活,而交感神经的激活可能通过不同的机制参与NIH的发生而导致AVF的失功。本综述重点阐述交感神经激活参与NIH发生发展的可能机制,旨在为AVF失功提供新的理论解释及其防治提供新的干预靶点。

液压扩张对自体移植静脉内膜增生的作用

液压扩张对自体移植静脉内膜增生的作用△⒇钱济先黄耀添王军吕荣⒇自体静脉是中小动脉伤病和心脑血管病血流重建术的首选材料，往往作为其它移植材料的参照标准，尽管如此，自体静脉移植仍有一定的晚期栓塞率，１年１７％，３年３８％，５年５９％，呈逐年递增趋势〔１〕...

应用c-myc反义寡核苷酸防治自体静脉移植物内膜增生的实验研究

目的：研究局部应用反义寡核苷酸ｃ－ｍ ｙｃ对自体静脉移植物内膜增生的防治作用，为反义技术防治血管内膜增生的早期临床应用提供实验依据。方法：３０ 只新西兰兔颈外静脉间置于同侧颈总动脉后随机分成对照组、蛋白胶组、正义组、反义组及错配组，以医用生物蛋白胶分别溶解反义、正义及错配的ｃ－ｍ ｙｃ基因片段（３３０ μｇ）后直接涂于静脉移植物外膜。术后２８ｄ 取材制片，显微镜进行形态观察，并用计算机图像分析系统测量和计算内膜厚度、中膜厚度及二者之比值，内膜面积、中膜面积及二者之比值，以ｑ 检验行统计学分析。结果：反义组增生内膜厚度较对照组降低３６．７７％ ，内膜面积降低４８．２２％ ，对照组、蛋白胶组、正义组及错配组间内膜厚度及内膜面积均无明显差异（Ｐ＞ ０．０５）；各组间中膜厚度及中膜面积均无明显差异（Ｐ＞ ０．０５）。结论：医用生物蛋白胶携载反义寡核苷酸ｃ－ｍ ｙｃ局部用于静脉移植物外膜能显著防治其内膜增生，有效防止管腔狭窄。

大鼠自体移植静脉内膜增生模型的改进

目的改进大鼠自体移植静脉内膜增生模型。方法将36只SD大鼠随机分成实验组和对照组。实验组采用套管法将大鼠自体颈外静脉移植入同侧颈动脉系统。对照组采用吻合法行自体颈外静脉移植,术后均皮下注射肝素800 U/kg,2次/d,共5 d。观察术后不同时间点两组大鼠移植静脉通畅性、吻合口狭窄及内膜增生情况。结果实验组移植静脉自体移植静通畅性优于对照组,吻合口狭窄程度轻于对照组。结论实验组模型设计科学,操作简便,成功率高。

阿托伐他汀对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响

目的:探讨新型降脂药阿托伐他汀对自体移植静脉内膜增生的影响。方法:将Wistar大鼠颈外静脉移植于腹主动脉,建立大鼠自体静脉移植模型,实验分为3组:假手术组、移植对照组和移植实验组。自术后第1 d起,对移植实验组大鼠经胃管灌注给予阿托伐他汀(5 mg.kg-1.d-1)处理。干预4周后取移植静脉组织标本,制备4μm厚组织切片,行病理组织学观察分析移植静脉内膜增生情况,行免疫组化染色分析新生内膜细胞SMα-actin和PCNA的表达情况。结果:移植对照组和实验组移植静脉内皮下层SMα-actin染色阳性平滑肌细胞大量增生,导致静脉内膜显著增厚,血管管腔明显狭窄。新生内膜定量分析显示移植实验组移植静脉内膜增生受到明显抑制,其新生内膜面积及新生内膜/中膜面积比均显著低于对照组(P<0.01);并且实验组移植静脉新生内膜细胞PCNA标记指数显著低于对照组(P<0.01)。结论:阿托伐他汀通过抑制新生内膜平滑肌细胞的增殖能有效抑制自体移植静脉内膜增生的发生发展,在防治血管重建术后再狭窄方面显示出良好的应用前景。

人arresten基因转染对自体移植静脉内膜增生的影响

目的探讨体内转染arresten基因对自体移植静脉内膜增生的影响。方法建立大鼠自体静脉移植模型。血管吻合术前,用脂质体介导重组质粒pSecTag2-AT(Ⅰ组),空载体pSecTag2转染(Ⅱ组)移植血管,等体积脂质体溶液处理移植血管(空白对照组,Ⅲ组)。各组动物均于4周后切取移植血管,RT-PCR检测移植血管中arresten mRNA的表达;常规HE,Verhoeff弹力纤维染色;计算机图象分析检测移植静脉血管内膜及中膜面积、厚度;免疫组化检测移植血管内膜α-SMA及PCNA的表达;West-ern blot检测TGF-β1蛋白的表达。结果Ⅰ组转染的移植静脉中有目的基因mRNA的表达,而Ⅱ、Ⅲ组无Ⅰ组内膜、中膜面积小均于Ⅱ组和Ⅲ组,差异有显著性(P<0.05)。而内膜面积/中膜面积3组间无统计学差异(P>0.05);Ⅰ组内膜厚度小于Ⅱ组和Ⅲ组,组间比较有统计学差异(P<0.01);α-SMA染色表明增生内膜中的细胞是血管平滑肌细胞;PCNA阳性细胞数及表达指数Ⅰ组均低于Ⅱ组和Ⅲ组(P<0.05);Ⅰ组TGF-β1蛋白的表达明显低于Ⅱ组和Ⅲ组。结论移植血管转染arresten基因,可有效抑制自体移植静脉内膜的增生,在防治血管移植术后再狭窄方面显示出良好的临床应用前景。

自体静脉移植血管的内膜增生—形态计量学研究

作者采用图像分析技术,测量了自体静脉移植术后4周和24周时移植血管增生内膜的厚度,并与正常静脉的内膜厚度和正常动脉的内膜中膜厚度作比较.结果显示,自体静脉移植术后4周发生了明显的内膜增生,但4周和24周时移植血管增生内膜的厚度无显著差别(P>0.05),即表现为内膜增生在相当一段时间内保持稳定;增生的内膜厚度没有达到动脉的内膜中膜厚度,两者占血管壁厚度的比例亦有很大差别(P<0.01).

可降解外套管抑制自体移植静脉内膜增生的研究

目的:研究可降解的外套管束缚自体移植静脉对减轻桥静脉内膜、中层增厚的作用,探讨其防止或延缓桥静脉再狭亮窄的机制.方法:建立犬自体股静脉至股动脉的端-端静脉移植模型,其中一侧桥静脉外加聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)做成的圆柱形外套管(外套管组),对侧单纯静脉移植作为对照组.超声多普勒观察在体移植血管的通畅性.术后2、4、6、8、24周再次手术取桥静脉.光镜观察移植静脉中段内膜、中层厚度,胶原、弹力纤维变化;透射电镜观察静脉壁基底膜、细胞排列、细胞增殖、凋亡,细胞骨架结构,细胞外基质(ECM)变化等;免疫组化观察静脉壁细胞增殖、凋亡及分布.结果:术后40条静脉均通畅,吻合口无狭窄.对照组术后2周见内膜、中层增厚;随时间延长,增厚更加明显.外套管组术后2周内膜、中层稍增厚;4～24周持续增厚,但各时间点均明显小于对照组(P＜0.05,P＜0.01);对照组术后2周见中层平滑肌、外膜弹力纤维断裂严重,而外套管组无明显断裂.新生静脉内膜由平滑肌细胞(SMCs)和大量ECM构成,中层主要为SMCs和ECM;术后2周,静脉壁细胞增殖和凋亡率都较高,主要分布在内膜和中层,外套管组明显低于对照组(P＜0.01),4周以后两者显著下降,凋亡率高于增殖率(P＜0.05).结论:可降解外套管在术后早期可保持静脉结构的完整性,减轻管壁结构破坏,抑制内膜、中层增生,外套管降解后对静脉壁的保护作用继续存在.

大鼠自体移植静脉内膜增生模型的改进

目的改进大鼠自体移植静脉内膜增生模型,比较采用不同方法建立模型的效果。方法将36只SD大鼠随机分成2组:实验组和对照组。实验组采用“套管法”将大鼠自体颈外静脉移植入同侧颈动脉系统。对照组采用“吻合法”行自体颈外静脉移植,术后均给予肝素皮下注射5天。观察术后不同时间点两组大鼠移植静脉通畅性、吻合口狭窄及内膜增生情况。结果实验组移limit自体移植静脉通畅性优于对照组,吻合口狭窄程度轻于对照组。结论实验组模型设计科学,手术操作简便,成功率高。

不同穿刺方式对自体动静脉内瘘血管内膜增生影响的研究进展

综述维持性血液透析病人血管内膜增生危险因素、增生机制、不同穿刺方式对血管内膜增生的影响、穿刺工具对内瘘的影响等,以期为相关研究提供参考。

p38MAPK抑制剂CBS3830对糖尿病大鼠自体静脉移植内膜增生的影响及机制探讨

目的观察p38MAPK抑制剂CBS3830对糖尿病大鼠自体移植静脉内膜增生的影响,并探讨机制。方法 SD雄性大鼠30只,采用腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病动物模型;将造模成功的26只随机分为两组,采用改良cuff法建立自体静脉移植模型,造模前1 h药物组经胃管灌入0.3 mg/ml的CBS3830 10 ml/kg,对照组同法给予等体积的CBS3830溶媒1%甲基纤维素。分别于术前及术后1、3、7 d采用ELSIA法检测大鼠血清TNF-α;于第7天处死动物并获取移植静脉标本,HE染色观察大鼠移植静脉内膜及中膜厚度。结果术后7 d,药物组大鼠血清TNF-α水平显著低于对照组(P<0.05),药物组内膜增生程度明显低于对照组。药物组内膜厚度为(33.6±1.34)μm、内膜厚度/中膜厚度为1.23±0.08,对照组分别为(38.5±1.50)μm、1.7±0.12,两组相比,P均<0.05。结论 p38MAPK抑制剂CBS3830对糖尿病大鼠自体移植静脉内膜的增生有抑制作用,可能与其降低血清TNF-α水平有关。

经外膜缓释雷公藤内酯醇抑制自体移植静脉内膜增生

目的探讨经外膜缓释雷公藤内酯醇(triptolide)对自体移植静脉内膜增生的抑制作用。方法健康雄性新西兰大白兔24只,建立颈外静脉-颈总动脉移植模型。随机将动物等分为3组。空白组移植血管不给任何处理,F-127多聚凝胶对照组在移植血管外膜喷洒20%F-127多聚凝胶0.5mL,实验组在移植血管外膜喷洒携带雷公藤内酯醇300μg的F-127多聚凝胶0.5mL。术后2周取标本。用组织形态学方法检测血管内膜增生程度,免疫组化检测标本中bcl-2和Fas的表达,TUNEL法检测标本中血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的水平。结果静脉移植2周后,与空白组和F-127对照组比较,实验组血管内膜增生明显受抑制(P<0.05),bcl-2的表达[(18.2±8.4)%]显著减少,而Fas的表达[(21.4±8.9)%]显著增加,凋亡细胞[(28.4±7.6)%]也显著增加(P<0.05)。结论经外膜缓释雷公藤内酯醇可有效抑制移植静脉内膜增生,这一作用可能系通过促进VSMC凋亡而实现的。

反义c-fos核酸对自体移植静脉内膜增生的影响

目的 :利用反义核酸技术和显微外科技术 ,探讨反义c fos核酸对自体移植静脉内膜增生的影响。方法 :选择 2 0只新西兰家免 ,等分为实验组和对照组 ,均行自体颈外静脉、颈总动脉移植手术 ,实验组移植静脉周围和血管吻合口周围应用反义c fos核酸凝胶涂布 ;对照组仅行凝胶涂布。术后 2周取出移植血管 ,分别行病理学、免疫组织化学检测移植血管内膜厚度 ,内膜平滑肌细胞数及PCNA阳性表达情况。结果 :实验组移植血管内膜厚度、管腔狭窄度及VSMC数均较对照组减少 ,PCNA阳性表达情况亦较对照组明显减少。结论 :反义c fos核酸可有效的抑制移植静脉内膜的增生 。

c-jun反义核酸对自体移植静脉内膜增生的影响

目的:观察反义c-jun核酸对自体移植静脉内膜增生的影响。方法:选择20只SD大鼠,等分为实验组和对照组,均行自体颈外静脉、颈总动脉移植手术,实验组移植静脉周围和血管吻合口周围应用反义c-jun核酸凝胶涂布;对照组仅行凝胶涂布。术后周取出移植血管,分2别行病理学、免疫组织化学检测移植血管内膜厚度,内膜平滑肌细胞数及增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)、脱氧核糖核酸和α-肌动蛋白等反映血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecell,VSMC)增殖情况和表型转换的指标的表达情况。结果:移植静脉术后动脉化,管壁增厚,但转染c-jun反义核酸组移植血管内膜厚度(实验组和对照组均数差值为-20.7170,P<0.01)及VSMC实验组和对照组比较t值为-13.011,P<0.01)(增殖均较对照组减少,PCNA(实验组和对照组均数差值为-19.2310,P<0.01)和DNA(实验组和对照组比较值为F55.000,P<0.01)阳性表达情况亦较对照组明显减少,α-肌动蛋白的表达较对照组升高(实验组和对照组比较q值为5.503,P<0.01)。结论:反义c-jun核酸可抑制VSMC的表型转化及细胞分裂而减少VSMC的增殖,从而有效的抑制移植静脉内膜的过度增生。

c-jun反义核酸对自体移植静脉内膜增生和ET-1水平的影响

目的 :观察反义c - jun核酸对自体移植静脉内膜增生及血管活性因子内皮素 - 1(ET - 1)的影响。方法 :选择 6 0只SD大鼠 ,等分为实验组和对照组 ,均行自体颈外静脉、腹主动脉移植手术 ,实验组移植静脉周围和血管吻合口周围应用反义c- jun核酸凝胶涂布 ;对照组仅行凝胶涂布。于手术时取静脉血 1ml,放射免疫分析检测血浆ET - 1的水平。术后 2周取出移植血管 ,分别行病理学、免疫组织化学检测移植血管内膜厚度 ,内膜平滑肌细胞数及增殖细胞核抗原和脱氧核糖核酸反映血管平滑肌细胞增殖情况的指标的表达情况。同时在另一侧颈外静脉取静脉血 1ml,仍采用放射免疫分析检测血浆ET - 1水平。结果 :移植静脉术后动脉化 ,管壁增存 ,血浆ET - 1水平升高 ,但转染c - jun反义核酸组移植血管内膜厚度及VSMC增殖均较对照组减少 ,PCNA和DNA阳性表达情况亦较对照组明显减少 ,血浆ET - 1水平升高幅度低于对照组。结论 :反义c - jun核酸可抑制VSMC分裂而减少VSMC的增殖 ,降低促进血管收缩和细胞增殖的ET - 1的表达 ,从而有效地抑制移植静脉内膜的过度增生。

力学因素在自体移植静脉内膜增生中的作用

内膜增生是自体移植静脉远期失败的主要原因。力学因素在自体移植静脉内膜增生中起重要作用。本文综述了血流速度、血流状态、壁面剪应力、血压、管壁环向应力/应变和血管壁力学特性如顺应性、各向异性、残余应变等力学因素在自体移植静脉内膜增生中的作用。

缺氧诱导因子1α与Gax基因对自体静脉移植术后内膜过度增生的调控机制

自体静脉移植术后内膜过度增生是影响术后效果的重要原因,缺氧诱导因子1α(HIF-1α)与Gax基因可以抑制自体静脉移植术后内膜过度增生,可作为治疗移植静脉再狭窄的一个新手段,HIF-1α通过调控血管内皮生长因子的表达,对恢复血管内皮细胞的结构和功能起着重要的调节作用,而Gax基因通过影响细胞周期和诱导细胞凋亡两条途径来调节血管平滑肌细胞的增殖。

自体移植静脉增生内膜内皮素I受体基因表达

目的 应用内皮素 (ET) I型受体基因 (ETA c DNA)原位分子杂交的方法观察自体静脉移植血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与内膜增生 (IH)的量效关系 ,并评价其在定量检测 VSMC增殖中的作用 .方法 家兔股动静脉移植模型 ,探针制备 ,原位分子杂交 ,微机图像分析 .结果 血管移植术后 1 W即有较多 ETAc DNA基因表达 ,术后 4 wk达最高峰 ,1 6wk和 48wk保持相对稳定 ,表达密度分别为 (1 8.4±5.8) % ,(42 .3± 3.6) % ,(42 .7± 7.2 ) %和 (43.1± 3.6) % ,IH相对厚度变化趋势与表达密度趋势相仿 ,1 ,4,1 6和 48wk分别为 (1 7.6± 5.2 ) % ,(53.0± 9.3) % ,(54.7± 8.7) %和(57.2± 1 0 .2 ) % ,经等级相关分析显示两者呈正相关 ,表达密度愈高则相对厚度愈小 .结论 VSMC增殖愈多对 IH贡献越大 ,应用 ETAc DNA基因探针定量分析自体静脉移植后增生内膜 VSMC变化准确特异 ;内皮素对血管

卡托普利对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响

目的 :观察卡托普利 (captopril,CAP)对移植静脉内膜增生的影响 ,探讨其作用机理。 方法 :建立大鼠颈总静脉移植于颈总动脉模型。分为CAP组及对照组各 10只。CAP组于术前 7d开始用CAP灌胃 ( 10 0mg·kg-1·d-1) ,对照组用等容量生理盐水灌胃。二组均灌胃到术后 2周。采用HE、弹力纤维VG染色 ,利用计算机图像分析仪计算内膜面积 /中膜面积比率 (I/M )来表示内膜增生程度 ;测定给药前、给药后 7d、给药 2周时动脉血清NO含量。结果 :CAP组I/M为 ( 9.73± 0 .67) % ,对照组为 ( 19.0 1± 0 .70 ) % ,实验组显著低于对照组 (P <0 .0 1)。给药7d即可引起动脉血清中NO升高 ,2周时升高更加明显。结论 :卡托普利通过提高大鼠动脉血中NO含量抑制移植静脉内膜增生。